RNA干扰CXCR7基因对结肠癌SW1116细胞增殖及迁移的影响

目的:探讨趋化因子受体7(chemokine receptor 7,CXCR7)基因沉默对结肠癌细胞株SW1116增殖和迁移能力的影响。方法:采用脂质体转染的方法将CXCR7基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转入人结肠癌SW1116细胞中,随后采用RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测CXCR7mRNA和蛋白在SW1116细胞中的表达水平;采用CCK-8法检测对细胞增殖抑制率的影响;Transwell小室法检测干扰前后对细胞迁移能力的影响。结果:CXCR7-siRNA转染SW1116细胞24h后,CXCR7-siRNA干扰组SW1116细胞中CXCR7mRNA相对表达量为0.275±0.018,与空白对照组的0.635±0.024相比,mRNA表达抑制率为(56.6±3.8);转染48h后,CXCR7-siRNA干扰组的SW1116细胞中CXCR7蛋白的表达水平明显低于Negative-siRNA组和空白对照组(P<0.05);CXCR7-siRNA组的SW1116细胞增殖力在转染48、72、96和120h后明显低于阴性转染对照组和空白对照组(P<0.05);CXCR7-siRNA干扰组SW1116细胞穿过聚碳酸酯膜的细胞数为(22.73±2.01)个,明显少于阴性转染对照组的(49.20±3.82)个和空白对照组的(54.80±4.85)个(P<0.05)。结论:siRNA干扰下调CXCR7基因表达能抑制结肠癌细胞SW1116的增殖和迁移能力。     

shRNA干扰BAMBI 基因对人结肠癌SW480 细胞恶性生物学行为的影响

[摘要] 目的: 探讨shRNA 干扰骨形成蛋白和激活素的穿膜抑制剂(bone orphogenetic protein and activin membrane bound inhibitor, BAMBI)基因对人结肠癌SW480 细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法: 转染SW480 细胞sh-BAMBI成功后,实时定量PCR（qRT-PCR)和Western blotting 检测BAMBI mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测SW480 细胞增殖能力,Hoechst33258 染色检测细胞凋亡情况,Transwell 实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测SW480 细胞迁移能力,Western blotting检测TGF-β/Smad2 通路相关蛋白的表达水平。结果: 转染成功后sh-BAMBI组中BAMBI的mRNA和蛋白水平均低于对照组(P<0.05);与对照组相比,sh-BAMBI 组细胞增殖率明显降低(P<0.05)、细胞凋亡率显著升高(P<0.01),同时其侵袭和迁移能力明显减弱(均P<0.05)。sh-BAMBI组TGF-β 蛋白水平和p-Smad2/Smad2 比值明显高于对照组(P<0.05)。结论: shRNA干扰BAMBI可诱导人结肠癌SW480 细胞凋亡并抑制细胞增殖、侵袭和迁移,其机制可能与激活TGFβ/Smad2 通路有关。     

前列腺素E2对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响

目的 研究前列腺素E2(PGE2)对结肠癌SW480细胞黏附、迁移、侵袭能力的影响及其可能的分子机制.方法 分别使用外源性PGE2及其受体EP1的拮抗剂SC19220作用于SW480细胞后,MTr法测定肿瘤细胞黏附能力,transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力,RT-PCR及Western blotting检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白水平的改变.结果 外源性PGE2可以显著增加SW480细胞黏附、迁移及侵袭能力,PGE2作用于细胞后,黏附细胞A值由0.207±0.009增加至0.417±0.088,迁移细胞由6.33±0.33增加至43.33±0.88,侵袭细胞由3.67±0.34增加至26.33±0.89,差异均有统计学意义(P＜0.05).SC19220可抑制PGE2所诱导的SW480细胞黏附、迁移及侵袭,PGE2+SC19220组与PGE2组相比,黏附细胞A值由0.417±0.088下降至0.140±0.006,迁移细胞由43.33±0.88下降至28.00±0.58,侵袭细胞由26.33±0.89下降至5.67±0.33,差异均有统计学差异(P＜0.05).RT-PCR及Western blotting检测结果显示,PGE2作用后SW480细胞VEGFmRNA及蛋白水平表达增强,且表达量与PGE2浓度呈正相关.结论 PGE2可显著增加SW480细胞黏附、迁移及侵袭能力,其作用过程可能与VEGF表达上调相关.     

