西维来司钠对实验性大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究西维来司钠对实验性大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法:体外培养大鼠神经元,以缺氧加缺糖培养建立神经元"缺血"性损伤模型,观察西维来司钠对培养神经元"缺血"性损伤的保护作用.结果:西维来司钠(10-8,10-7及10-6mol/L)能明显增高模型细胞的活性;能显著降低模型细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率;明显降低裂解液中MDA含量,提高SOD活性.结论:西维来司钠对大鼠脑神经元"缺血"损伤具有保护作用,其机制可能与其抗过氧化作用有关.     

地氟烷对全脑缺血再灌注损伤大鼠脑超微结构的影响

目的研究新型吸入麻醉药地氟烷对全脑缺血再灌注损伤大鼠脑超微结构的影响,探讨其脑保护作用。方法9只W istar大鼠分为3组,缺血组(n=3)、地氟烷组(n=3)和假手术对照组(n=3)。制备大鼠全脑缺血再灌注模型。地氟烷组再灌注开始后立即吸入地氟烷1 h。缺血组和地氟烷组于缺血再灌注1 h、假手术组于手术后1 h取脑,利用电镜技术观察皮质超微结构的变化。结果与缺血组比较,地氟烷组神经元固缩少,神经元的细胞器和微管结构基本正常,但胶质细胞和微循环的破坏并无改善。结论地氟烷对神经元、细胞骨架可能具有保护作用,但对胶质细胞和微循环可能无保护作用。     

高压氧对短暂全脑缺血再灌注大鼠脑ATP酶活性的影响

目的观察SD大鼠脑缺血再灌注后Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的动态变化以及高压氧对其的影响,为临床用高压氧治疗缺血性脑卒中提供实验依据。方法按随机数字表法将63只SD大鼠分为9组:缺血再灌注组(I/R),缺血再灌注后加高压氧处理组(HBO),上述2组分别有6h、24h、48h和96h4个时相点及假手术组(Sham-O)。以四动脉阻断法建立全脑缺血再灌注动物模型。I/R组和HBO组分别于再灌注各时相点断头取脑组织并匀浆,测定Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性。结果HBO组在6h出现Na+-K+-ATP酶活性升高,其活性显著高于I/R6h组(P<0.05)和假手术组(P<0.01),在24h恢复至正常;与假手术组比较,HBO组和I/R组从48h至96h再次出现Na+-K+-ATP酶活性升高(P均<0.05),但HBO组与I/R组相应时间点比较差异无统计学意义;HBO组在6h出现Ca2+-ATP酶活性升高,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01),24h后恢复至正常;与假手术组比较,I/R组在6h和48h出现Ca2+-ATP酶活性升高,差异有统计学意义(P<0.01),在24h和96h恢复至正常水平。结论高压氧处理不仅使急性期Na+-K+-ATP酶活性升高,且加快Ca2+-ATP酶活性恢复,为高压氧治疗缺血性脑卒中作用机制提供了实验依据。     

大鼠脑缺血再灌注对脑生物电变化的影响

目的∶通过观察大鼠在急性脑缺血再灌期间ＥＥＧ主频率功率、功率谱及频率分配的变化，探讨脑缺血再灌流损伤过程中脑电变化的规律。方法∶采用改良四动脉结扎法制作大鼠脑缺血再灌流模型，缺血４０ｍｉｎ后再灌６０ｍｉｎ。结果∶缺血可致ＥＥＧ总功率、主频率功率减小，δ和θ频段所占总功率比率减小而α和β频段比率增加。结论∶提示ＥＥＧ各频段电活动的改变可作为脑缺血性疾病诊断中的重要参考指标之一。     

