硫芥中毒淋巴细胞NO和NOS的变化

硫芥（Ｓｕｌｆｕｒｍｕｓｔａｒｄ）是一种糜烂性化学战剂，至今其中毒机理仍不清楚。淋巴细胞对硫芥非常敏感，是其攻击的靶细胞之一。一氧化氮（ＮＯ）是近年来医学研究的热点分子，具有很多的重要功能。有人报道ＮＯＳ的抑制剂能对抗硫芥的细胞毒性。我们研究中毒后淋巴细胞ＮＯ和ＮＯＳ的变化，旨在寻找评价硫芥的细胞毒性和早期诊断的敏感指标并探讨中毒机理，为进一步研究硫芥中毒的细胞、分子机制和提高防护水平奠定基础。材料和方法：１主要仪器设备：７２１分光光度计，ＵＶ２００紫外检测仪、离心机和细胞培养箱。２主要试…     

乙酰半胱氨酸及还原型谷胱甘肽对抗硫芥引起的细胞凋亡及坏死

本文在细胞水平上研究了 N-乙酰 L-半胱氨酸 ( NAC)及还原型谷胱甘肽 ( GSH)对抗硫芥致细胞坏死及凋亡的效应 .结果表明 :NAC和 GSH均可部分地对抗硫芥 1 0 0 0μmol· L-1引起的细胞坏死 ,可明显提高细胞的存活率 ,二者的有效浓度为0 .1 - 1 0 mmol· L-1. NAC( 5mmol· L-1)和 GSH( 5mmol· L-1)还均可对抗硫芥 ( 1 0 0 μmol·L-1)引起的细胞凋亡 ,使 DNA的降解片段明显减少 .流式细胞术检测表明 ,硫芥 1 0 0 μmol· L-1作用 1 2 h的 Hela细胞凋亡百分率为 37.2 % ,而 NAC和 GSH保护组的细胞凋亡百分率分别为 5.2 % ,8.2 % .谷氨酰胺也有对抗硫芥细胞毒的作用 ,但保护效果不及 NAC和 GSH.     

硫芥对犬外周血淋巴细胞DNA损伤的作用

硫芥是典型的双功能烃化剂 ,进入体内后产生烃化作用 ,攻击的主要靶分子是ＤＮＡ。目前 ,单细胞凝胶电泳(ＳＣＧＥ)技术发展很快 ,国内、外将该法作为ＤＮＡ损伤检测的基本方法之一。先前我们用此法进行硫芥对人外周血淋巴细胞ＤＮＡ损伤的体外实验[1 ] ,本次选用犬外周血淋巴细胞 ,观察体内、外硫芥染毒后ＤＮＡ损伤的剂量效应与时间效应关系 ,为寻找研究硫芥细胞毒性作用及中毒早期敏感的检测方法提供实验依据。1　材料与方法1 1　主要仪器设备　奥林巴斯ＢＸ - 6 0显微镜、目测微尺(日本 )、电泳仪ＤＤＹ Ⅲ 6Ｂ、电泳槽ＤＤＹ Ⅲ 34Ａ…     

硫芥诱导Hela细胞发生凋亡及坏死

目的 研究硫芥诱导的Ｈｅｌａ细胞凋亡的作用。方法 生长在ＤＭＥＭ培养基中的Ｈｅｌａ细胞与不同浓度的硫芥作用３小时,凋亡用电镜,电泳及流式术检测。结果 低浓度硫芥（１μｍｏｌ．Ｌ＾－１）抑制细胞生长;较高浓度（１－１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）俣细胞主要在Ｇ１期阻滞,发生典型的凋亡形态改变,提了细胞ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳,出现“ＤＮＡＬａｄｄｅｒ”,流式术观察表明硫芥处理３小时后,细胞撤药培养１２小时     

