葡萄糖对人血管内皮细胞周期和凋亡的影响

目的：观察高浓度葡萄糖对人血管内皮细胞周期和凋亡的影响。方法：用不同浓度葡萄糖（Glu）作用体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECS）24h、48h、72h，绘制细胞增殖曲线，用流式细胞仪分析细胞周期和凋亡的变化。结果：高浓度Glu(20mmol/L、40mmol/L)对内皮细胞的生长增殖有明显抑制作用，使G0/G1期细胞比例增加，S和G2/M期细胞比例下降，同时诱导了内皮细胞的凋亡，并随作用浓度增加、时间延长更为明显。结论：高糖使培养的HUVECS凋亡加速，同时抑制细胞增殖。细胞可能被阻滞在G1/S转变期。     

氧自由基对豚鼠耳蜗微血管内皮细胞凋亡的影响及其机制

目的 研究氧自由基诱导豚鼠耳蜗微血管内皮细胞凋亡及其可能机制.方法 以黄嘌呤氧化酶作用于黄嘌呤而产生氧自由基.不同浓度氧自由基作用于豚鼠耳蜗微血管内皮细胞,用流式细胞术检测凋亡细胞的百分比;用免疫细胞化学法检测Bax及Bcl-2蛋白表达;用RT-PCR方法检测Bax及Bcl-2 mRNA的表达.结果 氧自由基作用后,与空白对照组相比,各个浓度的氧自由基作用组豚鼠耳蜗微血管内皮细胞凋亡率均明显升高(均P<0.01),同时,BaxmRNA及蛋白的表达均显著增强(P<0.05或P<0.01),Bcl-2 mRNA及蛋白的表达明显减弱(均P<0.01).结论 氧自由基可诱导豚鼠耳蜗微血管内皮细胞发生凋亡,其发生机制与其调节Bax/Bcl-2 mRNA及蛋白的表达有关.     

人参皂甙对肺癌细胞和血管内皮细胞增生、凋亡及其周期的影响

目的：探讨中药20(R)-人参皂甙Rg3(Rg3)对肺癌细胞和血管内皮细胞增生、凋亡以及细胞周期的影响。方法：进行人肺腺癌细胞株A549、人脐静脉血管内皮HUVEC304细胞培养,不同浓度Rg3干预,采用MTT法、流式细胞术、透射电镜等技术,了解不同浓度Rg3对上述细胞增生、凋亡以及细胞周期的影响。结果：3×10-6 mol/L的Rg3可导致A549细胞明显凋亡,凋亡率为29.8%,与对照组(15.0%)相比差异有统计学意义（P<0.05）。Rg3对A549细胞周期的影响无显著差异。1×10-4 mol/L的Rg3对内皮细胞的生长抑制率为12.53%,显著高于其它组（P<0.05）,不同浓度Rg3对条件培养液（CM）诱导的血管内皮细胞的增生均有明显的抑制作用（P<0.05）,电镜下可见10-6 mol/L浓度的Rg3可使CM诱导的内皮细胞出现凋亡小体。 结论：适当浓度的Rg3有抗肿瘤作用和抑制肿瘤新生血管生成的作用。     

细胞凋亡与氧自由基

细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡,自从Kerr等在1972年首次提出以来,其研究受到了广泛重视,成为多学科研究的热点。同年,Demopoulos证实了氧自由基(oxygen　free　radical,OFR)在脑缺血中对内皮细胞损伤起重要作用,目前越来越多的证据表明OFR参与了细胞凋亡的发生。作者就细胞凋亡与氧自由基作一综述。     

三氧化二砷对血管内皮细胞增殖和周期的影响

目的:观察As2O3对血管内皮细胞增殖、凋亡和细胞周期的干扰,探讨As2O3对血管内皮细胞生长的直接影响。方法:血管内皮细胞EVC-304体外培养,As2O3干预。采用MTT测定细胞活性,流式细胞仪测定细胞周期、细胞凋亡。结果:ECV-304细胞经过As2O3干预,其存活率明显降低,并且呈剂量依赖性。As2O3干预后,进入S期的细胞减少,细胞周期被阻在G1期,细胞可能在G1期进入凋亡。As2O3诱导早期凋亡是对照组的2.88～5.1倍,并且呈剂量依赖性;其晚期凋亡是对照组的1.17～1.67倍。结论:As2O3可直接干扰血管内皮细胞的细胞周期,阻滞细胞在G1期,并诱导细胞凋亡,进而抑制血管内皮细胞的增殖。     

血管内皮细胞凋亡研究进展

凋亡诱导剂通过Fas/FasL/caspase途径、Cyt C途径、TNF-α途径及PARP途径等诱导血管内皮细胞凋亡。抗凋亡诱导剂通过干扰细胞凋亡的信号通路来抑制凋亡。中药作为广泛使用的抗凋亡药物在临床上已取得显著成效,但其部分具体的分子机制还不清楚。文章对血管内皮细胞凋亡的4条信号通路及凋亡诱导剂和抗凋亡诱导剂的研究进展作一综述。     

