六味地黄汤对糖尿病肾病大鼠肾功能及细胞凋亡的影响

目的探讨六味地黄汤对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏功能保护作用的量效关系及对细胞凋亡的影响。方法采用单侧肾脏结扎术+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立DN模型,2周实验结束时测定大鼠血糖、肌酐清除率、尿蛋白定量;2、4、8周实验结束时分析大鼠肾皮质细胞DNA降解的琼脂糖凝胶电泳,TUNEL法观察大鼠肾皮质细胞凋亡发生的部位,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果 2周实验结束时,3个剂量给药组均可不同程度降低DN大鼠血糖,减少尿蛋白的排泄,有效降低肌酐清除率;中、低剂量间显示出一定的量效关系,中剂量24.96 g/kg作用最佳;模型组大鼠8周时肾皮质细胞DNA琼脂糖凝胶电泳可出现100~300 bp的条带。TUNEL法检测模型组肾皮质细胞凋亡提示,2周时凋亡极少发生,4周时凋亡明显增多,多数在远端肾小管,8周时除远端肾小管外,近端肾小管亦可见散在的凋亡细胞,但肾小球未见凋亡细胞。流式细胞仪分析各组细胞凋亡率,4周及8周时DN模型大鼠存在肾脏皮质细胞凋亡率增加,给药组与之相比细胞凋亡率显著下降。结论六味地黄汤干预DN大鼠2周后,可以显著降低血糖、减少尿蛋白排泄量、改善肌酐清除率,从而起到保护DN大鼠肾功能的作用,24.96 g/kg为最佳剂量,六味地黄汤可以通过抑制DN大鼠肾皮质细胞凋亡来改善DN肾脏病理变化。     

葛根素对细胞因子诱导的杀伤细胞杀伤结肠癌SW-620细胞的影响

目的:观察葛根素作用前后细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和结肠癌SW-620细胞生长情况及其作用前后细胞因子诱导的杀伤细胞对结肠癌SW-620细胞杀伤活性的影响,并探讨其发生机制。方法:分离健康者外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子诱导为细胞因子诱导的杀伤细胞,收集培养第8天的细胞因子诱导的杀伤细胞,不同浓度葛根素分别作用于细胞因子诱导的杀伤细胞和结肠癌SW-620细胞48小时,CCK8法检测细胞因子诱导的杀伤细胞增殖率;四甲基偶氮唑蓝法检测结肠癌SW-620细胞抑制率;流式细胞术检测葛根素作用前后细胞因子诱导的杀伤细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a的表达;流式细胞术检测葛根素作用前后结肠癌SW-620细胞表面MICA/B分子表达;乳酸脱氢酶释放法测定葛根素对细胞因子诱导的杀伤细胞杀伤结肠癌细胞株SW-620的活性影响。结果:葛根素在0.8~100μmol/L浓度范围内对细胞因子诱导的杀伤细胞生长具有促进作用,对SW-620细胞生长无明显促进作用,浓度≥100μmol/L葛根素可抑制SW-620生长;经浓度为0.8~100μmol/L的葛根素诱导后的细胞因子诱导的杀伤细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a的表达显著高于对照组,对结肠癌SW-620细胞的杀伤活性亦显著高于对照组;经浓度为3.1~50μmol/L的葛根素作用48小时后的结肠癌SW-620细胞,其表面的MICA/B的表达不同程度增加,显著高于对照组。结论:葛根素能够促进细胞因子诱导的杀伤细胞增殖,并增强其对结肠癌SW-620细胞的杀伤活性,其机制可能与上调细胞因子诱导的杀伤细胞表面穿孔素、颗粒酶B、CD107a的表达有关;葛根素上调结肠癌SW-620细胞表面MICA/B的表达可能增加细胞因子诱导的杀伤细胞对结肠癌SW-620细胞的杀伤活性。     

