八珍汤对骨髓抑制小鼠血发生的影响

本研究从外周血细胞、骨髓有核细胞、造血祖细胞及细胞周期等方面探讨八珍汤对骨髓抑制小鼠造血系统的作用及其机制。结果显示：①八珍汤能明显促进骨髓抑制小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HB）以及骨髓有核细胞（BMC）的增加;②体内用药能明显促进红系（BFU—E,CFU—E）、粒系（CFU-GM）和巨核系（CFU—Meg）三系造血祖细胞集落形成;③能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞进入细胞周期,使G0／G1期细胞比例减少,S期和G2／M期细胞比例增加。     

四物汤及其单药对血虚证小鼠造血的改善作用及其机制初探

目的 :研究四物汤及各单药对γ射线照射致血虚小鼠造血系统的影响 ,探讨四物汤补血作用的机理及配伍机制。方法 :采用 3 5Gy60 Coγ射线全身一次照射制作小鼠血虚证模型 ,进行外周血象检测及造血祖细胞集落培养 ;MTT法检测四物汤及各单药诱生Peyer’sPatch细胞、NIH3T3细胞上清的活性。结果 :①血虚小鼠骨髓中的CFU GM、BFU E、CFU E、CFU mix较正常组明显减少 ,四物汤及各单药对模型组造血祖细胞集落增殖的作用强度不同 ,四物汤最为明显。②四物汤及各单药能够诱导Peyer’sPatch产生细胞因子刺激骨髓细胞的增殖。③四物汤、当归、白芍诱生NIH3T3细胞上清能显著促进NFS 6 0细胞的增殖。结论 :四物汤及各单药对血虚小鼠造血系统的作用机制 ,可能通过刺激Peyer’sPatch细胞、成纤维细胞或产生造血生长因子 ,或与造血因子协同作用 ,促进骨髓干祖细胞增殖分化来实现的 ;四物汤及各单药作用的靶点和强度不同 ,符合中药复方组方的规律。     

四物汤对环磷酰胺所致小鼠贫血的影响

目的：探讨四物汤抑制环磷酰胺(CY)所致小鼠贫血的作用机制。方法：用CY腹腔注射建立小鼠贫血模型．同时给小鼠灌服四物汤，采用骨髓细胞培养测定小鼠骨髓干细胞增殖能力、ELISA方法检测小鼠血清促红细胞生成素(EPO)的含量。结果：四物汤能明显促进骨髓干细胞的增殖和升高血清EPO的含量。结论：四物汤能明显抑制环磷酰胺所致的小鼠贫血，其作用机制可能是通过减轻CY对骨髓的抑制、促进红系细胞生长，并促进肾脏合成EPO而实现的。     

沙棘汁对再生障碍性贫血小鼠骨髓红系祖细胞、粒单系祖细胞的影响

目的：研究沙棘汁对再生障碍性贫血小鼠模型骨髓造血祖细胞体外增殖水平的影响。方法：采用免疫介导法制作再生障碍性贫血小鼠模型，采集其骨髓有核细胞进行培养。将Balb／c小鼠随机分为正常组、模型组、沙棘汁组、四物汤组，比较观察各组小鼠骨髓细胞体外培养红系祖细胞(CFU-E、BFU-E)、粒单系祖细胞(CFU-GM)集落的形成水平。结果：除正常组外，各组再生障碍性贫血小鼠的CFU-E、BFU-E、CFU-GM集落形成均有显著下降；而沙棘汁组则可促进骨髓细胞的增殖，但与正常组比较仍存在一定的差距。结论：沙棘汁可以促进再生障碍性贫血小鼠骨髓CFU-E、BFU-E、CFU-GM集落的形成。     

四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用,用60 Coγ射线身全照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34＋细胞在骨髓有核细胞中的比例,细胞固定后PI染色测定细胞周期,Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡,结果：四物汤对小鼠骨髓造 血干祖细胞,外周血细胞的恢复有明显促进作用,有保护骨髓和促进骨髓细胞由G1期进入S期的效应,四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡,促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一。     

