实验性创伤后脊髓凋亡细胞的流式细胞仪分选方法

目的：探讨创伤后脊髓凋亡细胞的流式细胞仪分选方法。方法：使用PI和Annexin V/PI检测法进行细胞凋亡的检测和分选。结果：Annexin V/PI检测法细胞凋亡的检出率显著高于PI法（P＜0．05）,并可区正常细胞,凋亡细胞和死亡细胞。结论：Annexin V/PI是目前较为理想的细胞凋亡检测和分选方法。     

七叶皂苷诱导HL-60细胞凋亡的研究

本研究观察七叶皂苷对髓系白血病HL-60细胞的抑制和诱导凋亡作用。取对数期生长的HL-60细胞经饥饿处理后，加入不同浓度的七叶皂苷观察七叶皂苷抑制细胞生长的指数、形态学变化，用DNA片段凝胶电泳（DNALadder）和Annexin V／PI—FITC双标法分析诱导细胞凋亡的作用。结果表明：七叶皂苷抑制HL-60细胞生长．15—120mg／L的七叶皂苷处理细胞48小时后，存活率为（92．2±0．69）％-（8．2±0．96）％，均明显低于不加药的对照组（99．4±0．31）％（P均〈0．05）；七叶皂苷15—60mg／L处理细胞24小时后细胞发生凋亡。Annexin V／PI分析显示，给药组Annexin V阳性细胞为（12．7±0．58）％-（65．4±1．30）％，明显高于对照组的（0．57±0．03）％（P均〈0．01）。七叶皂苷处理的细胞DNA琼脂糖凝胶电泳显示典形的凋亡DNA梯形条带。结论：七叶皂苷能特异性地诱导HL-60细胞凋亡，此研究结果为七叶皂苷今后作为治疗白血病的辅助药物提供实验依据。     

氧糖剥夺-氧糖恢复诱导乳鼠心肌细胞凋亡模型的建立

目的通过乳鼠心肌细胞原代培养进行氧糖剥夺．氧糖恢复,诱导心肌细胞凋亡。方法取1～3天的新生SD乳鼠心室肌培养,采用氧糖剥夺2小时模拟缺血,氧糖恢复模拟再灌注,根据氧糖恢复时间,随机分为OGR2小时组、OGR4小时组、OGR6小时组,正常培养为sham组。用Annexin V-FITC／PI双染色及JC-1染色流式细胞术分别检测细胞凋亡和膜电位,western blot检测细胞凋亡相关蛋白等。结果OGR4小时组、OGR6小时组与sham组相比,Annexin V-FITC／P1双染色示细胞早期凋亡率均增高,差异有统计学意义（P〈0．05）,但OGR6小时组细胞坏死率高于OGR4小时组（P〈0．05）;与sham组比,OGR2小时组、OGR4小时组、OGR6小时组绿色荧光比例均增高,差异有统计学意义（P〈0．05）;OGR4小时组、OGR6小时组与sham组比较,胞浆／线粒体cytc比例增高,细胞裂解液caspase．3增高;OGR6小时组与OGR4小时组相比,胞浆／线粒体cyt c比例下降,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论乳鼠心肌细胞氧糖剥夺2小时．氧糖恢复4小时可诱导线粒体途径细胞凋亡。     

棕榈酸对体外培养的人血管内皮细胞凋亡及活性氧的影响

【目的】研究棕榈酸对人血管内皮细胞凋亡及活性氧的影响。【方法】O．5％牛血清白蛋白（BSA）（对照组）或0．5％BSA及不同浓度的棕榈酸（棕榈酸组）（0．1mM、0．2mM、0．3mM）作用于人血管内皮细胞24h,流式细胞仪AnnexinV／PI法检测内皮细胞凋亡,分光光度计检测其caspase-3活性,应用DCFH-DA通过流式细胞仪检测细胞内活性氧。应用SPSSl3．0统计软件进行分析。【结果】AnnexinV／PI法检测结果提示棕榈酸组较对照组细胞凋亡及Caspase一3活性均增加（P〈0．05或P〈0．01）;棕榈酸组较对照组活性氧生成增加（P〈O．05或P〈0．01）。且随棕榈酸的浓度增加而增加。【结论】棕榈酸能够诱导内皮细胞凋亡并增加活性氧生成,说明高水平的游离脂肪酸对内皮细胞有直接伤害作用。     

