丹参素在大鼠肝脏低温保存中对HO-1表达的影响

目的 检测丹参素(Salviamiltiorriza Bunge,SB)或锌原卟啉(ZnPP)预处理的大鼠肝脏中血红素氧合酶-1(HO-1)的表达,研究丹参素对HO-1表达和肝脏病理改变的影响.方法 将72只SD雄性大鼠随机分成A、B、C 3组,每组24只.A组灌注保存液为乳酸林格液(LR),B、C组为SB(300 mg·kg-1)+LR,A、B组大鼠在制模前24 h 用生理盐水5 mL行腹腔注射.C组在制模前24 h用ZnPP(1.5 mg·kg-1)腹腔注射.建立大鼠肝脏低温灌注保存模型,在保存0、1、3、6 h后, RT-PCR检测各组大鼠肝脏HO-1 mRNA表达的情况,光镜观察肝细胞形态改变.结果 ①B组大鼠肝脏HO-1 mRNA表达水平明显比其他2组高(均P＜0.01).②B组肝脏病理评分明显优于其他2组(均P＜0.01).病理评分和HO-1的表达呈负相关(r=-0.816,P＜0.01).结论 丹参素灌注保存液可以诱导大鼠肝脏中HO-1的过表达,对肝脏低温保存起保护作用.     

氯化血红素对大鼠肝脏血红素加氧酶1的诱导表达

目的观察氯化血红素（hemin）对大鼠肝脏血红素加氧酶-1（HO-1）的诱导表达作用。方法SD大鼠18只随机分为两组：氯化血红素处理组共10只，每日早晨hemin15mg／kg腹腔注射，每24h重复1次；生理盐水对照组共8只，每日早晨同时间腹腔注射等量生理盐水，每24h重复1次。第10d处死大鼠后检测血清ALT、AST水平，用免疫组织化学方法观察肝组织HO-1的表达，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测肝组织HO-1mRNA表达。结果hemin处理组与生理盐水对照组大鼠血清ALT，AST水平无明显差异。hemin处理组肝组织HO-1表达明显高于生理盐水对照组。结论hemin能诱导大鼠肝组织HO-1表达明显增加。     

供肝丹参多酚酸盐预处理减轻受体大鼠肝移植术后胆道损伤

目的观察丹参多酚酸盐预处理供肝对受体大鼠肝移植术后胆道损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法根据供体肝脏保存方法,受体大鼠随机分为UW液组、丹参多酚酸盐预处理组(UW液+0.4 mg/ml丹参多酚酸盐)、生理盐水对照组(UW液+等量生理盐水)。大鼠行胆道持续外引流肝动脉化原位肝移植,观察移植术后1、6、24 h胆汁流量及胆汁酸盐分泌量。大鼠行肝动脉化大鼠原位肝移植,移植术后2周检测各组大鼠血清碱性磷酸酶、胆汁酸盐及总胆红素水平,观察胆道并发症发生率;采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹法分别检测肝脏移植物内胆汁酸盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)基因及蛋白的表达。结果与UW液组及生理盐水对照组相比,丹参多酚酸盐预处理组大鼠术后早期胆汁流量及胆汁酸盐分泌量明显增加(P<0.05);术后2周血清碱性磷酸酶、胆汁酸盐及总胆红素水平明显降低(P<0.05),胆汁淤积等胆道并发症发生率明显降低(P<0.01);肝脏移植物内BSEP mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05)。结论UW液内加入丹参多酚酸盐保存供肝可明显减轻受体大鼠肝移植术后胆道损伤,降低术后胆道并发症的发生,可能与其促进移植肝内B...     

Nodosin灌注对离体SD大鼠肝脏组织血红素

探讨中草药溪黄草有效成分Nodosin对离体SD大鼠肝脏血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响。采用质量浓度为10 μg/mL的Nodosin溶液灌注离体SD大鼠肝脏,以乳酸钠林格氏液灌注作为对照,用RT-PCR和Western bloting方法观察两组离体肝脏组织HO1的蛋白和mRNA表达的变化。实验结果表明：经Nodosin溶液和乳酸钠林格氏溶液灌注保留1 h和2 h,肝脏组织中HO-1在蛋白和mRNA水平上表达较灌注完毕时均有上调(P<0.01),且实验组较对照组上调作用更加明显(P<0.01)。该结果说明溪黄草有效成分Nodosin具有诱导上调离体肝脏组织HO-1表达,从而对大鼠肝移植后缺血再灌注损伤起到有效的保护作用。     

