miR-515-5p通过Nrf2/Keap1通路对子宫内膜异位症大鼠异位内膜病变的影响

目的 子宫内膜异位症（endometriosis）是女性常见的疾病。最近,越来越多的证据表明miRNA在子宫内膜异位症的诊断和治疗中发挥着重要作用。然而,miR-515-5p的调控机制尚未得到充分探索。方法 本研究进行了CCK-8、EdU、流式细胞术、划痕愈合和Transwell实验等探究miR-515-5p对子宫内膜细胞生物学功能的影响。此外,反转录定量qRT-PCR和Western blot分别用于评估miR-515-5p和Nrf2/Keap1通路相关蛋白的表达。构建子宫内膜异位症大鼠模型探究miR-515-5p在子宫内膜异位症病变中的作用。结果 异位子宫内膜组织中miR-515-5p的表达减少,miR-515-5p的过度表达显著抑制CRL-7566细胞的增殖、迁移和侵袭。此外,miR-515-5p对CRL-7566细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用是通过抑制Nrf2/Keap1通路活性所致。最后,腹腔内注射miR-515-5p mimic显著减轻了体内子宫内膜异位症病变。结论 miR-515-5p通过Nrf2/Keap1通路抑制异位子宫内膜细胞增殖、迁移和侵袭。因此,miR-515...     

MiR-17-5p在子宫内膜异位症间质细胞中的表达及其对基质金属蛋白酶-2的影响

目的:探讨miR-17-5p在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)间质细胞中的表达及其对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的影响.方法:MiRNA芯片筛选EMs异位子宫内膜组织中差异表达的miRNA,qRT-PCR验证EMs异位、在位子宫内膜组织和子宫...     

miR-194-5p通过FOXP2影响骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的研究

目的 探讨高表达miR-194-5p对骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的影响及机制。方法 实时荧光定量PCR方法检测骨肉瘤SAOS-2细胞与人成骨hFOB1.19细胞中miR-194-5p的表达水平,应用瞬时转染将miR-194-5p模拟物转染至骨肉瘤SAOS-2细胞,实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-194-5p、FOXP2 mRNA的相对表达水平,Western blot检测各组细胞中FOXP2蛋白表达,Targetscan7.2和双荧光素酶实验分析FOXP2与miR-194-5p的靶向关系,采用CCK8法检测各组细胞的增殖能力,transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 miR-194-5p在骨肉瘤SAOS-2细胞中的表达低于人成骨hFOB1.19细胞（P<0.05）;过表达miR-194-5p使SAOS-2细胞中FOXP2mRNA和蛋白表达下降;Targetscan7.2网站分析及双荧光素酶实验证实FOXP2为miR-194-5p的靶基因;过表达miR-194-5p使SAOS-2细胞增殖、侵袭能力下降。结论 过表达miR-194-5p可以抑制骨肉瘤SAOS-2细胞...     

卵巢癌组织中miR-574-5p的表达及其下调后对SKOV-3细胞增殖与侵袭的影响

目的观察miR-574-5p在卵巢组织中的表达及下调miR-574-5p表达对卵巢癌细胞株SKOV-3增殖与侵袭的影响。方法实时PCR检测41例卵巢癌组织及对应癌旁正常卵巢组织miR-574-5p的表达;随机将SKOV-3细胞分为空白对照组、阴性对照组和miR-574-5p抑制物组,分别用MTT方法与Transwell细胞侵袭实验检测各组SKOV3细胞的增殖与侵袭能力变化。结果卵巢癌组织中miR-574-5p相对表达量为1.29±0.18,显著高于癌旁正常卵巢组织的0.51±0.07(P0.01);转染miR-574-5p抑制物后,SKOV3细胞的增殖能力明显下降,穿膜能力亦明显减弱(P0.01)。结论卵巢癌组织中miR-574-5p的表达水平异常增高,抑制miR-574-5p的表达能够降低SKOV3细胞的增殖与侵袭。     

miR-299-5p在前列腺癌中的表达及对细胞生物行为学的影响

目的:探讨微小RNA-299-5p(miR-299-5p)在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞生物学行为的影响.方法:收集2016年8月至2018年10月期间本院手术后存档的前列腺癌组织及对应癌旁组织标本各42例,qRT-PCR法检测miR-299-5p表达水平.体外培养人前列腺癌PC-3细胞,通过Lipofect...     