四物汤及两味中药组方对γ射线照射所致血虚证小鼠作用机制的研究

[目的]探讨四物汤及其两味药组方治疗血虚证小鼠的补血作用机制。[方法]采用60^Coγ射线全身照射制成实验性小鼠血虚证模型，测定外周血象、CD34^ 细胞、细胞周期、NFS60细胞增殖以及造血干祖细胞的增殖情况。[结果]1)四物汤在各指标上都优于其两味药组方；(2)两味药组方中，当归相关组对CFU—E，CFU—Mix，CFU—GM的促进作用较好，且有升高白细胞的作用；而地黄相关组对CFU—E有增殖作用；白芍相关组能明显促进NFS60细胞的增殖；川芎相关组增加CD34抗原表达，并促进细胞由G0/1期向S期转化，其作用和所含的川芎嗪有关。[结论]四物汤全方优于两味药组方，各组方的作用靶点和作用强度各有异同。     

四物汤对血虚证小鼠骨髓细胞CD 34抗原表达的影响

目的：探讨四物汤对^60Coγ射线或环磷酰胺诱导的血虚证小鼠骨髓细胞CD34抗原分子表达的影响。方法：用^60Coγ射线全身照射小鼠升腹腔注射环磷酰胺造成小鼠血虚证模型，实验分正常组、模型组、小剂量组、中剂量组、大剂量组，荧光标记小鼠骨髓细胞并用流式细胞仪 测定CD34＋细胞在骨髓有核细胞中的比例，同时做小鼠骨髓细胞 落培养。结果与结论：四物汤可促进血虚小鼠骨髓中干祖细胞增生，增加CD34抗原分子的表达，为四物汤治疗血虚证提供了依据。     

四物汤对辐射小鼠造血功能影响的初步探讨

目的：观察四物汤对3．5Gyγ射线照射小鼠造血系统的影响，探讨四物汤作用机制。方法：通过外周血象观察、造血祖细胞体外培养、MTT法检测四物汤及其拆方诱导NIH3T3细胞上清对G－CSF依赖细胞株NFS－60增殖等指标的影响研究四物汤的作用机制。结果：四物汤显著升高3．5Gyγ射线照射小鼠外周血白细胞、血小板，促进其造血祖细胞CFU－GM、CFU－meg、CFU－mix集落的增殖；四物汤诱导的NIH3T3细胞上清能显著促进G－CSF依赖细胞株NFS－60细胞的增殖。结论：四物汤对辐射小鼠造血细胞的作用机制与刺激NIH3T3细胞产生类G－CSF作用或与G－CSF产生协同作用而促进外周血白细胞、血小板恢复有关。     

中药复方刺激再障骨髓体外造血的实验研究

中药复方治疗慢性再生障碍性贫血的临床疗效显著，为探讨该制剂的作用机理，本文采用造血祖细胞体外培养法观察了该制剂对再障病人骨髓粒系、红系造血祖细胞体外增殖的影响，结果表明：该制剂在0．01～10μg／ml浓度范围内与细胞因子（GM－CSF或EPO）协同作用能促进再障骨髓CFU—GM、CFU—E和BFU—E的集落形成，作用高峰在10μg／ml浓度，当超过10μg／ml时，集落数量增加不明显（P＞0.05），单独应用该制剂时无集落形成。     

补肾生血解毒方对再生障碍性贫血小鼠白细胞生成的影响

目的：探讨补肾生血解毒方对理化因素致骨髓抑制造成再生障碍性贫血（AA）模型小鼠白细胞生成的影响。方法：BALB／C小鼠随机分为空白组、模型组和补肾生血解毒方小、中、大剂量组,除空白组以外其余各组小鼠以60Co一γ射线复合环磷酰胺致小鼠骨髓造血抑制,补肾生血解毒方小、中、大剂量组分别给予不同剂量中药灌胃,其余2组予等量生理盐水灌胃。血细胞计数仪检测小鼠外周血中白细胞（WBC）的改变,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测外周血血清中粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）含量的差异,real—timePCR检测骨髓细胞中GM—CSF受体仪、B基因表达的改变。结果：与模型组比较,补肾生血解毒方可以明显提高AA模型小鼠外周血白细胞数量（小剂量作用14d）,显著增加外周血血清中GM—CSF含量和骨髓细胞中GM—CSF受体基因的表达。结论：补肾生血解毒方治疗AA发挥疗效作用．可能与提高GM—CSF活性和诱导造血细胞分化为成熟的白细胞．并促进其增殖、发挥免疫调节作用有关。     

