miR-328-5p通过调控RAGE对异位子宫内膜细胞生物学功能的影响

目的 探讨miR-328-5p在异位子宫内膜细胞生物学功能中的作用及潜在机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot检测异位子宫内膜组织中miR-328-5p、RAGE mRNA和蛋白的表达。分离并培养异位子宫内膜基质细胞，将其分为NCmimic组、miR-328-5pmimic组、miR-328-5pmimic+Vector组、miR-328-5p mimic+pcDNA-RAGE组，RT-qPCR检测细胞中miR-328-5p和RAGE mRNA的表达；CCK-8实验检测细胞增殖能力；Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力；Westernblot实验检测RAGE蛋白的表达；生物信息学和双荧光素酶报告基因实验用来预测和验证miR-328-5p和RAGE的靶向关系。结果 与正常子宫内膜组织比较，异位子宫内膜组织中miR-328-5p表达显著降低，RAGE mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.05）。与NC mimic组比较，miR-328-5p mimic组细胞中miR-328-5p表达显著升高，RAGE mRNA和蛋白表达显著降低，细胞...     

MiR-215-5p经AKT/GSK-3β/Snail信号通路抑制乳头状甲状腺癌增殖、迁移和侵袭

目的探究miR-215-5p对乳头状甲状腺癌增殖、迁移和侵袭能力的影响以及机制。方法乳头状甲状腺癌TPC1细胞体外转染miR-215-5p mimic后利用MTT实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验检测TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化;预测并验证miR-215-5p的靶基因,并且在TPC1细胞过表达和低表达miR-215-5p的靶基因后,检测TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化;利用Western blot检测转染后靶基因的表达水平,AKT和GSK-3β的磷酸化水平,以及Snail的表达水平。结果 miR-215-5p mimic能够显著抑制TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力(P0.05);通过双荧光素酶报告实验验证了miR-215-5p的靶基因为ARFGEF1;低表达ARFGEF1的TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力被显著抑制(P0.05);miR-215-5p mimic可显著抑制过表达ARFGEF1引起的TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力的增加(P0.05);Western blot结果显示miR-215-5p mimic可引起ARFGEF1和Snail表达水平显著降低(P0.05),AKT和GSK-3β的磷酸化水平降低(P0.05),但是miR-215-5p inhibitor和过表达ARFGEF1均可恢复ARFGEF1和Snail表达水平以及AKT和GSK-3β的磷酸化水平。结论 MiR-215-5p通过AKT/GSK-3β/Snail信号通路以ARFGEF1为目标发出信号抑制乳头状甲状腺癌增殖、迁移和侵袭。     

微小RNA-195-5p通过调控LRP6抑制滋养细胞增殖和转移

目的 探讨微小RNA-195-5p对滋养细胞HTR-8/SVneo增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法 体外培养滋养细胞HTR-8/SVneo,将miR-195-5p模拟物转染进滋养细胞HTR-8/SVneo中,实时定量PCR方法检测各组细胞miR-195-5p和LRP6 mRNA的表达,CCK-8方法检测HTR-8/SVneo细胞增殖能力,Transwell实验检测HTR-8/SVneo细胞迁移和侵袭能力。结果 miR-195-5p模拟物可显著促进HTR-8/SVneo细胞中miR-195-5p的表达,并抑制LRP6 mRNA的表达(P<0.05);双荧光素酶实验表明miR-195-5p可直接靶向LRP6;转染miR-195-5p模拟物后,HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭能力降低。结论 miR-195-5p可能通过抑制LRP6表达抑制HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭。     

miR-149-5p/PANX1轴对垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探究miR-149-5p对垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用及可能机制。方法 qRT-PCR检测垂体瘤组织及正常垂体组织中miR-149-5p表达;将miR-149-5p模拟物转染垂体瘤细胞,Edu实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;生物信息学分析PANX1 mRNA 3′UTR上miR-149-5p的潜在结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证;qRT-PCR和Western blot检测转染miR-149-5p模拟物后垂体瘤细胞PANX1表达;转染miR-149-5p模拟物后,Edu实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果 miR-149-5p在垂体瘤组织中下调;过表达miR-149-5p抑制垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭;miR-149-5p靶向结合PANX1并抑制其表达;过表达PANX1逆转了过表达miR-149-5p对垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-149-5p抑制PA细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向抑制PANX1表达有关。     