磷脂酶Cε1的过表达可抑制结肠癌SW6 20细胞的迁移并诱导其凋亡

目的:探讨磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1,PLCE1)基因过表达对结肠癌细胞迁移、细胞周期及凋亡等生物学特性的影响。方法:采用脂质体转染的方法建立PLCE1过表达的SW620细胞株,实验分为3组:亲本细胞组(未转染基因),对照组[转染含绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein,GFP)的空质粒],实验组(转染质粒pcDNA-DEST53-PLCE1)。分别采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQPCR)和蛋白质印迹法检测PLCE1 mRNA和蛋白在SW620细胞中的表达;Transwell小室法检测PLCE1过表达对SW620细胞迁移能力的影响,FCM法检测对细胞周期及凋亡率的影响,DNA Ladder法检测对细胞凋亡的影响。结果:PLCE1过表达可抑制结肠癌SW620细胞的迁移能力,实验组迁移细胞数为(8.80±1.72)个,而亲本组和对照组分别为(32.6±2.42)和(32.2±3.25)个,3组间差异有统计学意义(P<0.01)。PLCE1过表达可导致结肠癌细胞周期G1期延长,并出现凋亡。结论:PLCE1过表达可抑制结肠癌细胞的迁移能力,并引起细胞凋亡。PLCE1基因过表达使SW620结肠癌细胞恶性程度降低,该基因可能是新的结肠癌相关抑癌基因。     

上调Twist基因对人结肠癌SW480细胞增殖凋亡及侵袭能力的影响

目的:上调人结肠癌SW480细胞株中Twist基因的表达,观察其对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法:将高表达Twist基因的质粒和空载质粒稳定转染SW480细胞,分别命名为转染组和对照组,MTT法、细胞划痕实验和Matrige1侵袭实验分别检测肿瘤细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的变化。FCM检测细胞周期及凋亡情况。将肿瘤细胞接种至裸鼠皮下,对比转染前后肿瘤细胞的成瘤情况。结果:从第4天开始,转染组SW480细胞生长速度明显高于对照组(P<0.05):转染组SW480细胞的增殖指数(PI)和S期细胞比例[(61.279±1.709)%,(33.171±3.154)%]均高于对照组[(26.142±1.518)%,(14.112±2.137)%](P<0.05);转染组的细胞凋亡率(6.83I±1.624)%低于对照组(12.223±1.733)%(P<0.05);划痕24 h及48 h时后转染组细胞迁移率[(40.06±5.56)%,(75.77±8.06)%]均高于对照组[(25.25±2.65)%,(35.37±6.79)%](P<0.05);Matrige1侵袭实验结果显示转染组侵袭细胞个数明显高于对照组(p<0.05);将两组细胞分别接种裸鼠,16 d左右可见肿瘤结节,转染组肿瘤体积及瘤重均大于对照组(P<0.05)。结论:上调Twist基因可提高SW480细胞体外增殖、迁移和侵袭能力,降低SW480细胞凋亡率。     