六味地黄汤对宫内发育迟缓胎鼠脑发育的影响

目的：观察补肾方六味地黄汤对宫内发育迟缓胎鼠脑发育的影响,反证中医“肾”与“脑”的关系。方法：采用怀孕小鼠被动吸烟复制宫内发育迟缓模型,动物随机分为3组,分别给予蒸馏水、黄芪和六味地黄汤,于孕19天处死母鼠,计数总胚胎数、活胎数、吸收胎数、死胎数,称量活胎体质量和脑质量,观察胎鼠大脑显微结构和细胞凋亡情况。结果：被动吸烟可使孕鼠死胎数、吸收胎数增加,仔鼠脑发育迟缓,脑内细胞凋亡较正常仔鼠增加;黄芪、六味地黄汤能减少死胎、吸收胎数,增加仔鼠体质量与脑质量,一定程度改善脑发育,减少凋亡细胞数,与模型组差异有显著性（P〈0.05）,且黄芪与六味地黄汤比较差异有显著性（P〈0.05）。结论：六味地黄汤能显著促进宫内发育迟缓仔鼠脑的发育,提示“肾”通于“脑”理论的合理性。     

六味地黄汤对糖尿病大鼠肾脏抗脂质过氧化损伤的影响

在链脲佐菌素（ＳＴＺ）诱导的早期糖尿病大鼠肾脏组织中,其过氧化脂质（ＬＰＯ）含量与肾脏肥大及高滤过程度呈显著正相关（Ｐ〈０．０５）。六味地黄汤不仅可以降低糖尿病大鼠的空腹血糖,而且可以降低其肾组织中的ＬＰＯ含量,提高ＳＯＤ的活性,降低肾脏肥大及高滤过。提示：六味地黄汤防治糖尿病血管并发症有一定作用。     

六味地黄汤对小鼠血浆中环核苷酸的影响

目的 :研究六味地黄汤 (丸 )对阴虚病证模型小鼠血浆中环核苷酸的影响 ,以探讨六味地黄汤补阴作用的部分机理。方法 :采用糖皮质激素致小鼠阴虚模型 ,观察其煎剂、丸剂大小剂量组对环核苷酸 (cAMP)的影响 ,以放射免疫法进行测定。结果 :六味地黄汤 (丸 )有恢复血浆中cAMP、cGMP水平及其比值的作用 ,且以高剂量组的作用为优。结论 :六味地黄汤能改善和调节cAMP系统 ,此是其补阴作用的机理之一。     

六味地黄汤对实验性肾虚动物牙周组织的影响

本实验通过药物造成肾虚动物模型,观察动物牙周组织的改变。同时以六味地黄汤灌喂实验动物,观察其对牙周组织的影响。结果表明,由药物造成肾虚动物模型可加重牙周组织的损害。六味地黄汤对牙周病阴虚模型动物的牙周组织有保护作用。具有修复牙周组织损害的作用。灌喂六味地黄汤的实验动物的体重和活力均较对照组增加。     

六味地黄汤对虚症动物的影响

通过六味地黄汤对激素（醋酸地塞米松）所致虚症大鼠的体重，血糖、皮质醇含量、某些脏器指数，组织形态的影响，表明六味地黄汤对虚证具有明显疗效。     

六味地黄汤对佐剂性关节炎大鼠脾脏细胞表达细胞因子的影响

目的 :观察六味地黄汤 (LW)对佐剂性关节炎 (AA)大鼠脾脏辅助T细胞 (Th)的作用 ,并与免疫抑制剂环磷酰胺 (Cy)、环孢素A(CsA)进行比较。 方法 :运用定量PCR技术 ,检测AA大鼠脾脏T淋巴细胞因子IFN-γ ,IL-2 ,IL-4和IL-10的mRNA的表达水平。结果 :AA大鼠脾淋巴细胞IL-2mRNA表达水平与对照组相比有增高趋势 ;IFN-γ ,IL-4和IL-10mRNA的表达水平则明显降低。口服LW对AA大鼠脾细胞的表达水平则具有明显提高作用 ,与Cy和CsA相比具有明显不同的特点。 结论 :LW可能对AA大鼠脾脏表达的细胞因子水平有调节作用 ,提示LW可纠正Th1/Th2亚群功能的平衡紊乱。     

