长非编码RNA调控骨肉瘤耐药机制的研究进展

骨肉瘤是最常见的原发性实体骨恶性肿瘤, 化疗药物的耐药是导致骨肉瘤复发和转移的重要因素。长非编码RNA可通过调节上皮间质转化、细胞自噬、凋亡、药物外排、细胞周期等途径影响骨肉瘤耐药, 提示长非编码RNA可能成为治疗骨肉瘤耐药的新靶点。     

长链非编码RNA调控肿瘤能量代谢重编程机制的研究进展

尽管目前普遍认为肿瘤细胞内存在能量代谢异常且影响肿瘤的生物学行为, 但能量代谢重编程的确切机制及对肿瘤细胞增殖、侵袭、转移影响的具体机制尚不明确。近年来, 有研究显示长链非编码RNA(lncRNA)在转录及转录后水平通过与特定核酸和蛋白结合, 能够特异性地通过转录干扰、基因的表观遗传调控、蛋白活性改变、竞争性结合microRNA(miRNA)等相关机制影响肿瘤细胞能量代谢和发生、发展。lncRNA调控肿瘤能量代谢重编程机制研究的不断深入有望为肿瘤诊断治疗开辟新的标志物和靶点。文章就目前lncRNA调控肿瘤葡萄糖、脂肪酸、蛋白质和核苷酸代谢重编程作用机制的研究进展作一综述, 以期为lncRNA调控能量代谢通路为靶向的抗肿瘤治疗提供新思路。     

长链非编码RNA在胃癌临床应用中的研究进展

胃癌是常见的恶性肿瘤之一, 是全球癌症相关死亡的第3大原因, 严重威胁人类健康。长链非编码RNA(lncRNA)在多种层面参与胃癌的发生、发展, 并起到关键性的调节作用, 在胃癌的诊断、治疗以及预后评估方面发挥重要作用。文章就近年来lncRNA在胃癌临床应用中的研究进展进行综述。     

长链非编码RNA HAGLR对乳腺癌预后的影响及其竞争性内源RNA互作网络的构建

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)HAGLR在乳腺癌中的表达情况及其对乳腺癌预后的影响, 并构建竞争性内源RNA(ceRNA)网络。方法采用Atlas of Genetics and Cytogenetics in Oncology and Haematology网站检索HAGLR基因染色体定位及转录本表达情况。采用lnclocater网站预测HAGLR亚细胞定位。通过lnCAR数据库分析HAGLR在乳腺癌组织和癌旁组织的差异表达情况, 按HAGLR表达水平, 将lnCAR数据库患者分为HAGLR高表达组和HAGLR低表达组, 采用Kaplan-Meier法分析两组间总生存(OS)及无转移生存情况, 并通过UCSC Xena数据库进行验证。通过lnCAR数据库检索HAGLR共表达基因, 将排位前200个共表达基因提交至Metascape网站, 进行基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)功能富集分析, 构建蛋白互作网络(PPI)。采用生物信息学在线分析网站starbase预测HAGLR靶向的微RNA(miRNA)和可直接编码蛋白的mRNA, 通过Cytoscape3...     

长链非编码RNA H19在血液系统恶性肿瘤中的研究进展

随着血液系统恶性肿瘤发病率的上升, 探索其发病机制和新治疗策略已成为新的研究方向。高通量测序技术的发展, 使得长链非编码RNA被人们所认识, 它们在生命的发展和疾病的调控中发挥着重要作用。H19是第一个被报道的长链非编码RNA, 作为癌基因参与肿瘤生长和转移等各种病理过程。然而, H19在血液系统恶性肿瘤中的多重作用尚缺乏系统性的综述。文章就H19在常见血液系统恶性肿瘤发生、进展及耐药机制中的作用进行综述, 以期为后续研究提供指导。     

铜死亡相关差异长链非编码RNA评分公式在肾透明细胞癌中的临床价值

目的探讨基于生物信息学方法构建的肾透明细胞癌(ccRCC)预后相关的铜死亡相关差异长链非编码RNA(lncRNA)评分公式在患者临床诊断、预后预测以及治疗抉择中的价值。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取ccRCC患者的基因矩阵和临床数据(数据更新至2022年3月29日)。基因矩阵收录539例ccRCC组织和72例癌旁正常组织表达数据;临床数据收录530例ccRCC患者资料。采用Pearson相关性分析、Wilcoxon符合秩检验和单因素Cox比例风险模型分析筛选预后相关的铜死亡相关差异lncRNA。采用R软件将530例包含生存资料的ccRCC患者以近似1∶1的比例随机抽样分组, 分为训练集(266例)和验证集(264例)。采用LASSO回归构建铜死亡相关差异lncRNA评分公式并进行交叉验证。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估铜死亡相关差异lncRNA评分公式的特异度和灵敏度, 计算曲线下面积(AUC)。根据中位风险值将ccRCC患者分为低风险组和高风险组, 采用Kaplan-Meier法分析高、低风险组患者总生存(OS)的差异。采用t检验分析不同临床病理特征患者的风险值差异...     

