黄芪糖蛋白对T细胞增殖与活化的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对大鼠T细胞增殖与活化的影响。方法:无菌制备大鼠脾脏悬浮细胞,分离淋巴细胞,接种后加入黄芪糖蛋白共培养,采用MTT法和流式细胞术分别检测T细胞增殖情况和T细胞亚群分布。结果:MTT实验结果显示黄芪糖蛋白显著抑制了T细胞的增殖(P0.05或P0.01)。流式检测结果显示黄芪糖蛋白显著降低了T细胞中CD3+CD28+、CD3+CD278+细胞的比例(P0.01)。结论:黄芪糖蛋白可有效抑制T细胞的增殖与活化,且主要通过抑制CD278在T细胞表面表达来阻止T细胞的活化。     

黄芪糖蛋白对小鼠脾淋巴细胞的体外作用

 目的 研究黄芪糖蛋白（Huangqi glycoprotein,HQGP）对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、细胞周期、分泌白介素2（IL-2）的影响。方法 MTT法测定不同浓度黄芪糖蛋白对ConA、LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应以及对混合淋巴反应（MLR）的影响;流式细胞法测定黄芪糖蛋白对细胞周期、脾细胞分泌IL-2的影响。结果 黄芪糖蛋白明显抑制ConA、LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖,抑制混合淋巴反应;细胞周期分析表明,黄芪糖蛋白抑制T淋巴细胞增殖于G₀G₁期;抑制培养的脾细胞分泌IL-2。结论 黄芪糖蛋白在体外具有抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的作用,其机制可能与抑制IL-2的分泌有关。     

黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠脾细胞增殖与凋亡的影响研究

目的：探讨黄芪糖蛋白（HuangQi Glycoprotein,HQGP）对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）大鼠脾细胞增殖与凋亡的影响。方法：建立大鼠AA模型,1周后无菌取脾,制备细胞悬液,按浓度梯度给药处理,MTT法检测HQGP对体外培养的AA大鼠脾细胞增殖的影响。大鼠分组建模,1周后按浓度梯度给药治疗,3周后取各组大鼠脾组织,HE法观察各组大鼠脾组织形态学变化,TUNEL法检测大鼠脾组织原位细胞凋亡水平,免疫组织化学法检测大鼠脾组织中凋亡蛋白Bax、Bcl-2与核内转录因子Foxp3的表达水平。结果：MTT检测结果显示HQGP可显著抑制AA大鼠脾T细胞的增殖（P〈0.01）。TUNEL检测结果显示HQGP显著提高AA大鼠脾组织的凋亡细胞比例,免疫组化显示HQGP可回调脾组织中Bax、Bcl-2的蛋白表达水平,上调转录因子Foxp3的表达水平。结论：HQGP主要通过抑制脾T淋巴细胞的增殖来抑制机体的细胞免疫功能,同时通过调节Bax、Bcl-2的表达水平来诱导AA大鼠脾细胞凋亡,上调Foxp3的表达以提高机体的免疫耐受水平。     

雷公藤甲素对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究雷公藤甲素(TRD)对小鼠T淋巴细胞活化标志CD69、CD25及细胞因子IL-2及IFN-γmRNA表达的影响,为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据.方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的雷公藤甲素预先孵育1 h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆体双染技术,流式细胞仪检测TRD对小鼠T细胞CD69、CD25表达的影响;采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测TRD对细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA的表达的影响.结果:TRD能抑制T细胞早期活化标志CD69和CD25,同时TRD也能抑制IL-2及IFN-γmRNA的表达.结论:TRD对T细胞早期活化分子及细胞因子表达的抑制作用可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一.     

黄芪甲苷联合树突状细胞瘤苗抗胃癌免疫的体外实验研究

目的 通过体外实验观察中药单体黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AⅣ)联合树突状细胞(DC)瘤苗对机体免疫功能的调节作用.方法 外周血单个核细胞体外诱导、培养,负载胃痛SGC7901冻融抗原.制备DC瘤苗,分别观察AⅣ联合DC瘤苗、DC瘤苗、AⅣ淋巴细胞增殖情况及其激活的效应细胞在体外杀伤胃癌细胞的活性.结果 ...     

