重组人肿瘤坏死因子的纯化及N—端氨基酸序列测定

应用现有实验条件制备高纯度的ＴＮＦ－α,为进一步的研究工作提供物质保障。方法：发酵的细菌经破碎,盐析,透析和离子交换层析,制备高纯度的ＴＮＦ－α,结果：纯化后的ＴＮＦ－α其表现分子量为１７ｋＤ,纯度大于９５％,比活性为３．４４×１０＾７ｕ／ｍｇ。结论：本实验采用的纯化方法是成功的,所制备的ＴＮＦ－α与Ｓｉｇｍａ公司的产品相比,各项指标均达到其公布的参数。     

糖化血红蛋白和N末端脑钠肽原与急性冠脉综合征心功能的相关性研究

目的：探讨糖化血红蛋白和N末端脑钠肽原与急性冠脉综合征心功能的相关性。方法选择我院2014年1月—2015年1月之间收治的140例急性冠脉综合征患者为观察对象,将其分为合并糖尿病的A1组、无糖尿病症状的A2组,同时选择52例健康体检者作为对照B组,比较分析3组观察对象糖化血红蛋白（HbA1c）和 N 末端脑钠肽原（NT-proBNP）检查结果,及其与疾病之间的关系。结果NT-proBNP和HbAlc水平与急性冠脉综合征病情之间存在直接联系（P<0.05）。同时,3组观察对象NT-proBNP水平和HbAlc水平对比具有明显统计学差异（P<0.05）。结论糖化血红蛋白和N末端脑钠肽原检测结果能够直接反映急性冠脉综合征患者的心功能状态,并为患者疾病的治疗提供依据。     

糖化血红蛋白和N末端脑钠肽原与急性冠脉综合征心功能的相关性

目的：探讨糖化血红蛋白和N末端脑钠肽原与急性冠脉综合征心功能的相关性。方法选取我院收治的80例急性冠脉综合征患者,以合并有2型糖尿病的35例患者为观察组,以未合并2型糖尿病的45例患者为对照组。对2组患者的糖化血红蛋白水平及N末端脑钠肽原含量进行对比。结果观察组患者的糖化血红蛋白水平及N末端脑钠肽原含量均明显高于对照组（P〈0.05）,急性冠脉综合征患者血清中糖化血红蛋白水平及N末端脑钠肽原含量和急性冠脉综合征心功能受损程度呈正相关。结论糖化血红蛋白水平及N末端脑钠肽原会在一定程度上促进急性冠脉综合征患者的心功能受损,因此,临床上可将其作为判断急性冠脉综合征患者心功能受损程度的依据。     

毕赤酵母表达人胰岛素前体的纯化和N末端不均一性分析

利用毕赤酵母生产人胰岛素前体时,在胰岛素前体的N末端引入一段由10个氨基酸组成的间隔肽(EEAEAEAEPK)虽然可以提高目的产物的表达量,但间隔肽中的多个酶切位点有可能造成目的产物N末端的不均一性。对毕赤酵母分泌表达的胰岛素前体蛋白进行分离纯化,得到的样品经过MALDI TOF MS和N末端测序,证实了胰岛素前体N末端不均一性的现象,并对产生不均一性的原因进行了分析。实验同时证实,利用毕赤酵母得到的胰岛素前体,经胰蛋白酶酶切后,生成了B链缺少第30位苏氨酸但N末端均一的胰岛素产物desB30,且C末端未发生降解,这为人胰岛素和地特胰岛素的制备提供了新思路。     