保元汤对再障小鼠骨髓造血细胞的刺激增殖作用

目的：观察保元汤对再障小鼠骨髓造血细胞的刺激增殖作用。方法;利用本及辐射损伤获得再障动物模型,采用半固体集落培养（CFU－GM,CFU－E、BFU－E）和液体培养（MTT）观察保元汤对再障小鼠骨髓造血细胞增殖的影响。结果：对苯及辐射所致再障小鼠,保元汤3g生药／kg体重灌胃可提高CFU－GM、CFU－E、EFU－E的产率;MTT法结果也提示,保元汤对射线损伤的小鼠骨髓具有刺激造血的作用。结论：保元汤可防治再障,其应用前景广阔。     

四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用机理。用⁶⁰Coγ射线全身照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34⁺细胞在骨髓有核细胞中的比例;细胞固定后PI染色测定细胞周期;Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡。结果:四物汤对小鼠骨髓造血干祖细胞、外周血细胞的恢复有明显促进作用;有保护骨髓和促进骨髓细胞由G₁期进入S期的效应;四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡;促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一     

“痰瘀同治”法对再生障碍性贫血小鼠骨髓有核细胞凋亡的影响及其机制

目的：探讨＂痰瘀同治＂法对再生障碍性贫血小鼠骨髓有核细胞凋亡的影响及其相关机制。方法：复制免疫介导的再生障碍性贫血（AA）小鼠模型,取其血清诱导正常小鼠骨髓有核细胞的凋亡过程;同时用中药（单纯补肾、补肾祛痰瘀）灌给的大鼠血清作为治疗因素,体外共培养24h,观察有核细胞凋亡率、细胞内Caspase-3酶活性及Bax蛋白表达水平。结果：AA小鼠血清处理后,正常小鼠骨髓有核细胞凋亡率显著提高（P〈0.01）,两治疗组均能显著减轻AA小鼠血清的凋亡诱导作用（P〈0.01）,抑制AA血清诱导下骨髓有核细胞内Caspase-3酶活性（P〈0.05）,且以补肾祛痰方药的作用更明显（P〈0.05）;两治疗组均能显著降低骨髓细胞的Bax蛋白阳性强度与阳性率乘积（P〈0.05）,但两组间无显著性差异。结论：AA小鼠血清能显著诱导骨髓造血细胞的凋亡过程,两治疗组均能通过Caspase-3/Bax途径起到抑制作用,且以补肾祛痰瘀较为显著,但两者疗效的差异与Bax无显著相关性。     

黄芪多糖对体外人骨髓造血祖细胞生成的影响

应用甲基纤维素半固体培养法观察了黄芪多糖（Astragalus Polysaccharides,APSs）在体外对人骨髓粒单集落（CFU-GM)、红细胞集落（CFU－E）和爆式红细胞集落（BFU－E）生成的影响。结果显示：APSs 5mg/L对人骨髓CFU－GM和CFU－E的生成具有促进作用（均为P＜0．05）,在APSs 125mg/L时,以促进BFU－E的生成（P＜0．05）;在CFU－GM的培养体系中,如果没有GM－CSF,APSs在5mg/L的终浓度时,仍能促进CFU－GM的生成（P＜0．05）,过高或过低的浓度无效。在培养CFU－E时,不含EPO,则APSs对CFU－E无刺激作用。骨髓细胞与APSs孵育2小时后,再进行造血祖细胞培养,则CFU－GM、CFU－E和BFU－E的生成均略有下降,但与孵育时APSs的浓度高低无关。提示浓度合适的APSs在体外能促进人骨髓细胞中红细胞系和粒细胞系祖细胞的生成,这种促进作用在造血因子存在时,才能发挥,或发挥的作用最大,并且这种促进作用的发挥需APSs的持续刺激,短时间的刺激无效。     