肾癌索拉非尼耐药相关长链非编码RNA诱导骨肉瘤U2OS细胞侵袭和转移的机制

目的探讨肾癌索拉非尼耐药相关长链非编码RNA(lncRNA-SRLR)对骨肉瘤U2OS细胞侵袭和转移的机制。方法应用慢病毒空载对照(LV-NC)和慢病毒lncRNA-SRLR过表达载体(LV-over/SRLR)转染U2OS细胞, 并建立细胞稳转株U2OS/NC和U2OS/SRLR。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测lncRNA-SRLR和赖氨酸羟化酶(PLOD2)mRNA的相对表达量。采用transwell和划痕实验检测细胞迁移和侵袭能力。采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测白细胞介素6(IL-6)的表达情况。采用荧光原位杂交技术(FISH)检测lncRNA-SRLR细胞定位。采用免疫荧光法检测PLOD2蛋白的表达情况。采用Western blot法检测PLOD2和FAK/STAT3通路相关蛋白的表达情况。结果 qRT-PCR检测结果显示, U2OS/NC和U2OS/SRLR细胞中lncRNA-SRLR mRNA的相对表达量分别为1.00±0.01和3 964.97±0.05, 差异有统计学意义(P<0.001)。PLOD2 mRNA在U2OS/SRLR细胞中的表...     

长链非编码RNA LINC－PINT通过靶向miR－524－5p调控骨肉瘤细胞增殖凋亡的分子机制

目的探讨长链非编码RNA LINC-PINT对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应检测正常成骨细胞hFOB和人骨肉瘤细胞HOS、MG63和SAOS2中LINC-PINT和miR-524-5p的表达。应用脂质体法转染至pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC-PINT组(转染pcDNA-LINC-PINT)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC-PINT组(转染si-LINC-PINT)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-524-5p组(转染miR-524-5p mimics)、pcDNA-LINC-PINT+miR-NC组(共转染pcDNA-LINC-PINT和miR-NC)和pcDNA-LINC-PINT+miR-524-5p组(共转染pcDNA-LINC-PINT和miR-524-5p)HOS细胞, Western blot检测细胞中PCNA和cleaved-caspase-3蛋白的表达, 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况, 流式细胞术检测细胞的凋亡情况, 双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果人骨...     

miRNA-126-3p调控人单核细胞白血病THP-1细胞的增殖和周期变化

目的探讨miRNA-126-3p(miR-126-3p)对人单核细胞白血病THP-1细胞增殖和周期的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-126-3p在THP-1细胞和从2022年5月至2023年1月山西省肿瘤医院收集的4名健康体检者外周血分离的单核细胞中的表达情况。构建过表达miR-126-3p载体, 转染THP-1细胞(过表达miR-126-3p组), 以转染空载体的THP-1细胞为对照。采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力, 采用流式细胞术检测细胞周期。应用TargetScan软件预测miR-126-3p靶基因为RGS3, 通过双荧光素酶报告基因实验进行验证。采用蛋白质印迹法检测过表达miR-126-3p组THP-1细胞RGS3蛋白表达水平。结果 PCR检测结果显示, 与健康人外周血分离的单核细胞相比, THP-1细胞miR-126-3p表达水平低(P<0.05)。与对照组比较, 过表达miR-126-3p组THP-1细胞在培养48 h和72 h后增殖能力均低(均P<0.05), 且细胞G1期阻滞[G1期细胞比例:(58.2±2.8)%比(44....     

miRNA-182-5p对食管鳞癌细胞增殖和侵袭的影响及分子机制

目的探讨miR-182-5p对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖和侵袭的影响, 并探讨其可能的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ESCC组织和细胞中miR-182-5p的表达。将miR-182-5p抑制剂、miR-182-5p模拟物及阴性对照转染食管鳞癌Eca109和TE1细胞, RT-qPCR检测转染后ESCC细胞中miR-182-5p的表达水平, 细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测ESCC细胞的增殖能力, Transwell小室法检测ESCC细胞的侵袭能力。双荧光素酶报告实验分析miR-182-5p与细胞黏附分子2(CADM2)的相互作用, RT-qPCR检测ESCC组织中CADM2的表达, 并分析其与miR-182-5p表达的相关性。Western blot检测转染后CADM2、粘着斑激酶(FAK)、p-Akt和Akt蛋白的表达。结果 ESCC组织中miR-182-5p的相对表达水平为2.180±1.295, 显著高于正常组织(0.890±0.284, P<0.001)。miR-182-5p高表达ESCC患者的生存率低于低表达患者(P<0.0...     