miR-212-5p在肝癌组织中的表达及对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的 探讨miR-212-5p在肝癌组织中的表达及对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法应用qRT-PCR法检测96例肝癌组织及癌旁组织中miR-212-5p表达水平,同时设HepG2细胞组、miR-212-5pmimics组与miR-212-5pinhibitor组。培养72h后,采用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭与迁移水平;qRT-PCR法检测细胞miR-212-5p表达水平。结果 肝癌组织中miR-212-5p表达水平升高,肿瘤最大径≥2cm、TNM分期越高、浸润深度越深、病理级别越低、有淋巴结转移、有复发的肝癌患者miR-212-5p高表达率更高（P<0.05）。miR-212-5p模拟物能增强HepG2细胞增殖、侵袭及迁移能力,抑制HepG2细胞凋亡（P<0.05）;miR-212-5p抑制剂能抑制HepG2细胞活力、增殖、侵袭及迁移能力,促进HepG2细胞凋亡（P<0.05）。结论 miR-212-5p在肝癌组织中高表达,miR-212-5p可促进HepG2细胞增殖、侵袭及迁移能力,抑制...     

HSF1通过上调MTDH促进子宫内膜异位症在位内膜间质细胞的上皮-间质转化

目的 探讨热休克因子-1(HSF1)和星形胶质细胞升高基因-1(MTDH)对子宫内膜异位症在位内膜间质细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用。方法 分别获取子宫内膜异位症患者（n=20）的在位和异位子宫内膜组织,采用RT-qPCR法、Western blot法和免疫组织化学染色法分别检测各在位和异位子宫内膜组织中HSF1和MTDH的表达情况;离体原代培养在位内膜间质细胞（EuSCs）,并通过转染过表达HSF1,采用RT-qPCR法和Westernblot法对过表达HSF1效率进行验证;采用体外侵袭实验和划痕实验对EuSCs组,EuSCs转染pcDNA3.1组和EuSCs转染pcDNA3.1-HSF1组细胞的侵袭和迁移能力变化进行检测;采用细胞形态学成像和westernblot法分别对上述3组细胞的EMT表型和标志物,包括E-钙黏素、N-钙黏素、蜗牛蛋白和波形蛋白的表达水平变化进行检测。结果 与在位子宫内膜组织中HSF1和MTDH的表达水平相比,来源于子宫内膜异位症患者（n=20）的异位子宫内膜组织中对应蛋白质的...     

MiR-17-5p在子宫内膜异位症间质细胞中的表达及其对基质金属蛋白酶-2的影响

目的:探讨miR-17-5p在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)间质细胞中的表达及其对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的影响.方法:MiRNA芯片筛选EMs异位子宫内膜组织中差异表达的miRNA,qRT-PCR验证EMs异位、在位子宫内膜组织和子宫...     

