激活素A对人早孕细胞滋养层细胞凋亡的调节

目的探讨激活素A(Activin A,ActA)对细胞滋养层细胞凋亡的调节作用。方法用ActA刺激无血清培养的7~8周人绒毛细胞滋养层细胞后,激光共聚焦和蛋白印迹分析检测凋亡信号通路相关蛋白的表达变化,TUNEL检测细胞凋亡情况。结果高浓度ActA(50 ng/ml)作用24 h后,人绒毛细胞滋养层细胞中TUNEL阳性信号显著增强;同时Caspase-3,-9表达量明显提高(对照组:0.13±0.048和0.26±0.004;50 ng/ml组:0.34±0.068和1.54±0.062;100 ng/ml组:0.45±0.091和0.58±0.008),Caspase-8表达亦略有增加;凋亡相关蛋白P53(对照组:5.2±1.02;50ng/ml组:12.3±1.91;100 ng/ml组:11.5±1.73)和Bax(对照组:0.09±0.021;50 ng/ml组:0.46±0.065;100 ng/ml组:0.68±0.142)表达水平显著增加。结论高浓度ActA可诱导人细胞滋养层细胞发生凋亡,其作用可能主要是通过细胞凋亡的线粒体途径来实现的。     

子痫前期胎盘抑制素A、胎盘激活素A和胎盘抑制素B基因的表达

目的:探讨子痫前期患者胎盘中抑制素A(inhibin-A)、激活素A(activin-A)和抑制素B(inhibin-B)亚单位基因的表达水平及其意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术定量测定44例子痫前期患者和30例正常妊娠妇女胎盘中inhibin-A、activin-A和inhibin-B亚单位基因mRNA的表达。结果:子痫前期组胎盘中inhibin-Aα-βA亚单位和activin-A βA-βA亚单位基因mRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而inhibin-B α-βB亚单位基因表达两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:子痫前期患者胎盘中的inhibin-A α-βA亚单位和activin-A βA-βA亚单位mRNA表达水平升高,inhibin-A/activin-A水平可反映滋养细胞的功能,是监测胎盘功能有效指标,并参与子痫前期的病理生理过程。     

妊娠高血压综合征患者胎盘滋养细胞凋亡基因表达谱的研究

目的　采用基因芯片技术筛查妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者胎盘滋养细胞凋亡基因的差异表达 ,探讨细胞凋亡与妊高征发病的关系。方法　妊高征患者 2 0例为妊高征组 ,正常孕妇 10例为对照组。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)方法检测两组孕妇胎盘组织滋养细胞凋亡情况。同时采用上海博星公司生产的基因芯片进行凋亡基因表达谱的筛查。判断基因差异表达的标准 :(1)cy5 (妊高征组 ) /cy3(对照组 )的自然对数绝对值 >0 6 9,cy3与cy5的信号相差 2倍以上。 (2 )cy3或cy5、cy3和cy5的信号值其中之一必须 >80 0。 结果　 (1)TUNEL检测显示 ,每 10 0 0 0 μm2 绒毛面积中滋养细胞凋亡数 ,妊高征组为 1 5 84个 ,对照组为 0 0 32个 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。 (2 )基因芯片筛查有差异表达的凋亡基因 10个 ,占基因芯片筛查凋亡基因总数的 5 %。妊高征组胎盘组织中的凋亡基因表达均明显下调 ,即cy5 /cy3比值 <1。其中包括具有明显抗凋亡作用的SFRP2 、IAP2 、DHCY2 4及ATPIA1基因。结论　妊高征患者胎盘滋养细胞存在显著的凋亡现象 ,具有抗凋亡作用的基因表达明显下调 ,将可能导致胎盘滋养细胞凋亡 ,从而导致妊高征发病。     