全脑缺血再灌注对大鼠空间学习记忆的影响

目的:探讨缺血性脑损伤对大鼠空间分辨学习和记忆能力的影响。方法:17只Wistar雄性大鼠随机分成两组,缺血组采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法(4VO)建立大鼠全脑缺血模型,假手术组则只手术不缺血。缺血第8天开始利用Morris水迷宫测试来检测其空间分辨学习和记忆的能力。然后进行灌注固定,经石蜡切片和尼氏染色,最后在显微镜下观察海马CA1区神经元的存活情况,从而确定全脑缺血模型制作的成功与否。结果:缺血性脑损伤组大鼠CA1区约90%神经元死亡,未死亡的神经元散在分布,其形态与正常神经元形态稍异,而假手术组海马CA1区神经元排列整齐,并未发生死亡,说明模型制作成功;在Morris水迷宫测试前4天的训练中,缺血性脑损伤组大鼠平均找到平台时间明显多于假手术组大鼠所用时间,经统计分析两组间有显著性差异(P<0.05),而两组间的游泳速度未见显著性差异(P>0.05);第5天撤掉平台后,缺血性脑损伤组大鼠在原平台所在象限所走的路程占总路程的比例也明显比假手术组少(P<0.05)。说明与假手术组相比,缺血性脑损伤组大鼠的空间分辨学习与记忆能力明显降低。结论:缺血性脑损伤使大鼠的学习、记忆功能受到损害。     

一氧化氮在全脑缺血再灌注大鼠脑损害中的作用

目的　探讨一氧化氮在全脑缺血 2 0min后再灌注大鼠脑损害中的作用。方法　雄性Wistar大鼠 84只 ,体重 (2 2 0± 2 0 )g ,随机分为对照组 (12只 )和缺血组 (72只 ) ,后者设 8、2 4、48、72、96、16 8h 6个时相点。参照Pulsinelli等的方法制作大鼠全脑缺血 2 0min再灌注模型 ,于再灌注后 8、2 4、48、72、96、16 8h活杀取血及海马组织 ,对照组施行麻醉及手术 ,但不缺血 ,观察 72h后取血及海马组织 ,测定血清NSE、海马NO含量及海马CA1区锥体神经元 (Pyramidalneuron ,PN)密度。结果　①海马NO含量于缺血再灌注后 48h明显升高 ,72h达峰值 (与对照组比较P均 <0 .0 1) ,以后逐渐下降 (96h仍明显高于对照组水平 ,P <0 .0 5 ) ,16 8h降至接近对照组 ;②缺血组各时相点血清NSE含量均显著高于对照组 (P 均 <0 .0 1) ;③缺血组海马CA1区PN密度呈明显的逐渐减少趋势 ,自 48h后均明显低于对照组 (P均 <0 .0 1) ,再灌注后 16 8h仅为对照组水平的 2 2 .8% ;④缺血再灌注后海马NO含量与血清NSE水平的变化呈显著的线性正相关 (r =0 .90 2 2 ,P <0 .0 1)。结论　NO在全脑缺血再灌注损伤中起着重要作用 ,是引起海马CA1区锥体神经元DND发生的主要因素之一。     

西维来司钠对大鼠脑出血的保护作用

目的 探讨西维来司钠对大鼠脑出血的保护作用.方法 将Wistar大鼠随机分为5个组:假手术(sham)组;ICH+生理盐水组(model);ICH+Sivelestat(200mg/kg)组;ICH+Sivelestat(80mg/kg)组;ICH+Sire-lestat(30mg/kg)组,分别于造模后24h进行神经功能缺损评分、脑含水量(BWC)测定和组织病理学观察.结果 model组的神经病学评分最高,而各治疗组神经病学评分均底于model组,其中高剂量和中剂量与model组相比差异有显著性意义(P<0.01或P<0.05);大鼠脑出血24h后其脑组织含水量明显升高,与sham组相比具有显著性意义(P<0.01),治疗组(大剂量和中剂量)大鼠脑组织含水量与模型组相比却有明显降低,差别具有显著性意义(P<0.01);假手术组大鼠脑组织没有明显的炎症细胞浸润,ICH大鼠可见大量炎症细胞浸润,西维来司钠治疗组大鼠脑组织病理改变与模型组相比有明显改善,药物剂量越大,脑组织损伤改善越明显,呈剂量依赖性.结论 西维来司钠(80mg/kg和200mg/kg)对胶原酶所致的ICH大鼠模型脑组织有明显的保护作用,能明显改善其神经功能缺损症状,减少炎症细胞浸润,减轻脑水肿及脑组织的病理改变.     

