幽门螺杆菌的耐药性分析

目的:分析幽门螺杆菌(Hp)菌株对阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑、呋喃唑酮的耐药情况,并探讨Hp对克拉霉素耐药与23S rRNA基因点突变的关系.方法:分离培养Hp,药敏纸片法进行药敏实验,按酚-氯仿法提取Hp的DNA,PCR方法扩增23S rRNA基因中的片段,用限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测克拉霉素耐药菌株的点突变.结果:Hp菌株对阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑、呋喃唑酮的耐药率分别为9.3%、18.6%、53.5%、0%;8个克拉霉素耐药的Hp菌株有7个存在23S rRNA基因的A2143G点突变,进行PCR-RFLP的29个敏感菌株均无23S rRNA的点突变.结论:Hp菌株对甲硝唑耐药率高,对克拉霉素、阿莫西林和呋喃唑酮敏感;23S rRNA基因A2143G点突变与Hp对克拉霉素的耐药相关.     

北京地区幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药情况及其耐药机制

目的：（1）确定北京地区幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp)菌株对克拉霉素的耐药情况。（2）研究幽门螺杆菌对克拉霉素耐药与23SrRNA基因点突变的关系。方法：从北京地区89例有上胃肠症状的患者取得胃活检组织,微需氧培养得到Hp,E-检验方法测定克拉霉素的最低抑菌浓度（MIC）,CTAB／NaCl方法提取敏感菌和耐药菌的DNA,用限制性片段长度多态性（PCR－RFLP）检测克拉霉素耐药菌株的点突变。结果：（1）北京地区Hp菌株对克拉霉素的耐药率是13．5％。（2）12个克拉霉素耐药的Hp菌株均存在23S rRNA基因的A2143G点突变,进行PCR－RFLP的24个敏感菌株均无23S rRNA的点突变。结论：北京地区克拉霉素耐药的Hp菌株较为常见,Hp对克拉霉素的耐药与23SrRNA基因的点突变有关。     

幽门螺杆菌对克拉霉素耐药机制的研究

目的明确幽门螺杆菌(heliobacter pylori,Hp)对克拉霉素的耐药情况进而探讨Hp对克拉霉素耐药机制。方法分离培养获得96株Hp。采用琼脂稀释法进行体外抗生素敏感试验,检测Hp对克拉霉素的最低抑菌浓度(minimalinhibitory concentration,MIC),拟定克拉霉素MIC>2μg/m L为耐药菌株。比较城市和农村的差异。挑选克拉霉素耐药Hp10株,提取细菌DNA,用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)分析探讨克拉霉素耐药机制。结果 Hp对克拉霉素的耐药率为25%,城市和农村耐药率差异无统计学意义(P>0.05)。16株克拉霉素耐药菌株23S r RNA基因功能区V PCR扩增片段,均被BsaⅠ酶切,未被BbsⅠ酶切,提示16株在2143位点有A→G突变。结论 Hp对克拉霉素的耐药率较高,且城市和农村无显著差异。大多数克拉霉素耐药Hp存在23Sr RNA基因功能区V 2143位点A→G突变。     

340株肠球菌耐药性分析及基因分型

目的调查340株肠球菌的耐药性及其基因分型,了解医院感染的流行菌株.方法从痰、尿、血液中分离出不重复粪肠球菌340株,根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验,并进行统计分析;采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术构建指纹图谱进行基因分型.结果粪肠球菌和屎肠球菌对青霉素、氨苄青霉素、万古霉素、高浓度庆大霉素的耐药率分别为18%、90%;14%、87.5%;1.3%、2.5%;51%、57.5%.300株粪肠球菌和40株屎肠球菌分别分为64个基因型和9个基因型,具有相同指纹图谱的菌株有5个组11株菌.结论肠球菌对多种抗菌药物具有较强耐药性;RAPD技术可用于肠球菌医院感染的分型研究,监测有无流行株在医院内暴发流行.     