黄芪糖蛋白的分离纯化及其理化性质、组成成分分析

目的： 提取分离、纯化具有免疫抑制活性的黄芪糖蛋白（AmGP-2）并考察其理化性质、组成成分。 方法： 黄芪经水浸提,盐析分离,sevage试剂脱游离蛋白等方法提取糖蛋白,采用阴离子色谱柱和凝胶色谱柱进行纯化。通过苯酚-硫酸法、BCA、Molish试验、茚三酮反应、气相色谱分析、氨基酸分析、SDS-PAGE、UV、IR、β-消去反应等分析黄芪糖蛋白的理化性质及组成成分。 结果： AmGP-2易溶于水,等电点约4.7,蛋白质、糖类成分质量分数依次为56.7%,29.3%,相对分子质量约31 kDa;含有18种氨基酸,其中天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸含量较高;糖链部分含有阿拉伯糖、葡萄糖及2种未确定的单糖。 结论： AmGP-2具有显著的免疫抑制活性,为中药免疫抑制剂的开发提供参考。     

黄芪糖蛋白对T细胞增殖与共刺激分子表达的影响

目的：探讨黄芪糖蛋白对T细胞增殖与共刺激分子表达的影响。方法：无菌制备大鼠脾脏悬浮细胞,分离淋巴细胞,接种后加入黄芪糖蛋白共培养,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群分布。结果：MTT实验结果显示黄芪糖蛋白可显著抑制Con A刺激下淋巴细胞的增殖（P〈0.05或P〈0.01）。流式检测结果显示中、高剂量黄芪糖蛋白可显著降低淋巴细胞中CD3^＋CD54^＋细胞的比例（P〈0.01）,对CD3^＋CD28^＋细胞的比例无明显影响。结论：黄芪糖蛋白可有效抑制T细胞的增殖,同时可通过降低T细胞表面共刺激分子细胞间黏附分子-1的表达抑制T细胞的活化。     

异黄芪甲苷体外对淋巴细胞和树突状细胞免疫功能的影响

目的 研究异黄芪甲苷(6-O-β-D-葡萄糖基-环黄芪醇)对体外淋巴细胞和树突状细胞功能的影响.方法 培养巨噬细胞,观察异黄芪甲苷对细胞吞噬中性红能力和白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、IL-2、IL-6分泌功能的影响.MTT法检测异黄芪甲苷对原代培养脾淋巴细胞增殖的影响,并用流式细胞术通过检测C...     

雷公藤多苷片中雷公藤甲素与体外肝毒性相关性研究

目的:采用永生化人肝HepaRG细胞明确雷公藤多苷片制剂(Tripterygium Glycoside Tablets,TPT中主要成分雷公藤甲素(triptolide,TP)与肝毒性的相关性。方法:HepaRG细胞经不同浓度TP及TPT作用24 h后,采用细胞计数试剂盒法(cell vounting kit-8,CCK-8)分别测定TP和来自不同厂家的TPT对HepaRG细胞存活率的影响;采用流式检测法测定TP及TPT的对细胞凋亡率的影响;收集细胞培养液检测谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和谷氨酰转肽酶(GGT)等与肝毒性相关的生化指标,并以实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time PCR)法测定白细胞介素-6 (IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子表达水平。结果:TP的半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为15.14 nmol·L~(-1)。重点考察不同生产企业间TP含量与毒性差异之间的关联,结果发现,TP含量与细胞毒性、细胞凋亡、ALP、CK、TNF-α和IFN-γ变化直接相关,AST、LDH、TNF-α和IFN-γ是检测TP导致的肝细胞毒性较为灵敏的指标。结论:TP为不同企业TPT制剂中主要肝毒性成分。TPT中其他成分仍存在肝毒性风险,值得进一步研究。     

黄芪根、茎叶中黄芪甲苷的含量比较

目的:采用HPLC-ELSD法测定黄芪根、茎叶中黄芪甲苷的含量。方法:HPLC-ELSD法,Luna C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:乙腈-水(35∶65),流速:1.0mL·min-1;ELSD参数为漂移管温度105℃,载气流速2.8L·min-1。结果:不同产地黄芪根中黄芪甲苷的含量分别为0.096%、0.116%、0.081%,黄芪茎叶中黄芪甲苷的含量分别为0.219%、0.198%、0.232%。结论:黄芪茎叶中黄芪甲苷的含量明显高于黄芪根,黄芪茎叶有潜在的开发价值。     