多西他赛对人骨髓瘤细胞RPMI8226增殖与凋亡的影响

本研究旨在观察多西他赛对人骨髓瘤细胞系RPM18226增殖和凋亡的影响,探讨其作用的分子机制。采用MTT法检测骨髓瘤细胞增殖抑制率,光学显微镜及电子显微镜观察多西他赛对骨髓瘤细胞形态的影响,Annex-in-VFITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,PI染色流式细胞术检测骨髓瘤细胞周期分布情况,半定量RT-PCR检测多西他赛对B观-2、caspase-8及caspase-3mRNA表达影响,Westernblot法检测多西他赛作用前后骨髓瘤细胞BCL-2蛋白表达变化。结果显示：0．25-8．0μg／ml终浓度的多西他赛均可抑制RPM18226细胞增殖,抑制率呈时间（r=0．927）和浓度（r=0．726）依赖性;多西他赛处理组光学显微镜下可见细胞数量明显减少,排列紊乱,高倍镜可见凋亡细胞,偶见坏死细胞;电子显微镜下可见细胞典型凋亡改变以及少数坏死细胞;多西他赛可明显诱导骨髓瘤细胞凋亡（P〈0．01）,主要将细胞阻滞于G2／M期（P〈0．01）,作用48h时BCL-2mRNA与BCL-2蛋白表达量减少（P〈0．05）,caspase-8、caspase-3mRNA表达量增加（P〈0．05）。结论：多西他赛通过诱导细胞凋亡可抑制骨髓瘤细胞增殖,其诱导细胞凋亡可能与细胞周期阻滞,激活细胞内、外源性凋亡通路有关。     

维生素K2诱导人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1细胞凋亡机制的研究

为了研究维生素K2（VK2）诱导人骨髓增生异常综合征（MDS）细胞株MUTZ-1细胞凋亡的作用机制，采用流式细胞术Annexin—V^FITC／PI双染分析细胞凋亡率和PI染色分析细胞周期的改变。用RT-PCR技术检测抗凋亡基因bcl-2、survivin和促凋亡基因bax的表达，用发光比色法检测caspase-3活性。研究结果显示：细胞的凋亡率随着VK2浓度的增加和作用时间的延长逐渐增高并呈明显的时间浓度依赖性（P〈0．05），且随着药物浓度的增加和作用时间的延长S期和G2期细胞逐渐减少（P〈0．05），G0／G1期细胞逐渐增多（P〈0．01），细胞被阻滞在G0／G1期，并且在G0／G1期前出现明显的亚G1峰，即凋亡峰；抗凋亡基因bcl-2、survivin的表达随着VK2浓度的增高明显下调（P〈0．05），而促凋亡基因bax表达无明显变化（P〉0．05）；caspase-3的活性随着VK2浓度的增加和作用时间的延长而逐渐增强。结论：VK2主要是通过激活caspase-3途径诱导MUTZ-1细胞发生凋亡，同时抗凋亡基因bcl-2、survivin在细胞凋亡过程中也起重要作用。     