山药多糖预处理对缺血再灌注损伤大鼠肾脏缺氧诱导因子1α的影响

目的探讨山药多糖预处理对肾缺血再灌注损伤大鼠肾脏缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、山药多糖预处理组,制备大鼠肾缺血再灌注损伤模型。术前1周,山药多糖预处理组每日予以山药多糖（200mg·kg^-1）灌胃,假手术组和模型组每日予以生理盐水（10mL·kg^-1）灌胃,再灌注6h后检测各组大鼠血尿素氮（BUN）和血清肌酐（Scr）的含量,Westernblot和RT—PCR法分别检测各组肾组织HIF-1α蛋白及mRNA、HO-1蛋白的表达水平。结果山药多糖预处理组BUN、Scr含量明显低于模型组（P〈0．01）,肾组织HIF-1αmRNA及蛋白、HO-1蛋白的表达明显高于模型组（P〈0．01）。结论山药多糖预处理对。肾缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机制可能为通过上调肾组织中HIF-1α的表达进而诱导HO-1的表达。     

葛根素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后NF—κB表达的影响

目的探讨葛根素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后NF—κB表达的影响。方法雄性SD大鼠,建立肝脏缺血再灌注模型（HIR）,随机分为假手术组、HIR组和HIR-葛根素预处理组。肝脏缺血再灌注后,通过Western blot方法,分析大鼠肝脏组织中NF—κB蛋白表达的变化。同时利用RT—PCR法,观察大鼠肝脏组织中NF—κBmRNA表达水平的变化。结果与假手术组相比,大鼠肝脏缺血再灌注损伤后,肝脏组织中NF—κB的蛋白表达和mRNA表达水平均显著升高,而经过葛根素预处理后,模型组动物肝脏组织中NF—κB的蛋白表达和mRNA表达水平均显著降低。结论葛根素可以调节NF—κB的表达,可能是葛根素保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤的机制之一。     

氯胺酮对脓毒症大鼠肺组织HO-1表达的影响

目的探讨氯胺酮对脓毒症大鼠肺组织血红素加氧酶-1表达的影响及其可能的保护机制。方法选择健康雄性Vista大鼠40只,随机分为5组：假手术组（A组）、CLP组（B组）、氯胺酮40mg／kg＋CLP组（C组）、氯胺酮组40n=1g／kg＋锌原卟啉组IX5mg／k时CLP（D组）、锌原卟啉IX5mg／kg＋CLP组（E组）,药品均用生理盐水稀释到1ml,假手术组、CLP组均术前30min腹腔注射1ml生理盐水。各组均在9h腹主动脉放血处死大鼠,检测肺组织中MDA的含量、肺泡灌洗液中（BALF）蛋白含量（TP）,取肺组织行HE染色观察其病理变化,用免疫组化方法测定HO-1的表达。结果与A组相比,各损伤组MDA含量和BALF中总蛋白含量升高,HO-1表达上调（P〈0．01）;与B组相比,C组MDA含量和BALF中总蛋白含量降低,HO-1表达上调（P〈O．05或P〈0．01）;与c组相比,D组MDA含量和BALF中总蛋白含量升高,HO-1表达下调（P〈0．01）;B组、D组、E组之间比较,MDA含量和BALF中总蛋白含量差异无统计学意义。结论氯胺酮能够减轻脓毒症大鼠肺损伤,此作用可能与诱导HO-1表达增强有关。     