miR-202-5p靶向结合TSPAN12抑制胶质瘤细胞的恶性生物学行为

目的 探讨miR-202-5p调控胶质瘤细胞恶性生物学行为的潜在分子机制。方法 应用实时定量PCR实验检测miR-202-5p在人脑胶质瘤U87MG细胞中的内源性表达;实时定量PCR实验和Western blot实验用于检测TSPAN12在人脑胶质瘤U87MG细胞的内源性表达;应用CCK-8、transwell、流式细胞术检测过表达miR-202-5p或沉默TSPAN12对U87MG细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响;应用双荧光素酶报告基因分析系统检测miR-202-5p和TSPAN12的结合作用。结果 miR-202-5p在U87MG细胞中低表达,TSPAN12在U87MG细胞中高表达。过表达miR-202-5p或沉默TSPAN12显著抑制U87MG细胞的增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡。miR-202-5p靶向结合TSPAN12 mRNA的3’UTR。结论 miR-202-5p通过靶向结合TSPAN12抑制胶质瘤细胞的恶性生物学行为。     

过表达miR-139-5p对胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨过表达miR-139-5p对胶质瘤U87MG细胞增殖和侵袭的影响,并初步分析其可能机制.方法 在胶质瘤U87MG细胞中瞬时转染miR-139-5p并用real-time PCR方法验证其转染效率,CCK-8法检测转染后各组U87MG细胞的增殖能力,Transwell实验检测转染后各组U87MG细胞的侵袭能力,...     

circ-SFMBT2通过靶向miR-7-5p/ADAM10轴对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨circ-SFMBT2对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞生物学行为的影响以及对miR-7-5p/ADAM10分子轴的调控作用。方法:采用qRT-PCR法与Western印迹法分别检测NSCLC与癌旁组织中circ-SFMBT2、miR-7-5p、ADAM10...     

circ-SFMBT2通过靶向miR-7-5p/ADAM10轴对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响CSCD

目的探讨circ-SFMBT2对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞生物学行为的影响以及对miR-7-5p/ADAM10分子轴的调控作用。方法﹑采用qRT-PCR法与Western印迹法分别检测NSCLC与癌旁组织中circ-SFMBT2、miR-7-5p、ADAM10的表达量;用Pearson法分析circ-SFMBT2与miR-7-5p,以及miR-7-5p与ADAM10的相关性;体外培养人支气管上皮样细胞(human bronchial epithelial-like cells,HBE)与肺癌细胞系H1650、H460、A549、H1299。用CCK-8与EdU实验检测细胞的增殖能力。用平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力。用流式细胞术检测细胞凋亡率。用Transwell小室实验检测细胞侵袭。用双荧光素酶报告实验检测circ-SFMBT2与miR-7-5p、以及miR-7-5p与ADAM10的靶向关系。用裸鼠移植瘤实验检测敲低circ-SFMBT2对移植瘤生长的影响。用免疫组化实验检测移植瘤组织中ADAM10与Ki67蛋白阳性率。结果circ-SFMBT2与ADAM10在NSCLC组织及细胞系中表达升高,而miR-7-5p的表达降低,circ-SFMBT2与miR-7-5p的表达呈负相关,而miR-7-5p与ADAM10的表达呈负相关。沉默circ-SFMBT2及miR-7-5p过表达可抑制细胞增殖、克隆形成及侵袭,还可促进其凋亡。circ-SFMBT2可靶向调控miR-7-5p,而ADAM10是miR-7-5p的靶基因。沉默circ-SFMBT2与抑制miR-7-5p联合作用,以及miR-7-5p过表达与ADAM10过表达联合作用均可促进细胞增殖、克隆形成及侵袭,并抑制其凋亡。沉默circ-SFMBT2可抑制移植瘤的生长。结论︰沉默circ-SFMBT2可通过调控miR-7-5p/ADAM10分子轴而减弱NSCLC细胞增殖、克隆形成,侵袭能力并诱导其凋亡。     

