中药复方松友饮抑制姑息性肝切除术后残癌生长和转移的实验研究

目的:研究中药复方松友饮对姑息性肝切除裸鼠模型中残癌生长及转移的影响。方法:以人肝癌细胞(MHCC97H)建立裸鼠移植瘤姑息性肝切除模型,36只裸鼠随机分成对照组和松友饮组,每天1次灌胃给药连续5周,每周测体质量。给药结束后第2d每组处死6只裸鼠观察肿瘤大小、肺转移等;并检测残癌中白细胞介素-1β(IL-1β)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。剩余裸鼠用于观察生存期。结果:松友饮组与对照组残癌体积为(724.9±337.6)mm3和(1205.2±581.3)mm3(P<0.05),抑瘤率为39.9%;肺转移分级下降(P<0.05)。前者体质量大于对照组(P<0.001),生存期延长率为22.7%;IL-1βmRNA表达水平显著下调(P<0.001),蛋白水平为(18.0±5.1)pg/mL和(27.9±4.5)pg/mL(P<0.01);PCNA指数为(75.2±8.5)%和(86.1±4.8)%(P<0.001)。结论:松友饮灌胃给药下调残癌表达IL-1β和PCNA,抑制残癌生长、转移,对肝癌病人有潜在的应用价值。     

中药复方“松友饮”增强IFN-α抑制肝癌的实验研究

目的:研究联用中药"松友饮"和干扰素α(IFN-α)对高转移人肝癌裸鼠原位模型肿瘤生长、转移和生存期的影响。方法:以人高转移MHCC97H细胞建立裸鼠原位移植瘤模型,48只成模裸鼠随机分成对照组、"松友饮"组、IFN-α组及"松友饮"+IFN-α组,肝脏接种肿瘤24h开始每天1次灌胃给药及皮下注射,连续5周。第35天每组随机处死6只裸鼠,计算肿瘤体积及转移情况;剩余成瘤裸鼠用于观察生存期。结果:"松友饮"组、IFN-α组及"松友饮"+IFN-α组肿瘤体积、肺转移结节数及生存期与对照组比较,均有显著差异(P<0.05)。结论:连续5周联用"松友饮"显著增强IFNα对HCC裸鼠模型肿瘤生长、转移的抑制作用并延长生存期,对HCC病人有潜在的应用价值。     

下瘀血汤诱导人肝癌裸鼠移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的 观察下瘀血汤对肝癌裸鼠移植瘤及核仁纺锤体相关蛋白1(Nusap1) mRNA和蛋白表达的影响,并探讨作用机制。方法 将32只雌性BALB/c裸鼠建立人肝癌移植瘤动物模型,将造模成功的20只裸鼠采用随机数字表法分为对照组及下瘀血汤低、中、高剂量组,每组5只。下瘀血汤低、中、高剂量组分别予0. 15、0. 3、0. 6 g/20 g下瘀血汤灌胃,对照组予等容积0. 9%氯化钠注射液灌胃,灌胃均每日2次,连续15 d。灌胃期间每3 d测量肿瘤大小,灌胃结束后处死取出肿瘤,称取肿瘤质量,采用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Nusap1 mRNA表达,采用免疫印迹法检测Nusap1蛋白的表达水平。结果 灌胃第12 d,下瘀血汤中、高剂量组裸鼠移植瘤体积低于对照组(P 0. 05);灌胃第15 d,下瘀血汤低、中、高剂量组裸鼠移植瘤体积低于对照组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组裸鼠移植瘤平均质量均低于对照组(P 0. 05),下瘀血汤中、高剂量组裸鼠移植瘤平均质量均低于下瘀血汤低剂量组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组裸鼠移植瘤平均质量低于下瘀血汤中剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组移植瘤细胞凋亡率高于对照组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组移植瘤细胞凋亡率高于下瘀血汤低、中剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组Nusap1 mRNA相对表达量均低于对照组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组Nusap1 mRNA相对表达量低于下瘀血汤低剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组可以抑制Nusap1蛋白的表达,且随着用药浓度的增加,抑制作用增强。结论 下瘀血汤可抑制Nusap1的表达,可减缓裸鼠肝癌细胞移植瘤的生长,促进移植瘤细胞凋亡。     

