孕激素诱导的microRNA-152对子宫内膜上皮细胞增殖的抑制作用

目的 研究孕激素诱导microRNA-152的表达及其对子宫内膜上皮细胞增殖的抑制作用。方法 培养子宫内膜上皮细胞Ishikawa,将其分为4组,分别为空白对照组（control,C组）、10-8mol/L雌激素处理组（estrogen,E组）、10-6mol/L孕激素处理组（progesterone,P组）以及相应浓度的雌、孕激素联合处理组（estrogen plus progesterone,E&P组）,利用实时定量PCR检测microRNA-152的成熟体microRNA-152-3p的表达。将microRNA-152-3p拟似剂转染雌激素预处理的细胞,microRNA-152-3p抑制剂转染雌、孕激素联合处理的细胞,CCK-8法观察microRNA-152-3p对细胞增殖的影响。利用microRNA靶蛋白数据库预测microRNA-152-3p的靶蛋白,并利用Western blot加以验证。结果 实时定量PCR结果显示E组与C组相比,其细胞microRNA-152-3p的表达量无明显变化（ P＞0.05）;P 组细胞microRNA-152-3p的表达量相比C组增加（ P<0.05）;且E&P组的microRNA-152-3p表达量高于C组和P组（ P均<0.05）。对microRNA-152-3p靶蛋白的预测表明CDC14A是其一个重要的靶蛋白。转染microRNA-152-3p拟似剂能够抑制雌激素对子宫内膜上皮细胞的增殖效应（ P<0.05）,同时下调CDC14A蛋白的表达（ P<0.05)。而microRNA-152-3p抑制剂能一定程度解除孕激素对子宫内膜上皮细胞的增殖抑制效应（ P<0.05）,同时上调CDC14A蛋白水平（ P<0.05)。结论 孕激素可通过诱导microRNA-152-3p的表达抑制子宫内膜上皮细胞的增殖,CDC14A蛋白可能是microRNA-152-3p抑制子宫内膜上皮细胞增殖的靶蛋白。     

miR-557通过Notch2/hes1信号通路对肺癌细胞的影响

目的 探讨miR-557通过Notch2/发状分裂相关增强子1(hes1)信号通路对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测人正常肺上皮细胞BEAS-2B及肺癌细胞SPC-A-1、A549、NCI-H446、PC-9中miR-557表达水平。将A549细胞分为对照组(A549细胞在RPMI-1640培养基中正常培养)、miRNC组[A549细胞转染miR-557模拟物(mimic)阴性对照]、miR-557组(A549细胞转染miR-557mimic)、Notch通路激动剂组(5mg/L Jagged1蛋白处理A549细胞)、miR-557+Notch通路激动剂组(转染miR-557mimic成功后加入5mg/L Jagged1蛋白处理A549细胞);qRT-PCR检测A549细胞中miR-557表达水平;细胞计数试剂盒-8检测A549细胞增殖;Transwell检测A549细胞侵袭;划痕实验检测A549细胞迁移;蛋白免疫印迹法检测A549细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Notch2、hes1蛋白表达水...     

microRNA-130a对肺泡上皮细胞肺表面活性物质合成的影响

目的：探讨microRNA-130a对A549肺泡上皮细胞中肺表面活性物质(PS)合成的影响。方法：体外培养A549肺泡上皮细胞株，应用microRNA-130a模拟物和抑制剂干预细胞，将细胞分为模拟物组(mimic组)、模拟物阴性对照组(mimic-NC组)、抑制剂组(inhibitor组)、抑制剂阴性对照组(inhibitor-NC组)和空白对照组(blank组);采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况；采用RT-PCR法检测microRNA-130a和SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA表达水平；采用Western blot法检测SP-A、SP-B、SP-C、SP-D蛋白表达水平。结果：mimic组microRNA-130a表达水平显著高于mimic-NC组和blank组(P<0.05); inhibitor组microRNA-130a表达水平明显低于inhibitor-NC组和blank组(P<0.05);同一时点各组细胞增殖活力间差异无统计学意义(P>0.05);mimic组SP-A、B、C、D mRNA和蛋白表达水平均显著低于mimic-NC组和...     

