酶法直接测定血清总胆固醇的方法探讨

我们采用酶偶联比色法测定血清总胆固醇,试剂空白≤0.080,线性范围0mmol/L～10.40mmol/L准确度与质控血清靶值相对偏差≤10%,精密度n=20、批内变异系数CV≤3%,批间极差CV≤5%,试剂为浙江东瓯生物工程有限公司。常规测定中已广泛应用酶法,酶法具有特异性好,精密度和灵敏度都能很好的满足临床实验室的要求,既可手工操作,也可自动分析。目前已成为测定总胆固醇的主要方法[1]。1原理血清中总胆固醇(totalcholesterol,TC)包括游离胆固醇(freecholesterol,FC)和胆固醇酯(cholesterolester,CE)两部分。血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离…     

化学修饰酶法测定高密度脂蛋白胆固醇

①目的对化学修饰酶法测定血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)进行方法学评价。②方法通过重复性试验、回收实验、线性实验对该方法进行评价。③结果该方法线性范围为0.25~2.50mmol/L,精密度批内CV1.7%,批间CV为2.08%;平均回收率95.9%,参考范围为(1.01~1.56)mmol/L;心脑血管病组与正常对照组相比,差异有显著性(P<0.01)。④结论化学修饰酶法准确性及重复性均符合要求,方便快速,适合常规开展。     

血清C反应蛋白测定的方法学比较

目的:对全自动干化学法测定血清C反应蛋白(CRP)进行应用评价。方法:在VITROS-250型干式生化分析仪上测定血清CRP,并同时在日立7600型全自动生化分析仪上检测。结果:血清CRP的检测限为7.0～110.0 mg/L;高、中、低浓度的批内CV分别为1.79%、1.90%和2.46%,批间CV分别为1.95%、2.53%和3.62%;回收率平均为98.2%;与日立7600型全自动生化分析仪相关系数R2=0.989 5,相关方程为Y∧=0.970 2X+0.431 9;血红蛋白2.0 g/L,胆红素浓度356μmol/L,三酰甘油浓度7.8 mmol/L,对全自动干化学法测定基本无干扰。结论:干化学法测定CRP快速、准确、可靠。     

酶法检测血清总二氧化碳的实验评价及临床应用

目的：探讨应用酶法检测血清总二氧化碳及临床应用。方法：用日立7600—10全自动生化分析仪酶法测定血清总二氧化碳,通过线性实验、回收实验、干扰实验、重复性实验和对比实验进行方法评价。结果：该法线性范围为4—50mmol／L,批内CV为2．96％,批间CV为3．85％,雏生素C 300mg／L、脂血（TG）15mmol／L、胆红素600μmol／L、血红素5g/L对测定均无干扰,平均回收率为100．8％,本法与间接离子选择电极法对200份血浆标本总二氧化碳的测定结果作相关性分析,Y=0．995X＋0．456,γ=0．986。结论：酶法检测血清（浆）总二氧化碳具有较高的灵敏性和特异性。快速自动化分析,适合临床需要,是判断体内酸碱平衡的重要指标。     

干化学法测定血清淀粉酶的应用与评价

目的:评价全自动干化学法测定血清淀粉酶的效果。方法:在VITROS-250干式生化分析仪上测定血清淀粉酶,与日立7170全自动生化分析仪比较。结果:血清淀粉酶的检测限为30～1200U/L;高、中、低浓度的批内CV分别为3.5%、4.1%和4.2%,,批间CV分别为3.8%、4.8%和4.9%;回收率为96.8%～103.1%;与日立7170全自动生化分析仪(X)相关系数r=0.991,相关方程Y=1.016X+19.7;血红蛋白浓度2.8g/L以下,胆红素浓度378μmol/L以下,甘油三酯浓度7.2mmol/L以下,对该法测定基本无干扰。结论:该法测定血清淀粉酶简便、快速、准确可靠,适用于急诊检测。     

血清钾、钠酶法测定在日立7060全自动生化分析仪上的应用

目的探讨酶法在全自动生化仪上分析钾、钠的实验参数特点。方法应用宝灵曼钾、钠酶法测定试剂,并与电极法进行实验比较。结果酶法与电极法测得钾、钠的相关系数分别为0.9927、0.9697,两种方法所得结果之间均无显著性差异。酶法测定钾、钠的线性范围分别为(1.25-10.0)mmol/L与(45-175)mmol/L。其批内变异系数钾1.22%-1.96%、钠1.44%-1.50%;批间变异系数钾1.51%-2.35%、钠1.75%-1.79%。钾的平均回收率为99.1%,钠的平均回收率为101.5%。黄疸、脂血对酶法测定结果无影响。结论酶法在全自动生化分析仪上操作简便、快速,各种实验参数符合要求,是一种很值得推广的方法。     