妊娠高血压综合征胎盘滋养细胞中胰岛素样生长因子Ⅱ及其mRNA的表达

目的　检测胎盘滋养细胞中胰岛素样生长因子Ⅱ (insulin likegrowthfactorⅡ ,IGF Ⅱ )及其mRNA的表达 ,评估IGF Ⅱ在妊娠高血压综合征 (妊高征 )发病中的作用。　方法　 (1)用免疫组化法检测正常及妊高征孕妇胎盘组织中IGF Ⅱ的表达 ,并用计算机图像分析系统进行定量分析比较。 (2 )用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测正常妊娠及妊高征胎盘滋养细胞IGF ⅡmRNA表达水平 ,并通过紫外凝胶图像分析进行定量分析比较。　结果　 (1)IGF Ⅱ主要位于绒毛小叶的合体滋养细胞及细胞滋养细胞。此外 ,也存在于羊膜绒毛层 ,但染色较以上两种细胞明显减弱。(2 )与正常妊娠胎盘组 (0 36 0± 0 0 72 )比较 ,妊高征组IGF Ⅱ的平均光密度 (0 32 4± 0 0 4 2 )显著降低 (P <0 .0 5 )。 (3)妊高征胎盘滋养细胞IGF ⅡmRNA的表达 (0 72± 0 72 )亦显著低于正常妊娠者(0 96± 0 30 ,P <0 .0 5 )。　结论　胎盘滋养细胞表达IGF Ⅱ减少可能与妊高征的发病有关。     

胎盘部位滋养细胞肿瘤的临床特点

1976年 Kurman 等描述了一种变异的滋养细胞疾病并称之为滋养细胞假瘤。在形态学上细胞类似滋养细胞并且侵入周围组织。对这些侵入的细胞进行免疫酶学研究提示存在有绒毛膜促性腺激素(hcG)。本病也有一些特点不同于绒癌。该肿瘤缺少通常如绒癌那样同时具有细胞滋养细胞及合体滋养细胞的两种细胞类型,在瘤体中亦无广泛坏死及出血。细胞浸润的特点是细胞潜入肌束及纤维束之间。在12例此种患者中,无因本病而     

低分子肝素对低氧诱导的早孕细胞滋养细胞凋亡的影响

目的:研究低分子肝素对低氧诱导的早孕细胞滋养细胞凋亡的影响。方法:选取正常早孕(8～10周)绒毛,使用Percoll梯度离心法提取细胞滋养细胞在1%和20%氧分压下分别进行原代培养。两种氧条件下均设对照组与研究组。研究组培养液中加入不同浓度低分子肝素(终浓度为0.1U/ml、1U/ml、10U/ml),未加低分子肝素组作为对照组,将培养孔板分别置入1%和20%氧分压培养箱中培养120h。使用TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR法检测凋亡基因表达。结果:(1)与20%氧分压条件下对照组相比,在1%氧分压下对照组的细胞滋养细胞的生长明显增加,差异有统计学意义(P0.05);(2)与对照组比较,1%和20%氧分压下研究组,细胞滋养细胞的生长均明显增加,差异有统计学意义(P0.05);(3)与20%氧分压条件对照组相比,在1%氧分压下,对照组的细胞滋养细胞的凋亡明显增加,有显著差异(P0.01);(4)在1%氧分压下,与对照组相比,研究组细胞滋养细胞的凋亡明显减少,差异有统计学意义(P0.05)。结论:低氧能促进早孕细胞滋养细胞生长,并诱导细胞滋养细胞凋亡;低分子肝素抑制低氧诱导的早孕细胞滋养细胞凋亡并促进其生长。     

人早孕滋养细胞条件培养液对蜕膜白细胞的趋化作用

目的:探讨人早孕滋养细胞在蜕膜白细胞选择性募集中的可能机制。方法:分离纯化人早孕滋养细胞进行原代培养,制备滋养细胞条件培养液(CM),分离蜕膜白细胞进行Transwell趋化实验,流式细胞术分析CM对蜕膜各型免疫细胞的趋化效应。结果:4倍稀释的CM即显示对蜕膜白细胞的显著趋化活性(P<0.05),而且二者之间呈显著直线正相关性(P<0.01);4倍稀释的CM即显示对CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞、单核细胞、T细胞的显著趋化活性(P<0.05),趋化效率随CM浓度增高而上升;2倍稀释的CM显示对γδT细胞的趋化效应(P<0.05);CM对NKT细胞不表现趋化效应;经CM趋化前后的蜕膜白细胞构成比例相似(P>0.05)。结论:人早孕滋养细胞可能分泌多种趋化因子和细胞因子,募集和黏附到达蜕膜的母体免疫细胞,缔造母胎免疫耐受。     