复方浙贝颗粒联合阿霉素对K562／A02移植瘤细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

本研究旨在探讨复方浙贝颗粒联合阿霉素对K562／A02移植瘤细胞凋亡及BCL-2、BAX蛋白表达影响。将多药耐药K562／A02细胞接种于BALB／c—nu裸鼠腋前皮下构建多药耐药移植瘤模型,用Annexin V—FITC／PI流式细胞术检测实验各组移植瘤细胞的凋亡率;用免疫组织化学染色法检测实验各组移植瘤细胞的BCL-2、BAX蛋白表达,并计算蛋白表达积分的光密度值（IOD）。结果发现,复方浙贝颗粒各剂量联合阿霉素组的细胞凋亡率与对照组、阿霉素组相比有统计学意义（P〈0．05）;与对照组和阿霉素组相比,复方浙贝颗粒各剂量联合阿霉素组多药耐药移植瘤BCL-2表达的IOD值降低（P〈0．05）,BAX表达的IOD值增高（P〈0．05）。结论：复方浙贝颗粒是通过增强阿霉素对耐药移植瘤的促细胞凋亡,减少耐药移植瘤的BCL-2蛋白表达,增加BAX蛋白表达而逆转多药耐药。     

硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞凋亡及分子伴侣BiP表达的影响

本研究旨在探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞株NCI—H929（H929）的凋亡诱导作用及其对H929细胞中分子伴侣BiP表达的影响。以不同浓度硼替佐米处理H929细胞24小时后,采用Annexin V—FITC／PI双染联合流式细胞术检测靶细胞凋亡率;用RT—PCR和Westernblot检测靶细胞BiP mRNA和BiP蛋白的表达。结果表明：不同浓度硼替佐米（20、40、80nmol／L）均可诱导靶细胞凋亡,凋亡率分别为（15．73±0．67）％、（27．83±1．26）％7t．（44．17±2．25）％,呈剂量依赖性,且均显著高于未处理组（1．21±0．07％）（P〈0．05）;经不同浓度硼替佐米处理后,靶细胞BiPmRNA和BiP蛋白水平均高于未处理组,且二者变化一致;在相近的促凋亡条件下（凋亡率约40％-50％）,标准内质网应激诱导剂brefeldin A（500ng／ml,24小时）对H929细胞BiP mRNA和BiP蛋白表达的上调作用与硼替佐米（80nmol／L,24小时）基本一致。结论：硼替佐米诱导H929细胞凋亡并伴有分子伴侣BiP mRNA和BiP蛋白表达上调,表明硼替佐米诱导的H929细胞凋亡极可能涉及内质网应激反应。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠脑缺血-再灌流损伤的保护作用

目的 探讨盐酸戊乙奎醚对大鼠三动脉阻断法急性全脑缺血．再灌流损伤的保护作用。方法 144只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌流组（生理盐水1ml）、东莨菪碱组（0．01mg／kg）和盐酸戊乙奎醚组（0．01mg／kg）,缺血前40min分别腹腔注射相应药物,缺血时间为10min,于再灌流24h、3d和7d测定其行为学（开阔法、平衡木法、攀绳和肌力试验）,再灌流2h、12h、24h、3d和7d取材测定海马CA1区存活神经元数量（HE染色）、凋亡神经元数量（TUNEL染色）、bcl-2和bax蛋白表达（免疫组化染色）,部分大鼠于再灌流4d测定脑梗死体积（TTC法）。结果 与缺血-再灌流组比较,盐酸戊乙奎醚组和东莨菪碱组海马CA1区凋亡神经元数量减少（P〈0．01）,bcl-2提前并延长表达（P〈0．01）,盐酸戊乙奎醚组bax表达下降（P〈0．05或P〈0．01）。同时,盐酸戊乙奎醚组和东莨菪碱组存活神经元数量增加（P〈0．05）,脑梗死体积缩小（P〈0．05或P〈0．01）,行为学检测指标改善（P〈0．05）。盐酸戊乙奎醚组较东莨菪碱组作用更加明显（P〈0．05）。结论 盐酸戊乙奎醚对脑缺血．再灌流损伤大鼠具有脑保护作用,并且优于同样剂量东莨菪碱。改变bcl-2／bax的比例可能是其机制之一。     