四物汤刺激Peyer's Patch促进骨髓造血的研究

研究了四物汤煎剂刺激Peyer's Patch产生细胞因子促进骨髓造血的作用。小鼠灌服给药后取Peyer's Patch诱生得上清,MTT法检测上清对骨髓细胞的刺激增殖作用;另以体外直接给药诱生Peyer's Patch得上清,检测Peyer's Patch诱导的细胞因子活性。结果：四物汤体内、外给药均可刺激Peyer's Patch产生细胞因子刺激骨髓细胞增殖,此可能是四物汤补血作用的途径之一。     

补肾填精方对再障模型小鼠骨髓造血干（祖）细胞CFU—GM、CFU—E的影响

目的：观察补肾填精方对再生障碍性贫血（简称再障）模型小鼠骨髓造血功能的影响。方法：小鼠在接受给予环磷酰胺及苯油1周后每天经灌胃分别给予补肾填精方悬液3个剂量（20mg·kg^-1·d^-1、30mg·kg^-1·d^-1、40mg·kg^-1·d^-1）35天后眶动／静脉采血法检测外周血细胞数,取小鼠左侧股骨骨髓制备骨髓有核细胞悬液并进行有核细胞（BMNC）计数,甲基纤维素半固体法测定红系祖细胞集落（CFU—E）及粒单系祖细胞集落（CFU—GM）。结果：模型组小鼠红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）、BMNC、CFU—E及CFU—GM数目较空白组明显减少（P〈0．01）,中药中、高剂量组上述指标较模型组升高（P〈0．05）。结论：补肾填精方具有促进骨髓造血干／祖细胞造血,提升外周血细胞作用。     

刺五加注射液对^60Co-γ放射损伤小鼠骨髓CFU—E、BFU—E生成的影响

目的观察刺五加注射液对^60Co-γ放射损伤小鼠骨髓红系集落形成单位（CFU—E）和红系爆式集落形成单位（BFU—E）生成的影响。方法小鼠接受6．0Gy^60Co-γ射线照射后立即分别腹腔注射刺五加注射液0．2和0．4ml／10g，均每132次，连续3d；照射后第4日取股骨骨髓制备骨髓有核细胞悬液，甲基纤维素半固体培养法测定CFU—E和BFU—E集落。结果刺五加注射液能明显提高有核细胞CFU—E和BFU—E集落数量，与模型组相比均具有显著差异。结论刺五加注射液能明显提高放射损伤小鼠骨髓有核细胞数量及红系祖细胞集落形成，从而保护受损小鼠骨髓造血功能。     

四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠骨髓基质金属蛋白酶的影响

目的：观察四物汤配方颗粒对骨髓抑制贫血小鼠骨髓基质金属蛋白酶-2和-9（MMP-2和MMP-9）的影响,并探讨其在造血调控中的可能作用。方法：BALB／C小鼠60只造模后分5组,SABC法检测MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果：各组小鼠骨髓细胞中均检测到MMP-2和MMP-9的表达。造模后骨髓造血微环境活性明显降低。与模型组相比,高、中、低剂量组骨髓细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达明显增强。高剂量组最明显,具有剂量依赖性。结论：四物汤配方颗粒可能通过促进骨髓细胞中基质金属蛋白酶表达增强、导致基质细胞膜上细胞因子的释放来促进骨髓造血功能的恢复。     

四物汤对环磷酰胺所致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤治疗环磷酰胺所致小鼠血虚证的作用机理。腹腔注射环磷酰胺制成小鼠血虚证模型;测定小鼠外周血象;骨髓细胞集落形成;CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例;小鼠胸腺指数。结果表明四物汤具有明显促进骨髓造血和增强免疫的作用,并可升高血虚证小鼠的外周血象。四物汤增强免疫、促进造血可能是四物汤治疗小鼠血虚证的机理之一。     

四物汤刺激Peyer′s Patch促进骨髓造血的研究

研究了四物汤煎剂刺激Peyer′s Patch产生细胞因子促进骨髓造血的作用。小鼠灌服给药后取Peyer′s Patch诱生得上清,MTT法检测上清对骨髓细胞的刺激增殖作用;另以体外直接给药诱生Peyer′s Patch得上清,检测Peyer′s Patch诱导的细胞因子活性。结果：四物汤体内、外给药均可刺激Peyer′s Patch产生细胞因子刺激骨髓细胞增殖,此可能是四物汤补血作用的途径之一。