芥子气诱导大鼠小肠上皮细胞的凋亡

芥子气是一种双功能烃化剂,易与细胞内ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质等大分子物质起烃化反应,中毒后可以引起机体组织细胞的损伤以至死亡。细胞死亡方式有凋亡和坏死两种,但芥子气引起细胞坏死方式国内外还很少报道。小肠粘膜分裂旺盛的上皮细胞对芥子气较为敏感,致死剂量芥子气中毒动物的死亡高峰出现在中毒后第４,５ｄ,其主要原因是由于肠道严重失水所导致的低血容量性休克所致。本实验以大鼠小肠上皮细胞（ＩＥＣ６）为体外实验细胞模型,研究不同浓度芥子气对ＩＥＣ６细胞生长的影响及其引起的细胞死亡的方式。采用胎盘蓝染色法,发…     

硫芥诱导Hela细胞发生凋亡及坏死(英文)

目的:研究硫芥诱导Hela细胞凋亡的作用,方法:生长在DMEM培养基中的Hela细胞与不同浓度的硫芥作用3小时,凋亡用电镜,电泳及流式术检测.结果:低浓度硫芥(I μmol·L~(-1))抑制细胞生长;较高浓度(1-100 μmol·L~(-1))使细胞主要在G_1期阻滞,发生典型的凋亡形态改变,提取细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳,出现“DNA Ladder”.流式术观察表明硫芥处理3小时后,细胞撤药培养12小时,凋亡率达33％,S期的细胞最敏感,硫芥1000 μmol-L~(-1)使Hela细胞发生明显的坏死,结论:硫芥诱导Hela细胞发生两种不同的损伤:坏死及凋亡,硫芥的细胞毒有浓度依赖性。     

硫芥中毒复合腹部穿透伤的初步实验研究

目的　观察硫芥中毒复合枪弹伤伤情 ,以了解硫芥中毒复合伤伤情特点 ,为临床救治提供帮助。方法　实验兔分中毒复合火器伤组及假手术组。中毒复合伤组 :兔正中切 1～ 2cm小口入腹 ,提起胃窦部缝扎固定于腹壁 ,固定于枪击架上 ,左侧腹部硫芥染毒 5min后 ,5 4式手枪距腹部 2 0cm枪击 ,立即进行中毒急救及手术救治。假手术组 :兔以生理盐水替代硫芥中毒 ,剖腹探查 (进腹 ,不做胃手术 )时间同实验组。 2 4h后观察存活率。结果　假手术组及单纯硫芥中毒组 2 4h死亡率均为 0 %。中毒复合枪伤的手术急救组 2 4h死亡率为 2 5 % ,未进行手术急救的死亡率为 10 0 %。死亡兔为腹腔内出血较多及创伤较重有关。结论　硫芥中毒复合火器伤的救治应在局部消毒、清创的同时以首先抢救火器伤情为主。     

白毒鹅膏菌提取液诱导小鼠肝细胞凋亡的实验研究

随着对细胞死亡生物学行为的进一步认识,凋亡作为细胞死亡的一种形式,被认为与细胞的新陈代谢有关,也是许多疾病的发病机制之一。由于凋亡不同于细胞坏死而引起人们的极大重视,细胞凋亡区别于细胞坏死的特征是质膜保持完整性,核染色质固缩,核DNA降解成寡聚核小体等。肝细胞凋亡在肝病中所起的作用,近年来引起人们相当的重视,白毒鹅膏菌提取液诱导肝细胞凋亡的机制的研究将对肝病中出现的异常肝细胞凋亡和缓解肝细胞的病变提供重要的理论依据。本研究旨在检测白毒鹅膏菌提取液能否诱导肝细胞凋亡以及确定其诱导发生的凋亡是否存在剂量效应,为阐明白毒鹅膏菌中毒机理提供实验依据。     

冠心病铁死亡发病机制及药物干预研究进展

<正>细胞死亡是生命现象的不可逆停止及生命的结束,是组织器官发育和机体维持稳态必须的生理过程。细胞死亡分为细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬三种类型,其中细胞死亡方式研究主要集中在细胞凋亡和细胞坏死。铁死亡(Ferroptosis)是继细胞凋亡之后又一伟大发现,是一种铁依赖性的,区别于细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬的新型细胞程序性死亡方式^[1]。铁死亡主要是通过脂质过氧化驱动并依赖于铁的一种死亡过程,其调节代谢的途径包括氧化还原反应、铁代谢、脂质和糖类的代谢以及氨基酸的代谢^[2]。     