Id1 和Id3 协同诱导结肠癌SW620 细胞EMT并影响其侵袭与迁移

目的：探讨分化抑制因子1 基因（inhibitor of differentiation-1, Id1）和Id3 是否协同促进结肠癌SW620 细胞EMT和细胞的侵袭迁移能力及其可能的机制。方法：利用慢病毒载体构建Idl 和Id3 单或双基因敲减的结肠癌SW620 细胞,实验分为4组：SW620-Sh-Id1 组（转染shRNA-Id1）、SW620-Sh-Id3 组（转染shRNA-Id3）、SW620-Sh-Id1-Id3 组（共转染shRNA-Id1 和shRNAId3）、SW620-NC组（转染阴性空载慢病毒）。用qPCR 法和Western blotting 法分别检测敲减效果,显微镜下观察稳定下调Idl 和Id3 后SW620 细胞形态的变化,划痕愈合实验和Transwell 小室法检测SW620 细胞迁移和侵袭的变化,Western blotting 检测EMT标志分子及迁移、侵袭相关蛋白的表达。结果：成功构建了Idl 和Id3 单基因敲减与双基因敲减的结肠癌SW620 细胞株。（1）Idl和Id3 的敲除诱导SW620 细胞形态由上皮样向间质样转变;（2）与对照组相比,SW620-Sh-Id1 组和SW620-Sh-Id3 组SW620 细胞侵袭和迁移的能力显著下降(均P<0.05);SW620-Sh-Id1-Id3 组细胞侵袭和迁移的能力较SW620-Sh-Id1 组和SW620-Sh-Id3 组也明显下降(均P<0.05);（3）与对照组相比,SW620-Sh-Id1 组和SW620-Sh-Id3 组β-catenin、snail1 及MMP2 蛋白表达降低,上皮黏蛋白及TIMP2 蛋白表达增高(均P<0.05);SW620-Sh-Id1-Id3 组与SW620-Sh-Id1 组和SW620-Sh-Id3 组相比,β-catenin、snail1 及MMP2蛋白表达也下降,同时上皮钙黏蛋白及TIMP2 蛋白表达也增高(均P<0.05)。结论：Id1 和Id3 可能通过诱导EMT协同影响结肠癌SW620 细胞侵袭与迁移的能力。     

下调S100A2表达对结肠癌细胞增殖、侵袭迁移和Wnt信号通路的影响

目的 探讨S100钙结合蛋白A2(S100A2)在结肠癌增殖和侵袭迁移中的作用及可能机制。方法 通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测S100A2在结肠癌组织和细胞系中的表达情况。选择SW480细胞并分为3组：对照组、siRNA-NC组(阴性对照)和siRNA-S100A2组(下调S100A2表达)。采用MTT、划痕实验和Transwell小室实验探究S100A2在结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移过程中的作用,qPCR和Western blotting检测干扰S100A2对Wnt1/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。结果 与癌旁组织(1.00±0.05)或正常结肠上皮细胞株NCM460(1.00±0.07)比较,S100A2在结肠癌组织(1.66±0.07)和细胞SW620(1.38±0.10)、HT29(1.62±0.13)、LoVo(1.94±0.14)和SW480(2.03±0.08)中均高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA-S100A2组的细胞活力及Wnt1、β-catenin和基质金属蛋白酶7水平低于对照组和siRNA-NC组(P<0.0...     

人胎盘提取物抑制结肠癌细胞的增殖及迁移

目的:探讨人胎盘提取物(human placenta extracts,HPE)对人结肠癌细胞株Caco-2及SW480增殖和迁移能力的影响.方法:用不同质量浓度HPE处理Caco-2和SW480细胞,CCK-8、Ki-67、CFSE法检测细胞增殖活性的变化,Annexin-V/PI及DAPI细胞核染色检测HPE对细胞周期及凋亡的影响,实时荧光定量PCR法检测HPE对细胞中BAX、CDK2及CyclinA2基因表达的影响,划痕实验检测对细胞迁移能力的影响.建立裸鼠结肠癌移植瘤模型,随机分组分别单独或联合给予HPE和5-氟尿嘧啶(5-Fu),观察裸鼠移植瘤的生长状况.结果:HPE处理组Caco-2及SW480细胞增殖能力低于对照组[(0.82±0.01) vs (0.96±0.02),P＜0.01;(0.90±0.03) vs (0.96±0.02),P＜0.05],细胞凋亡率高于对照组[(20.47±1.32)％ vs(11.01±3.82)％,P＜0.01;(20.70±5.19)％ vs (8.00±2.69)％,P＜0.05];HPE处理组细胞胞质减少、核固缩、BAX基因表达增加[(3.23±1.90)vs(1.00±0.00),(2.25 ±0.55) vs (1.00±0.00),均P＜0.05];细胞停留在细胞DNA复制S期,出现凋亡峰;Caco-2细胞CDK2及CyclinA2基因表达降低(P＜0.05);并且细胞的迁移能力低于对照组[(0.17 ±0.29) vs (1.50±0.50)mm,P＜0.05].HPE处理组裸鼠移植瘤体积小于对照组、生存率高于单用5-Fu组(P＜0.05).结论:HPE在体内外通过干预结肠癌细胞凋亡、阻滞细胞周期、抑制细胞增殖及迁移,可能对抑制肿瘤细胞增殖有一定作用.     