牙龈卟啉单胞菌FtsZ的C末端和N末端氨基酸残基缺失对其GTPase活性的影响

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌（Pg）丝状温度敏感蛋白质（FtsZ）的C末端和N末端氨基酸残基缺失对其GTPase活性的影响,阐明PgFtsZ GTPase的功能区域,为牙周病的防治提供实验依据。方法：将质粒pEZ1(Wt PgFtsZ,含野生型PgFtsZ的基因)、pYW1（ZΔC01,从PgFtsZ的C末端去除73个氨基酸残基的变异型）、pYW2（ZΔC02,从PgFtsZ的C末端去除128个氨基酸残基的变异型）、pYWN1（ZΔN01,从PgFtsZ的N末端去除43个氨基酸残基的变异型）和pYWN2（ZΔN02,从PgFtsZ的N末端去除205个氨基酸残基的变异型）分别导入E.coli BL21(DE3)pLysS中表达目的蛋白,然后分离和纯化WtPgFtsZ、ZΔC01、ZΔC02、ZΔN01和ZΔN02,将pET3a 载体导入E.coli BL21(DE3)pLysS中作为空白对照。采用Malachite green assay法检测Wt PgFtsZ、ZΔC01、ZΔC02、ZΔN01和ZΔN02的GTPase活性,沉淀法检测体外聚合功能,光学显微镜下观察Wt PgFtsZ和各种变异型PgFtsZs过表达时E.coli细胞形态变化。结果：除ZΔN01外,ZΔC01、ZΔC02和ZΔN02的GTPase的活性值均较Wt PgFtsZ降低（P<0.05）,10 mmol•L^-1 CaCl2可使Wt PgFtsZ和各种变异型PgFtsZs的活性下降（P<0.05）;除ZΔN02以外,10 mmol?L-1 CaCl2均可诱导Wt PgFtsZ、ZΔC01、ZΔC02和ZΔN01的体外聚合反应。Wt PgFtsZ、ZΔC01和ZΔC02在E.coli细胞中过表达时,细胞呈细长丝状,与仅含有pET3a载体作为空白对照的E.coli相比细胞明显变长;ZΔN01和ZΔN02在E.coli中过表达时,E.coli细胞形态与仅含有pET3a载体作为空白对照的E.coli细胞形态相似。结论：PgFtsZ N末端的ZΔN01和ZΔN02之间的162个氨基酸残基及C末端的128个氨基酸残基与PgFtsZ 的GTPase活性有关,二价阳离子Ca2+能抑制PgFtsZ的GTPase活性,促进其体外聚合的功能。     

急性心肌梗死N末端B型钠尿肽系列测定与心力衰竭短期预后的关系

目的研究急性心肌梗死(AMI)患者N末端B型钠尿肽(NT-proBNP)系列测定与短期心力衰竭的临床关系。方法 110名急性心肌梗死患者分为心力衰竭组和非心力衰竭组,测定入院时、24h、7d的血浆NT-proBNP浓度及超声心动检查,所有患者自入院起随访30 d。结果两组患者在入院时、24 h、7d血浆NT-proBNP水平差异均有统计学意义(P0.01)。非心力衰竭组血浆24 h、7d NT-ProBN P水平较入院时无显著性差异(P0.05),面心力衰竭组患者血浆24 h、7d NT-ProBNP水平持续增高,两者有统计学差异(P0.01)。同时,NT-ProBNP水平与超声心动检查中的LVEF呈负相关(P0.05),与LVEDD呈显著的正相关(r=0452,P0.01)。结论血浆NT-ProBNP水平是心肌梗死后发生早期心力衰竭的预测因子,并且NT-ProBNP水平的系列测定与单一基线水平测定相比,其预后判断价值显著增加。     

N末端脑钠肽和血小板计数对感染性休克的评估价值研究

目的：探讨N末端脑钠肽（NT-pro-BNP）、血小板计数评估感染性休克患者病情变化及预后的临床价值。方法选取2013年7月～2014年4月收治的感染性休克患者65例作为观察组,并以2012年6月～2013年6月收治的感染性休克患者65例作为对照组,观察组患者分别于入院后1、2、3、5与7 d开展血小板计数与血浆NT-pro-BNP检测,对患者开展序贯器官衰竭评分（SOFA）与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）,并依据血小板计数与NT-pro-BNP水平调整治疗方案,观察2组患者的临床治疗基本情况,并开展比较与分析。结果对照组患者治疗有效率为40.0%,其他39例均病情危重至死亡;观察组患者的治疗有效率为67.7%,观察组显著优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。65例患者中病情危重者的血小板计数总体水平明显低于获得好转患者,而NT-pro-BNP总体水平显著高于获得好转患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论在感染性休克患者的治疗期间开展血小板计数与NT-pro-BNP水平检测,对患者的病情变化以及预后效果有确切的预测作用,具有良好的临床评估价值。     