存活蛋白和P63蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及其对细胞凋亡和增殖的作用

本研究探讨存活蛋白（Survivin）和P63蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤（B—NHL）发生发展中的可能作用及其与细胞凋亡和增殖的相互关系。应用免疫组织化学SP法和TdT介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术检测43例B-NHL和10例反应性增殖淋巴组织（RHL）中的survivin和P63蛋白表达以及细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）的水平。结果表明：survivin和P63在43例B-NHL中表达的阳性率分别为69．8％（30／43）和82．7％（36／43），survivin和P63在10例RHL中表达阳性率分别为10％（1／10）和40％（4／10），survivin在侵袭性B—NHL中的阳性率明显高于惰性B—NHL（83．3％vs46．2％，P〈0．01），P63蛋白表达差异无显著性意义；survivin阳性表达与凋亡指数（AI）和增殖指数（PI）呈正相关（r=0．429，P〈0．01；r=0．348，P〈0．01），P63蛋白阳性表达与AI和PI呈正相关（r=0．451，P〈0．01；r=0．369，P〈0．05），B—NHL的AI和PI呈显著正相关（r=0．598，P〈0．001）。结论：survivin可能参与了B—NHL的凋亡和增殖调控机制，P63作为癌基因参与B—NHL发生，二者可能共同影响细胞增殖和凋亡。     

VPA增强ORI诱导HL-60细胞凋亡及机制研究

目的：探讨VPA与冬凌草甲素（oridonin,ORI）联合诱导HL-60细凋亡的作用及其机制。方法：CCK-8法选取ORI和VPA最佳协同作用剂量;VPA和ORI单独或联合作用于HL-60细胞后,Hoechst33342染色后荧光显微镜下观察细胞核形态学变化;Western blot检测凋亡相关基因caspase-3剪切片段的蛋白表达;预先加入或不加入caspase抑制剂处理HL-60细胞,采用Annexin V／PI流式试剂盒检测两药联合后细胞凋亡的变化。结果：Hoechst33342染色后荧光显微镜下,ORI＋VPA组比单独用药纽核碎裂数目明显增多;ORI和VPA单独作用组caspase-3活性片段表达较对照组高但均不如ORI＋VPA组明显;ORI＋VPA组细胞凋亡率（16．7±2．0）％。与对照组（1．2±1．5）％相比,具有显著差异（P〈0．05）;预先加入caspase抑制剂组细胞几乎没有凋亡,与对照组相比,不具有显著差异（P〉0．05）。结论：VPA确实能增强冬凌草甲素诱导HL-60细胞凋亡,且凋亡机制与caspase凋亡通路密切相关。     

几种抗肿瘤药物诱导Jurkat细胞凋亡的研究

本研究评价几种临床常用的抗肿瘤药物顺铂（CDDP）、羟基喜树碱（HCPT）、高三尖杉酯碱（HHT）和米托蒽醌（MIT）在白血病治疗中的作用，并分析其在诱导Jurkat细胞凋亡的作用，为白血病的临床治疗提供新的理论依据和思路。用Annexin V／PI双参数流式分析方法，检测这几种抗肿瘤药物诱导Jurkat细胞凋亡和死亡的效应。结果表明：MIT和HCPT在加药处理早期4小时（P〈0.05）和后期第8小时（P〈0．05）都有明显的诱导Jurkat细胞凋亡的效应。HHT有明显诱导Jurkat细胞凋亡的效果，但各剂量组之间无显著差异。CDDP在高浓度和长时间作用时才显示较弱的细胞凋亡效应，明显弱于前3者。各种药物作用后均未观察到明显的细胞死亡效应。结论：MIT诱导Jurkat细胞凋亡的作用最显著，Annexin V流式分析方法可作为一种可靠的临床药物筛选的方法。     