长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1通过靶向miR－200b－5p促进视网膜母细胞瘤细胞增殖抑制凋亡

目的探讨长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1(lnc RNA ADPGK-AS1)对视网膜母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响及其可能的作用机制。方法收集2020年2—6月河南省立眼科医院收治的31例视网膜母细胞瘤患者的肿瘤组织及其相应癌旁正常组织, 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测视网膜母细胞瘤组织和癌旁正常组织中lncRNA ADPGK-AS1、miR-200b-5p的表达水平。体外培养人视网膜上皮细胞ARPE-19、人视网膜母细胞瘤细胞Y-79和WERI-Rb-1, qRT-PCR法检测lncRNA ADPGK-AS1、miR-200b-5p的表达水平。以Y-79细胞为研究对象, 随机分组si-con组、si-lncRNA ADPGK-AS1组、miR-con组、miR-200b-5p组、si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组、si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-200b-5p组。四甲基偶氮唑蓝法、平板克隆形成实验与流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、克隆及凋亡情况, 双荧光素酶报告实验检测lncRNA...     

长链非编码RNA FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞中的表达及功能

目的:探讨长链非编码RNA FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞中的表达谱及其功能。方法:前期对5对组织（骨肉瘤组织和正常组织）进行转录组学测序筛选出差异表达的lncRNAs,并筛选出上调变化的具有研究意义的前五位lncRNAs。通过荧光定量PCR进一步在骨肉瘤组织及正常组织内验证lncRNA FOXD2-AS1差异表达这一趋势,利用siRNA技术干扰其表达,筛选出干扰lncRNA FOXD2-AS1效率最高的两条siRNAs,CCK-8法及流式细胞术检测敲减lncRNA后细胞增殖及凋亡是否发生变化。结果:转录组学测序筛选出上调变化明显的前5位lncRNAs,并进一步通过实时荧光定量PCR显示lncRNA FOXD2-AS1在骨肉瘤组织内高表达,CCK-8法及流式细胞术结果显示该高表达的lncRNA FOXD2-AS1促进骨肉瘤细胞增殖,且抑制骨肉瘤细胞的凋亡。结论:骨肉瘤与正常组织相比,存在明显的高表达lncRNAs,且高表达的lncRNA FOXD2-AS1促进骨肉瘤的增殖并抑制其凋亡,在骨肉瘤进展中发挥至关重要的作用。     

沉默lncRNA FTX通过miR-22-3p/NLRP3炎症体通路抑制胃癌细胞增殖

目的探究长非编码RNA(lncRNA)FTX通过miR-22-3p/NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症体通路对胃癌细胞增殖的调控作用。方法将胃癌细胞NCI-N87分为空白对照组、si-FTX-NC组、si-FTX组、si-FTX+miR-22-3p inhibitor-NC组、si-FTX+miR-22-3p inhibitor组。采用实时定量荧光PCR分析lncRNA FTX、miR-22-3p表达量, 克隆形成实验分析NCI-N87细胞增殖能力, 蛋白质印迹法分析NLRP3炎症体通路蛋白表达情况, 双荧光素酶报告实验分析lncRNA FTX和miR-22-3p的靶向关系。结果空白对照组、si-FTX-NC组、si-FTX组、si-FTX+miR-22-3p inhibitor-NC组、si-FTX+miR-22-3p inhibitor组lncRNA FTX相对表达量分别为1.03±0.09、1.01±0.15、0.42±0.08、0.45±0.06、0.46±0.13, 差异有统计学意义(F=52.19, P<0.001);miR-22-3p相对表达量分别为1.04±0....     

超保守长链非编码RNA uc.77在肺癌中的表达及其调控作用

目的探讨超保守长链非编码RNA uc.77(uc.77)在肺癌中的表达及其分子机制。方法肺癌组织及癌旁正常组织来自2014—2016年解放军南部战区总医院确诊肺癌并行手术的61例肺癌患者。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺癌细胞株中uc.77的相对表达水平, 同时在61对肺癌组织及其癌旁正常组织中验证其表达趋势, 分析uc.77的表达与肺癌患者临床病理特征的关系。转染uc.77 siRNA敲低uc.77的表达, 采用细胞计数试剂盒8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力, 流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化。将转染uc.77 siRNA的肺癌H1299细胞注射至BALB/c裸鼠构建荷瘤模型, 观察uc.77对肿瘤生长的影响, 对肿瘤组织进行HE染色和免疫组化检测, qRT-PCR和Western blot法检测p21 mRNA和蛋白表达水平。结果肺癌细胞系95-D、H1299、A549、H460、H446和16HBE-T中uc.77的表达水平高于正常支气管上皮样细胞16HBE(均P<0.05);61例肺癌组织中uc.77的表达水平高于旁正常组织(P<0.001...     