β—苯乙胺的N—取代反应过程中反应物和产物的反相HPLC分离测定

采用反相ＨＰＬＣ法对β－苯乙胺的Ｎ－取代反应过程中反应物及产物进行同时测定。色谱柱为ＯＤＳ柱;流动相为甲醇－０．３％三乙胺水溶液（以磷酸调节ｐＨ至６．０）（６０：４０）;检测波长２５４ｎｍ;外标法定量。四种组分间的分离度均在１．９以上。定量测定的相对标准偏差低于０．８％。     

老年心力衰竭患者血中甲状腺激素和N末端原脑钠肽的检测及临床意义

目的:探讨甲状腺激素和N末端原脑钠肽(NT-proBNP)在老年心力衰竭患者血中的检测及临床意义.方法:选择109例老年心力衰竭患者作为观察组,另选择同期收治的NYHA心功能分级为Ⅰ级的老年心血管患者45例作为对照组;观察组根据NYHA心功能分级分为A1组和A2组,A1组为心功能分级Ⅱ～Ⅲ级,A2组为心功能分级Ⅳ级;根据住院期间是否发生心血管事件分为B1组和B2组,B1组为未发生心血管事件患者,B2组为发生心血管事件患者.测定所有患者游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、血清游离甲状腺素(FT4)、高敏促甲状腺激素(sTSH)以及NT proBNP,组间NT-proBNP的比较取对数变换lgNT-proBNP进行比较.结果:观察组FT3明显低于对照组,lgNT-proBNP明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);A2组FT3低于A1组,lgNT-proBNP明显高于A1组,差异均有统计学意义(P＜0.05);B2组FT3低于B1组,lgNT-proBNP明显高于B1组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:老年心力衰竭患者血中FT3明显降低,NT-proBNP明显升高,甲状腺激素和NT-proBNP水平与心功能严重程度和预后密切相关,具有积极的临床意义.     

猪精浆中,二肽基肽酶Ⅱ的提取,纯化和N—末端氨基酸序列分析

本文采用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ、Ｓｅｐｈａｃｏｙｌｓ－３００ＨＲ、ＭｔｒｅｓＧｅｌＲｅｄＡ、Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ、Ｚｉｎｅ－ＣｈｅｌａｔｅＣｅｌｌｕｌｆｉｎｅ，Ｐｈｅｎｙｌ－ＳｕＰｅｒｏｓｉｉｎｔｈｅＦＰＬＣ柱层析的方法，从猪精浆中将二肽基肽酶Ⅱ提纯到１６００倍。经聚丙烯酸胺凝胺电泳分离鉴定后，得到了单一的一条区带。采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ时，在用β－ＭＥ存在条件下，其分子量为６１ＫＤ，而不存在     

N末端脑钠肽前体和相关生化指标对老年慢性心力衰竭的诊断价值

目的分析N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)水平及心肌肌钙蛋白I(c Tn I)、肌红蛋白(Mb)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血清同型半胱氨酸(Hcy)、C反应蛋白(CRP)对老年慢性心力衰竭的诊断价值。方法选择2010年5月至2012年5月开封市龙海医院明确诊断为慢性心力衰竭的老年患者156例,同时选择50例老年健康体检者作为对照组,对所有受试者NT-pro BNP、c Tn I、Mb、CK-MB、Hcy、CRP指标进行检测。结果与对照组相比,不同心功能分级下,NT-pro BNP、c Tn I、Mb、CK-MB、Hcy和CRP均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。NT-pro BNP、c Tn I、Mb、CK-MB、Hcy和CRP随着心功能分级的升高呈上升趋势。Pearson相关分析提示,NT-pro BNP与c Tn I、Mb、CKMB、Hcy、CRP均相关。结论 NT-pro BNP前体水平与c Tn I、Mb、CK-MB、Hcy、CRP指标对老年慢性心力衰竭有一定的诊断价值。     