miR-125b-5p靶向STAT3调控免疫因子IL-6/10的表达抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的探讨miR-125b-5p对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法采用荧光定量PCR检测子宫内膜癌组织中miR-125b-5p的表达,免疫组织化学染色法检测子宫内膜癌组织中STAT3、IL-6/10的表达;双荧光素酶报告基因检测和Western blot检测验证miR-125b-5p和STAT3的靶向调控关系;荧光定量PCR和Western blot检测miR-125b-5p过表达或干扰STAT3表达对子宫内膜癌HEC-1B细胞中IL-6/10 mRNA和蛋白表达的影响;CCK-8法、Transwell小室分别检测miR-125b-5p过表达或干扰STAT3表达对HEC-1B细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。结果与癌旁正常组织相比,子宫内膜癌组织中miR-125b-5p表达明显降低,而STAT3、IL-6/10蛋白的表达水平明显升高(P0.05)。子宫内膜癌中STAT3表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级以及TNM分期呈显著正相关(P0.05),而miR-125b-5p表达与肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级以及TNM分期呈显著负相关(P0.05)。STAT3是miR-125b-5p的潜在靶基因,miR-125b-5p可负向调控STAT3表达。miR-125b-5p过表达后,HEC-1B细胞中IL-6/10 mRNA和蛋白表达水平以及细胞增殖、迁移、侵袭能力均明显降低;干扰STAT3表达后,HEC-1B细胞中IL-6/10表达及细胞增殖、迁移、侵袭能力与miR-125b-5p过表达的结果相一致。结论 miR-125b-5p可通过靶向STAT3调控IL-6/10的表达抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

miR-25-3p靶向调节PTEN对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响

目的 探究miR-25-3p靶向调节10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物基因（PTEN）对子宫内膜癌（EC）细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响。方法 qRT-PCR检测人子宫内膜上皮细胞与人EC细胞株HEC-1-A、RL95-2、Ishikawa中miR-25-3p、PTEN表达。取Ishikawa细胞随机分为对照组、miR-25-3p inhibitor组、miR-25-3p inhibitor阴性对照+空载组、共转染组,分组转染后,检测各组Ishikawa细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、增殖蛋白（PCNA）和凋亡蛋白（caspase-9、Bax）、上皮间质转化标志蛋白（Vimentin、E-cadherin）表达、miR-25-3p和PTEN mRNA表达、miR-25-3p对PTEN的靶向调控作用。结果 与人子宫内膜上皮细胞相比,人EC细胞株Ishikawa、HEC-1-A、RL95-2中miR-25-3p表达升高（P<0.05）,PTEN mRNA表达降低（P<0.05）。与对照组相比,miR-25-3p inhibitor组细胞迁移距离、侵袭细胞数、细胞miR-25...     

miR-205-5p抑制体外胃癌细胞系增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-205-5p靶向RAS致癌家族基因2B(RAP2B)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 RT-qPCR和Western blot检测胃癌细胞AGS、MGC803、MKN-28、SGC-7901和正常胃黏膜细胞GES-1中miR-205-5p和RAS致癌家族基因2B的表达。分别构建过表达miR-205-5p和抑制RAP2B表达的AGS细胞株,采用MTT法检测细胞活力;Transwell小室法检测细胞的迁移及侵袭能力;Western blot检测RAP2B、cyclin D1、MMP-2、MMP-9、GSK-3β和β-catenin蛋白的表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-205-5p对RAP2B的靶向作用。结果与正常胃黏膜细胞相比,4种胃癌细胞中miR-205-5p的表达显著降低,RAP2B的表达显著升高(P0.05)。过表达miR-205-5p或抑制RAP2B表达均可显著抑制AGS细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达(P0.05)。miR-205-5p可负性调控RAP2B的表达。结论 miR-205-5p通过靶向RAP2B抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

miR-197-3p调控DMBT1抑制甲状腺癌细胞系增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-197-3p是否通过靶向调控恶性脑瘤缺失1基因(DMBT1)影响甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法RT-qPCR检测健康人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1和甲状腺癌细胞SW579、CGTHW-1中miR-197-3p表达;MTT法检测SW579细胞增殖;Transwell小室法检测SW579细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因实验验证miR-197-3p是否靶向DMBT1;Western blot检测细胞DMBT1、cyclinD1、p21、MMP-2和E-cadherin蛋白表达。结果与Nthy-ori 3-1细胞比较,SW579和CGTHW-1细胞中miR-197-3p相对表达量升高(P<0.05);抑制miR-197-3p表达后,SW579细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显受到抑制,细胞中cyclinD1蛋白和MMP-2蛋白表达降低而p21蛋白和E-cadherin蛋白表达升高;SW579细胞中miR-197-3p靶向负调控DMBT1的表达;过表达DMBT1明显抑制SW579细胞增殖、迁移和侵袭,而抑制DMBT1则能逆转miR-197-3p对SW579细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论miR-197-3p通过靶向调控DMBT1的表达,抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

