用小白鼠乳鼠直接从湖北疫区黑线姬鼠分离到流行性出血热病毒及其鉴定

经间接免疫荧光法检查证实能与EHF病人恢复期血清起特异反应的黑线姬鼠肺标本,直接经脑内接种2～5日龄乳小鼠,结果分离到一株能在乳鼠体内增殖传代的EHF相关因子(HA_(1018)株)。经EHF单克隆抗体检查及排除呼肠孤病毒存在的可能性,证明HA_(1018)株是流行性出血热病毒。应用乳小白鼠直接从疫区黑线姬鼠分离EHF病毒是一个经济简便的途径,受染的小白鼠可作为模型动物。     

流行性出血热病原学研究——Ⅰ、用非疫区黑线姬鼠分离病毒及其特异性检查

在用非疫区黑线姬鼠分离EHF病毒的传代中,发现感染鼠鼠肺中存在一种可传代的EHF相关因子。用间接免疫荧光法对其特异性作了检查:101份EHF患者血清96％阳性,175份正常人及其他疾病患者血清全部阴性;20例EHF患者双份血清,18例的恢复期有4倍以上抗体滴度升高;12例EHF患者血清对KHF抗原及EHF相关因子的阴、阳性反应基本一致;抗呼肠孤病毒血清和抗类呼肠孤病毒血清等全部阴性;血清编码双盲法检查和预期结果一致;抗KHF血清对EHF患者血清的免疫荧光反应有显著阻断作用,抗呼肠孤病毒Ⅰ～Ⅲ型多价血清无此作用。上述结果可初步确定,此相关因子是流行性出血热病毒。     

从黑线姬鼠肝组织分离流行性出血热病毒J28B株的初步鉴定

继Lee HW 等(1978)采用非疫区黑线姬鼠传代及用间接免疫荧光技术(IFAT)作指标,分离到朝鲜出血热(KHF)病毒后,French 等(1981)又成功地将其适应到人肺癌传代细胞A549细胞系。近年来,我国学者应用上述方法已从EHF 疫区的黑线姬鼠及褐家鼠肺脏和病人血中分离到EHF 相关病毒或有关因子。但迄今,从本病宿主动物肝脏、特别是用细胞培养直接从肝脏分离EHF 病毒,尚未见报导。最近,我们用     

湖北省疫区黑线姬鼠肺组织流行性出血热特异性抗原的免疫荧光检查

<正> 1976年李镐旺等关于朝鲜出血热(KHF)抗原-抗体系统的发现,使得历时40余年。一直未获成功的流行性出血热(EHF)病原学研究发生了一个新的转折。他们首先用间接免疫荧光技术在朝鲜出血热(KHF)疫区黑线姬鼠肺、肾等组织中找到了一种抗原,能与KHF病人恢复期血清发生特异性反应。其后又报导从黑线姬鼠肺和EHF病人急性期血清中分离出朝鲜出血热病毒。除将病毒适应于非疫区黑线姬鼠以外,KHF病毒还被适应于Wistar大白鼠和A-549细胞。朝鲜出血热与苏联、     

流行性出血热病毒抗原在黑线仓鼠体内定位的研究

1983年9、10月间,哈尔滨市太平区民主公社松花江21号肇(航标)附近渔民中间爆发一起EHF。为查明疫区传染源,于同年10月下旬我们在疫区渔民窝棚内外,用鼠夹捕鼠119只,其中黑线姬鼠50只,东方田鼠62只,黑线仓鼠3只,小家鼠2只,鼩鼱2只。以间接免疫荧光技术(IFAT)检查鼠的脏器,结果从1只黑线仓鼠(编号T17)肺、肝、脾、肾组织查出EHF 病毒抗原。现报告如下。     

用非疫区黑线姬鼠分离到流行性出血热病原因子(简报)

我们试用非疫区黑线姬鼠分离出血热病毒,在感染鼠肺组织内查见一种可传代的相关因子,经鉴定证明为流行性出血热病毒。分离材料取自重疫区的黑线姬鼠肺组织;实验动物为非疫区的黑线姬鼠;检查指标为间接免疫荧光法,抗体为朝鲜出血热(KHF)抗原检查阳     