氯苄四氢小檗碱对抗H2O2引起无血清培养的血管内皮细胞凋亡及坏死

目的：研究氯苄四氢小檗碱对过氧化氢（H2O2）引起无血清培养的小牛主动脉血管内皮细胞的凋亡、增殖、坏死的影响。方法：通过体外细胞培养，以噻唑兰（MTT）法测定细胞存活率；用流式细胞术检测细胞DNA含量及凋亡细胞百分率、增殖率；DNA琼脂糖凝胶电泳法观察细胞凋亡过程中DNA断裂程度。结果：H2O2诱导无血清培养的内皮细胞凋亡，氯苄四氢小檗碱可显降低内皮肌细胞中凋亡细胞百分率，并抑制其增殖，也减少凋亡细胞DNA断裂，同时也减少其引起的平滑肌细胞坏死。结论：氯苄四氢小檗碱可对抗H2O2引起的无血清培养的血管平滑肌细胞凋亡、增殖及坏死。     

细胞凋亡在脊髓损伤中的表达及意义

目的：探讨细胞凋亡在脊髓损伤发病机理中的作用。方法：采用Allen氏方法制作大鼠脊髓损伤模型，用HE染色及原位末端标记法，对大鼠脊髓损伤后不同时间脊髓组织中凋亡细胞的数目进行观察和分析，并作正常对照。结果：损伤后灰质和白质均检测到凋亡细胞，细胞凋亡发生在损伤后2h-4周，以3d时达到高峰，至4周时渐趋于正常。结论：大鼠脊髓损伤后神经细胞存在死亡和凋亡两种方式，对研究脊髓损伤的病理生理过程有重要意义。     

硫芥中毒复合四肢火器伤的初步实验研究

目的　通过对硫芥中毒复合枪弹伤伤情观察 ,了解硫芥中毒复合伤伤情特点。方法　动物分为假手术组、中毒组、中毒复合枪伤骨折、中毒复合骨折中毒急救、中毒复合骨折中毒急救及手术救治。将兔四肢关节伸展位固定在架上 ,枪击点位于右大腿中下 1/ 3前外侧 ,皮肤硫芥染毒 5min后 ,枪击造成兔右股骨开放性粉碎性骨折 ,立即进行中毒急救及手术救治。假手术组动物以生理盐水替代硫芥 ,相同部位行假手术 (即切开显露股骨 ,不作骨折固定 )。观察 2 4h存活率及伤情变化。结果　假手术组及单纯中毒组 2 4h死亡率均为 0 % ,中毒复合骨折动物未经救治死亡率为 10 0 % ,经手术急救后死亡率为 2 5 %。死亡兔与创伤重及骨折部位大出血有关。结论　硫芥中毒复合火器伤骨折 ,先挽救危及生命的骨折出血 ,同时洗消解毒     

硫芥诱导小鼠耳郭表皮角质细胞凋亡

目的　利用小鼠耳郭模型研究硫芥对角质细胞增殖动力学的影响 ,以进一步了解表皮干细胞在硫芥皮肤损伤、修复中的作用地位及探索干细胞移植的可行性。方法　固定小鼠后取 5 μL不同浓度(32 ,16 0 ,32 0g·L- 1)硫芥均匀涂抹于耳郭内表面 ,分别于 12 ,2 4 ,4 8,72 ,12 0和 16 8h后急性分离细胞。在无菌条件下取耳郭皮肤组织 ,分离内外侧皮肤 ,小心剥离内侧软骨 ,用胰蛋白酶消化皮肤 ,使表皮与真皮分离 ,进一步用胰蛋白酶消化表皮成单个细胞。采用PI染色流式细胞术观察不同剂量、不同时间细胞的凋亡率 ;PI并Hoechst33342双染活细胞Confocal观察细胞核形态变化 ;琼脂糖凝胶电泳的方法检测生化改变。结果　 32 0g·L- 1染毒 3h后肉眼可见小鼠耳郭充血、水肿和红斑 ,随着时间的延长还可看到糜烂、化脓、结痂、坏死等变化。 16 0及 32 0g·L- 1不同浓度染毒后在 72h细胞均发生了明显的凋亡 ,并呈现出一定的剂量效应和时间效应关系。凋亡的发生需要一定的时间 ,72h凋亡率达到了峰值 ,并且S期细胞对硫芥尤为敏感。同时Confocal显示细胞核染色质呈高凝集的点状结构、琼脂糖凝胶电泳DNA呈典型的梯型条带。结论　硫芥可引起表皮细胞凋亡 ,促进细胞的终末分化     