RAGE/NF-κB通路对妊娠期糖尿病大鼠胎盘滋养细胞凋亡及胎盘屏障功能改变的影响

目的:探讨晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)通路对妊娠期糖尿病(GDM)大鼠胎盘滋养细胞凋亡及胎盘屏障功能改变的影响。方法:将受孕雌性SD大鼠随机分为正常妊娠组、模型组(GDM组)、RAGE抑制剂组(FPS-ZM1组)、RAGE抑制剂阴性对照组(FPS-ZM1 NC组)、RAGE激活剂组(RAGE组)、RAGE激活剂阴性对照组(RAGE NC组),每组20只。除正常妊娠组外,其余各组均建立GDM模型,并在妊娠第5天开始给药,连续给药2周后,比较各组空腹血糖(FBG)、晚期糖基化终末产物(AGE)、胎盘重量、胎鼠重量、胎盘通透性、胎盘滋养细胞凋亡率;胎盘组织RAGE、NF-κB、紧密连接蛋白(TJ)、囊膜蛋白-2(Syncytin-2)、调解超家族蛋白2 A(MFSD2 A)、抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的差异。结果:与正常妊娠组相比,GDM组大鼠FBG及AGE水平、胎盘重量及胎鼠重量、胎盘组织伊文思蓝(EB)含量、RAGE和NF-κB阳性表达水平、IL-6、TNF-α、Bcl...     

米非司酮影响早孕滋养细胞的信号传导和凋亡的机？…

目的 探讨米非司酮（ＲＵ４８６）在早孕滋养细胞信号传导及其凋亡的影响。方法 ２１９例服用ＲＵ４８６早孕药物流产者,对其有效组３０例,失败组２３例,人流组对照１６例,以免疫组化法分别标记孕激素受体（ＰＲ）、雌激素受体（ＥＲ）、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）、酪氨酸蛋白激酶Ｃ（αＰＫＣ）、分裂激活蛋白激酶（ＭＥＫ－１）、细胞转化分裂介质（ｒａｆ－１）和抗凋亡蛋白（Ｂｃｌ－２）。三组均计数凋亡指数（ＡＩ）     

抗子宫内膜抗体对人早孕绒毛滋养细胞凋亡及FasL蛋白表达的影响

目的:探讨体外培养人早孕绒毛滋养层细胞在游离抗子宫内膜抗体(Em-Ab)环境中,细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)及凋亡相关因子配体(factor associated suicide ligend,FasL)的表达。方法:培养经胰蛋白酶/DNA酶Ⅰ联合消化,通过Percoll细胞分离液纯化得到绒毛滋养细胞。用TUNEL法测定EmAb(+)血清处理组和EmAb(-)血清处理组绒毛滋养细胞培养0、48、72、96h时的细胞凋亡指数,同时用免疫细胞化学法测定FasL蛋白的表达。结果:EmAb(+)血清处理组于培养72、96h时间点测得的AI明显高于EmAb(-)血清处理组(P<0.01);FasL蛋白表达明显低于EmAb(-)血清处理组;而培养48h AI及FasL蛋白表达无显著差异。结论:绒毛滋养细胞在EmAb(+)环境下AI增加,FasL蛋白表达减少。     

上皮型钙粘附素在正常滋养细胞及妊娠滋养细胞肿瘤组织中的表达

浸润和转移是恶性肿瘤生物学行为最本质的特征 ,涉及癌细胞与细胞外基质相互作用的一系列复杂过程 ,其中细胞粘附是一个重要环节。上皮型钙粘附素 (ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃａｄｈｅｒｉｎ ,Ｅ ｃｄ)作为钙粘附素家族中的一员 ,为钙依赖性跨膜糖蛋白 ,是介导细胞间联结最重要的一类分子 ,与肿瘤的浸润和转移有着密切的关系[1 ] 。本研究采用免疫组织化学 (组化 )链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶连接 (ＳＰ)法检测Ｅ ｃｄ在正常滋养细胞、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎及绒毛膜癌 (绒癌 )组织中的表达 ,以探讨Ｅ ｃｄ的表达与恶性滋养细胞肿瘤侵袭的关…     