重庆地区分离幽门螺杆菌对克拉霉素耐药性研究

目的:了解重庆地区幽门螺杆菌(Heliobacter pylori,Hp)对克拉霉素的耐药情况,探讨Hp对克拉霉素耐药的分子机制.方法:分离培养获得96株Hp.采用琼脂稀释法进行体外抗生素敏感试验,检测Hp对克拉霉素的最低抑菌浓度(Minimalinhibitory concentration,MIC),拟定克拉霉素MIC>2μg/ml为耐药菌株.比较城市和农村的差异.挑选克拉霉素耐药Hp1O株,提取细菌DNA,用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)分析探讨克拉霉素耐药机制.结果:重庆地区Hp对克拉霉素的耐药率为29.17%.城市和农村耐药率无统计学差异(P>0.05).10株克拉霉索耐药菌株23S rRNA基因功能区V PCR扩增片段,均被Bsa I酶切,未被Bbs I酶切,提示1O株在2143位点有A→G突变.结论:重庆地区Hp对克拉霉素的耐药率较高,且城市和农村无显著差异.大多数克拉霉素耐药Hp存在23SrRNA基因功能区V 2143位点A→G突变.     

意大利中部地区幽门螺杆菌的遗传变异性、抗生素敏感性及其毒力标记物分析

目的：评价幽门螺杆菌（Hp）混合感染的表现与抗生素敏感性、毒力标记物之间的关系。材料与方法：共有36例Hp感染被纳入该研究。分别从每例宿主的阳性活检标本中取出3个Hp菌落，共获得的108个Hp分离菌株。应用扩增片段长度多态性（AFIP）分析来评价Hp菌株的遗传变异性；应用琼脂稀释法检测细菌的最小（低）抑菌浓度（MIC）来测定Hp菌株对阿莫西林、克拉霉素、莫西沙星、利福布丁和替硝唑的敏感性。另外，应用聚合酶链反应（PCR）的方法来测定Hp菌株的vacA、cagA、iceA和babA2表达情况。结果：Hp的混合感染与其对抗生素的耐药性之间存在明显的相关性。特别是相对于具有特有的宿主遗传模式的Hp菌株而言，同一宿主体内具有遗传变异性的Hp菌株，更容易对克拉霉素、莫西沙星和替硝唑耐药。     

幽门螺杆菌基因分型及耐药检测寡核苷酸芯片的制备及鉴定

目的探讨应用寡核苷酸芯片简单快速检测幽门螺杆菌(HP)感染并对其致病性相关的基因型及耐药性同时进行检测的方法,并进行鉴定。方法根据Hp的致病性将其分为cagA 和cagA-两种基因型,通过检测23SrRNA基因是否发生点突变判断其对克拉霉素的耐药性。应用寡核苷酸芯片技术对临床标本的Hp进行基因分型和耐药性检测,并制备相应的寡核苷酸芯片。通过构建的野生型模板和突变模板证实制备的寡核苷酸芯片的准确性。结果制备的寡核苷酸芯片可准确地将Hp分为cagA 和cagA-两种基因型,并能够通过检测23SrRNA基因中4种常见的、与克拉霉素耐药性密切相关的点突变,判断幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性。结论应用寡核苷酸芯片可快速检测Hp感染并同时对其致病性相关的基因型及耐药性进行检测。     