circDIDO1通过miR-141/Keap-Nrf2/HO-1通路对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探讨环状非编码RNA(circ)DIDO1通过微小RNA(miR)-141/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路探讨对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖、侵袭和迁移的影响。方法 qRT-PCR检测卵巢癌组织及细胞系（SKOV3、OVCAR3和A2780）及IOSE80细胞中miR-141、circDIDO1、Keap1、Nrf2、HO-1 mRNA表达水平；取SKOV3细胞，设置分组为对照组、DIDO1过表达（Exo-circDIDO1）组（转染Exo-circDIDO1）、过表达阴性对照（Exo-vector）组（转染Exo-vector）、Exo-circDIDO1+miR-141模拟物（miR-141mimics）组（共转染Exo-circDIDO1、miR-141mimics）、Exo-circDIDO1+模拟物阴性对照（mimicsNC）组（共转染Exo-circDIDO1、mimicsNC）。48h后，CCK-8及Transwell实验检测细胞迁移、侵袭及增殖变化；qRT-PCR检测及Weste...     

冬凌草甲素通过上调miR-204-5p抑制PC-3细胞迁移与侵袭的作用机制研究

目的 探索冬凌草甲素影响PC-3细胞迁移及侵袭的作用及机制,为冬凌草甲素治疗前列腺癌骨转移提供前期体外实验参考。 方法 通过CCK8检测冬凌草甲素对PC-3细胞增殖的影响,Transwell检测冬凌草甲素对PC-3细胞迁移和侵袭的影响,qRT-PCR分析冬凌草甲素溶液处理PC-3细胞后miR-204-5p及NF-κB信号通路表达情况,Western blotting分析冬凌草甲素溶液处理PC-3细胞后NF-κB信号通路蛋白表达情况。 结果 冬凌草甲素溶液以浓度依赖性和时间依赖性方式抑制PC-3细胞的增殖,与对照组相比差异有统计学意义（P<0.01）,冬凌草甲素IC50值为10 μmol/L;冬凌草甲素溶液呈浓度依赖性抑制PC-3细胞的迁移和侵袭,差异较对照组有统计学意义（P<0.01）;冬凌草甲素溶液能促进PC-3细胞表达miR-204-5p并阻断NF-κB信号通路下游基因表达;过表达miR-204-5p和冬凌草甲素均能抑制PC-3细胞NF-κB信号通路下游基因表达。 结论 冬凌草甲素能抑制PC-3细胞的增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能与其能上调miR-204-5p阻断NF-κB信号通路有关。     

IL-6在子宫内膜异位患者血清中的表达及其潜在作用机制研究

目的：探讨IL-6在子宫内膜异位患者血清中的表达及其高表达对子宫内膜异位症腺上皮细胞的作用及潜在机制。方法：ELISA实验检测子宫内膜异位患者血清中IL-6表达;MTT实验检测IL-6对子宫内膜异位症腺上皮细胞增殖影响,Western blot、Transwell实验检测IL-6对子宫内膜异位症腺上皮细胞上皮间质转化的影响;Western blot检测IL-6对细胞中STAT3/BCL6通路蛋白表达的影响;免疫组化检测患者组织中BCL6表达。结果：IL-6在子宫内膜异位患者血清中高表达;IL-6可促进子宫内膜异位症腺上皮细胞增殖和上皮间质转化;IL-6可促进细胞中p-STAT3、BCL6蛋白表达增加;子宫内膜异位患者组织中BCL6高表达。结论：IL-6、BCL6在子宫内膜异位患者血清和组织中普遍高表达,IL-6可能通过激活STAT3/BCL6促进子宫内膜异位症腺上皮细胞增殖及上皮间质转化过程,提示IL-6和BCL6可作为临床诊断治疗子宫内膜异位的新靶标。     