激活素A和卵泡休止素与先兆子痫的相关性研究

目的　探讨先兆子痫患者血清中激活素A和卵泡休止素水平及其mRNA在胎盘组织中的表达 ,及其与先兆子痫发病的关系。方法　 2 0例足月妊娠先兆子痫孕妇作为先兆子痫组 ,2 0例足月妊娠血压正常孕妇作为对照组。应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测两组孕妇血清中激活素A和卵泡休止素水平。应用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测两组孕妇分娩后胎盘组织中激活素AmRNA和卵泡休止素mRNA的相对表达强度。将两组孕妇的胎盘组织激活素AmRNA的表达强度与血清激活素A水平进行直线相关分析。结果　 (1)先兆子痫组孕妇血清中激活素A水平为 (33 7± 6 6 ) μg/L ,明显高于对照组的 (9 9± 2 1) μg/L(P <0 0 1)。先兆子痫组孕妇血清中卵泡休止素水平为 (5 1± 0 6 ) μg/L ,与对照组的 (4 7± 0 3) μg/L比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。 (2 )先兆子痫组胎盘组织中激活素AmRNA为 1 11± 0 2 1,明显高于对照组的 0 6 1± 0 17(P <0 0 1)。先兆子痫组胎盘组织中卵泡休止素mRNA为 0 5 7± 0 31,与对照组的 0 5 4± 0 2 7比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。(3)在先兆子痫组和对照组孕妇中 ,血清中激活素A水平与胎盘组织激活素AmRNA相对表达强度呈正相关 [相关系数 (r) =0 89,P <0 0 1]。结论     

胎盘部位滋养细胞肿瘤的病例分析

胎盘部位滋养细胞肿瘤的病例分析上海医科大学妇产科医院（２０００１１）朱关珍陆惠娟胎盘部位滋养细胞肿瘤（ｐｌａｃｅｎｔａｌｓｉｔｅｔｒｏ－ｐｈｏｂｌａｓｔｉｃｔｕｍｏｒ，ＰＳＴＴ）是一种少见而独特的子宫肿瘤。按Ｖａｒｄａｒ［１］报道在英文文献迄今共有７...     

细胞凋亡与胎盘的研究进展

细胞凋亡是细胞的主动死亡过程 ,是与细胞坏死截然不同的细胞死亡方式。在机体的非免疫系统中 ,细胞凋亡是组织生长、更新以及清除异常细胞的重要手段 ;在免疫系统中 ,细胞凋亡与淋巴细胞发生、选择、功能的发挥和及时终止密切相关 ;在某些特殊组织 ,细胞凋亡则是形成免疫豁免或免疫耐受的重要机理。胎盘是母、儿在体内直接接触的重要部位 ,已有的研究表明 ,胎盘本身存在细胞凋亡 ,在某些病理妊娠情况下细胞凋亡出现异常。现就细胞凋亡与胎盘的研究进展综述如下。一、胎盘细胞凋亡的观察胎盘的细胞凋亡研究只在近年来才受到重视。胎盘是母儿…     

氧化低密度脂蛋白及其受体对滋养细胞凋亡的影响

目的:探讨氧化低密度脂蛋白(oxLDL)及血凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)对滋养细胞凋亡的影响。方法:采用蛋白印迹法检测滋养细胞LOX-1蛋白的表达;RT-PCR技术检测LOX-1mRNA及caspase-3mRNA的表达;流式细胞仪检测滋养细胞凋亡指数。结果:不同浓度oxLDL(0.01,0.05,0.10mg/ml)培养下细胞滋养细胞中LOX-1蛋白、mRNA及caspase-3mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.01),各组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。拮抗剂组LOX-1蛋白、mRNA及caspase-3mRNA表达水平均显著低于同浓度oxLDL刺激组,差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论:oxLDL可通过上调滋养细胞中LOX-1表达引起滋养细胞的过度凋亡。     