黄芪饮片与黄芪配方颗粒有效成分含量比较

目的:比较黄芪饮片及其配方颗粒中2种有效成分的含量。方法:采用HPLC法,迪马C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈∶水(32∶68)为流动相;蒸发光检测器检测黄芪甲苷含量,以乙腈为流动相A,以0.2%甲酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱紫外检测器检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,比较黄芪饮片及其配方颗粒中二者含量差异。结果:黄芪饮片中2种有效成分含量均高于《中国药典》标准,黄芪配方颗粒中黄芪甲苷含量接近药典标准、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量与所标示的浓缩倍数不符,远低于药材含量。结论:配方颗粒生产工艺及质控标准需要改进,需建立统一的配方颗粒工艺标准和质量标准。     

黄芪党参颗粒中黄芪甲苷含量的HPLC测定方法

目的：建立黄芪党参颗粒中黄芪甲苷含量的HPLC测定方法。方法：以ELSD为检测器,色谱柱C18（Alltech Hypersil ODS 4.6 mm×150 mm,5μm）;流动相：乙腈∶水（40∶60）,流速：1.0 mL/min;柱温：25℃;漂移管温度：100℃,载气量：2.6 L/min。结果：回归方程y=1.5471x＋2.6231（r=0.9996）,黄芪甲苷在1.656～4.968μg/mL之间峰面积与浓度线性关系良好。平均回收率为101%。结论：该法简便可靠,可为黄芪党参颗粒质量控制提供依据。     

黄芪注射液治疗脑梗死的Meta分析

目的：评价黄芪注射液治疗脑梗死的疗效与安全性。方法：计算机检索MEDLINE、EMbase、Cochrane图书馆、CNKI、VIP和万方数据库,按照纳入与排除标准由两位研究者独立筛选和提取资料,采用Cochrane协作网随机对照试验的质量评价标准评价纳入文献质量,使用Rev Man 5.2软件进行Meta分析。结果;共纳入10篇文献,864例患者。10篇文献报道均未见患者死亡情况,其病死率为0%。Met a分析结果显示：黄芪注射液组的临床疗效[RR=1.21,95%CI（1.13,1.29）]和神经功能缺损改善情况[MD=-3.28,95%CI（-5.27,-1.29）]均优于对照组,2组相比差异有统计学意义。纳入的10篇文献中,4篇文献报道未见明显不良反应,3篇未提及安全性或不良反应,2篇有不良反应报道,但具体组别未知,仅有1篇报道试验组出现轻度腹泻2例和身体局部瘙痒1例。结论：黄芪注射液治疗脑梗死,在提高临床疗效、改善神经功能缺损评分方面可能优于对照组药物,但由于本系统评价纳入研究质量低且样本量小,药物安全性不明确,尚需高质量随机对照试验进一步验证。     

药用植物黄芪品种道地产区产量的AMMI模型分析

目的:筛选适宜在甘肃定西市多样性生态条件下种植的优良黄芪新品种。方法:采用AMMI模型分析基因型与环境互作效应方面的优势,对2012—2013年定西市4个主产县区选用7个参试品系进行丰产性及稳产性分析。结果:所有参试品系中HQZX04-03-02表现最稳定,但产量最低;HQZX04-04-01的稳产性较好,产量最高,较当地主栽品种陇芪1号增产24.23%;各试点间的鉴别力具有差异,其顺序为:漳县马泉渭源新寨岷县禾驮陇西首阳。结论:黄芪各品系不同试点AMMI模型中的主成分分值共解释总互作和的87.6%,比线性回归模型和方差分析能更有效地分析基因与环境的互作效应。     

评定ICP-MS法测定黄芪中重金属含量的不确定度

目的:评定采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定黄芪中铅、镉、砷、铜含量的不确定度。方法:使用ICP-MS法测定黄芪中铅、镉、砷、铜的含量,分析测定方法流程,确定不确定度来源,并计算扩展不确定度。结果:铅、镉、砷、铜的扩展不确定度分别为Pb 0.13 mg/kg,Cd 0.052 mg/kg,As 0.21 mg/kg,Cu 0.17 mg/kg。结论:该方法适用于ICP-MS法测定黄芪中铅、镉、砷、铜的不确定度评定,能为重金属分析过程的不确定度评定提供了参考。     

黄芪及其有效成分防治消化道肿瘤的文献评价

目的：总结和评价黄芪及其提取物或有效成分治疗消化道肿瘤的文献。方法：在CNKI、万方、维普及PubMed数据库以“黄芪、黄芪注射液、黄芪总苷、黄芪甲苷、黄芪多糖”和“胃癌、肝癌、食管癌、大肠癌、胰腺癌”为主题词检索1994-2012关于黄芪及其有效成分治疗消化道肿瘤的文献,并进行评价。结果：符合要求的文献共60篇,其研究主要集中在肝癌与胃癌方面,研究包含了动物实验、体外细胞实验和临床试验,其机制包括诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤侵袭转移和血管生成,并发现黄芪与其他抗肿瘤药物合用时具有抗瘤减毒增效作用。结论：黄芪及其有效成分是防治消化道肿瘤的有效中药,应进一步加强其抗肿瘤的机理研究和临床应用。     