miR-17-5p通过靶向调控PTEN表达抑制乳腺癌的增殖、侵袭及迁移

目的 探讨miR-17-5p在乳腺癌中的表达和对乳腺癌细胞的调控作用及其作用机制。方法 采用RT-qPCR和Western blot方法检测乳腺癌组织和细胞中miR-17-5p和PTEN的表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测凋亡,Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和转移。Western blot检测PTEN蛋白表达变化;采用荧光素酶活性检测miR-17-5p与PTEN的相互作用。结果 与对照组相比,乳腺癌组织和细胞中miR-17-5p表达升高,同时PTEN水平降低。体外实验发现,miR-17-5p的敲减能够抑制乳腺癌细胞增殖和转移。荧光素酶报告基因实验发现PTEN是miR-17-5p的靶点。miR-17-5p下调促进乳腺癌细胞PTEN蛋白的表达。结论 miR-17-5p与乳腺癌患者预后相关,同时miR-17-5p下调能显著抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭转移。     

miR-219-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡与侵袭的影响及其机制

目的:探索miR-219-5p对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,并探讨其机制.方法:采用RT-PCR检测miR-219-5p在NSCLC细胞系H1299,A549,H1975及正常肺上皮细胞系BEAS-2B中的表达.将NSCLC细胞系H1299分成对照组和miR-219-5p组,用Lipofectamine 2000分别转染miR-219-5p scramble和miR-219-5p mimics,采用MTT法、流式细胞术及Transwell实验分别检测比较两组细胞增殖、凋亡及侵袭能力,Western印迹测定表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及裂解型多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP ribose polymerase,PARP)在两组细胞中的表达.结果:miR-219-5p在H1299,A549和H1975细胞系中的表达量均低于BEAS-2B,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验显示在48,72,96及120 h,miR-219-5p组OD490 nm值显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-219-5p组细胞凋亡率显著高于对照组(13.33%±1.20%vs 3.43%±0.12%),差异有统计学意义(P<0.01);miR-219-5p组侵袭细胞数显著少于对照组(67.5±9.9 vs 189.5±16.7),差异有统计学意义(P<0.05);miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量为0.35±0.07,miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量显著低于对照组(1.0),差异有统计学意义(P<0.01);miR-219-5p组裂解型PARP蛋白相对表达量显著高于对照组(2.74±0.17 vs 1.0),差异有统计学意义(P<0.01).结论:miR-219-5p可抑制NSCLC的细胞增殖和侵袭并促进其凋亡,其机制可能与下调EGFR及上调PARP的表达有关.     

miR-210-3p通过靶向调控SMAD4基因对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨miR-210-3p对宫颈癌细胞增殖、侵袭的影响及作用机制.方法 通过OncomiR和GEPIA网站分析TCGA数据库宫颈癌病例中miR-210-3p和SMAD4的表达.采用miR-210-3p抑制物转染宫颈癌Hela细胞,实验设置空白组、miR-210-3p阴性对照组和miR-210-3p抑制物组,采用CC...     

miR-140-5 p通过调控Wnt1通路对非小细胞肺癌迁移与侵袭能力的影响

目的:探究miR-140-5p通过Wnt1通路对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、侵袭的影响,为临床对NSCLC的治疗提供理论依据.方法:临床收集人NSCLC组织及癌旁组织20组,RT-PCR检测miR-140-5p与Wnt1基因的表达水平,Spearman相关分析法比较miR-140-5p与Wnt1基因表达水平的相...     