中药复方“松友饮”含药血清体外抑制高转移人肝癌MHCC97H细胞的实验研究

目的：研究中药复方＂松友饮＂含药血清对体外培养的人肝癌MHCC97H细胞增殖、侵袭潜能的影响。方法：以MHCC97H细胞构建裸鼠原位移植瘤模型,84只成模裸鼠随机平均分成对照组和＂松友饮＂组,肝脏接种肿瘤24 h内开始1次/天灌胃给药。在第1、4、7、14、21、28、35次灌胃结束后2h,每组分别处死6只裸鼠收集血样。应用含药血清体外干预MHCC97H细胞,检测细胞增殖、侵袭潜能变化。结果：＂松友饮＂灌胃给药1、4、7天的荷HCC裸鼠含药血清体外抑制HCC作用逐渐增强,给药7、14、21、28、35天的含药血清抑制作用无统计学差异。灌胃7天的＂松友饮＂含药血清抑制HCC增殖的作用与中剂量卡培他滨作用近似,抑瘤率分别为37.4%、41.1%。给药7天的含药血清抑制HCC侵袭潜能达到最强,＂松友饮＂组穿膜细胞数明显少于对照组,为26.0±3.6和37.3±2.8。结论：给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对MHCC97H细胞的体外抑制作用达到最强。     

扶脾化瘤饮对人胃癌裸鼠移植瘤生长及TNF、NK活性的影响

目的:观察中药复方扶脾化瘤饮对荷人胃癌SGC-7901裸鼠移植瘤生长及对荷瘤裸鼠TNF、NK活性的影响。方法:建立人胃癌SGC-7901细胞BALB/C裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为5组,每组8只。荷瘤对照组予纯净水灌胃,扶脾化瘤饮大、中、小剂量组予扶脾化瘤饮煎剂灌胃,20ml/kg,1次/d;阳性对照组予环磷酰胺灌胃,20mg/kg,1次/d。观察各组裸鼠移植瘤生长情况,采用L929细胞杀伤实验检测TNF活性及NK细胞活性。结果:扶脾化瘤饮大、中剂量对荷人胃癌SGC-7901裸鼠具有显著的抑瘤作用,抑瘤率为44.46%、35.79%(P0.01,P0.05),同时能显著促进产生TNF,细胞毒指数分别为55.53%、52.52%(P0.01);扶脾化瘤饮大剂量对脾脏NK细胞活性也有提高作用,细胞杀伤率为30.59%(P0.05)。结论:扶脾化瘤饮可以抑制人胃癌SGC-7901的生长,且能拮抗荷瘤所致的免疫功能的抑制。     

蜈蚣提取液对裸鼠移植肝癌治疗作用研究

目的探讨蜈蚣提取液体内对肝癌的治疗作用及其机制。方法建立裸鼠Bel-7404人异位肝癌移植模型,以蜈蚣提取液予以灌服,观察肿瘤生长、裸鼠胸腺与脾质量及肝癌转移情况。结果裸鼠Bel-7404人异位肝癌移植模型成功率100%。蜈蚣提取液对裸鼠Bel-7404移植瘤有明显抑制作用,在移植后第31天,对照组的肿瘤体积为(1 187.5±117.4)mm3,治疗组为(506.1±65.7)mm3;裸鼠处死后,对照组的肿瘤质量为(1 059±125.2)mg,治疗组为(647±122.89)mg,抑制率达38.91%。治疗组胸腺指数为(2.15±0.43)%,脾指数为(10.63±3.7)%,对照组胸腺指数(0.81±0.27)%,脾指数为(7.90±2.58)%,2组比较有显著差异性。结论蜈蚣提取液能抑制裸鼠Bel-7404移植瘤的生长,机制为其能提高荷瘤裸鼠的胸腺指数及脾指数,具有增强裸鼠免疫功能作用。     

温郁金对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长转移的抑制作用及对COX-2和VEGF表达的影响