红芪替换黄芪后益气养血汤对老龄鼠抗氧化损伤及抗免疫衰老作用的比较研究

目的：评估含红芪和含黄芪益气养血汤对衰老小鼠体内抗氧化损伤及抗免疫衰老作用的效果及差异。方法：用相同剂量红芪替换益气养血汤中的黄芪,灌胃18个月龄老龄鼠。测定老龄小鼠脾脏、胸腺指数,检测老龄小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）水平和血清IL-2含量。结果：含红芪和含黄芪的益气养血汤均可提高老龄小鼠脾脏和胸腺指数,在提高脾脏指数方面红芪作用优于黄芪。2种药物均可提高血清SOD活力,降低MDA水平,且二者作用无差异（P＞0.05）。含红芪和含黄芪的益气养血汤均可升高老龄小鼠血清IL-2含量且红芪作用优于黄芪（P＜0.05）。结论：含红芪和含黄芪的益气养血汤对老龄小鼠有一定的抗氧化损伤和抗免疫衰老效果,且红芪作用与黄芪作用相当。含红芪的益气养血汤在提高老龄小鼠脾脏指数,提高血清IL-2含量方面优于含黄芪益气养血汤。     

黄芪建中汤加味治疗消化性溃疡40例

目的:观察黄芪建中汤加味治疗消化性溃疡(PU)的临床疗效。方法:将80例PU患者随机分为对照组、治疗组各40例。对照组给予雷贝拉唑钠肠溶胶囊治疗,治疗组用黄芪建中汤加味治疗,2组均连续治疗4周。观察2组临床疗效、胃镜疗效及治疗前后症状积分的变化情况。结果:临床疗效、胃镜疗效总有效率治疗组分别为89.74%、86.2%,对照组分别为75.68%、71.4%,2组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。症状积分2组治疗后均明显降低(P<0.05),治疗组降低更明显(P<0.05)。复发率治疗组为22.2%,对照组为58.3%,治疗组低于对照组(P<0.05)。结论:黄芪建中汤加味治疗PU疗效优于西医治疗,其疗效肯定,复发率低。     

黄芪生脉饮对小鼠耐缺氧和抗疲劳的作用

目的:研究黄芪生脉饮对小鼠耐缺氧和抗疲劳的作用,探讨其对运动性疲劳和缺氧的改善作用及其机制。方法:采用昆明种雄性小鼠,通过抗缺氧实验及转棒耐力实验评价黄芪生脉饮耐缺氧和抗疲劳的药物功效,并通过运动后小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量变化,初步探讨黄芪生脉饮耐缺氧和抗疲劳的作用机制。结果:在常压耐缺氧实验中,黄芪生脉饮高、中剂量组与空白对照组相比能够明显延长小鼠的存活时间,差异具有统计学意义(P0.05);在转棒耐力实验中,黄芪生脉饮各组与空白对照组相比均能够明显延长在转棒上的运动时间,差异具有统计学意义(P0.05);黄芪生脉饮高、中剂量组可显著增强小鼠血清中SOD活性并降低MDA含量,与空白对照组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:黄芪生脉饮具有较好的耐缺氧、抗疲劳作用,可有效延长运动时间,其作用机制可能与增强血清中SOD活性、降低MDA含量有关。     

高效液相色谱法测定黄七胶囊中人参皂苷Rg_1、Rb_1及三七皂苷R_1的含量

目的:优选流动相参数,建立高效液相色谱法(HPLC)测定复方制剂黄七胶囊中人参皂苷Rg1、Rb_1及三七皂苷R_1含量的方法。方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以水为流动相B,考察最佳梯度洗脱参数。结果:最佳梯度为0~30 min,乙腈19→40,水81→60。在此条件下,人参皂苷Rg_1进样量在0.849 6~7.646 4μg,Rb_1在0.853 8~8.853 8μg,三七皂苷R1在0.202 0~2.020 0μg范围内皆与峰面积呈良好的线性关系。结论:该流动相梯度洗脱比例提高了峰面积和理论塔板数,并节省了时间。