脂质体介导CXCR4 RNA干扰对结肠癌细胞SW480迁移与侵袭影响的研究

目的:探讨CXCR4 RNA 干扰对结肠癌细胞株SW480 CXCR4 mRNA和CXCR4蛋白凋亡、迁移和侵袭能力的影响.方法:采用脂质体转导CXCR4 RNA干扰序列sihCXCR4-3,RT-PCR检测CXCR4 mRNA相对含量,蛋白质印迹法检测CXCR4蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室评价SW480细胞迁移与侵袭能力.结果:sih-CXCR4-3组CXCR4 mRNA的抑制率为81.40％,CXCR4蛋白相对含量为9.62％.早期凋亡率各组间均无差别,晚期凋亡率sihCXCR4-3组为(7.62±0.88)％,高于SW480细胞组(6.41士0 26)％,P=0.0451.迁移实验显示,sihCXCR4-3组平均细胞数为84.25±22.46,低于SW480组(154.63±44.53,P=0.002 6)与NCsihCXCR4组(110.63+ 20.16,P=0.026 6).侵袭实验发现,sihCXCR4-3组平均细胞数为0,低于SW480组(294.43±70.10,P=0.000 0)与NCsihCXCR4(201.43±54.41,P=0.000 0).结论:CXCR4 RNA干扰抑制SW480细胞CXCR4基因与蛋白表达,促进凋亡,降低迁移和侵袭能力.     

Rac1活化在大肠癌细胞SW480迁移侵袭中的作用

目的研究Racl的活化在大肠癌迁移侵袭中的作用。方法对大肠癌SW480细胞株,分别导入活化的Rac1 L61重组体和对照用质粒;采用配体结合免疫共沉淀法通过Western blot检测细胞中活化Rac1的含量,进一步用。Transwell小室研究具有不同活性Rac1的SW480细胞其迁移及侵袭能力。结果SW480细胞的转染效率高达80%以上,配体结合免疫共沉淀结果显示,转染Rac1 L61重组体后Rac1的活性显著高于对照组;应用Transwell小室对SW480细胞迁移及侵袭能力研究时,发现Rac1活性高的实验组迁移及侵袭的细胞数显著高于对照组(迁移细胞数43±9:22±5, P<0.01;侵袭细胞数73±13:38±1,P<0.01)。结论Rac1的活化在大肠癌迁移侵袭中起重要的作用。     

肝窦内皮细胞与结肠癌细胞相互作用促进肝转移的影响

目的:探讨结肠癌细胞和肝窦内皮细胞共培养对结肠癌细胞功能以及肝转移能力的影响,为结肠癌肝转移机制的研究提供一种基本实验材料.方法:体外将人肝窦内皮细胞和结肠癌细胞进行共培养21轮,采用Transwell法、明胶酶谱分析、CCK-8法、集落形成实验检测共培养后结肠癌细胞SW1116P21体外侵袭、增殖、克隆形成能力;采用皮下成瘤实验以及实验性肝转移实验检测SW1116P21皮下成瘤以及肝转移的影响;Western blot的方法检测相关分子的改变.结果:共培养后的结肠癌细胞SW1116P21的细胞间界限明显.侵袭检测发现,SW1116P21细胞的侵袭能力较SW1116亲本细胞提高了2倍;明胶酶谱分析检测发现,SW1116P21分泌MMP-2/9的能力显著高于亲本细胞.皮下成瘤实验发现,SW1116P21皮下成瘤能力显著增强.实验性肝转移发现,SW1116P21肝转移能力显著高于SW1116细胞.Western blot检测发现SW1116P21细胞表达E-cadherin显著下调,vimentin表达上调.结论:结肠癌细胞和肝窦内皮细胞相互作用可促进瘤细胞侵袭、增殖、克隆形成以及体内细胞生长,更易发生肝转移,这种影响是与内皮细胞相互作用后结肠癌细胞发生EMT有关.     