恶性肿瘤患者行细胞因子诱导的杀伤细胞免疫治疗的护理

目的：探讨细胞因子诱导的杀伤细胞免疫治疗恶性肿瘤的护理。方法：选取我科2012年7月至2013年3月采取细胞因子诱导的杀伤细胞免疫治疗恶性肿瘤患者80例,按常规方法采集细胞,分离培养,10天收获。采用细胞因子诱导的杀伤细胞静脉输注治疗,并采取全面的护理措施,观察患者治疗后生活质量改善情况、不良反应发生情况及护理结果。结果：本组80例患者治疗后生活质量提高62例,稳定11例,下降7例,提高率为77.5%,3例患者出现轻微发热,无严重并发症出现,护理满意度为97.5%。结论：细胞因子诱导的杀伤细胞免疫治疗恶性肿瘤患者期间给予全面的护理干预,能够提高恶性肿瘤患者的生存质量,副作用小。     

六味地黄汤对创伤小鼠红细胞免疫功能的影响

目的 :了解六味地黄汤对创伤小鼠免疫功能影响。方法 :利用创伤小鼠实验模型 ,采用酵母菌花环法 ,分别测定创伤小鼠六味地黄汤治疗前后红细胞免疫功能指标。结果 :RBC-C3 b R花环率、RBC-IC花环率和 RBC免疫粘附促进因子 ( RFER)活性降低 ,而 RBC免疫粘附抑制因子 ( RF IR)活性升高。结论 :六味地黄汤对创伤引起的红细胞免疫功能抑制有恢复作用。     

六味地黄汤对甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响

目的 应用双向电泳技术和质谱技术研究六味地黄汤对甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋向质组的影响.方法 双向电泳分离甲状腺素造成的肾阴虚模型和六味地黄汤治疗大鼠肝线粒体蛋白质,银染后扫描得到蛋白质组图谱,用Image Master2D6.0软件进行差异蛋白质组分析,筛选差异在2倍以上的蛋白质进行质谱鉴定和生物信息学分析.结果 大鼠Major urinary protein precursor、Peroxiredoxin-6、内质网蛋白29前体、大鼠转甲状腺素蛋白D链表达升高,78 kDa葡萄糖调节蛋白前体、谷胱甘肽硫转移酶Mu 1、热休克蛋白60、肽基脯氨酰顺反式异构酶、核转录因子-κB 2、H~+-转运ATP合酶、BNIP1 protein表达均降低.结论 六味地黄汤滋阴补肾作用机理可能与下调线粒体内H~+-转运ATP合酶表达量从而减缓能量代谢、抑制NF-κB过量表达和活化以调节炎性细胞因子紊乱状态和凋亡抑制状态、上调PDX6表达对抗氧自由基损伤以及增强性激素分泌水平相关.     

加味六味地黄汤治疗复发性口腔溃疡疗效分析

目的:初步探讨使用中药经方六味地黄汤加减治疗复发性口腔溃疡的疗效.方法:120例患者随机分为3组,中药治疗组:内服六味地黄汤加减;西药治疗组:口服左旋咪唑片;观察对照组:口服复合维生素B2片;观察用药3d、6d时溃疡面积的变化,疼痛缓解程度,对比观察其临床疗效.结果:中药治疗组与西药治疗组间无显著性差异(P＞0.05),但中药比西药更安全,中药治疗组与维生素B2组、西药治疗组与维生素B2组间有显著性差异(P＜0.05).结论:六味地黄汤在复发性口腔溃疡的治疗上有效而安全,值得进一步研究和推广.     

六味地黄汤相关苷类单体对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的研究

目的：研究六味地黄汤中芍药苷、薯蓣皂苷元、马钱苷、莫诺苷、桃叶珊瑚苷对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响。方法：制备脾淋巴细胞,MTT比色法检测不同浓度5种苷类单体单独作用及其与丝裂原（ConA、LPS）共同作用时对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果：10-5M芍药苷能显著促进淋巴细胞增殖,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,10-7～10-6M芍药苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）;薯蓣皂苷元有一定促进淋巴细胞增殖作用,但与对照组比较无显著性差异;10-7～10-5M马钱苷能显著促进淋巴细胞增殖,10-7M马钱苷对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有显著协同作用,随剂量增加,增殖作用反而降低;10-7～10-5M莫诺苷能显著促进淋巴细胞增殖,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）。10-7～10-5M桃叶珊瑚苷基本无促进淋巴细胞增殖作用1,0-5M桃叶珊瑚苷对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,10-7～10-5M桃叶珊瑚苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）。结论：六味地黄汤中5种苷类单体对T、B淋巴细胞均有不同程度增殖作用,莫诺苷作用最明显,马钱苷低剂量促进增殖,高剂量反而抑制。     