心血管疾病与细胞凋亡

细胞凋亡(apoptosis)是指细胞在某些生理或病理情况下发生的有序的主动性死亡,又称程序化死亡(programmedcelldeath)。细胞凋亡是人体组织细胞普遍存在的一种生理现象。某些致病因子可使细胞凋亡发生异常,从而破坏了机体细胞的自稳态而表现为疾病的发生。细胞凋亡的异常在心血管疾病中也有重要的作用。1细胞凋亡的形态学特征、发生机制及调控1972年,Kerr等提出细胞凋亡的概念,以区别于细胞坏死(necrosis)的死亡过程。细胞坏死是指病理刺激导致的被动性细胞死亡,其过程无基因调控参与,受累细胞成灶状。而凋亡是局部环境生理或病理刺激引起的…     

硫芥所致犬血淋巴细胞DNA损伤的图像分析与评价

目的　利用图像分析系统对硫芥引起的犬外周血淋巴细胞DNA损伤进行分析和评价。方法分离比格犬外周血淋巴细胞 ,设阴性对照、阳性对照(10 0 μmol·L- 1H2 O2 )、溶剂对照 (3.5 %丙二醇 )、硫芥中毒 (1,10 ,10 0和 10 0 0 μmol·L- 1)共 7组 ,在37℃作用 1h ,应用单细胞凝胶电泳 (SCGE)及其图像分析系统进行淋巴细胞DNA损伤的图像分析 ,所用参数为彗星长、尾长、尾部DNA百分含量、Olive尾矩和尾长 /头长。结果　硫芥引起的淋巴细胞DNA损伤呈现出明显的剂量效应关系 ,其中彗星长、尾长和尾部DNA百分含量从 10 μmol·L- 1硫芥中毒组开始即显著高于溶剂对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,Olive尾矩和尾长 /头长从 10 0 μmol·L- 1硫芥中毒组开始非常显著地高于溶剂对照组(P <0 .0 1)。结论　SCGE图像分析系统可较好地用于犬外周血淋巴细胞DNA损伤的分析和评价。     

转化生长因子β1诱发人肝癌细胞凋亡的形态学研究

为了进一步研究ｒｈＴＧＦ－β１抑制人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１增殖的作用机理,应用光镜、电镜观察ｒｈＴＧＦ－β１抑制人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１增殖的形态学改变。结果显示：经ｒｈＴＧＦ－β１１０ｎｇ／ｍｌ作用９６小时后,ＳＭＭＣ－７７２１细胞出现曲型的凋亡形态。相差显微镜下表现为细胞变圆、体积缩小;ＨＥ染色可见核固缩;荧光显微镜观察凋亡细胞多为核亮染呈致密斑块;电镜下可见由膜包裹内容物的凋亡小体。结果证实：ｒｈＴＧＦ－β１具有诱发肝癌人细胞ＳＭＭＣ－７７２１凋亡的作用     

云芝糖肽对大鼠下丘脑内侧基底部电活动和免疫功能的影响

目的：探讨云芝糖肽（ＰＳＰ）免疫增强的作用物神经机制。方法：用Ｗｉｓｔａｒ大鼠细胞外记录下丘脑内侧基底部（ＭＢＨ）神经元的单位放电，并检测淋巴细胞的增殖作用，结果：给大鼠灌骨ＰＳＰ１ｇ．ｋｇ＾－１，连续５天，使脾脏Ｔ淋巴细胞增加，并引起脾脏和外周血中Ｔ淋巴细胞的明显增殖，损毁ＭＢＨ能阻断这种增殖作用，ＰＳＰ使ＭＢＨ神经元的放电频率增加，加免疫抑制剂环孢菌素Ａ能去除这种作用，结论：神经系统（主要是Ｍ     