N末端BNP前体和高敏C反应蛋白水平对老年充血性心力衰竭近期预后的评估价值

目的评价N末端BNP前体（NT-proBNP）和高敏C反应蛋白（hs-CRP）水平对充血性心力衰竭预后的评估价值。方法测定80例CHF患者急诊时和出院时血NT-proBNP和hs-CRP等,观察并随访住院期间和出院后12个月内不良心脏事件的发生率、再住院率及病死率。结果 NYHA心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级患者的NT-proBNP分别为（520.34±99.47）ng/L、（2287.25±300.28）ng/L、（5725.36±410.56）ng/L,心功能越差,NT-proBNP越高。心肌损伤与心功能程度之间是关联的。NT-proBNP≥900ng/L或hs-CRP≥3.5mg/L的患者住院期间与出院后12个月内不良心脏事件、再住院率和心源性病死率均高于NT-proBNP〈900ng/L或hs-CRP〈3.5mg/L的患者。结论联合NT-proBNP和hs-CRP可以更全面地评估CHF患者的危险程度和近期预后。     

测定糖尿病患者尿N—乙酰－β－D氨基葡萄糖苷酶的临床意义

本文对１０５例糖尿病患者尿中Ｎ－乙酰－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）、白蛋白（Ａｌｂ）、β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）及尿糖进行了检测，结果显示：（１）尿ＮＡＧ和尿Ａｌｂ的检测相比，对早期糖尿病肾病的诊断有相似的敏感性，在早期ＤＮ患者中，尿ＮＡＧ活性与尿Ａｌｂ排泄呈显著正相关，但在临床ＤＮ患者中，尿ＮＡＧ活性与尿Ａｌｂ无相关性；（２）不论尿β２－ＭＧ正常或增高的患者中，尿ＮＡＧ活性与尿β２－ＭＧ排泄量均无相关性；（３）在２４小时尿糖＜５９、５～１５ｇ及＞１５ｇ的三组患老中，尿ＮＡＧ与２４小时尿糖排泄量亦均无相关性。本文研究提示：测定糖尿病患者尿ＮＡＧ活性可作为一筛选早期ＤＮ的一敏感指标，尿ＮＡＧ活性与尿β２－ＭＧ及尿糖排泄量无直接关系。     

聚乙二醇-牛血红蛋白停搏液对离体心脏功能和超微结构的影响

目的观察含聚乙二醇-牛血红蛋白（polyethylene glycol-bovine hemoglobin,PEG-bHb）的心脏停搏液对离体心脏功能的影响。方法32只成年雄性S-D大鼠根据停搏液不同随机分为4组,麻醉后开胸取心,建立Langendorff离体心脏灌注模型,平衡20 min后灌注冷St.Thomas液或三种不同浓度的PEG-bHb停搏液,30℃保持60 min后恢复灌注。记录各组左室发展压（LVDP）、左心室内压最大变化速率（±dp/dtmax）和冠脉流出量（CF）等血流动力学指标,并行超微结构观察。结果恢复灌注后,三个PEG-bHb组的LDVP、±dp/dtmax及CF均显著高于St.Thomas液组（P〈0.05）,超微结构也得到较好的保护。三个PEG-bHb组之间除CF外,其余指标均无明显差异（P〉0.05）。结论以PEG-bHb制成的含血停搏液可以改善离体心脏的血流动力学表现和超微结构。     

N末端脑钠肽前体和同型半胱氨酸水平与心力衰竭患者病情的相关性

目的:探讨N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)和同型半胱氨酸(Hcy)水平与心力衰竭(CHF)患者病情严重程度的相关性.方法:按照纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级,将78例CHF患者分为Ⅱ级(n=21)、Ⅲ级(n=33)、Ⅳ级(n=24);另选30名同期住院的无心衰的冠心病患者为对照组.受试者均行超声心动图和血清NT-proBNP、Hcy水平检测.结果:观察组患者血清NT-proBNP、Hcy水平均高于对照组(P<0.05).按NYHA分级,Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者之间血清NT-proBNP、Hcy水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),且随着病情严重程度增加,两者均升高.相关性分析显示Hcy与NT-proBNP、LVEDD、心功能分级呈正相关性,与LVEF呈负相关性(P<0.05).多因素Logistic回归分析显示NT-proBNP、Hcy是CHF的独立危险因素(P<0.05).结论:CHF患者血清NT-proBNP、Hcy水平显著升高,两者有正相关性,都是CHF的独立危险因素,可作为CHF严重程度及不良预后的评价指标.     