miR-129-5p靶向HMGB1对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制

为探讨miR-129-5p对卵巢癌(ovarian cancer,OC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制,qRT-PCR检测不同OC细胞株和正常人卵巢上皮细胞株中miR-129-5p的表达水平;在SKOV3细胞中分别转染miR-129-5p模拟物或无关序列,qRT-PCR检测转染后细胞中miR-129-5p的表达情况。生物信息学软件TargetScan预测miR-129-5p与高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein, HMGB1)基因靶向结合位点,qRT-PCR、Western blotting和双荧光素酶报告基因实验分析miR-129-5p对HMGB1的靶向调控作用。分别采用MTT和Transwell实验检测SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移能力。将miR-129-5p模拟物和HMGB1 siRNA或siRNA Control共转染至SKOV3细胞,MTT和Transwell实验检测其对细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。结果显示,SKOV3细胞中miR-129-5p的表达量显著低于正常人卵巢上皮细胞(P0.05)。在SKOV3细胞中转染miR-129-5p模拟物可显著提高miR-129-5p的表达量(P0.05)。miR-129-5p与HMGB1 3’非翻译区存在靶向结合位点,且过表达miR-129-5p可抑制HMGB1的表达,miR-129-5p模拟物转染后相对荧光素酶活性显著下降(P0.05)。过表达miR-129-5p后,SKOV3细胞增殖能力明显减弱,侵袭和迁移能力明显受到抑制(P0.05)。而转染HMGB1 siRNA后,miR-129-5p模拟物对SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用明显减弱(P0.05)。以上结果表明miR-129-5p通过靶向调控HMGB1的表达抑制SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移。     

miR-199a-5p下调NF-κB信号通路激活水平抑制宫颈癌细胞恶性生物学行为

目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌细胞生长、侵袭和迁移的影响和机制。方法 Real-time PCR测定miR-199a-5p在宫颈癌HeLa、HCC94、Ca Ski细胞和正常宫颈Ect1/E6E7细胞中的表达差异。在宫颈癌细胞中转染miR-199a-5p mimics,real-time PCR检测过表达效果,MTT检测增殖,克隆形成实验测定克隆形成能力,Transwell小室测定侵袭和迁移能力,Westernblot检测细胞中p-p65、p-IκB蛋白表达变化。使用核因子-κB(NF-κB)激活剂PMA处理转染miR-199a-5p mimics后的宫颈癌细胞,同样使用上述方法测定细胞生长、克隆、侵袭和迁移能力变化。结果 miR-199a-5p在宫颈癌HeLa、HCC94、CaSki细胞中的表达水平低于正常宫颈Ect1/E6E7细胞。miR-199a-5p mimics提高宫颈癌细胞中miR-199a-5p表达水平,降低细胞增殖、克隆、侵袭和迁移能力,减少细胞中p-p65、p-IκB蛋白表达。NF-κB激活剂PMA可以逆转miR-199a-5p对宫颈癌细胞增殖、克隆、侵袭和迁移能力的抑制作用。结论 miR-199a-5p通过下调NF-κB信号通路激活水平抑制宫颈癌细胞生长、侵袭和迁移。     

微小RNA-138-5p抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的机制研究

目的:探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的相关机制。方法:以肺癌细胞A549和H460作为研究对象,分别转染miR-NC(对照组)或miR-138-5p(实验组);生物信息学技术预测miR-138-5p的靶基因;RT-qPCR检测转染后细胞miR-138-5p、叉头框蛋白C1(FOXC1)mRNA和波形蛋白(vimentin)mRNA的相对表达量;Western blot法检测FOXC1、vimentin、E-cadherin、N-cadherin和β-catenin蛋白表达变化;MTS法和集落形成实验分别检测细胞的增殖能力;划痕愈合实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力。结果:miR-138-5p过表达显著降低FOXC1和vimentin的mRNA及蛋白的表达(P0.05),E-cadherin和β-catenin蛋白表达上调,N-cadherin蛋白表达下调,显著抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P0.05)。结论:miR-138-5p可以通过靶向干扰FOXC1和vimentin的表达抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,可能是肺癌基因治疗的潜在靶点。     