目的:通过建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型,研究移植瘤生长及其转移的抑制作用。方法:BALB/c裸小鼠12只,以荷SGC-7901人胃癌胞株裸鼠皮下移植瘤为材料,通过手术将癌组织转移到裸小鼠胃壁建立胃癌原位移植模型;造模后,12只荷瘤裸鼠随机分为两组(对照组、治疗组),每组6只;原位移植24h后开始灌胃,治疗组给予温郁金水蒸气蒸馏液(2.5g/mL),0.4mL灌胃,每日1次,对照组予等量生理盐水。当动物出现明显消瘦、弓背、神萎等衰竭征象(约9周)时处死动物,观察和比较两组肿瘤抑制率和肿瘤转移情况。用免疫组化法检测两组移植瘤瘤体中COX-2和VEGF的表达。结果:所有荷瘤鼠胃壁均有肿瘤生长,荷瘤率100%,治疗组与对照组瘤重分别为(0.4189±0.1086)g、(0.7296±0.210)g,P<0.01,抑瘤率为42%;模型组腹膜转移6/6、肝脏转移5/6、腹水1/6,治疗组腹膜转移2/6、肝脏转移1/6、腹水0/6,其中腹膜及肝脏转移情况差异具有统计学意义(P<0.05)。温郁金治疗组瘤体中COX-2和VEGF的表达明显下调。结论:温郁金具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,其作用机制可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。     

中药抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑瘤作用及相关机制研究

目的:观察中药抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其治疗肺癌的作用机制。方法:将肺腺癌细胞A549接种于裸鼠腋窝皮下,形成移植瘤,待成瘤后分为阴性对照组(胃饲生理盐水)、阳性对照组(胃饲鸦胆子油乳)、抑肺饮高、中、低剂量组共5组,灌胃,27d后处死裸鼠,取下移植瘤,进行相关检测。采用流式细胞术检测细胞周期、CD95(Fas)、Bcl-2及凋亡率,免疫组织化学法检测Caspase-3、p16、VEGF、p53,TUNEL法检测凋亡指数。结果:中药抑肺饮中剂量组、阳性对照组的抑瘤率分别为:29.9%、35.9%,G0/G1期细胞百分比(65.7%±20.7%、63.6%±27.3%)均升高,p53(4.55%±1.48%、4.67%±0.79%)、p16(45.6%±19.5%、51.4%±29.1%)的表达阳性率均上升,VEGF(20.90%±8.44%、21.30%±9.28%)和Bcl-2(2.51%±1.37%、2.34%±1.68%)的表达阳性率均降低,凋亡率(27.7%±8.6%、30.5%±10.3%)和凋亡指数(1.53%±1.14%、1.47%±1.29%)均升高,CD95(Fa...     

鲜土贝母二氯甲烷提取物对人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠肿瘤生长及肺转移的抑制作用

目的:研究土贝母鲜品二氯甲烷提取物(DEFT)对绿色荧光蛋白标记的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型中移植瘤生长和肺转移的作用。方法:应用外科原位移植方法,建立人乳腺癌裸鼠移植模型,随机分成3组,阴性对照组(0.9%Na Cl)、低剂量组(DEFT 50 mg/kg)和高剂量组(DEFT 75 mg/kg),每组5只,灌胃给药,1次/d,连续58 d。每周2次荧光成像系统釆集肿瘤图像,系统自带软件计算肿瘤面积;给药结束时,称取肿瘤质量,荧光成像系统观察肺转移情况。结果:给药前后3组裸鼠体质量变化差异均无统计学意义(P0.05)。给药第14天,3组肿瘤面积比较,差异有统计学意义(P0.05)。实验结束时,土贝母低剂量组和高剂量组肺转移的发生均低于阴性对照组(P0.05)。土贝母低剂量组和高剂量的肿瘤质量低于阴性对照组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:鲜土贝母二氯甲烷提取物对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型中肿瘤生长及肺转移的发生有一定抑制作用。     