脑缺血性疾病的蛋白质组学研究进展

脑血管病是导致人类死亡的三大病因之一,而其中缺血性脑血管病约占75％～80％,其发病机制涉及多方面复杂因素;蛋白质组学作为新兴学科从整体角度,系统地研究动态变化的蛋白质组成分构成及其活动规律,为探索该病机制开辟了新途径。本文旨在综述蛋白质组学概念和主要研究技术,以及脑缺血个体体液、脑缺血个体脑组织、体外模拟缺血的细胞模型三方面的脑缺血性疾病蛋白质组学研究现状,为进一步开展该病蛋白质水平研究奠定基础。     

全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回核酸的影响

目的：观察全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回核酸的影响。方法：采用4－血管阻断（4－VO）方法建立大鼠急性全脑缺血模型,用吖啶橙染色法进行全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回的核酸保护作用的研究。结果：与正常对照组比较,全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回核酸吖啶橙染色后的荧光强度明显减弱。结论：缺血再灌注可导致大鼠海马及齿状回核酸损伤。     

VitC对大鼠全脑缺血再灌注脑组织c-jun蛋白磷酸化的影响

目的研究维生素C（VitC）对脑缺血再灌注损伤保护作用及其机制。方法制备大鼠全脑缺血再灌注模型,应用TUNEL方法检测缺血海马细胞凋亡,应用免疫印迹法观察VitC对c-jun蛋白磷酸化的影响。结果 VitC（20mg/100g）能显著抑制大脑海马区细胞的凋亡,而且降低c-jun的磷酸化水平。结论 VitC抑制c-jun蛋白激活而延缓缺血海马神经元的凋亡。     

七叶皂苷钠对大鼠局灶性脑缺血损伤炎症反应的作用

目的：观察七叶皂苷钠对大鼠脑缺血再灌注损伤局部炎症反应的影响。方法：线栓法阻塞大鼠左侧大脑中动脉，建立缺血再灌注模型，经视交叉的冠状脑组织块行TTC染色测梗死面积，并进行髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO)、细胞间黏附分子－1（inter-cellular adhesion molecule-1,ICAM-1)免疫组化染色。结果：再灌注即刻腹腔内注射七叶皂苷钠的治疗组较对照组神经功能缺损程度显著减轻（P＜0.05)，梗死面积明显缩小（P＜0.05)，MPO阳性细胞数明显减少（P＜0.05)，ICAM-1免疫阳性血管数无显著变化（P＞0.05)。结论：七叶皂苷钠对局灶性脑缺血损伤的保护作用可能与抑制局部炎性渗出有一定的关系。     

西维来司钠对犬缺血再灌注损伤心肌线粒体的保护作用

的 探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)抑制剂西维来司钠对体外循环(CPB)中犬缺血再灌注损伤心肌线粒体功能的保护作用。方法 12只犬随机分为对照组(C组,n=6)和西维来司钠组(S组,n=6),建立CPB心肌缺血再灌注损伤模型。S组于CPB前静脉注射西维来司钠(40 mg/kg),C组静脉注射等量生理盐水。分别于CPB前、阻断主动脉60 min和开放主动脉60 min时,测定血浆NE、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度以及心肌线粒体三磷酸腺苷(ATP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)水平、线粒体肿胀度(MSD)和线粒体含量。于CPB前和开放主动脉30、60 min时测定血流动力学指标。结果 S组在阻断主动脉60 min和开放主动脉60 min时ATP、SOD、GSH-Px、T-AOC、MSD和线粒体含量均高于C组(P＜0.01),而NE、IL-1β、TNF-α、MDA和MPO均低于C组(P＜0.01)。与CPB前相比,开放循环后C组CO、CI和SV均下降(P＜0.01);S组在开放30 min时CO、CI和SV均降低(P＜0.05),在开放60 min时CO、CI和SV均恢复至CPB前水平。开放循环期间S组CO、CI和SV均高于同期C组(P＜0.01)。结论 西维来司钠可明显提高犬缺血再灌注损伤心肌线粒体抗氧化能力,改善心肌能量代谢。     

藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌流后神经元损伤的保护作用

目的　探讨大鼠脑缺血再灌流后神经元损伤的机制以及藻蓝蛋白对神经元的保护作用。方法　用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌流模型 (MCAO) ,分别对假手术组、模型对照组、藻蓝蛋白组进行神经功能缺失评分 ,用TTC染色法测量脑梗死体积 ,用干湿重法计算脑的含水量 ,应用原位末端标记 (TUNEL)观察脑缺血再灌流不同时间点神经元凋亡的变化。结果　 (1)在大鼠脑缺血再灌流后 2小时应用藻蓝蛋白 ,能够明显改善神经功能缺失症状 ,脑缺血再灌流后 2 4小时 ,藻蓝蛋白组的Bederson神经功能评分与模型对照组间差别有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,且这种差异一直持续到脑缺血再灌流后 4 8小时。藻蓝蛋白还能够缩小脑梗死的体积 ,脑缺血再灌流后 4 8小时 ,藻蓝蛋白组的脑梗死体积与模型对照组间差别有显著性意义 (P <0 0 5 )。藻蓝蛋白还能够减轻脑水肿 ,使脑组织的含水量明显减少。 (2 )模型对照组 ,脑缺血再灌流后凋亡神经元主要分布于缺血周围区 ,随着再灌流时间的延长 ,凋亡细胞数逐渐增加 ,至 2 4小时达高峰 ,2天开始下降 ,14天时与假手术组间差别仍有显著性意义 (P <0 0 5 )。藻蓝蛋白组凋亡细胞的数量相对较少 ,其变化规律与模型对照组相似 ,同一时间点相比较 ,藻蓝蛋白组与模型对照组间差别有显著性意义     

大鼠脑缺血/再灌注层粘连蛋白表达的实验研究

目的探讨层粘连蛋白(Laminin,LN)在大鼠脑缺血再灌注中的作用.方法制备大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,分为假手术组与缺血再灌注组;缺血2h后依照再灌注时间点的不同分为2h、6h、12h、24h、3d及7d共6组.各时相点取材,免疫组化观察脑组织LN的表达变化,并使用多媒体彩色病理图像分析系统进行定量分析.结果 LN的表达于再灌注2h开始降低,24h时达最低,第3日时开始回升.结论 LN可能参与了缺血再灌注血管源性脑水肿的形成与发展,并且可能参与了再灌注损伤后新生血管的生成、血管重塑及侧支循环的建立.     

针刺对缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的保护作用及机制

Objective To investigate the protective effect and mechanisms of acupuncture on the mem-brane potential in mitochondria of the brain cells injury induced by ischemia and reperfusion. Method The mid-dle cerebral artery occlusion/repeffusion (MCAO/R) rat model was established by the modified Longa occlusion method. The Baihui and Shuigou Point in Du meridian was acupunctured electrically 30 min. After reperfusion 24 h and 48 h, mitochondrial membrane potential, apoptosis and mitochondria ultrastrocture of brain cells were detected by the method of Rhodamin123 fluorescence staining,TUNEL in situ labeling and electron microscopy respectively after repeffusion 24 h and 48 h. Results The fluorescence intensity of Rhodamin123 was 961.27±34.22 and 1231.23±121.54 after focal cerebral ischemic reperfusion 24 h and 48 h respectively,this result was increased to compare with sham-operated group. The fluorescence intensity of Rhodamin 123 in group of using the intervention of acupuncture was 808.44±56.23 and 954.25±35.11 after operation 24 h and 48 h respectively ,this values de-creased significantly to compare with the group of ischemic reperfusion. The amount of apoptosis cells after cerebral ischemia reperfusion 24 h and 48 h were more than the sham group. The amount of apoptosis cells after acupuncture was less than the cerebral ischemic reperfusion group. The mitochondrial membrane shown intumesee,disaggrega-tion, endocrista collapsing and toxic granulation increased after ischemie reperfusion and this non-specificity change of mitochondrion alleviated by using acupuncture. Conclusion Acupuncture stabilized the permeability of mitochon-drial membrane, reduced the dissipation of mitochondrial transmembrane potential, decreased the amount of apopto-sis of brain cells of ischemic reperfusion and increased the toleration of brain against the ischemic and anoxie inju-ry. Conclusion Acupuncture could stabilized the permeability of mitochondria membrane. It could decreased the dissipation of cytochondriome transmembrane potential and the amount of apoptosis of brain cells. It could increased the toleration of brain against the ischemic and anoxic injury.     