2020—2022年宁夏地区幽门螺杆菌对左氧氟沙星和克拉霉素耐药率和耐药基因的调查

目的探索宁夏地区幽门螺杆菌(Hp)对左氧氟沙星和克拉霉素耐药率及耐药基因的常见突变方式, 评估其表型与基因型耐药的一致性。方法横断面研究。回顾性选取2020年2月至2022年5月宁夏地区14家医院确诊为Hp感染的患者。从Hp感染患者的胃活检标本中分离到Hp菌株, 进行表型药敏试验和耐药基因的检测, 分析宁夏地区Hp对左氧氟沙星和克拉霉素耐药率及耐药基因常见突变方式;采用符合率和Kappa系数评估表型与基因型耐药的一致性。结果共分离培养1 942株Hp, 感染者中, 男1 069例(55.0%), 女873例(45.0%), 年龄(50.0±12.5)岁(15～86岁)。宁夏地区Hp对左氧氟沙星和克拉霉素耐药率分别为42.1%(818/1 942)和40.1%(779/1 942), 双重耐药率为22.8%(443/1 942)。其中来自女性患者的Hp菌株对左氧氟沙星和克拉霉素耐药率均较男性高(左氧氟沙星:50.4%(440/873)比35.4%(378/1 069);克拉霉素:44.4%(388/873)比36.6%(391/1 069), 均P<0.001)。与左氧氟沙星耐药有...     

幽门螺杆菌耐药初探

目的:观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对克拉霉素、呋喃唑酮的耐药情况,初步了解克拉霉素耐药菌株为原发耐药还是继发耐药,初步探讨抗H.pylori感染失败的原因是由于原有菌株未消灭还是由于感染了新的菌株.方法:从消化性溃疡及糜烂性胃炎患者的胃黏膜中分离培养出H.pylori共21株,利用纸片法进行药物敏感试验,观察耐药情况.应用随机扩增多态性DNA分析方法,进行菌株指纹图谱分析,确定抗H.pylori治疗前后菌株的同一性.结果:(1)21株H.pylori中有8株对克拉霉素耐药,1株对呋喃唑酮耐药,耐药率分别为38.1%和4.8%.(2)3对治疗前后配对菌株中,1例为原发性耐药(持续感染),1例为继发性耐药,另有1例为新菌株感染.结论:H.pylori对克拉霉素耐药率比较高,而对呋喃唑酮高度敏感.抗H.pylori感染失败的原因与菌株对克拉霉素原发性及继发性耐药有关.     

福建省宁德市青山岛居民幽门螺杆菌感染率及细菌耐药率调查

目的 调查福建省宁德市青山岛居民幽门螺杆菌(Hp)感染率,了解该地区Hp菌株耐药率并与福建省立医院门诊病人菌株耐药率比较.方法 用13C尿素呼气试验检测有无Hp感染.对感染者行胃镜检查,胃黏膜活检培养Hp菌株.用E试验法和琼脂稀释法检测阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑的耐药性.结果 该地区的Hp感染率为52.5%,存在家庭聚集现象.感染率随着年龄增长而增加.其Hp菌株甲硝唑耐药率为11.4%,克拉霉素耐药率为5.7%,无阿莫西林耐药菌株.福建省立医院门诊病人Hp菌株甲硝唑耐药率66.7%,克拉霉素耐药率为26%,无阿莫西林耐药菌株.结论 由于无抗生素滥用,宁德市青山岛Hp对克拉霉素、甲硝唑耐药率明显低于福建省立医院门诊福州市区病人.     

DNA-based subtypes and antimicrobial susceptibility profiles of Haemophilus influenzae and Haemophilus parainfluenzae isolated from different tonsillar sites of children undergoing tonsillectomy and/or adenoidectomy