猫爪草总皂苷对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长及EGFR、MMP-9表达的影响

目的:观察猫爪草总皂苷对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,及对表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:建立A549裸鼠移植瘤模型,待肿瘤长到100mm3以上,开始分组、称重、给药,分别设猫爪草总皂苷高剂量组(1.73 g/kg)、中剂量组(0.86 g/kg)、低剂量组(0.43 g/kg),同时设环磷酰胺(CTX)阳性对照组(30 mg/kg×3)及水阴性对照组(30 m L/kg),每隔3 d测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线图;18 d后脱颈处死裸鼠,称瘤重,计算抑瘤率,病理常规HE染色,免疫组化法检测EGFR、MMP-9在瘤组织中的表达。结果:各治疗组移植瘤生长较水对照组缓慢,猫爪草总皂苷高剂量组瘤重与水对照组比较差异显著(P0.05),不同剂量猫爪草总皂苷的抑瘤率为13.8%-32.6%。猫爪草总皂苷高剂量组14 d和18 d的肿瘤生长体积、中剂量组18 d的肿瘤生长体积与水对照组相比差异显著(P0.05)。不同剂量猫爪草总皂苷组的EGFR、MMP-9的阳性表达率与水对照组相比有所降低,且呈剂量依赖性,其中高剂量组的EGFR阳性表达率与水对照组相比差异显著(P0.05)。结论:猫爪草总皂苷能较好地抑制A549裸鼠移植瘤生长,并下调瘤组织EGFR、MMP-9的表达。     

白背叶提取物芹菜素对裸鼠人胃癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响

目的:研究白背叶提取物芹菜素对裸鼠人胃癌SGC-7901细胞移植瘤生长及凋亡的影响.方法:建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,连续11 dig给予芹菜素600,300,150 mg·kg-或ip五氟尿嘧啶(5-FU) 20 mg·kg-1治疗,观察移植瘤瘤重及药物对肿瘤生长的抑制率;透射电镜观察肿瘤组织细胞凋亡情况.结果:芹菜素600,300 mg·kg-1和5 -FU均能明显抑制裸鼠移植瘤生长,抑瘤率分别为31.78％ (P ＜0.01),25.66％ (P ＜0.05)和49.03％ (P ＜0.01),且芹菜素可致裸鼠移植瘤大量细胞发生凋亡,可见典型的细胞凋亡形态学变化.结论:白背叶提取物芹菜素可能通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用.     

消痰散结方对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成拟态的影响

目的 探讨消痰散结方对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）的影响及其机制。 方法 30只裸鼠右前肢腋部皮下移植人胃癌瘤块建立荷瘤模型。造模后的荷瘤鼠随机分为模型组（10只）、消痰散结组（10只）和多西环素组（10只）,分别给予相应药物灌胃治疗4周后,脱颈椎处死荷瘤鼠。剥取肿瘤,称取瘤质量,计算抑瘤率;计数肿瘤中VM的数量;运用免疫组织化学法检测肿瘤中基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）蛋白的表达。     

消痰散结方对裸鼠MKN-45人胃癌组织中血管内皮生长因子D表达的影响

目的观察消痰散结方对裸鼠MKN-45人胃癌组织中血管内皮生长因子D（VEGF-D）表达的影响,探讨消痰散结方防治胃癌淋巴转移的作用机制。方法 30只裸鼠建立MKN-45人胃癌原位移植模型,并随机分为生理盐水组、5-氟尿嘧啶（5-Fu）组及消痰散结方组,每组10只,分别给予生理盐水、5-Fu和消痰散结方干预后,采用免疫组织化学和RT-PCR方法检测瘤组织VEGF-D蛋白及mRNA的表达。结果消痰散结方可不同程度下调肿瘤组织中VEGF-D蛋白和mRNA水平的表达,与生理盐水组比较,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论调控淋巴管生长因子VEGF-D蛋白和mRNA的表达是消痰散结方防治胃癌淋巴转移的可能机制之一。     