热休克蛋白27对人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的：观察热休克预处理诱导的热休克蛋白27对晶状体上皮细胞的保护作用。 方法：实验于2004—01／12在中国医科大学卫生部小儿先天畸形重点实验室完成。体外培养人晶状体上皮细胞系HLB—C3细胞，随机分为4组：①正常对照组。②氧化损伤组：细胞中加入200μmol／LH2O2作用6h。③热休克处理组：42℃预热30min后，37℃恢复2h，处理同氧化损伤组。④放线菌酮组：预热前30min加入放线菌酮（25mg／L），其余处理同热休克处理组。观察各组细胞存活率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性；DNA ladder和Annexin V—FITC流式细胞仪检测晶状体上皮细胞凋亡率；免疫印迹法检测各组中热休克蛋白27和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达。 结果：①细胞活力：氧化损伤组低于正常对照组（0．24&;#177;0．02，0．28&;#177;0.04，P〈0．01），热休克处理组高于氧化损伤组（0．27&;#177;0．04，P〈0．05），放线菌酮组低于热休克处理组（0．23&;#177;0．01，P〈0．01）。②细胞凋亡率：氧化损伤组高于正常对照组[（15．69&;#177;1．54）％，（4．17&;#177;0．83）％，P〈0．01]；热休克处理组低于氧化损伤组[（8．34&;#177;1．19）％，P〈0．01]；放线菌酮组高于热休克处理组[（13．58&;#177;1．21）％，P〈0．01]。③超氧化物岐酶和过氧化氢酶活性：氧化损伤组低于正常对照组（P〈0．01），热休克处理组高于氧化损伤组（P〈0．05），放线菌酮组低于热休克处理组（P〈0．01）。④热休克蛋白27表达：正常对照组细胞中略有表达，氧化损伤组表达稍有增加，热休克处理组表达明显增多，放线菌酮组未见表达。⑤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达：正常对照组细胞表达较弱，氧化损伤组表达增多，热休克处理组的表达少于氧化损伤组。 结论：热休克预处理诱导的热休克蛋白27对氧化损伤的晶状体上皮细胞起着保护作用。其保护机制可能是：①对与晶状体抗氧化有关的酶防御系统的影响：②小分子热休克蛋白对抗细胞凋亡。     

热疗联合阿霉素对K562/AO2细胞株凋亡及Bcl-2表达的影响

目的：观察热疗联合阿霉素对耐药慢性髓系白血病细胞株K562／AO2的体外增殖抑制作用、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT法）确定阿霉素的工作浓度，以该浓度进行化疗或与热疗联合治疗，分别选择温度40，41和42℃，体外作用于K562／AO2。采用MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用；流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2表达。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果：作用48h后IC50为53μg／ml，以此为实验的工作浓度。单纯热疗60min对K562／AO2细胞有抑制作用（P〈0．01），并随温度增高而增强；单纯化疗对K562／AO2细胞也有抑制作用；各热化疗组对K562／AO2均有明显的抑制作用（P〈0．01），随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2的表达，热疗组、化疗组及热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高，各组之间差异有统计学意义（P〈0．01）；Bcl-2蛋白的表达下降，各组之间的差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：热疗联合阿霉素能增强对K562／AO2细胞的体外抑制作用，提高肿瘤细胞的凋亡率，下调Bcl-2蛋白的表达。     

阿魏酸对阻断兔主动脉血流所致脊髓神经元凋亡的影响

目的探讨阿魏酸对阻断家兔主动脉血流所致脊髓神经元凋亡的影响及其可能的作用机制。方法将24只家兔按随机数字表法分为假手术组、缺血／再灌注（I／R）损伤组和阿魏酸组。采用阻断腹主动脉血流40min、再灌注7d制备脊髓I／R损伤模型；阿魏酸组于阻断腹主动脉前15min一次性静脉注射阿魏酸50mg／kg；假手术组仅松套腹主动脉，不阻断血流。分别测定腹主动脉阻断前10min（C-10）、开放前即刻（C40）及开放后60min（R60）和处死前即刻（R7d）血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平；检测脊髓凋亡神经元以及Bax和Bcl-2蛋白的表达；观察术后动物后肢神经功能评分。结果①I／R损伤组MDA含量明显高于C-10值及假手术组相应时间点值（P〈0．05或P〈0．01），SOD活性变化与MDA变化相反；阿魏酸组MDA含量明显高于C-10值（P〈0．05），但显著低于I／R损伤组相应时间点值（P〈0．05或P〈0．01），较假手术组比较差异无显著性，SOD活性变化与MDA变化亦相反。②I／R损伤组Bax蛋白表达明显高于假手术组（P〈0．05），Bcl-2蛋白表达则明显低于假手术组（P〈0．01）；阿魏酸组Bax蛋白表达明显低于I／R损伤组，但显著高于假手术组（P〈0．01和P〈0.05），Bcl一2蛋白表达明显高于I／R损伤组及假手术组（P均〈0.01）。③I／R损伤组脊髓神经元凋亡指数明显高于假手术组（P〈0．01）；阿魏酸组明显低于I／R损伤组，但高于假手术组（P〈0．01和P〈0．05）。④阿魏酸组瘫痪发生率明显低于I／R损伤组，其后肢神经功能评分明显高于I／R损伤组（P均〈0．01）。结论阿魏酸能显著抑制阻断家兔主动脉所致脊髓神经元凋亡的发生，其机制可能与其通过抗氧化反应进而抑制Bax蛋白、增强Bcl-2蛋白的表汰有关．     