We did a comparative analysis between DNA-based subtypes and antimicrobial susceptibility profiles on Haemophilus influenzae and Haemophilus parainfluenzae, isolated from multiple tonsillar sites per individual from patients with chronic recurrent tonsillitis and/or tonsillar idiopathic hypertrophy and undergoing tonsillectomy and/or adenoidectomy. A total of eighty-eight Haemophilus isolates were obtained aseptically from the surface and core of tonsils and/or adenoids of 32 out of 60 patients and identified at the species level by the X and V factors and the API NH Kit. The H. influenzae and H. parainfluenzae isolates as well as ATCC strains were tested for antimicrobial susceptibility using a panel of antimicrobial agents. Random amplified polymorphic DNA (RAPD) was done on extracted DNA from all Haemophilus isolates and ATCC strains, using one 10 mer and one 18 mer primers to subtype the two species. Antimicrobial susceptibility testing data have shown a variation in generated susceptibility patterns to tested antimicrobial agents among H. influenzae and H. parainfluenzae isolates. This variation was demonstrated too among isolates obtained from different tonsillar sites (core and surface) in a single patient. RAPD analysis identified 58/88 (66%) different RAPD patterns. Variations in RAPD patterns among H. influenzae and H. parainfluenzae were also observed in isolates obtained from different tonsillar sites of the same individual. A correlation between RAPD patterns and antimicrobial susceptibility data, have shown: 1) the predominance of one strain (RAPD pattern) of either Haemophilus species among isolated organisms per patient, and exhibiting different antimicrobial susceptibility profiles or 2) the existence of multiple strains (RAPD patterns) of either Haemophilis species per patient, and showing either a single or multiple antimicrobial susceptibility profile(s). These observations question the validity of swab cultures obtained from a single tonsillar site per patient, for detection, identification and determination of antimicrobial profiles of the etiology of tonsillitis, since swab specimens taken from only one site may or may not reflect the etiology of infection.     

白色念珠菌的耐药性和随机扩增DNA多态性分型研究

采用Etest药敏试验方法检测 30株临床分离白色念珠菌对 5种抗真菌药物的敏感性 ,并用随机扩增DNA多态性 (RAPD)分型方法对这些菌株进行基因分型。结果发现有两株对氟康唑耐药 ,且它们的RAPD带型有着高度相似性 ,提示RAPD带型可能与耐氟康唑基因有关。     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学及耐药机制的研究

目的 分析我院碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌分子流行病学及耐药机制.方法 鲍曼不动杆菌源自2008年1-12月我院临床分离株,共51株.采用K-B法(CLSI 2008年标准)筛选对碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌临床分离株,采用随机引物多态性DNA(randomly amplified polymorphism DNA,R...     

万古霉素耐药肠球菌的筛选及基因型检测

目的 了解我院耐万古霉素肠球菌的耐药表型、基因型及流行情况.方法 药敏试验采用K-B纸片扩散法,Etest法检测万古霉素耐药肠球菌对万古霉素的最低抑菌浓度（MIC）.聚合酶链反应（PCR）检测vanA、vanB、vanC1和vanC2-3基因型,PFGE分析万古霉素耐药肠球菌同源性.结果 219株肠球菌中检出3株万古霉素耐药屎肠球菌,检出率为1.3％;该菌株对万古霉素和替考拉宁均耐药,但对利奈唑胺敏感;基因型检测显示3株屎肠球菌均为vanA型,PFGE结果显示该3株万古霉素耐药肠球菌不属于同一型别.结论 我院住院患者中已出现万古霉素耐药菌株,医院应加强感染控制措施,以阻止这些VRE菌株在院内的传播和流行.     

白色念珠菌的耐药性和随机扩增DNA多态性分型研究

采用Etest药敏试验方法检测30株临床分离白色念珠菌对5种抗真菌药物的敏感性,并用随机扩增DNA多态性(RAPD)分型方法对这些菌株进行基因分型。结果发现有两株对氟康唑耐药,且它们的RAPD带型有着高度相似性,提示RAPD带型可能与耐氟康唑基因有关。     

Clinical isolates of Mycobacterium abscessus in Guangzhou area most possibly from the environmental infection showed variable susceptibility