����Ƥ������������ȫ�˵���¡����Ranti-HER�Ŀ�����ҩ�������о�

??OBJECTIVE To observe the in vivo activity of Ranti-HER, a fully human monoclonal antibody, and combined with the doxorubicin or CPT-11 in established human tumor xenografts in nude mice, and to investigate whether EGFR expression is correlated with this activity. METHODS The overall receptor of EGF was quantified by flow cytometry. The anti-tumor effects of Ranti-HER were evaluated using established, s/c human carcinoma xenografts in nude mice, and the relative growth rate of tumor was used to assess the anti-tumor activity. RESULTS A431 cells showed highly expression of EGFR by flow cytometry, SW620 showed negative expression, and EGFR were expressed positively in HT29 and SW948 cells, but both of them were showed low expression. Ranti-HER(0.25-1.0 mg) could inhibit the tumor growth in human A431 epidermoid carcinoma xenografts and dose-effect relationship was observed; Ranti-HER(1.0 mg) could also inhibit the tumor growth in human SW948 colon carcinoma xenografts, but no anti-tumor effects of Ranti-HER 1.0 mg were observed in human HT29 and SW620 colon carcinoma xenografts. Therapeutic enhancement was observed in the A431 xenografts after treatment with Ranti-HER combined with doxorubicin. For another combination regimens, Ranti-HER and CPT-11 proved to be significantly more efficacious than Ranti-HER monotherpy in SW948 xenografts. CONCLUSION Anti-tumor activity of Ranti-HER are observed in xenografts in athymic nude mice, and the activity of Ranti-HER is correlated with the EGFR expression; synergistic effects are observed when Ranti-HER is combined with chemicals compared to Ranti-HER monotherapy.     

健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用

目的:观察健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用,并初步探讨其作用机理。方法:建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,随机分为4组:对照组、奥沙利铂组、健脾解毒方组、健脾解毒方联合奥沙利铂组(联合用药组),观察各组抑瘤率、裸鼠体重及生存期;采用MTT法检测治疗后移植瘤肿瘤细胞耐药性的变化。结果:(1)联合用药组的抑瘤率为53.6%,是单用奥沙利铂组的4.25倍。(2)治疗后,健脾解毒方组和联合用药组体重较对照组增加(P0.05)。(3)健脾解毒方组和联合用药组中位生存期长于对照组和奥沙利铂组(P0.05)。(4)奥沙利铂组对L-OHP、5-Fu、HCPT和THP的耐药指数分别为7.59、4.28、5.78和4.50;联合用药组对L-OHP、5-Fu、HCPT和THP的逆转指数分别为6.57、2.61、4.97和3.10。结论:健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长有增效作用,其增效作用可能与健脾解毒方部分逆转移植瘤对奥沙利铂的耐药性有关。     

健脾解毒方对人结肠癌裸鼠原位移植瘤铂类耐药相关铜转运蛋白ATP7A ATP7B表达的影响

目的:探讨健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用及其对移植瘤铂类耐药相关铜转运蛋白ATP7A、ATP7B表达的影响,揭示健脾解毒方对奥沙利铂增效作用的部分机制。方法:建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,随机分为4组:对照组、奥沙利铂组、健脾解毒方组、健脾解毒方联合奥沙利铂组(联合用药组),治疗后观察各组移植瘤生长情况,采用实时荧光定量-PCR及免疫组化S-P法、Western-blot检测移植瘤中ATP7A、ATP7B mRNA和蛋白的表达。结果:(1)联合用药组的抑瘤率为53.6%,是单用奥沙利铂组的4.25倍;(2)奥沙利铂组裸鼠反复腹腔注射L-OHP后,移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达均高于对照组(P<0.05);联合用药组移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达均低于奥沙利铂组(P<0.05)。结论:健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长有增效作用,其增效作用可能与下调移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达,增加细胞内奥沙利铂药物的浓度有关。     

汗证的经方治验与体会

结合案例5则,探讨运用经方辨治汗证的临床经验。认为汗证为汗液外泄失常的病证,是一种病理性出汗。主要由人体阴阳失调、营卫不和、毛孔开阖不利所致,营卫不和为其核心病机,临证多以桂枝汤为主方,合用柴胡剂、白虎剂等进行加减治疗。     

外科原位移植人前列腺癌自发转移模型的建立

目的 建立人前列腺癌裸鼠自发转移模型，观察其生长和转移的生物学特性。方法 利用外科原位移植的，取材于人前列腺癌细胞系ＰＣ－３Ｍ裸鼠皮下移植瘤，保持肿瘤组织结构的完整性，通过显微外科手术植于裸鼠前列腺两腹侧叶之间，濒死时处死。结果 动物平均３０ｄ衰竭，处死，原位移植成功率１００％，主动脉地转移发生率１００％，较ＰＣ－３Ｍ肿瘤细胞原位注及ＰＣ－３外科原位移植主动脉旁淋巴结转移发生率更高。结论 肿瘤细胞