脓毒症早期大鼠肾脏细胞凋亡及炎症细胞因子的变化

目的研究脓毒症时肾脏组织细胞凋亡变化与炎症细胞因子的关系。方法采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建立SD大鼠脓毒症模型。分别取肾组织．通过组织裂解液。制备组织匀浆，测定匀浆上清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）含量；采用钙结合蛋白V／碘化丙啶（Annexin V／PI）双染色法和流式细胞仪测定组织凋亡细胞，采用原位末端缺刻标记技术（TUNEL）和免疫组化分析细胞凋亡情况。结果在脓毒症早期，肾组织匀浆中TNF-α、MCP-1含量均明显增高，肾组织细胞凋亡数量增加以致伤后3h为最高，6h后逐渐下降，差异均有显著性（P〈0．05或P〈0．01）。结论TNF-α、MCP-1是脓毒症早期激活的细胞因子，脓毒症早期肾组织细胞凋亡数量增加与细胞因子大量释放有关。     

再生障碍性贫血发病机制分型与sFas测定的临床意义

目的：探讨可溶性Fas（sFas）在再生障碍性贫血（aplasticanemia．AA）中的表达及临床意义。方法：用酶联免疫夹心法（ELISA法）检测37例再障患者血清sFas，采用微量甲基纤维素法对30例AA患者骨髓单个核细胞（BMMNC）进行粒一单系祖细胞（CFU—GM）的培养．对再障发病机制进行体外分型。以20例健康献血员静脉血清为正常对照。结果：重型再障（SAA）和慢性再障（CAA）患者血清sFas均显著低于正常对照组（P〈0．01，P〈0．01）．且SAA组较CAA组显著降低（P〈0．05）；骨髓增生Ⅱ～Ⅲ级、Ⅳ～V级AA患者血清sFas均显著低于对照组（P〈0．05，P〈0．01），骨髓增生Ⅳ～V级AAsFas显著低于Ⅱ～Ⅲ级AA患者（P〈0．01）；AA患者骨髓非造血细胞所占比例≥60％组和〈60％组sFas均显著低于正常对照（P〈0．01，P〈0．01），≥60％组sFas显著低于〈60％组sFas（P〈0．05）。干细胞缺陷型AA、免疫介导组AAsFas水平较正常对照组显著降低（P〈0．01），而微环境缺陷组sFas水平与对照组比较没有明显差异（P〉0．05）；免疫介导型、微环境缺陷型与干细胞缺陷型相比P〉0．05、P〈0．05；免疫介导型与微环境缺陷型相比P〉0．05。结论：血清sFas水平降低可能是促进造血干细胞凋亡因素之一。     