miR-185-5p靶向AKR1C1抑制肺癌细胞的迁移和侵袭

目的 观察miR-185-5p对肺癌细胞迁移、侵袭的影响,分析酮还原酶1家族成员C1(AKR1C1)在miR-185-5p调控肺癌细胞迁移和侵袭中的作用。方法 RT-qPCR检测miR-185-5p在组织样本(人肺癌及对应癌旁组织)、细胞系(人肺上皮细胞系BEAS-2B和肺癌细胞系A549、H460)中的表达。按照处理方式不同将A549细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-185-5p组(转染miR-185-5p)、miR-185-5p+pcDNA组(共转染miR-185-5p和pcDNA)、miR-185-5p+pcDNA-AKR1C1组(共转染miR-185-5p和pcDNA-AKR1C1);Transwell和划痕实验检测各组A549细胞迁移和侵袭;在线预测网站Starbase预测miR-185-5p的下游靶基因;双荧光素酶报告基因实验检测A549细胞荧光素酶活性;蛋白免疫印迹实验检测各组A549细胞中AKR1C1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的蛋白表达。结果 与癌旁组织比较,肺癌组织中miR-185-5p的表达显著降低(P<0.001);与BEA...     

PI3K介导消退素D1上调脂多糖刺激的A549细胞钠离子通道

目的 研究促炎症消退介质消退素D1(resolvin D1,RvD1)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的肺泡上皮A549细胞钠离子通道α亚基(epithelial sodium channel α-subunit,α-ENaC)和γ亚基(epithelial sodium channel-γ-subunit,γ-ENaC)蛋白表达的影响并探讨其机制.方法 不同时间点和不同剂量的LPS刺激A549细胞建立LPS刺激A549细胞模型.将A549细胞分为:空白对照组;LPS(1μg/ml)组;LPS+RvD1(100nmol/L)组;LPS+LY294002(10μmol/L)组.用Western blot检测A549细胞中α-ENaC和γ-ENaC蛋白表达及磷酸化的磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)水平.结果 LPS下调A549细胞α-ENaC和γ-ENaC蛋白表达,消退素D1抑制LPS对ENaC的下调作用,抑制LPS刺激的磷酸化PI3K.结论 消退素D1通过下调磷酸化PI3K,抑制LPS对A549细胞α-ENaC和γ-ENaC蛋白表达的下调作用.     

microRNA-34a在肺癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨microRNA-34a在肺癌细胞凋亡中的作用。 方法 将A549肺癌细胞株分为3组:microRNA-34a转染组、对照组和未转染组。分析microRNA-34a在A549肺癌细胞中的表达,microRNA-34a对A549肺癌细胞生长周期、细胞增殖、细胞凋亡的影响,microRNA-34a对A549肺癌细胞Bcl-2、P53和C-MYC蛋白以及mRNA表达的影响。 结果 miRNA-34a转染组microRNA-34a的表达明显高于对照组(P<0.05)。miRNA-34a转染组G₀/G₁细胞明显高于对照组和未转染组(P<0.05)。miRNA-34a转染组48 h和96 h的增殖率明显低于对照组和未转染组(P<0.05)。miRNA-34a转染组的细胞凋亡明显高于对照组和未转染组(P<0.05)。miRNA-34a转染组的Bcl-2蛋白和C-MYC蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05);miRNA-34a转染组的P53蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。miRNA-34a转染组的Bcl-2 mRNA和C-MYC mRNA表达水平明显低于对照组Bcl-2 mRNA和C-MYC mRNA表达水平(P<0.05);miRNA-34a转染组的P53 mRNA表达水平明显高于对照组P53 mRNA表达水平(P<0.05)。 结论 microRNA-34a抑制A549肺癌细胞增殖,促进A549肺癌细胞的凋亡,机制可能为下调Bcl-2和C-MYC基因,上调P53基因。      

雷帕霉素对人非小细胞肺癌细胞株A549生长及增殖的影响

目的探讨雷帕霉素对人非小细胞肺癌细胞株A549生长和增殖的影响。方法分别以0(阴性对照组)、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1、5μmol/L雷帕霉素干预A549细胞(雷帕霉素干预组)24、48、72 h,MTT比色法检测细胞活力。分别以0(阴性对照组)、0.01、0.05、0.1、0.5、1μmol/L雷帕霉素干预A549细胞(雷帕霉素干预组)48 h,光学显微镜观察细胞形态变化,PI单染流式细胞仪分析细胞周期。结果 MTT比色法检测结果显示:雷帕霉素干预组细胞生长抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05),其中以5μmol/L雷帕霉素干预72 h组的细胞生长抑制率最高。与阴性对照组比较,经不同浓度雷帕霉素干预48 h后的A549细胞变圆缩小,伪足缩短,细胞间距增大;细胞周期检测结果显示:与阴性对照组比较,雷帕霉素干预组G0/G1期细胞百分率明显增加,S期细胞百分率显著减少(P<0.05)。结论雷帕霉素对人肺癌细胞株A549的生长和增殖具有明显抑制作用,并呈现一定的时间和浓度依赖性。     