灯盏细辛对急性期大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡影响作用的研究

目的研究灯盏细辛对急性期大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响作用。方法将健康SD大鼠65只分成3组,分别为正常组（5只）、脑缺血再灌注模型组（20只）、灯盏细辛治疗组（20只）。除正常组外,模型组和治疗组设2个时间点,即3 d与7 d,每个时间点10只。利用采用改良的Zealonga法建立大鼠大脑中动脉局灶缺血,即再灌注梗死（MCAO）模型,分别于脑缺血再灌注3 d和7 d进行神经病学评分和脑组织含水量测定,用苏木精-伊红（HE）进行形态学观察,用TUNEL法检测脑组织凋亡细胞的变化。结果再灌注3 d和7 d神经病学评分和脑组织含水量测定,治疗组Bederson评分均高于模型组（P〈0.05）;治疗组大鼠脑组织含水量与模型组比较均减小（P〈0.05）。结论灯盏细辛对急性期大鼠脑出血再灌注后细胞凋亡有明显的抑制作用,对促进受损脑组织的恢复作用明显。     

Effect of Electroacupuncture on Expression of p53 Protein in Cerebral Cortex of Rats with Global Cerebral Ischemia/Reperfusion Injury

Objective: To observe the effect of electroacupuncture (EA) on expression of p53 protein in cerebral cortex of senile rats with global cerebral ischemia/reperfusion (IR) injury and to explore its mechanism. Methods: The cerebral IR injury rat model was established referring to Pulsinelli 4-vessel occlusion method. Thirty-six SD rats were randomly and evenly divided into the control group, the IR group and the IR plus EA (IR-EA) group. The animals in the control group were subjected to electrocauterization of vertebral arteries in bilateral flank orifice alone with the general carotid arteries unoccluded. To rats in the IR-EA group, immediately and 24h, 48h, 72h after cerebral IR, EA treatment on bilateral acupoint "Zusanli" (ST36) was applied once a day, lasting for 60 minutes. After the final treatment, all the rats were sacrificed and their brains were taken to examine p53 protein expression by the immunohistochemical method. Results: Cells with positive p53 immunoreactivity in the cerebral cortex of     

益肾降浊汤对脑缺血再灌注大鼠海马组织超微结构的影响

目的：观察益肾降浊汤对大鼠脑缺血再灌后海马组织超微结构的影响。方法：对大鼠进行双侧颈总动脉缺血再灌注,于术后第1、7、15d取海马电镜制样、观察。结果：模型大鼠术后1d神经细胞内线粒体肿胀、嵴断裂,空泡样变;7d神经元变性、核碎裂强皱缩;15d有胶质细胞增生。治疗组脑组织的损伤性变化明显轻于模型组。结论：益肾降浊汤可明显减轻脑缺血再灌注后的神经元损伤,对神经元有保护作用。     

针刺对缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的保护作用及机制

目的 探讨脑缺血再灌注后针刺对脑细胞线粒体跨膜电位的保护作用及保护机制.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,针刺水沟、百会二穴,通过Rhodamin123荧光染色、TUNEL原位标记及电镜观察,分别于脑缺血再灌注后24h及48h检测脑细胞线粒体跨膜电位、线粒体超微结构及脑凋亡细胞的变化.结果 脑缺血再灌注后Rhodamin123的荧光强度增强,术后24h是(961.27±34.22),48h是(1231.23±121.54),与假手术组(782.82±57.24)比较明显增高(P<0.05);针刺干预后Rhodamin123的荧光强度术后24h是(808.44±56.23),48 h是(954.25±35.11),与脑缺血再灌注组比较明显下降(P<0.05);脑缺血再灌注后24h凋亡细胞是[(26.12±2.75)个/视野],48 h凋亡细胞是[(41.24±4.73)个/视野],与假手术组[(3.56±0.92)个/视野]比较明显增加(P<0.05),针刺干预后24h[(19.88±3.32)个/视野]与48 h[(33.23±3.81)个/视野]凋亡细胞数量与脑缺血再灌注组比较明显减少(P< 0.05);脑缺血再灌注后线粒体膜肿胀、崩解,内嵴断裂,中毒颗粒增加,针刺干预后线粒体的非特异性改变明显减轻.结论 针刺能够稳定线粒体膜的通透性,减少线粒体跨膜电位的耗散,减少缺血再灌注后脑细胞凋亡,增加脑组织对缺血缺氧的耐受性.