多烯紫杉醇诱导的卵巢癌SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖、迁移和凋亡的特性研究

目的:探讨多烯紫杉醇（Docetaxel,Doc）诱导的卵巢癌SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖、迁移和凋亡的特性。方法:0.8 μmol/L Doc处理SK-OV-3细胞16 h,更换为完全培养液继续培养细胞至第3天和第5天。免疫荧光染色法观察细胞形态和增殖,流式细胞术检测细胞倍性、周期和凋亡,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:Doc处理后SK-OV-3细胞体积变大,细胞核增多,细胞增殖能力降低。Doc（3 day）组和Doc（5 day）组多倍体细胞（>4 N）百分比高于对照组（P＜0.01）。Doc诱导Doc（16 h）组发生细胞周期阻滞。Doc（5 day）组细胞迁移能力低于对照组（P＜0.01）。Doc（3 day）组和Doc（5 day）组早期凋亡细胞百分比高于对照组（P＜0.05）。Doc（16 h）组、Doc（3 day）组和Doc（5 day）组促凋亡蛋白表达逐渐上调,抗凋亡蛋白表达下调。结论:Doc诱导卵巢癌SK-OV-3细胞形成多倍体肿瘤巨细胞,SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖和迁移能力降低,早期凋亡增加,这为探索多倍体肿瘤巨细胞特性提供了研究基础。     

miRNA-186-3p对子宫颈癌CaSki细胞功能影响及与转化生长因子β-Smad信号通路关系的研究

目的探讨miRNA-186-3p(miR-186-3p)对子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭的影响及与转化生长因子β(TGF-β)-Smad信号通路的关系。方法将载有miR-186-3p抑制基因、miR-186-3p模拟物的质粒分别转染至子宫颈癌CaSki细胞, 分别为miR-186-3p-I组、miR-186-3p-M组;另将转染空载质粒的CaSki细胞作为对照, 为miR-186-3p-C组。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率, 采用Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力;采用蛋白质印迹法检测各组细胞TGF-β-Smad信号通路相关蛋白表达水平;采用Starbase软件预测miR-186-3p靶基因, 并用双荧光素酶报告基因实验进行验证。结果 miR-186-3p-M组细胞凋亡率均低于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[(7.5±3.2)%比(13.9±0.7)%、(12.7±0.6)%, 均P<0.05]。miR-186-3p-M组迁移细胞数[(218±25)个比(168±13)个、(175±13)个, 均P<0.001]和侵袭细胞数均多...     

IL-17A通过NF-κB通路介导MMP-2/9表达促进结肠癌SW480细胞迁移和侵袭

目的:探讨IL-17A对结肠癌细胞株SW480侵袭、迁移的作用及其机制.方法:体外培养结肠癌SW480细胞,分为实验组(IL-17A50 ng/ml)及对照组(空白组).通过细胞划痕实验观察细胞的迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力,Western blotting检测细胞MMP-2/9蛋白及PI3k/AKT/NF-κB通路相关蛋白的表达水平.结果:经50 ng/ml的IL-17A处理后,(1)SW480细胞的迁移距离及穿膜细胞数目均明显增加[(2.49±0.18) vs (1.54±0.21) mm及(262.00±24.60)vs (92.00 ±31.16)个,均P＜0.05];(2) SW480细胞MMP-2/9蛋白水平明显上调[(0.41 ±0.05) vs (0.23 ±0.03)及(0.76±0.09) vs (0.25±0.04),均P＜0.05];(3) SW480细胞AKT磷酸化水平表达增加[(0.72±0.1)vs(0.28±0.04),P＜0.05],P65和P50蛋白表达水平明显升高[(0.78 ±0.10) vs (0.35 ±0.04)和(0.85±0.15) vs (0.44±0.06),均P＜0.05],而c-Rel、ReLB和P52蛋白表达无明显变化(P＞0.05).结论:IL-17A诱导结肠癌SW480细胞迁移和侵袭,其机制可能与激活PI3K/AKT/NF-κB转导通路、调节MMP-2/9蛋白表达有关.     