N末端脑钠肽前体和红细胞分布宽度对川崎病的早期诊断价值

目的：探究N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）、红细胞分布宽度（RDW）对川崎病（KD）的早期诊断价值。方法：按是否确诊将92例疑似KD患儿分为KD组（n=48）和非KD组（n=37）,比较两组患儿NT-proBNP和RDW等血细胞学及生化指标。采用Logsitic回归模型分析KD发生的独立影响因素,并采用受试者工作...     

血浆和肽素、N末端脑钠肽前体和肾上腺髓质素前体N端20肽与慢性心力衰竭的关系研究

目的：探讨血浆和肽素、肾上腺髓质素前体N端20肽（proadrenomedullin N-terminal 20 peptide,PAMP）、N末端脑钠肽前体（N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP）水平和慢性心力衰竭（chronic heart failure,CHF）及其严重程度的相关关系。方法：分别入选CHF患者72例和32例非CHF对照,检测纳入对象血浆和肽素、PAMP和NT-proBNP水平,心脏彩超评价心脏的结构和功能。结果：CHF患者血浆和肽素、NT-proBNP水平与对照组相比明显升高（P<0.001）,并随纽约心脏病协会（New York heart association,NYHA）分级的增加而升高。和肽素分别与左室舒张末期内径值（r=0.508）、血肌酐（r=0.320）、NYHA分级（r=0.567）、NT-proBNP（r=0.412）呈显著正相关（均有P<0.01）,与左室射血分数呈负相关（r=-0.663,P<0.01）。CHF患者血浆PAMP水平与对照组相比无显著差异。结论：血浆和肽素、NT-proBNP水平在CHF中显著升高,并与CHF的严重程度密切相关。     

N末端前体脑利钠肽和D-二聚体检测对心力衰竭的诊断价值

目的：分析N末端前体脑利钠肽(NT-proBNP)与D-二聚体(D-D)检测在心力衰竭诊断中的价值。方法：选取2020年1月-2021年9月北京市昌平区中西医结合医院收治的射血分数保留性心力衰竭患者98例设为观察组,并将同时间段内100例健康体检者设为对照组,回顾性分析两组资料,观察两组NT-proBNP、D-D水平差异,对比观察组中不同心功能分级患者的NT-proBNP、D-D水平,分析射血分数保留性心力衰竭的主要危险因素。结果：两组年龄、心功能分级、NT-proBNP及D-D水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);高龄、高NT-proBNP水平以及高D-D水平均是射血分数保留性心力衰竭的主要危险因素,OR值均>1;观察组患者心功能分级升高,NT-proBNP及D-D水平相应升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：NT-proBNP与D-D检测对心力衰竭有着较高诊断价值,高龄、高NT-proBNP水平以及高D-D水平是射血分数保留性心力衰竭的主要危险因素,且伴随心力衰竭程度加重,患者NT-proBNP与D-D水平相应升高,便于临床评定其心功能分级。     

血浆N氨基末端脑钠肽前体对不稳定型心绞痛患者危险性和预后评估的价值

目的探讨血浆N氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的变化对不稳定型心绞痛(UA)患者危险性及预后评估的价值。方法选择148例UA患者和40例健康体检者(健康对照组),UA患者按Brawnwald分级分为3组,经皮冠状动脉介入(PCI)治疗后随访12个月,根据是否发生早期心血管事件分为心血管事件组与无心血管事件组。检测各组血浆NT-proBNP水平并进行比较分析。结果 UA患者血浆NT-proBNP水平较健康对照组显著升高(P<0.01),并随危险分层的严重程度而增加(P<0.05)。心血管事件组血浆NT-proBNP水平显著高于无心血管事件组(P<0.01)。结论血浆NT-proBNP是早期识别UA高危患者和评价UA患者预后较好的生物学标志物。