血管内皮细胞凋亡研究进展

凋亡诱导剂通过Fas/FasL/caspase途径、Cyt C途径、TNF-α途径及PARP途径等诱导血管内皮细胞凋亡。抗凋亡诱导剂通过干扰细胞凋亡的信号通路来抑制凋亡。中药作为广泛使用的抗凋亡药物在临床上已取得显著成效,但其部分具体的分子机制还不清楚。文章对血管内皮细胞凋亡的4条信号通路及凋亡诱导剂和抗凋亡诱导剂的研究进展作一综述。     

血管内皮细胞凋亡研究进展

血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)是铺陈于血管壁内侧的一种多功能的细胞,对血栓与止血、炎症与免疫和血管新生、物质转运等多种生理、病理过程具有重要的调节功能。当凋亡触发因子作用于VEC时,细胞内出现多种调控基因表达改变、蛋白酶活化等一系列的变化,并出现胞膜泡状突起,染色质浓缩,细胞核裂解以及膜分子结构和功能等的改变,从而参与血栓形成、动脉粥样硬化、高血压等多种病理过程。     

二酰胺对血管内皮细胞凋亡的作用

目的　观察巯基氧化剂二酰胺 (diamide)对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)凋亡的诱导作用。　方法　(1)光镜及电镜观察细胞形态 ;(2 )流式细胞仪分析细胞周期 ,计算凋亡峰值 ;(3)TUNEL原位检测细胞凋亡。　结果　 (1)二酰胺诱导HUVEC出现细胞凋亡的超微结构改变 ;(2 )二酰胺增加HUVEC细胞周期中凋亡峰值 (百分比 )及TUNEL检测阳性率 ;二者呈明显量效关系 (P <0 0 5 )。　结论　二酰胺可诱导内皮细胞凋亡。     

一氧化氮对血管内皮细胞凋亡的影响

目的：研究一氧化氮（NO）对人血管内皮细胞凋亡的影响。方法：TNF－α刺激培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）后，用流氏细胞术Annexin V方法检测细胞凋亡情况，用分光光度法检测细胞上清液中NO水平，结果：低浓度N抑制TNF－α诱导的内皮细胞凋亡，而高浓度NO能促进内皮细胞凋亡，结论：低浓度NO对HUVEC有抗凋亡作用而高浓度NO则有促凋亡作用。     

冠状血管内皮细胞与氧自由基致大鼠心肌损伤关系的研究

为探讨冠状血管内皮细胞在氧自由基致心肌损伤中的作用，采用电解法（恒流，5mA，2min）产生氧自由基（OFR），观察OFR对保留冠状血管内皮及去冠状血管内皮的Langendorff大鼠心脏心率（HR）、心律、冠脉灌注压（CPP）、左室内压峰值（LVSP）及左室舒张末压（LVEDP）、冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）含量、心肌组织中两二醛（MDA）及Na －K ATPase水平的影响。结果：去内皮组CPP、LVEDP、LDH、MDA及心律失常严重指数（ASI）均显著低于冠脉内皮保留组（P＜0．05或P＜0．01），而Na －K ATPase显著高于冠脉内应保留组（P＜0．05）。提示：去冠脉内皮细胞可减轻OFR对心肌的损伤，冠脉内皮至少部分介导OFR对心肌的损伤，亦说明冠脉内皮细胞在心肌损伤中所发挥的重要作用。     

冠脉内皮细胞在电解性氧自由基损伤离体大鼠心脏中的作用

为了探讨冠脉血管内皮细胞在外源性氧自田基致心肌损伤中的作用、本文采用电解法产生氧自由基(OFR)．观察OFR对保留冠脉内皮与去冠脉内皮的Langendorff大鼠心脏的心率(HR)、心律、冠脉灌注压(CPP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张未压(LVEDP)．冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量，心肌组织中丙二醛(MDA)及Na^ -K^ ATPase水平等的影响。结果：去冠脉内皮组的CPP、LVEDP、LDH、MDA及心律失常严重指数(ASl)均显著低于保留内皮组．而Na^ -K^ ATPase与HR则明显高于保留内皮组。两组的LVSP无明显差异。表明：冠脉由皮细胞可能介导OFR对心肌的损伤、去冠脉羽皮细胞可减轻OFR对心肌的损伤．同时提示：冠脉内皮细胞在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要作用。     

As2O3诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与活性氧水平相关

目的 研究三氧化二砷（As2O3)诱导NB4细胞凋亡的周期性选择与细胞 活性氧（reactive oxygen species,ROS)水平的关系。方法 以碘化丙啶（PI）标记DNA,流式细胞仪检测As2O3单独或联用二甲萘醌（DMNQ）作用后细胞周期的变化,以7－氨基放线菌素D（7AAD）标记DNA,双氢罗丹明123（DHR）或双氢－乙酰乙酸二氯荧光黄（DCFH－DA）捕获ROS,流式细胞仪双参数法检测细胞周期不同阶段ROS水平。结果 2μmol/L As2O3可选择性诱导NB4 G2／M期细胞凋亡,DMNQ可增强这一效应;G2／M期细胞ROS水平明显高于G1、S期。结论 As2O3诱导NB4 G2／M期细胞凋亡与G2／M期ROS水平较高相关。As2O3诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与细胞ROS水平有关。     