Background Mycobacterium abscessus (M.abscessus) can cause a variety of human infections,involving the lung,skin and soft tissues,and is generally believed to be acquired from environmental sources.The aim of this study was to investigate the molecular diversity and antibiotic susceptibility of M.abscessus isolates as the basis for strategies to improve control and management of infection.Methods Seventy M.abscessus isolates from patients attending the Guangzhou Thoracic Hospital were identified from 2003 to 2005 by biochemical tests,gas chromatography,polymerase chain reaction (PCR)-restriction analysis (PRA) of heat shock protein gene hsp65,and sequencing of the quinolone resistance determining regions (QRDRs) of gyrA.Susceptibilities to six antibiotics were determined by micro-broth dilution.Isolates were genotyped using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis.Results Most isolates (63/70; 90％) were susceptible to amikacin but rates of susceptibility to other antibiotics varied from moderate,clarithromycin (60％) and imipenem (43％),to low for ciprofloxacin and ofloxacin (3％),and 87％ of isolates had intermediate susceptibility to cefoxitin.RAPD analysis showed that the 70 clinical isolates displayed 69 unique RAPD patterns.Conclusions The high genetic diversity of isolates suggests that they are not transmitted from person to person but,presumably,are acquired independently from environmental sources.M.abscessus isolates displayed variable levels of susceptibility to all antibiotics tested,other than amikacin,indicating a need for routine susceptibility testing to guide treatment.     

申克孢子丝菌的随机扩增DNA指纹分型

目的：对申克孢子丝菌进行基因分型研究,探索申克孢子丝菌的基因分型标准。方法：用光镜对2株标准株,4株环境分离株和24株临床分离菌株进行形态特征观察,再用随机扩增DNA指纹方法(RAPD)对DNA进行PCR扩增,根据扩增产物的电泳带型来分析DNA多态性。结果：30株菌株镜下可见2种形态结构;30株申克孢子丝菌的DNA指纹带型不同;多引物聚类分析表明,3条引物可将30株不同地区来源申克孢子丝菌分作11个型。结论：(1)在我国申克孢子丝菌中存在2种不同的形态结构。(2)申克孢子丝菌中存在不同的基因型。(3)RAPD法用于申克孢子丝菌菌株鉴定是一种快速、方便、可行的方法。     

重症监护病房铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA研究

目的建立随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法监测重症监护病房(ICU)铜绿假单胞菌医院感染。方法收集2005年1月~6月从各科ICU内分离出的21株铜绿假单胞菌,提取DNA后进行RAPD分型,同时进行抗生素敏感性试验。结果全部菌株均能产生指纹图谱,分型率100%。21株铜绿假单胞菌共分为14型,其中9株6型分布于脑外科,3株同型分布于神经内科,4株4型分布于呼吸科,5株3型分布于普外科。抗生素敏感性试验表明21株铜绿假单胞菌均为多重耐药菌株,对哌拉西林、头孢菌素类、喹诺酮类及阿米卡星等耐药,仅对亚胺培南/西司他丁、头孢哌酮/舒巴坦等敏感。结论ICU内存在铜绿假单胞菌感染局部流行,RAPD分型技术分型率高、简便快速。     

北京市复治结核病患者非北京基因型菌株谱系及耐药分析

目的 了解北京市复治结核病患者非北京基因型菌株谱系及耐药情况,为复治非北京基因型结核病患者有效防治提供科学依据。方法 采用RD105基因缺失法对复治患者所分离的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis, MTB）进行检测,筛查出非北京基因型菌株,使用可变数目串联重复序列基因分型实验分析非北京基因型菌株的遗传特征,再使用比例法药敏实验及全基因组测序分析其耐药情况。结果 134例复治结核病患者所分离的MTB中,北京基因型为 125例（93.3%）,非北京基因型为9例（6.7%）。9例非北京基因型MTB呈现9种不同的基因型,均不成簇,为独特型。9例非北京基因型MTB均为谱系4,其中,亚谱系L4.4有4株,亚谱系L4.5有5株。耐药预测结果显示,9例非北京基因型中,6例为全敏感菌株（66.7%）,1例单耐异烟肼,耐药突变位点为ahpC_c.-48G>A,1例同时耐异烟肼与乙硫异烟胺, 耐药突变位点为fabG1_c.-15C>T,1例单耐氟喹诺酮,耐药突变位点为gyrA_p.Asp94Asn与gyrA_p.Ala90Val。全基因组测序预测耐药结果与比例法药敏结果完全一致。结论 复治结核病患者非北京基因型菌株主要为谱系4,呈明显的多态性。耐药突变位点均为常见突变位点。