胎盘部位滋养细胞肿瘤的病例分析

胎盘部位滋养细胞肿瘤 (ｐｌａｃｅｎｔａｌｓｉｔｅｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｔｉｃｔｕ ｍｏｒ,ＰＳＴＴ)是一种极罕见的滋养细胞肿瘤 ,1976年Ｋｕｒ ｍａｎ等首次以“子宫滋养细胞假瘤”为名报道 12例。鉴于其某些病例存在浸润、转移及死亡的恶性生物学行为 ,1981年Ｓｃｕｌｌｙ及Ｙｏｕｎｇ把病名改为ＰＳＴＴ。Ｖａｒｄａｒ[1] 1995年报道在英文文献中共有 74例ＰＳＴＴ ,其病死率为 2 0 % ,现报道 1例。1　病历摘要患者 2 9岁 ,住院号 434 5 35。平素月经周期 40 6 0天 ,经量少 ,每次用卫生巾 3片。末次月经 1998年 8月 2 6日 ,因闭经院外…     

激活素A和卵泡休止素对人滋养层细胞增殖和激素分泌的调节作用

目的: 探讨激活素A和卵泡休止素对人早孕绒毛滋养层细胞的增殖和人绒毛膜促性腺激素及孕酮分泌的调节作用。方法: 早孕绒毛用胰蛋白酶与胶原酶联合消化后,再用小牛血清白蛋白密度梯度离心,分离纯化后所得的滋养层细胞进行体外原代培养。将不同浓度激活素A加入细胞培养液中作用48 h,观察其对滋养细胞生长和人绒毛膜促性腺激素及孕酮分泌的影响。向滋养层细胞培养液中加入激活素A和不同浓度的卵泡休止素,培养24 h,观察相互作用。结果: 激活素A和卵泡休止素都不影响滋养层细胞的增殖。激活素A以剂量依赖的方式促进滋养层细胞绒毛膜促性腺激素的分泌和孕酮的分泌,滋养细胞分别经30 ng/mL,100 ng/mL激活素A处理后,培液中绒毛膜促性腺激素和孕酮水平达到高峰(P均<0.01)。激活素A对滋养层细胞激素分泌的影响,可以被其特异结合蛋白卵泡休止素以剂量依赖方式阻断。结论: 激活素A和卵泡休止素以自分泌方式调节滋养层细胞绒毛膜促性腺激素和孕酮分泌,但并不影响细胞增殖,激活素A与卵泡休止素在人早期妊娠中起重要的生理作用。     

胎盘残留与妊娠滋养细胞疾病的甄别

胎盘残留(residual placenta)是产后30分钟胎盘未完全排除而残留于宫腔内的产后并发症,它是引起产后出血、宫腔感染的主要原因[1].妊娠滋养细胞疾病(gestational trophoblastic disease,GTD)是一组来源于胎盘滋养细胞的疾病.根据良恶性进行分类,其中良性滋养细胞疾病包括完全...     

胎盘部位滋养细胞肿瘤的研究进展

胎盘部位滋养细胞肿瘤 (ｐｌａｃｅｎｔａｌｓｉｔｅｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｔｉｃｔｕｍｏｒ,ＰＳＴＴ)是近 2 0年来新命名的一种滋养细胞肿瘤。起初它曾被称为“滋养细胞假瘤” ,“不典型绒毛膜癌” ,“绒毛膜上皮病” ,“合胞体瘤”或“不典型绒毛膜上皮瘤”。随着认识的深入 ,ＰＳＴＴ这一兼有良、恶性内涵的命名得以公认 ,并正式与葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌并列 ,成为第 4种滋养细胞疾病。ＰＳＴＴ临床罕见 ,至今文献报道仅百余例。一、发病机理ＰＳＴＴ是来源于中间型滋养细胞的肿瘤。细胞滋养细胞作为干细胞 ,经双途径分别分化成…