六味地黄汤实验治疗离体心脏低灌-再灌注心律失常及心肌病诱发心律失常

六味地黄汤ｐｏ１ｇ／ｋｇ，ｑｄ　５ｄ显著对抗Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流大鼠心脏低灌－再灌注诱发的心律失常，使室颤发生率降低５０％，持续时间缩短７３％，且能明显抑制甲状腺素引起的心脏肥厚，并降低心脏对心律失常易损性的增加，使肥厚心脏低灌－再灌注诱发的室颤发生率由１００％降至１０％。六味地黄汤能明显抑制肥厚心脏遭受低灌－再灌注损伤引起的组织内ＳＯＤ的进一步降低及ＭＤＡ含量的进一步升高，提示六味地黄汤的抗心律失常及对肥厚心脏的保护作用均与其抗氧自由基作用有关。     

加味地黄汤调理创伤小鼠腹腔巨噬细胞功能及DTH的初步研究

目的:观察加味地黄汤对创伤小鼠腹腔巨噬细胞(M)功能及迟发型超敏反应(DTH)的调理作用。方法:采用手法致小鼠双股骨干单纯性闭合性骨折创伤模型,将小鼠随机分为正常对照组、创伤对照组和创伤治疗组,正常对照组为非造模组,创伤对照组和创伤治疗组造模后,创伤治疗组即灌胃给予加味地黄汤煎剂,正常对照组、创伤对照组分别于相同时间用相同方法给予等体积的冷开水,均于第6d测定免疫指标。结果:创伤对照组小鼠第6d的腹腔Mφ功能和DHT均明显低于正常对照组小鼠水平(P<001),而创伤治疗组小鼠的DTH未受抑制,腹腔Mφ功能与正常对照组相比无显著性差别。结论:加味地黄汤对创伤小鼠腹腔巨噬细胞功能有改善作用。     

六味地黄汤免疫调节活性成分化学分离的药理学导向评价

为定向追踪分离六味地黄汤发挥免疫调节作用的活性成分进行导向评价。方法；运用化学与药理学密切合作的研究方法，以环磷酰胺处理小鼠为模型，抗体生成反应为活性评价指标，对每一步化学分离所得组分进行活性评价，确定活性部位。     

六味地黄汤和四物汤中诸元素的含量及煎出率

研究了六味地黄汤中和四物汤中各单味药的铜、锌、铁、钙、镁等元素的含量及煎出率,并与复方煎出率作了比较。实验结果表明,不同生药中诸元素的煎出率有很大差异,各生药中元素含量与煎剂中的含量不一定成正比。     

六味地黄汤对实验性骨关节炎兔软骨细胞凋亡与增殖的体内实验

目的：探讨六味地黄汤对实验性膝骨关节炎兔软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法：20只新西兰兔用Hulth法造骨关节炎动物模型，随机分成空白对照组、实验组；实验组用六味地黄汤灌胃，空白对照组用生理盐水，治疗第4、8、12、2，4周后每组各取2只动物，用亚硝酸盐还原酶法测定关节滑液NO水平，关节软骨组织HE染色，光镜观察形态学变化、电镜观察软骨细胞内结构变化及原位末端标记（TUN-EL）法观察软骨细胞凋亡病理改变，进行组织病理学评估。结果：空白对照组NO活性在不同时期均高于实验组（8周，P〈0．05；12、24周，P〈0．01），两组间比较有显著性差异（P〈0．05，0．01）；实验组的关节软骨病理变化总积分、软骨细胞病理改变积分和软骨表层病理改变积分均明显低于空白对照组（P〈0．05）；实验组的软骨细胞凋亡指数与对照组的软骨细胞凋亡有显著性差异（P〈0．05），与关节液中NO含量显著相关。结论：六味地黄汤对兔膝关节实验性骨关节炎软骨退变具有保护作用，通过NO诱导途径减少软骨细胞的凋亡，可能是其作用机制之一。     

六味地黄汤中抗癌元素的研究

用荧光分光光度法测定了六味地黄汤中六味药材及煎剂,五种不同配伍的煎剂和全方煎剂的硒含量。结果表明,地黄对硒具有富集作用。硒在各药材通煎液中的溶出率约为30～40%。