长链非编码RNA HOTAIR通过Wnt/β-catenin信号通路对肾母细胞瘤细胞增殖凋亡及耐药的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOTAIR对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡与耐药性的影响及分子机制。方法收集2015—2019年于郑州大学附属儿童医院手术治疗的32例肾母细胞瘤患儿的肾母细胞瘤组织和癌旁正常组织, 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测肾母细胞瘤组织和癌旁组织中HOTAIR的表达, CCK-8法检测细胞的增殖能力, 流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡水平, Western blot检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达, CCK-8检测转染后经过不同浓度顺铂处理下的细胞增殖抑制情况。结果 HOTAIR在肾母细胞瘤组织中的表达水平为2.02±0.18, 高于癌旁组织(0.61±0.04, P<0.05)。si-HOTAIR组细胞中Wnt、β-catenin、Cyclin D1、c-myc蛋白的表达水平分别为0.54±0.05、0.41±0.05、0.25±0.03和0.56±0.06, 均低于对照组(分别为0.89±0.08、0.94±0.10、0.72±0.06和1.10±0.11)和si-RNA组(分别为1.06±0.11、0.92±0.0...     

慢病毒体外干扰长链非编码RNA LINC00630表达对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨长链非编码RNA LINC00630在膀胱癌细胞中的表达,以及体外干扰其表达对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测膀胱癌细胞株5637、BIU-87、T24、J82和正常膀胱上皮细胞株SV-HUC-1中LINC00630的表达。选择LINC0063表达量最高的膀...     

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1在血液系统肿瘤中的研究进展

肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)在多种肿瘤的发生过程中具有重要作用。近年来研究表明MALAT1在血液系统肿瘤中表达升高, 且可以作为竞争性内源RNA从转录和转录后水平等多层面参与血液系统肿瘤的发生、发展及预后, 因此, MALAT1有可能成为新型标志物, 为血液系统肿瘤的诊断、治疗及预后评估提供有价值的依据。     

miRNA-4686通过靶向PDIA4影响食管癌细胞增殖和迁移

目的探讨miRNA-4686(miR-4686)和蛋白质二硫键异构酶A4(PDIA4)在食管癌组织和细胞中的表达, 以及miR-4686体外对食管癌细胞增殖和迁移能力的影响及可能机制。方法采用miRWalk version 3在线网站预测到miR-4686与PDIA4 mRNA互补结合。利用从加州大学圣克鲁兹分校基因组(UCSC)数据库获得的miR-4686和PDIA4 mRNA的表达谱, 分析食管癌组织和癌旁组织中miR-4686和PDIA4 mRNA相对表达量。从UCSC数据库获得miR-4686在人体细胞中的定位。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测食管癌细胞Eca109、TE-13、EC9706、KYSE-510与正常食管上皮细胞HET-1A中miR-4686和PDIA4 mRNA的相对表达量。选择miR-4686相对表达量最低的Eca109细胞进行后续研究。将Eca109细胞分为miR-4686组(转染miR-4686模拟物)和miR-NC组(转染miR-4686阴性对照序列模拟物)。通过克隆形成实验检测两组Eca109细胞增殖能力, 划痕愈合实验检测Eca10...     

预防性全脑照射治疗非小细胞肺癌的研究进展

随着非小细胞肺癌(NSCLC)局部控制率和生存率的提高, 使脑转移率增加这一临床难题日益突出。预防性全脑照射(PCI)已被证实能够降低NSCLC患者脑转移的发生率, 提高其生存率, 但其在NSCLC治疗中的意义仍存在较大争议。文章对NSCLC患者接受PCI治疗后的效果及不良反应的研究进展进行综述, 为临床提供参考。     

长链非编码RNA RP11-1212A22.4通过靶向miRNA-483-5p对食管癌细胞株细胞活力和侵袭能力的影响

目的探讨长链非编码RNA RP11-1212A22.4通过靶向miRNA-483-5p(miR-483-5p)对食管癌细胞株细胞活力和侵袭能力的影响。方法采用GEPIA在线数据库分析RP11-1212A22.4在食管癌组织中的表达情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测RP11-1212A22.4在人食管癌细胞株EC9706、KYSE30、TE-13、Eca109和正常食管黏膜上皮细胞株HET-1A中的表达情况。将RP11-1212A22.4相对表达量最低的细胞株EC9706分为RP11-1212A22.4组(转染pcDNA-RP11-1212A22.4质粒)和对照组(转染pcDNA-NC质粒)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析EC9706细胞活力, 采用Transwell法检测EC9706细胞侵袭能力。StarBase数据库预测和双荧光素酶报告基因实验验证RP11-1212A22.4和miR-483-5p的靶向关系。qRT-PCR检测两组EC9706细胞中miR-483-5p的相对表达量。蛋白质印迹法检测两组EC9706细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)、基...