绿原酸通过抑制PI3K-Akt信号通路诱导肺癌A549细胞线粒体功能障碍

目的探讨绿原酸能否通过作用于PI3K-Akt信号通路造成线粒体功能障碍, 从而抑制肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和促进其凋亡。方法采用梯度浓度(0、25、50、100、150、200 μg/ml)的绿原酸干预A549细胞48 h, CCK-8实验检测细胞增殖率并计算半抑制浓度(IC50)。将A549细胞分成空白组、绿原酸组(IC50)和绿原酸+740YP组(IC50绿原酸+50 μg/ml 740YP), 干预48 h后使用细胞划痕实验检测细胞迁移距离, 细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力, 流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡水平与线粒体膜电位变化情况, 酶联免疫吸附试验检测细胞上清丙二醛(MDA)含量, 蛋白质印迹法检测细胞中p-PI3K、p-Akt和Caspase3蛋白表达情况。结果绿原酸对A549细胞的IC50为57.45 μg/ml。细胞划痕实验结果显示, 空白组、绿原酸组和绿原酸+740YP组细胞48 h迁移距离分别为(424.80±14.43)、(289.67±18.93)和(402.22±17.99)μm, 细胞侵袭实验结果显示, 3组细胞48 h侵袭细胞数量分别为(96.00...     

鞘氨醇激酶1促进SW480细胞迁移机制探讨

目的 鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,SK1)具有调控细胞迁移的重要作用,丝/苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,AKT)参与其调控过程.本研究旨在探讨SK1对结肠癌细胞株SW480迁移和侵袭的影响及与AKT信号通路的关系.方法 以不同浓度12-豆蔻酸-13-乙酸佛波醇(phorbol 12-myristate-13-acetate,PMA)干预SW480细胞,观察细胞SK1、p-AKT基因和蛋白表达水平变化情况.采用Ttranswell法观察PMA和AKT抑制剂对SW480细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 CCK8实验显示,25、50、100 nmol/L PMA刺激的SW480细胞培养液吸光度(A)值分别为0.780±0.030、0.844±0.057和0.998±0.045,与空白对照组(A值0.631±0.051)比较均明显增加,F=93.48,P＜0.001;PMA可诱导细胞内SK1基因和蛋白表达水平明显增高;Transwell实验结果显示,100 nmol/L PMA增强SW480细胞迁移和侵袭(分别为169.8±10.82和89.6±8.44),较对照组(分别为63.6±8.67和39.6±6.12)明显增加,而AKT抑制剂AKTi1/2可减少PMA诱导的迁移和侵袭SW480细胞数量(分别为91.8±9.36和57.2±8.98);PMA增强SW480细胞SK1表达同时促进AKT蛋白磷酸化水平,而AKTi1/2可拮抗PMA的作用.结论 SK1可促进SW480细胞的迁移和侵袭能力,其机制与上调AKT信号通路有关.     

阿苯达唑抑制结肠癌SW480细胞的侵袭和迁移能力及其可能的机制

目的：探索阿苯达唑（albendazole）抑制结肠癌SW480细胞侵袭和迁移能力及其可能的机制。方法：体外培养人结肠癌SW480细胞,用不同质量浓度(0、1.0和2.0 mg/ml)的albendazole处理人结肠癌SW480细胞,CCK-8法检测albendazole对结肠癌SW480细胞增殖能力的影响,采用细胞划痕实验、Transwell小室实验检测细胞的迁移侵袭能力,免疫细胞化学及Western blotting检测SW480细胞中E-cadherin、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平。结果：与空白对照组比较,albendazole各质量浓度（1.0和2.0 mg/ml）组细胞的增殖能力明显降低,SW480细胞侵袭细胞数显著下降\[ （51.33±3.96）、（23.42±403）vs （80.76±7.18）个/视野,F=3.975, P=0.026\];而且细胞迁移能力显著下降\[（9.6±1.13）、（6.4±0.81）vs （19.6±1.41） mm;F=5.012, P=0.023\];E-cadherin蛋白表达水平上调,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平明显下调。结论：Albendazole能显著抑制SW480细胞增殖,并通过上调E-cadherin的表达水平和下调MMP-2和MMP-9的分泌水平抑制细胞的侵袭和迁移能力。     