IL-17通过抑制miR-195-5p表达促进子宫内膜癌细胞生长和转移

目的:探讨白细胞介素17(IL-17)对人子宫内膜癌细胞的活力、迁移和侵袭能力的影响及其潜在作用机制。方法:收集人子宫内膜癌组织和良性子宫病变组织,RT-qPCR法检测组织中IL-17和微小RNA-195-5p(miR-195-5p)的表达。以不同浓度IL-17干预人子宫内膜癌HEC-1-B细胞48 h,RT-qPCR法检测细胞中miR-195-5p表达。采用MTT和Transwell实验分别检测100μg/L IL-17干预或转染miR-195-5p mimics后HEC-1-B细胞的活力、迁移能力和侵袭能力改变;过表达miR-195-5p联合100μg/L IL-17干预,检测HEC-1-B细胞的活力、迁移能力和侵袭能力。结果:在人子宫内膜癌组织中,IL-17高表达而miR-195-5p低表达(P0.05)。浓度为10、100和300μg/L的IL-17干预HEC-1-B细胞48 h后,miR-195-5p的表达水平显著降低。MTT和Transwell实验结果表明,100μg/L IL-17能够提高HEC-1-B细胞的活力、迁移能力和侵袭能力(P0.05),而过表达miR-195-5p所得结果相反(P0.05)。过表达miR-195-5p能够减弱IL-17对HEC-1-B细胞活力、侵袭和迁移的促进作用(P0.05)。结论:IL-17在人子宫内膜癌组织中高表达。外源性IL-17能够促进人子宫内膜癌HEC-1-B细胞的生长、迁移和侵袭,这一作用可能与抑制miR-195-5p表达有关。     

利多卡因通过LncRNA H19/miR-671-5p分子轴调控胃癌细胞增殖、迁移及侵袭北大核心CSCD

目的:探讨利多卡因对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对LncRNA H19/miR-671-5p的调控机制。方法:体外培养胃癌细胞AGS,使用不同浓度的利多卡因处理细胞;MTT检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;qRT-PCR检测H19及miR-671-5p的表达量;双荧光素酶报告实验验证H19与miR-671-5p的靶向关系;将pcDNA-H19及其阴性对照pcDNA转染至AGS细胞,使用利多卡因处理细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭;Western blot检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达量。结果:与Con组相比,利多卡因不同剂量可明显降低细胞活力和Ki-67、PCNA、N-cadherin蛋白水平及H19的表达量(P<0.05),并可减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05),提高E-cadherin蛋白水平及miR-671-5p的表达量(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实H19可靶向结合miR-671-5p;H19过表达可明显逆转利多卡因对细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论:利多卡因可能通过抑制H19表达及促进miR-671-5p表达从而抑制胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

miR-874-3p靶向结合SDC1抑制胶质瘤血管生成拟态

目的本研究旨在探讨miR-874-3p调控胶质瘤血管生成拟态的潜在分子机制。方法应用实时定量PCR检测miR-874-3p在胶质瘤细胞系U87细胞中的表达水平;应用双荧光素酶报告基因分析系统检测miR-874-3p和SDC1的结合作用;应用CCK-8法、transwell法、体外管形成实验检测miR-874-3p或SDC1表达变化对U87细胞增殖、迁移、侵袭和管形成能力的影响。结果 miR-874-3p在U87细胞中低表达,过表达miR-874-3p显著抑制U87细胞的增殖、迁移、侵袭和管形成能力。SDC1在U87细胞中的表达上调,沉默SDC1显著抑制U87细胞增殖、迁移、侵袭和管形成能力。miR-874-3p靶向SDC1 3'UTR。结论 miR-874-3p通过靶向结合SDC1抑制胶质瘤血管生成拟态。