脲酶电导电极法测定血清尿素方法学探讨

目的评价和证实脲酶电导电极法测定尿素的性能。方法采用电极法测定血清尿素 ,对其精密度、准确度和特异性进行了评价 ,并与脲酶 -谷氨酸脱氢酶偶联的酶速率法进行了比较。结果脲酶电极法 (Y)与酶法 (X)测定血清尿素有良好的相关性 :Y =1.0 2 5X - 0 .32 ,r =0 .994。尿素高、中、低值血清标本的批内和批间CV值分别为 1 2 2 %、1 5 5 %、1 78%和 2 36 %、2 6 8%、2 99% ,平均回收率为 10 1 3% ,线性范围达 5 3 3mmol/L。血红蛋白 <5g/L ,胆红素 <36 3umol/L ,TG <8.3mmol/L不干扰测定。结论脲酶电极法测定血清尿素简便、快速、准确 ,适合临床常规应用     

Dimension AR全自动生化分析仪CO_2电极测血清总CO_2的应用及评价

目的:探讨Dimension AR全自动生化分析仪CO2电极测血清总CO2(TCO2)的应用及评价。方法:用Dimension AR全自动生化分析仪CO2电极检测血清TCO2。结果:用Dimension AR全自动生化分析仪CO2电极检测血清TCO2线性范围4.0mmol/L~48.0mmol/L;平均回收率99.6%;批内CV:低TCO2含量标本为1.61%,高TCO2含量标本为2.42%;批间CV:低值标本为3.38%,高值标本4.01%;与CO2酶法比较,r=0.9997,t=1.262,P>0.05;当TBIL<448.0umol/L、TG<23.8umol/L、HB<5g/L时,对测定结果无影响。结论:用Dimension AR全自动生化分析仪CO2电极检测血清TCO2准确、快速、稳定,具有很好的临床应用价值。     

酶法测定血清β-羟丁酸的方法学评价及其临床应用

目的应用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准化评价方案对酶法测定血清β-羟丁酸进行初步评价,并探讨β-羟丁酸对糖尿病酮症酸中毒诊断及治疗监测的意义。方法分析酶法测定血清β-羟丁酸的精密度、准确性、线性范围和干扰因素。测定60例正常人、50例糖尿病DM患者和34例糖尿病酮症酸中毒DKA患者血清β-羟丁酸浓度。结果酶法测定β-羟丁酸具有良好的精密度(批内、日间及总变异系数均小于5%)和准确度(回收率为98.5%～104.1%),检测线性范围为0～4.00mmol/L,基本不受溶血、黄疸和脂血干扰。DKA患者血清β-羟丁酸明显升高(P<0.01),血清β-羟丁酸测定阳性率高于尿酮体测定(P<0.05)。结论酶法测定血清β-羟丁酸快速、准确、精密度高,可用于DKA的早期特异、快速诊断及治疗监测。     

酶转换法测定同型半胱氨酸的方法学评价

目的对酶转换法测定同型半胱氨酸(Hcy)进行方法学评价,以确定其分析性能是否符合临床实验室使用的要求。方法根据NCCLS文件和已建立的方法对酶转换法测定Hcy的精密度、线性、方法学比较、干扰试验、回收率、试剂稳定性等进行评价和比较。结果酶转换法测定Hcy的精密度(批内、批间、日间、总CV均<5.0%)较高;Hcy浓度在0～40μmol/L内,呈线性关系;酶转换法和循环酶法测定Hcy结果两者相关性良好(r2=0.924,n=60),测定结果的可靠性是相同的(t=0.08,P>0.05);血红蛋白(Hb)<2g/L、甘油三酯(TG)<72mmol/L,总胆红素(Tbil)<340μmol/L,维生素C(VitC)<10.0g/L时,酶转换法测定Hcy干扰相对偏差<10.0%;回收率为101.25%;试剂稳定性较好。结论酶转换法测定Hcy具有较高的精密度、较宽的线性、较强的抗干扰能力,结果准确可靠,适合在临床实验室使用。     

血清二氧化碳试剂对血糖测定的干扰及排除

目的：观察二氧化碳试剂对血糖测定的干扰及排除。方法：将新鲜混合血清作为样品,做以下试验：（1）单独测定血糖60次,测定结果作为对照组;（2）二氧化碳与血糖同时测定60次,血糖结果作为测定组1;（3）二氧化碳与血糖两个项目之间加入项目TP、ALB、TG、TC、BUN、CRE测定60次,血糖结果作为测定组2;（4）测定二氧化碳后,加入试剂针特殊冲洗功能,测定血糖60次,血糖结果作为测定组3。三个测定组分别与对照组进行结果比较,行t检验。结果：对照组与三个测定组的血糖结果（mmol／L）分别是4．75±0．03,8．62±0．25,4．79±0．06,4．78±0．07,测定组1与对照组结果比较,测定组1血糖结果明显高于对照组,P〈0．01,有显著性差异;测定组2和测定组3分别与对照组结果比较,P〉0．05,均无显著性差异。将二氧化碳试剂作为标本测定血糖60次,血糖结果为50．38±0．28（mmol／L）。结论：二氧化碳试剂对血糖测定有干扰,通过试剂针特殊冲洗功能和项目间隔可予以排除。     