NDRG2基因对结肠癌细胞SW620增殖和侵袭力的影响

目的 观察N-myc下游调节基因2(NDRG2)对结肠癌细胞SW620生长和侵袭能力的影响,并探讨其机制.方法 采用阳离子脂质体转染方法,分别将pcDNA3.1-NDRG2和siRNA-NDRG2转染入SW620细胞内,以空白组作为对照.Western blotting检测各组细胞NDRG2以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达情况;细胞侵袭试验对各组细胞侵袭能力进行分析;四甲基偶氮唑蓝法对各组细胞生长曲线进行测定.结果 pcDNA3.1-NDRG2转染入SW620细胞后,NDRG2蛋白表达升高,而MMP-2蛋白表达降低;siRNA-NDRG2转染入SW620细胞后,NDRG2蛋白表达降低,而MMP-2蛋白表达升高.pcDNA3.1组的穿膜细胞数(56.20±7.40)及siRNA组穿膜细胞数(94.20 ±9.23)分别与对照组(75.80 ±4.82)相比,差异具有统计学意义(t=13.102,P=0.000;t=11.820,P=0.000).生长曲线显示,转染后第5天,pcDNA3.1组细胞吸光度值(0.46 ±0.01)及siRNA组细胞吸光度值(0.91 ±0.02)分别与对照组(0.67 ±0.01)相比,差异具有统计学意义(t=9.561,P=0.000;t=10.922,P=0.000).结论 NDRG2能降低结肠癌细胞SW620的侵袭和增殖能力,其机制可能与下调MMP-2的表达有关.     

miR-34a对结肠癌细胞SW480增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制探讨

目的 探讨miR-34a对结肠癌细胞株SW480增殖、侵袭和迁移能力的影响及可能的作用机制。方法将miR-34a过表达慢病毒、空病毒载体转染SW480细胞,未做处理细胞作为空白对照组。Real-time PCR检测各组细胞内miR-34a的表达;CCK8法检测细胞增殖能力;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot实验检测细胞内E-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果 与空病毒载体组及空白对照组相比,转染组细胞中miR-34a的表达增高,且细胞增殖效率、侵袭和迁移能力降低(P＜0.05),miR-34a使E-cadherin蛋白表达增加、Vimentin蛋白表达降低。结论 miR-34a可抑制结肠癌细胞SW480增殖、侵袭和迁移能力,并能影响E-cadherin和Vimentin的表达,miR-34a有望成为干预结肠癌转移和复发的分子靶点。     

siRNA干扰Id-1表达对人结肠癌SW480细胞株生长与侵袭能力影响研究

目的 DNA结合分化抑制因子-1(inhibitor-1 0f DNA binding/differentiation-1,Id-1)对结肠肿瘤细胞侵袭行为影响的研究较少,本研究探讨siRNA转染下调Id-1表达对人结肠癌SW480细胞侵袭和转移行为的影响.方法 将合成Id-1干扰序列(siRNA)转染至SW480细胞作为实验组(抑制组),并以Id 1表达干扰空白组、空载体组作为对照,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞中Id-1和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein,MMP-9)的表达情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖能力;划痕损伤实验、Transwell小室和Matrigel侵袭模型评价Id-1对细胞侵袭和转移能力的影响.结果 抑制组Id-1 mRNA表达水平为(0.14±0.02),与空白组(1.27±0.03)和空载体组(1.25±0.06)比较明显降低,差异有统计学意义,P＜0.001;抑制组Id-1蛋白表达水平为0.25±0.02,与空白组(1.18±0.03)和空载体组(1.16±0.04)比较明显降低,差异有统计学意义,P＜0.001;抑制组MMP-9 mRNA表达水平为0.19±0.02,与空白组(1.33±0.04)和空载体组(1.38±0.03)比较明显降低,差异有统计学意义,P＜0.001;抑制组MMP-9蛋白表达水平为0.12±0.02,与空白组(0.89±0.04)和空载体组(0.91±0.02)比较明显降低,差异有统计学意义,P＜0.001;生长曲线表明,从第3天起抑制组细胞增殖明显减弱,与空白组和空载体组差异明显;划痕损伤实验结果显示,空白组和空载体组向划痕处的迁移速度明显快于抑制组;迁移试验显示,抑制组迁移细胞数为75±12,明显少于空白组(201±12)和空载体组(206±15);抑制组侵袭细胞数为51±10,明显少于空白组(121±17)和空载体组(126±14),差异均有统计学意义,P＜0.001.结论 Id-1促进SW480细胞的侵袭和转移,其机制可能与诱导MMP-9的表达有关.