丹参提取物对脑外伤大鼠神经元SIRT1-FoxO-自噬通路的影响

目的：研究丹参提取物对脑外伤大鼠神经元SIRT1-FoxO-自噬通路的影响。方法：采用Feeney 法构建大鼠脑外伤模型,将SD 大鼠78只随机分成6组,即假手术组、模型组、丹参提取物处理组(A组0.75 ml /mg、B组1.5 ml /mg、C组3.0 ml /mg)和抑制剂组。假手术组和模型组腹腔注射生理盐水5 ml,丹参提取物处理组分别腹腔注射各5 ml丹参提取物溶液,抑制剂组先按照B组剂量给药同时按照5 mg /kg注射SIRT1抑制剂(EX-527)。通过尼氏染色观察大鼠右侧脑组织神经元损伤情况;免疫组织化学染色、RT-PCR、Weston-blot分别测定SIRT1和FoxO1的细胞阳性率、mRNA水平和蛋白表达水平。结果：与假手术组相比,模型组SIRT1和FoxO1的阳性细胞比例、mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与模型组相比,抑制剂组SIRT1的阳性细胞比例、mRNA和蛋白表达量均显著降低(P<0.05),A、B两组SIRT1蛋白水平及C组SIRT1、FoxO1的阳性细胞比例、mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与抑制剂组相比,B、C两组SIRT1阳性细胞比例、A、B和C三组的FoxO1阳性细胞比例、SIRT1、FoxO1的 mRNA和蛋白水平都显著升高(P<0.05);与A组相比,B组FoxO1 mRNA和SIRT1蛋白表达量及C组SIRT1阳性细胞比例、SIRT1和FoxO1的mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与B组相比,C组SIRT1和FoxO1 mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论：丹参注射液处理能够明显促进脑外伤大鼠神经元SIRT1表达,增强SIRT1的去乙酰化活性,正向调节SIRT1-FoxO1-自噬通路发挥神经保护作用。     

溴氰菊酯对大鼠脑血红素氧化酶-1的影响

目的：研究溴氰菊酯（DM）对大鼠脑皮质及海马血红素氧化酶-1（HO-1）mRNA及蛋白表达的影响。方法：健康SD雄性大鼠36只,随机分为对照组（腹腔注射色拉油）、低剂量DM组（腹腔注射1.25mg/kg DM）、高剂量DM组（腹腔注射12.5mg/kg DM）,连续染毒5d,末次染毒24h后以原位杂交法测定皮质及海马HO-1 mRNA的表达,以免疫组化法测定HO-1蛋白表达。结果：与正常对照组相比,高剂量DM组HO-1 mRNA表达阳性细胞数明显增多（P〈0.05）;而HO-1蛋白表达阳性细胞数则在低剂量DM组、高剂量DM组大鼠均明显增高（P〈0.05）,并随着染毒剂量的增加表达明显增强（P〈0.05）。结论：溴氰菊酯可诱导大鼠脑皮质及海马HO-1表达增加,发挥一定保护作用。     

ＨＯ-１持续高表达对ＤＡ到Ｌｅｗｉｓ大鼠肝移植急性排斥反应的影响

目的:探讨血红素氧化酶-1(hemeoxygenage-1,HO-1)在DA到Lewis大鼠肝移植中对急性排斥反应的影响及其机制.方法:建立DA到Lewis大鼠肝移植急性排斥模型,实验分3组,各12对.A组供体术前24 h阴茎背静脉注射5ml/kg生理盐水作为对照;B组供体术前24 h阴茎背经脉注射HO-1诱导剂钴原卟啉(CoPP),C组供体给予HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPP),移植后持续予相同处理直至受体死亡.术后7天,各组处死6只,取外周血及肝脏标本,测定血清ALT,DBIL水平,组织病理观察排斥反应程度,RT-PCR及Western blot法测定移植物内HO-1 mRNA,Foxp3 mRNA及其蛋白表达情况,余观察生存期.结果:术后7天,B组血ALT,TBIL水平与A组,c组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);病理示B组移植肝排斥反应程度轻于A,C组;B组HO-1和Foxp3 mRNA及其蛋白的表达均强于A,C组;B组受体存活时间(29.83±1.40)天较A组(13.00±0.52)天与C组(11.67±0.42)天显著延长(P＜0.01),而A,C组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:诱导移植肝HO-1持续高表达,可通过促进移植物内Foxp3表达增强,发挥免疫抑制作用,减轻移植肝急性排斥反应.     

复方丹参对兔肝脏热缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 探讨复方丹参对兔肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制.方法 采用Pringle's肝脏缺血再灌注模型,48只SD大鼠随机分成三组:假手术组(A组),肝脏缺血冉灌注组(B组)和复方丹参预处理组(c组).测定各组缺血30 min(T1)、再灌注120 min(T2)肝功能(ALT、AST)、肝组织的抗氧化能力(SOD)、脂质过氧化产物丙二醛(MAD)含量、肝指数(湿重/干重%),比较肝组织形态学改变.结果 (1)T1、T2相,B、C组与A组比较肝组织损害重:ALT、AST均升高(P<0.05);肝组织匀浆SOD含量降低;MDA含量升高(P<0.05);肝脏水肿程度上升(P<0.05);肝组织出现不同程度的病理学改变.2)在T1、T2相,C组与B组比较肝组织损害轻:ALT、AST均较低(P<0.05);肝组织匀浆SOD含量高,MDA含量减少(P<0.05);肝脏水肿程度较轻(P<0.05);肝组织出现较轻的病理学改变.结论 复方丹参通过改善肝脏微循环状况,改善缺血肝脏组织的能量代谢,提高肝组织抗氧化能力,减少肝脏细胞的变性坏死程度而对肝脏热缺血再灌注起保护作用.     