血糖血脂快速检测的干试剂研究

目的:探讨干试剂方法检测血糖血脂的可行性。方法:对血糖血脂检测的干试剂进行了研究,对试剂和测定方法进行改良和改进,使检测方法能适应干试剂法检测的需要;将试剂工作液制成干试剂,对干燥的方法进行比较。结果:以2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(TBHBA)替代酚试剂,添加10g/L白蛋白冻干葡萄糖(氧化酶法)试剂,增加稀释倍数,提高了反应速度,灵敏度提高了4.6倍,增加了线性范围,降低了检测限,优化的方法测定结果与全自动生化分析仪结果具有较好的一致性。结论:初步建立了葡萄糖的干试剂微量测定方法,为多指标同步检测奠定了基础。     

微板干试剂测定血糖方法学的建立及其在体检筛查中的应用

目的研制一种通过微板干试剂葡萄糖氧化酶法快速检测血糖的新方法,并小批量在普查糖尿病中应用。方法将改良葡萄糖试剂冻干于96孔板中并封存。检测时微板中每孔由排枪加入200∶1比例去离子水和待检标本混匀的预处理液,复溶冻干试剂并进行反应,水浴10min,用酶标仪检测并计算结果。结果该法在1～24mmol/L范围内线性良好,其准确性在允许偏差±5%内,变异系数(CV)<5%,干扰实验均能满足检测的要求。对120例体检者应用本法进行血糖测定,其结果与日立7060全自动生化分析仪测定结果具有较好的相关性(r=0.987 5)。结论微板干试剂葡萄糖氧化酶法快速检测血糖结果准确可靠,检测过程简便,适合基层医疗机构快速检测及批量普查。     

摇瓶发酵过程中OUR,CER和RQ的在线检测

用一种特制摇瓶可在线检测摇瓶发酵过程中Ｎ２，Ｏ２，ＣＯ２的浓度变化，继而能进一步得出过程中摄氧率，二氧化碳释放率和呼吸商随发酵时间的变化，并以酵母菌为对象菌种进行了实验研究。结果证明该实验装置和实验方法是可靠的。     

固体一元包装稳定性二氧化氯消毒剂的研究

为解决二氧化氯在生产、运输、使用不便利因素,选用不同的酸性激发剂,加上特殊的处理工艺,研制出一种固体一元包装稳定性二氧化氯消毒剂。该消毒剂在干燥状态下可稳定存在,溶于水产生二氧化氯。当消毒剂浓度为３．３ｍｇ·Ｌ＾－１作用５ｍｉｎ时,对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭率为１００％;消毒剂浓度为４３４ｍｇ·Ｌ＾－１时作用３０ｍｉｎ呆１００％破坏乙肝表面抗原。故该种二氧化氯可作为灭菌剂,其溶液在密闭容器中可保     

Detection of Para-Aminosalicylic Acid (PAS) in Urine: A Simple Spot Test

A simple spot test for the detection of PAS in urine has been described and its sensitivity compared with that of other methods such as the Ehrlich's reagent and the ferric chloride tests. In patients receiving 4 g. PAS the three methods gave similar results in urine specimens collected within eight hours. The new test is an inexpensive micro method which can easily be performed on a large scale. There is no reaction with sulfonamide or salicylic acid derivatives.     

酶标仪干试剂氰化高铁法测定血红蛋白的探讨

目的 建立一种在酶标仪上用干试剂测定血液血红蛋白的检测方法.方法 将氰化高铁血红蛋白法的试剂干燥在酶标板的微孔内,封存备用.测定时将水溶血后的样品加入微孔,混匀,10min后测定OD值.结果 血红蛋白在25～175g/L内有良好的线性关系(r=0.998 3),结果与全自动血液分析仪SE-9000具有较好的一致性,显色后的吸光度值2h内无明显变化.结论 酶标仪干试剂法测定血红蛋白结果准确可靠,测定过程简便,是一种快速测定血红蛋白的好方法.     

SPDP制备酶结合物及其应用于ELISA检测HBV血清学标志的初步研究

在ELISA中,以异型双功能试剂—N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶二硫基)丙酸酯(SPDP)作为交联剂制备酶结合物(S-ELISA),比同型双功能试剂制备的结合物活性要高。我们以SPDP制备的抗-HBS-HRP与抗-HBe-HRP结合物,较过碘酸钠法制备的同种结合物敏感性高,实验证明其特异性,可重复满意。     

干试剂在血糖血脂微量快速检测上的应用研究

目的探讨干试剂方法检测血糖血脂的可行性。方法通过对试剂和测定方法进行改良和改进,使检测方法能适应干试剂法检测的需要;将试剂工作液制成干试剂,对干燥的方法进行比较。结果以TBHBA替代酚试剂,添加10g/L清蛋白冻干葡萄糖（氧化酶法）试剂,增加稀释倍数,提高了反应速度,灵敏度提高了4.6倍,增加了线性范围,降低了检测限,优化的方法测定结果与全自动生化分析仪结果具有较好的一致性。结论初步建立了葡萄糖的干试剂微量测定方法,为多指标同步检测奠定了基础。