依达拉奉对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的：观察依达拉奉对心肌缺血／再灌注后心肌细胞凋亡的影响。方法：选择30只健康SD大鼠，采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法复制心肌缺血再灌注的动物模型，随机分为假手术组（n=10）、缺血／再灌注（I／R）组（n=10）和药物（依达拉秦）组（n=10）。检测各组3h后心肌组织的超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。并用免疫组化法测定局部凋亡相关因子Bcl-2、Fas的表达，比较各组间差异。结果：与假手术组比较，I／R组中反映氧化损伤程度的MDA明显升高（P〈0．01），抗氧化酶SOD则明显减少（P〈0．01），Fas含量升高（P〈0、01），Bcl-2含量明显减少（P〈0、01）；药物组较I／R组MDA含量明显减少（P〈0．01），SOD活性显著增加（P〈0．01），Fas含量明显降低（P〈0，05），Bcl-2含量明显增加（P〈0．01）。结论：依达拉奉具有抗心肌缺血再灌注损伤作用，其机制可能是通过调节Bcl-2和Fas介导的细胞凋亡而实现     

三七总皂甙对大鼠脑出血模型中神经细胞凋亡、Bcl-2表达的影响

目的：研究大鼠实验性脑出血模型中神经细胞凋亡发生的规律以及与Bcl-2表达的关系，观察三七总皂甙对出血性脑损伤的保护作用。方法：将雄性SD大鼠随机分成正常组、假手术组、脑出血模型组、三七总皂甙治疗组。采用VⅡ型胶原酶注入到大鼠右侧苍白球制备脑出血模型，每组分别在术后6h、1d、3d、5d4个时间点取SD大鼠脑组织标本，应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法（TUNEI。）检测细胞凋亡，免疫组化法检测Bcl-2蛋白表达。结果：正常组与假手术组比较，大鼠脑出血后各时间点脑组织TuNEL阳性细胞数、Bcl-2表达显著增高（P〈0．01）；与脑出血模型组比较，三七总皂甙治疗组1d、3d、5dTUNEI，阳性细胞数显著减少（P〈0．05～0．01），Bcb2显著增高（P〈0．05～0．01）。结论：细胞凋亡参与了脑出血后神经细胞的继发损伤过程，Beb2有抑制细胞凋亡的作用；三七总皂甙可以增高脑出血后Bcl-2的表达，对脑组织具有保护作用。     

重组变构人TNF相关促凋亡配体联合三氧化二砷诱导白血病耐药细胞株凋亡

本研究探讨重组变构人TNF相关促凋亡配体（recombinant mutant human TNF—related apoptosis—inducing ligand，rmhTRAIL）联合三氧化二砷（As2O3）对阿霉素诱导的人慢性髓系白血病红白血病变耐药细胞株K562／AO2（mdr-1^＋）的促凋亡作用，以亲本阿霉素敏感细胞株K562（mdr-1^-）为对照，观察rmhTRAIL作用后细胞形态变化，采用MTT法测定rmhTRAIL、As2O3单药及联合作用后细胞增殖抑制率；碘化丙锭染色的流式细胞术（FACSCalibur）定量检测rmhTRAILL、As2O3单药及联合作用后sub—G1峰占检测细胞的百分比（sub—G1％）。结果表明：rmhTRAIL联合As2O3对K562／AO2和K562增殖的抑制作用优于单药，采用国内金（正均）氏公式判断rmhTRAIL和As2O3联合作用具有协同作用；流式细胞术定量检测sub—G1％显示，rmhTRAIL 2000ng／ml与As2O3 2μmoL／L单独作用下K562／AO2组与K562组凋亡率分别为（34．93±0．10）％、（10．53±0．16）％（P〈0．01）；（5．95±0．07）％、（3．50±0．01）％（P〈0．05），联合作用下细胞凋亡率分别为（50．95±0，91）％、（20．75±0．95）％（P〈0．05），K562／AO2组凋亡效应强于K562组．结论：rmhTRAIL可诱导K562、K562／AO2细胞凋亡；rmhTRAIL联合凋亡诱导剂As2O3对白血病耐药细胞株K562／AO2和K562细胞株的凋亡具有协同作用；rmhTRAIL、As2O3对K562／AO2的促凋亡作用优于其亲本K562细胞．