血红素氧化酶-1在鼠异种肝移植中的抗排斥作用及其机制研究

目的探讨血红素氧化酶1(HO1)在异种肝移植中的作用及其机制方法采用豚鼠对大鼠肝移植模型,实验动物分为3组,每组10对鼠。A组供体鼠术前24h腹腔注射5ml/kg生理盐水作为对照;B组供体术前24h腹腔注射HO1诱导剂钴原卟啉(CoPP),C组供体注射CoPP的同时给予HO1抑制剂锌原卟啉(ZnPP)。每组受体均接受眼镜蛇毒因子(CVF)。分别以RTPCR和western印迹法观察HO1mRNA及蛋白表达。通过凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)检测移植肝核转录因子(NF)κB的活化,免疫组化观察E选择素表达,来评价HO1对内皮细胞活化的抑制作用。并比较各组受体鼠存活时间。结果各组均未发生超急性排斥反应。CoPP预处理可以诱导HO1mRNA和蛋白过度表达,进而显著抑制移植肝内NFκB的活化和内皮细胞E选择素表达;B组与(0.112±0.039)A组(0.211±0.030)、C组(0.283±0.075)相比差异有统计学意义(P<0.05)。HO1过度表达组与其它组相比,移植肝内皮细胞肿胀减轻,浸润细胞数减少,肝脏功能改善,而且受体鼠存活时间显著延长;B组(15.5h±3.8h)比A组(7.3h±2.1h)差异有统计学意义(P<0.01)。这种保护效应可被同时给予HO1抑制剂ZnPP所取消;B组比C组(6.7h±2.9h)差异有统计学意义(P<0.01)。结论HO1通过抑制内皮细胞活化,延缓异种移植肝排斥反应发生。     

线粒体ATP酶6、8基因及编码蛋白表达改变对移植肝脏能量代谢的影响

目的 探讨肝细胞线粒体DNA ATP酶6、ATP酶8基因及编码蛋白F_0F_1-ATP酶表达改变对移植肝能量代谢的影响.方法 采用改良"二袖套法"制作大鼠肝移植模型,随机分为A组(冷保存30 min组),B组(冷保存6 h组),c组(冷保存12 h组)和D组(假手术对照组),分别于制模后于12 h、24 h、3 d、5 d、7 d采集标本,检测各组大鼠肝脏ATP含量、mtDNA ATP酶6、ATP酶8mRNA和F0F1-ATP酶蛋白表达.结果 冷保存再灌注早期(12 h),各组ATP酶6、ATP酶8 mRNA、F_0F_1-ATP酶蛋白表达(ng/mg蛋白)和ATP含量(U/L)均降低,C组(0.81±o.08,0.71±0.07,0.47±0.07,0.44 ±0.05)显著低于A组(1.11±0.04,1.07±0.07,0.86±0.15,0.70±0.11)、B组(1.02±0.07,0.90±0. 10,0.65 ±0.07,0.55±0.08)(P<0.05).再灌注24 h后各组ATP酶6、ATP酶8mRNA、F_0F_1-ATP酶蛋白表达和ATP含量增加,c组升高较A组、B组缓慢.结论 ATP酶6、ATP酶8基因表达改变后F_0F_1-ATPase蛋白表达异常.可能是导致能量合成障碍的主要原因.     