miR-141-3p、PD-L1及巨噬细胞在子宫内膜异位症中的表达及相关性研究

目的 探讨miR-141-3p、PD-L1及M1、M2型巨噬细胞在子宫内膜异位症 （Endometriosis,EMs） 中的表达及其临床意义。方法 选取2021年10月-2022年7月,因EMs在石河子大学第一附属医院妇科行腹腔镜手术或开腹手术的患者30 例为EMs组,同期选取非EMs患者因子宫肌瘤行诊断性刮宫或子宫全切术的子宫内膜组织30例为对照组,术后病理证实均为增生期子宫内膜。通过qRT-PCR检测子宫内膜组织中miR-141-3p以及PD-L1的表达;通过免疫组化检测子宫内膜组织中 M1型巨噬细胞表面标志物CD86,M2型巨噬细胞表面标志物CD206的表达,并应用Image J软件对免疫组化结果进行平均光密度 （Average Optical Density,AOD） 的检测。通过 Person 或 Spearman 相关检验分析 miR-141-3p、PD-L1、CD86 及 CD206 之间相关性。结果 （1） miR-141-3p 在 EMs 组在位内膜、异位内膜中的表达低于对照组子宫内膜 （P=0.000 5; P＜0.000 1）,且在异位内膜中表达最低。（2）PD-L1在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达高于对照组子宫内膜（P=0.013 7; P=0.000 3）,且在异位内膜中表达最高。（3）在EMs异位内膜中miR-141-3p与PD-L1的表达呈负相关（r =-0.648 9,P=0.000 1）。 （4） CD86在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达低于对照组子宫内膜 （P=0.047 2;P=0.001 0）。（5） CD206在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达高于对照组子宫内膜 （P=0.043 4;P＜0.000 1）,且在异位内膜中表达最高。（6） PD-L1与M1型巨噬细胞标志物 CD86 在 EMs 异位内膜中的表达呈负相关 （r =-0.440 8,P=0.014 8）。（7） PD-L1 与 M2 型巨噬细胞标志物 CD206在EMs异位内膜中的表达呈正相关 （r =0.598 1,P=0.000 5）。结论 EMs患者中miR-141-3p表达降低,PD-L1表达升高,巨噬细胞从M1型向M2型极化,且随病情进展而改变。     

miR-129-5p靶向KLK7对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响及分子机制

目的 探讨高表达miR-129-5p对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响及分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR方法检测卵巢癌SKOV3细胞与人正常卵巢上皮细胞株中miR-129-5p的表达。在卵巢癌SKOV3细胞中瞬时转染miR-129-5p模拟物及无意义序列,采用CCK8法及Transwell实验检测各组细胞的增殖能力和侵袭能力;实时荧光定量PCR检测miR-129-5p和KLK7的相对表达水平;Western blot检测各组细胞中KLK7蛋白表达;Targetscan 7.2和双荧光素酶实验分析miR-129-5p与KLK7的靶向关系。结果 miR-129-5p在卵巢癌SKOV3细胞中的表达低于人正常卵巢上皮细胞(P<0.05),过表达miR-129-5p降低SKOV3细胞中KLK7 mRNA和蛋白的表达,Targetscan 7.2网站分析及双荧光素酶实验证实KLK7为miR-129-5p的靶基因,过表达miR-129-5p抑制SKOV3细胞增殖和侵袭能力(P<0.05)。结论 过表达miR-129-5p可通过靶向调控KLK7抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭。     

miR-361-5p对脑胶质瘤迁移和侵袭的影响

目的 探讨miR-361-5p对脑胶质瘤迁移和侵袭的影响。方法 应用miR-361-5p mimics转染人脑胶质瘤U251细胞,CCK-8法检测细胞增殖能力;采用Transwell实验检测U251细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的蛋白表达。结果 与对照组和NC组相比,mimics组U251细胞的增殖能力显著降低（P<0.01）,mimics组迁移和侵袭的细胞个数明显减少（P<0.05）;与对照组和NC组相比,mimics组MMP-2、MMP-9以及VEGF表达明显减少（P<0.05）。结论miR-361-5p能抑制胶质瘤U251细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并且降低MMP-2、MMP-9以及VEGF蛋白表达,从而能够控制胶质瘤的生长和转移。     

ZNF521促进结肠癌的进展且受miR-211-5p靶向调控

目的:探索锌指蛋白521(ZNF521)在结肠癌中的表达、功能和临床意义,并研究其机制.方法:采用免疫组织化学、蛋白质印迹法和qRT-PCR检测结肠癌组织或细胞系中ZNF521或miR-211-5p的表达;采用小干扰RNA(small interfering,siRNA)和miRNA模拟物分别构建ZNF521低表达和m...