氧自由基清除剂在严重失血性休克晚期阶段中的作用

将雌性在白兔造成失血性休克晚期模型后，监测血浆丙二醛、血液超氧化物歧化酶活性、酸性磷酸酶、Mg~(2+)和血液乳酸等。观察氧自由基在休克晚期阶段中的作用，并探索9种药物(中药4种，西药5种）的疗效以及其最佳投药条件。实验结果证实:①氧自由基大量增加是导致休克不可逆转的重要原因之一。②9种药物均有抗氧自由基效应，与对照组比较，9种药物有提高失血性休克晚期疗效的作作。中药中以三七、丹参、川芎嗪效果最佳；西药中以山莨菪碱、辅酶Q_(10)、地塞米松作用较佳。③采取联合用药可达到药物减半用量，降低副作用，获得同样效果；并以“经动脉途径，在再灌注前给药，同时灌注携氧平衡盐液的投药方案”疗效最佳。     

参麦注射液对淋巴管内皮细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨参麦注射液对淋巴管内皮细胞（lymphatic endothelial cells,LECs）增殖和凋亡的影响。方法取健康猪的胸导管内皮细胞进行分离、培养;采用Ⅷ因子、血管内皮生长因子受体3（vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3）抗体联合对LECs进行鉴定;采用甲基噻唑基四唑（methyl thia-zolyl tetrazolium,MTT）染色法检测参麦注射液对LECs的生长抑制作用;采用Hoechst 33258荧光染色法检测LECs凋亡。结果形成了典型的LECs;当浓度为40~160μg/ml时,参麦注射液能明显抑制LECs的增殖,且抑制作用呈现剂量依赖关系;Hoechst 33258荧光染色检测证实,经参麦注射液处理后LECs,可观察到其核周围有凋亡小体。结论参麦注射液能抑制淋巴管生成和诱导LECs凋亡。     

冬凌草甲素对多发性骨髓瘤细胞细胞周期和凋亡的影响及其机制研究

目的探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)对人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞的细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响及其涉及机制。方法利用MTT比色法检测Ori对细胞增殖活性的影响;碘化丙啶(PI)单染流式细胞术检测细胞周期;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot技术检测p65核蛋白水平。结果 Ori能明显抑制RPMI 8226细胞增殖,其抑制作用呈时间、剂量依赖性;能同时引起细胞G2/M细胞周期阻滞、细胞凋亡和p65核蛋白水平下降;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)抑制核因子κB(NF-κB)活性后进一步促进了Ori所致的细胞G2/M细胞周期阻滞和凋亡。结论 Ori能明显抑制RPMI 8226细胞增殖,引起G2/M细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,该效应与NF-κB活性抑制相关。     

甲基莲心碱对脂质过氧化和活性氧自由基的作用

用硫代巴比妥酸（TBA）比色法、电子自旋捕集技术、化学发光法及检测苯甲酸──OH．加成物等方法，研究了甲基莲心碱（Nef）清除氧自由基及抗脂质过氧化作用。Nef0.1～5.0μmol／L剂量依赖性地抑制小鼠肝匀浆温孵引起的丙二醛（MDA）升高；Nefl.0μmol／L也有效抑制由乙酸豆寇佛波醇刺激多形核粒细胞产生的化学发光。用核黄素光照法测O_2~-，Nef93.3μmol／L及超氧化物歧化酶10~6U／L对O_2~-的清除率分别为73.6％及72.9％，而对OH的清除效能则为羟自由基清除剂甘露醇的106倍。结果表明，Nef是一有效的植物来源的抗氧化剂。     

Corilagin对HUVEC增殖及细胞周期的影响

目的 研究corilagin对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)损伤人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial ceils,HUVEC)增殖及细胞周期的影响,探索corilagin抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的机理.方法 采用ox-LDL复制HUVEC的损伤模型,MTT法观察Corilagin对ox-LDL损伤HUVEC的保护作用.流式细胞术方法分析Corilagin对ox-LDL损伤HUVEC细胞周期的影响.结果 与模型对照组比较,Corilagin (6.25 μmol/L～ 50 μmol/L),作用12h、24 h、48 h对HUVEC有保护作用(P＜0.05).与模型组比较,corilagin组S期细胞比例增加,G1、G2的变异系数减小,sub-G1减小,其各期细胞分布图趋于正常组的分布比例.结论 Corilagin呈浓度依赖性明显抑制ox-LDL对HUVEC的损伤,其机制可能是通过改善内皮细胞周期的G2/M期阻滞而发挥作用.