流行性出血热病毒抗原在疫区黑线姬鼠体内定位的研究

病原体在宿主体内的特异性定位决定着病原体向体外排出的方式,以及进一步侵入宿主体内的可能途径。关于EHF 病原体在自然疫源地宿主动物体内定位的研究为数很少,现将我们的研究结果报告如下。材料和方法一、疫区黑线姬鼠肺、肝、脾、肾:1983年9月至1983年10月自吉林省蛟河县EHF 发病较重的6个公社用鼠夹法和挖     

流行性出血热病毒在黑线姬鼠肺内的分布

流行性出血热病毒抗原(EHFAg)在黑线姬鼠肺脏内含量虽然最多,但同一阳性鼠肺多次切片检查,感染细胞数量及亮度常有差别,是否由于EHFAg在肺内分布不均一所致,我们于1987年7月用直接免疫荧光法(DFA)对开阳等县阳性黑线姬鼠肺脏的不同部位进行了检查,结果如下。     

用大白鼠乳鼠原代肺细胞直接从病人血清中分离流行性出血热病毒

<正> 1983年流行性出血热(简称 EHF)流行季节,我们在流行区采集发病2～5天以内的急性期病人血清,用大白鼠乳鼠原代肺细胞(简称 RL)同样分离到 EHF 病毒。方法:将典型 EHF 病人急性期血液按常规方法分离血清,各取0.5ml 接种 RL 单层细胞青霉素小瓶,37℃吸附2小时,     

用大白鼠乳鼠原代肺细胞直接从病人血清中分离流行性出血热病毒

我国用A-549和VeroE6细胞从啮齿类动物和病人血清中分离流行性出血热(EHF)病毒,相继获得成功。但上述分离到的毒株均已通过传代细胞不同代次的传代,不宜作为EHF疫苗的筛选毒株。1983年EHF流行季节,我们在流行区采集了急性期(发病2～5天以內)病人血清用大白鼠乳鼠原代肺细胞(RL)同样分离到EHF病毒。典型EHF病人急性期血液按常规方法     

从野兔分离到流行性出血热病毒

近年来由于流行性出血热(EHF)病原学和流行病学研究的进展,除明确啮齿目中的某些鼠种可作为本病宿主动物外,目前又证明食肉目中的家猫及食虫目中的鼩亦可自然感染并已分别从其体内分离出流行性出血热病毒(EHFV)。我们自1984～1985年对湖北疫区野兔进行了带毒调查,检查到了特异性抗体及抗原,并从5只EHF抗原阳性的野兔脏器中分离出一株能在乳小白鼠体内增殖传代的病毒(Q_(25)),经系统鉴定证实:①Q_(25)     

流行性出血热病毒在Vero—E6细胞内的增殖特性研究

采用病毒盲传的方法，检测流行性出血热（EHF）早期患者血液标本中的EHF病毒，阳性率为79．7％（145／182）。病毒抗原量随盲传时间延长而增加，病毒增殖高峰期在其感染细胞后的9－13d。细胞感染病毒后出现空泡样变，粗面内质网扩张，并在感染细胞内找到病毒颗粒和病毒包涵体。以上结果为研究EHF病毒的增殖特征提供了新的依据，并指出病毒盲传的方法是提高临床标本中病毒检出率的有益方法。     

流行性出血热疫区与非疫区的研究——为出血热病毒分离解决和提供实验动物

<正> 自三十年代发现流行性出血热(EHF)以来,为了分离病毒,探讨实验敏感动物和组织培养方法,花了四十年时间。陕西于1955年发现EHF,1959—1980年对EHF疫区和非发病区进行了长期研究,1973—1975年做了专题调查,随后取得了血清学调查数据,首次提出汉中县为非疫区,1976年应用非疫区原代黑线姬鼠淡色亚种(Apodemus agrarius pallidior)为实验动物来分离EHF病毒,1977年从EHF病人早期血液标本中分离到4株病毒。同时,根据中国医学科学院病毒学研究所的要求以及全国病原研究协作会议纪     