丹参联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎疗效分析

目的：探讨丹参联合阿德福韦酯（代丁）治疗慢性乙型肝炎（中度）的临床疗效。方法：随机选择30例慢性乙型肝炎患者用丹参（3片tid）和阿德福韦酯（10mg qd〉联合治疗（治疗组）,选择24例患者使用阿德福韦酯（10mg qd〉治疗（对照组）,共治疗1年。结果：治疗结束时,治疗组ALT下降幅度、肝功稳定好于对照组（P〈0.05）,HBeAg转阴率高于对照组（P〈0.05）。结论：丹参和阿德福韦酯联合治疗慢性乙型肝炎（中度）近期疗效肯定。     

丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡及FasL蛋白表达的影响

目的:探讨丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤(IRI)后细胞凋亡及FasL蛋白表达的影响。方法:健康豚鼠72只,随机分成正常组、假手术组、丹参干预假手术组、模型组和干预组(术前腹腔注射丹参注射液,每天1次共7 d),模型组和干预组再各分成3个亚组:缺血30 min组、再灌注6 h组及再灌注24 h组。用HE染色法观察缺血及再灌注不同时间段耳蜗各部位的形态学改变,用免疫组织化学法检测内耳FasL的表达,用原位凋亡法(TUNEL法)检测内耳细胞凋亡情况。结果:正常组、假手术组、丹参干预假手术组内耳罕见凋亡细胞,FasL为弱阳性表达;模型组Corti器、血管纹、螺旋神经节每个时间点均有细胞凋亡,FasL为阳性表达,与正常组比较有显著性差异(P0.05);干预组Corti器、血管纹、螺旋神经节每个时间点均有细胞凋亡,FasL为阳性表达,程度较模型组减弱,与模型组比较有显著性差异(P0.05)。结论:FasL参与了耳蜗IRI后的细胞凋亡,丹参可能通过抑制FasL蛋白的表达使凋亡细胞减少而对IRI后的耳蜗起保护作用。     

血红素加氧酶-1诱导对移植肾的保护作用

目的探讨HO-1在大鼠肾移植模型中的肾保护作用。方法实验分三组,分别为肾移植组(A组)、HO-1诱导剂氯化高铁血红素(hemin)预处理组(B组)和假手术组(C组)。各组在术后4、12、24和48h测血肌酐值,并取肾组织做常规病理切片。用免疫组织化学法检测HO-1表达。结果与C组相比,A、B组HO-1表达明显增加,hemin预处理后,B组表达较A组高。而肾移植后,A、B组肾功能均明显受损,但预处理后B组明显轻于A组。结论HO-1对肾移植后早期肾功能具有保护作用,HO-1诱导可能成为一种新的有效的肾移植后肾保护措施。     

葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中血红素加氧酶-1的影响

目的:观察葛根素对兔肺缺血再灌注损伤(IRI)中血红素加氧酶-1(HO-1)的影响.方法:30只健康日本大耳白兔随机分成假手术对照组(C组)、肺缺血再灌注组(IR组)和葛根素组(Pur组).复制兔单侧肺缺血再灌注损伤模型,对比观察各组肺湿干重比(W/D)、肺泡损伤数(IAR)、HO-1活性、HO-1mRNA及其蛋白的表达.结果:IR组与Pur组W/D、IQA均比C组为高(P＜0.01),但Pur组显著低于IR组(P＜0.01);与C组相比,IR组HO-1活性、HO-1mRNA及其蛋白表达增加(P＜0.01),Pur组上升更加显著(P＜0.01).结论:葛根素能增加HO-1的活性,上调HO-1mRNA及其蛋白的表达,对肺缺血再灌注损伤有明显的保护作用.     

三甲益肝冲剂对肝纤维化大鼠肝组织结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨复方中药三甲益肝冲剂(Sanjia-yigan granule,S-JG)对肝纤维化的预防机制和效果。方法雄性SD大鼠40只,随机分为模型组、复方丹参组、S-JG组和正常对照组各10只。模型组、复方丹参组、S-JG组均以二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型;模型组造模同时给予生理盐水灌胃,复方丹参组造模同时给予复方丹参口服液灌胃,S-JG组造模同时给予S-JG灌胃;正常对照组腹腔注射生理盐水并用自来水灌胃,共4周。4周后取肝组织标本,行HE和Masson染色,免疫组织化学法检测肝组织结缔组织生长因子(CTGF)。结果(1)肝脏病理学改变:模型组可见较粗的纤维间隔;复方丹参组、S-JG组可见稍细的纤维间隔。(2)Masson染色胶原纤维面积比较:模型组胶原面积较正常对照组显著增加(P<0.05),复方丹参组和S-JG组胶原面积均较模型组减轻(P<0.05);(3)免疫组织化学检测结果:模型组CTGF强阳性表达,S-JG组和复方丹参组组表达少于模型组。结论三甲益肝冲剂抗纤维化作用与其抑制肝组织中CTGF的表达有关。