云芝糖肽对大鼠下丘脑内侧基底部电活动和免疫功能的影响

目的：探讨云芝糖肽（ＰＳＰ）免疫增强作用的神经机制．方法：用Ｗｉｓｔａｒ大鼠细胞外记录下丘脑内侧基底部（ＭＢＨ）神经元的单位放电，并检测淋巴细胞的增殖作用．结果：给大鼠灌胃ＰＳＰ１ｇ·ｋｇ－１，连续５天，使脾脏Ｔ淋巴细胞增加，并引起脾脏和外周血中Ｔ淋巴细胞的明显增殖．损毁ＭＢＨ能阻断这种增殖作用．ＰＳＰ使ＭＢＨ神经元的放电频率增加，加免疫抑制剂环孢菌素Ａ能去除这种作用．结论：神经系统（主要是ＭＢＨ）参与ＰＳＰ的免疫增强作用．     

烟酰胺治疗大鼠硫芥中毒的实验评价

目的　为评价多 (ADP核糖 )聚合酶 (PAD PRP)抑制剂烟酰胺 (尼克酰胺 )对SD大鼠硫芥全身中毒的治疗效果。方法　雄性SD大鼠 30只 ,体重190～ 2 30g ,分为正常对照组、中毒对照组和烟酰胺治疗组。 4mg·kg- 1硫芥中毒。中毒对照组和烟酰胺治疗组动物腰背部皮下注射硫芥 ,正常对照组给予等容量的丙二醇。中毒后 0 .5hip 5 0mg·kg- 1烟酰胺 ,每日 1次 ,连续 8d。实验动物在中毒前测 1次体重 ,以后每天定时测 1次。观察动物食欲及腹泻情况 ,记录动物死亡时间。中毒后d 4 ,d 8各测 1次血常规 ,d 8全部活杀 ,取胫骨上段做骨髓涂片 ,重点观察骨髓的细胞学分类及增生程度。结果　①中毒对照组腹泻率为 70 % ,但未见死亡 ;烟酰胺治疗组的腹泻率为 80 % ,并且在d 5出现动物死亡 ,死亡率为 10 % ,但统计学上均无显著差异。中毒对照组和治疗组动物之间体重变化无明显差异 ,而与正常对照组相比自中毒后d 3起均明显下降。②血常规变化 ,中毒后d 4 ,治疗组与中毒对照组相比 ,结果均无显著差异 ,但这两组与正常对照组相比 ,白细胞总数 (WBC)、淋巴细胞分类 (LYM )、粒细胞分类(GRAN)和血小板总数 (PLT)均明显下降 ,尤其以WBC ,LYM和GRAN为显著 ,而红细胞总数 (RBC)和血红蛋白量 (HGB)均无显著变化。中毒后d 8,治疗组与?     

Prophylactic effect of methylene blue against neurotoxicity of sodium nitroprusside

目的：测定硝普钠（ＳＮＰ）及环鸟苷酸（ｃＧＭＰ）对培养的小脑神经原的细胞毒性和亚甲蓝（ＭＢ）对其小鼠毒性的预防作用．方法：用Ｄｅｓｉ法测定ＳＮＰ和ｃＧＭＰ的小鼠小脑神经细胞毒性．测定ｉｃｖＳＮＰ的小鼠惊厥发生率和２４ｈ死亡率及ＭＢ对其毒性的预防作用．结果：给予ＳＮＰ１ｍｍｏｌ·Ｌ－１１０ｍｉｎ细胞存活率由对照组９２％降至３５％．ｃＧＭＰ０１ｍｍｏｌ·Ｌ－１作用１ｈ，细胞存活率由９４％降至４０％．ＳＮＰ２０ｎｍｏｌｉｃｖ使１／１０小鼠在２４ｈ内死亡，３０ｎｍｏｌ使１１／１３小鼠死亡．ＭＢ１００ｎｍｏｌｉｃｖ可预防１１／１３的ＳＮＰ中毒（３０ｎｍｏｌ，ｉｃｖ）小鼠发生惊厥及死亡，可完全消除ＳＮＰ２０ｎｍｏｌ的中毒效应．结论：ＳＮＰ和ｃＧＭＰ对小鼠小脑神经细胞有细胞毒性．亚甲蓝明显对抗ｉｃｖＳＮＰ小鼠的惊厥和死亡