流行性出血热病毒Vero-E6细胞病变株的分离和鉴定

从EHF患者血清中分离到8株EHF病毒,在E 6细胞中传代适应过程中,发现有5株EHF病毒分别在第4～10代出现规律的细胞病变(CPE),对其中两个CPE株(HFN-04和-19)进行了一系列特异性鉴定试验。实验结果表明:(1)病毒的CPE发展与病毒增殖动态完全一致;(2)CPE株的主要生物学和理化性状均符合EHF病毒;(3)用CPE株病毒感染细胞抗原片检测EHF患者双份血清,其恢复期血清抗体均呈4倍以上增高反应;(4)病毒的CPE可被患者血清及EHF、KHF免疫血清所中和,不能被正常兔血清和Reo病毒1—3型多价血清所中和;(5)CPE株病毒感染的E_6细胞几乎能完全吸收EHF患者血清及EHF、KHF抗血清中的特异性抗体;(6)CPE株病毒感染鼠脑悬液与EHF病毒A9株McAb25-1致敏血球呈阳性血凝反应。据此,首次证实了EHF病毒至少有部分毒株能引起E_6细胞规律性CPE。EHF病毒CPE株的发现为EHF的诊断和防治工作提供了有利条件。     

从黑线姬鼠肺细胞中分离一株病毒的鉴定

<正> 黑线姬鼠是肾型流行性出血热(简称出血热,EHF)的传染源和储存宿主。Lee氏利用间接免疫萤光抗体(FA)方法,从黑线姬鼠肺细胞中检测到朝鲜出血热(KHF)病毒抗原,随后病原分离成功。我们曾利用黑线姬鼠的肝、肾组织分离EHF病毒,未获阳性结果。1979年在试图建立黑线姬鼠肺细胞株过程中,我们从连续传代的黑线姬鼠肺细胞中获得大小     

从革螨中分离到流行性出血热病毒

革螨是否自然携带流行性出血热（EHF）病毒，在传播EHF中是否起着媒介作用，我们于近年来进行了探讨，现报告如下：     

从社鼠肺切片中检出流行性出血热病毒抗原

自1978年Lee HW 等用间接免疫荧光法从朝鲜黑线姬鼠肺组织中检出KHF 相关抗原后,国内外学者在EHF 宿主动物方面做了大量研究。据文献报道,国内已证明,在黑线姬鼠、大林姬鼠、褐系鼠、黄胸鼠、罗赛鼠、大足鼠、大仓鼠、棕背(鼠平)、巢鼠、普通田鼠、东方田鼠和黑线仓鼠等13种鼠类体内携带EHF 病毒抗原,而社鼠携带EHF 病毒抗原尚未见报道。1984年5～9月份于陕西省长安县喂子坪地区捕获99只各种鼠类,其中有17只社鼠。我     

从流行性出血热患者血清中分离病毒的研究

应用Vero—E_6细胞从流行性出血热(EHF)患者血清中分离出两株病毒,经初步鉴定表明:病毒不耐酸,对脂溶剂敏感,不被5—碘脱氧脲嘧啶核苷所抑制,属RNA病毒;所分离病毒与流行性出血热病毒(EHFV)抗血清和EHF患者血清做间接免疫荧光抗体法试验(IFA)均为阳性,其感染性可被EHF恢复期病人血清中和;将该病毒感染细胞做超薄切片在电镜下查到EHF病毒颗粒。     

人肺组织内流行性出血热病毒和肺超微结构的形态观察

用病毒分离和电镜超薄切片技术研究了ＥＨＦ尸肺和患ＥＨＦ孕妇流产的胎儿肺组织标本。发现在肺泡Ⅱ型上皮细胞和血管内皮细胞内有典型的ＥＨＦ病毒颗粒和病毒导致的超微结构病变。     

人肺组织内流行性出血热病毒和肺超微结构的形态观察

用病毒分离和电镜超薄切片技术研究了ＥＨＦ尸肺和患ＥＨＦ孕妇流产的胎儿肺组织标本。发现在肺泡Ⅱ型上皮细胞和血管内皮细胞内有典型的ＥＨＦ病毒颗粒和病毒导致的超微结构病变。