雷帕霉素对人非小细胞肺癌细胞株A549生长及增殖的影响

目的探讨雷帕霉素对人非小细胞肺癌细胞株A549生长和增殖的影响。方法分别以0(阴性对照组)、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1、5μmol/L雷帕霉素干预A549细胞(雷帕霉素干预组)24、48、72 h,MTT比色法检测细胞活力。分别以0(阴性对照组)、0.01、0.05、0.1、0.5、1μmol/L雷帕霉素干预A549细胞(雷帕霉素干预组)48 h,光学显微镜观察细胞形态变化,PI单染流式细胞仪分析细胞周期。结果 MTT比色法检测结果显示:雷帕霉素干预组细胞生长抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05),其中以5μmol/L雷帕霉素干预72 h组的细胞生长抑制率最高。与阴性对照组比较,经不同浓度雷帕霉素干预48 h后的A549细胞变圆缩小,伪足缩短,细胞间距增大;细胞周期检测结果显示:与阴性对照组比较,雷帕霉素干预组G0/G1期细胞百分率明显增加,S期细胞百分率显著减少(P<0.05)。结论雷帕霉素对人肺癌细胞株A549的生长和增殖具有明显抑制作用,并呈现一定的时间和浓度依赖性。     

MicroRNA-18a对乳腺癌细胞MCF-7/PTX紫杉醇耐药性的影响

目的:探讨微小RNA-18a(microRNA-18a)对紫杉醇(PTX)耐药的乳腺癌细胞MCF-7/PTX耐药性的影响及其作用机制。方法:将MCF-7/PTX细胞分为microRNA-18a转染组、microRNA-18a敲除对照组、阴性对照组(转染无关序列)、空白对照组,并于转染24,48,72及96 h后,采用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测转染效率。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测转染48 h后MCF-7/PTX细胞对PTX药物敏感性的变化,流式细胞术(FCM)检测转染MCF-7/PTX细胞的细胞凋亡比例及细胞周期的变化,蛋白免疫印迹(Western Blot)实验检测转染48 h后,MCF-7/PTX细胞内共济失调毛细血管扩张突变基因蛋白(ATM)及磷酸化ATM(p-ATM)的表达情况。结果:转染24,48,72和96 h时,microRNA-18a转染组microRNA-18a相对表达量显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0. 05),而敲除对照组microRNA-18a相对表达量显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0. 05)。microRNA-18a转染组PTX的半数抑制浓度(IC50)低于敲除对照组、阴性对照组、空白对照组(P<0. 05)。与敲除对照组、阴性对照组、空白对照组相比,microRNA-18a转染组MCF-7/PTX细胞的凋亡比例及G2/M期细胞比例均升高,ATM及p-ATM蛋白水平均降低,差异均有统计学意义(P<0. 05)。结论:增加microRNA-18a表达水平可以部分逆转MCF-7/PTX细胞对PTX的耐药性,可能与microRNA-18a下调ATM及p-ATM的表达有关。     

SIGIRR对HMGB1诱导的A549细胞炎性反应的影响

目的 观察单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白(SIGIRR)对高迁移率族蛋白B1( HMGB1)诱导的人肺泡上皮细胞株A549炎性反应的影响.方法 构建含有SIGIRR cDNA全长的真核表达载体pCDNA3.1(+),瞬时转染人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞,使SIGIRR在A549细胞中过表达,采用Weste...     

不同剂量射线对非小细胞肺癌患者mTOR信号通路的影响

目的 探讨不同剂量射线对非小细胞肺癌患者哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响.方法 采用不同剂量的雷帕霉素抑制非小细胞肺癌细胞系A549种的mTOR信号通路;Western Blot检测雷帕霉素作用后下游信号分子的表达.将A549细胞分为空白对照组、雷帕霉素作用的观察组,给予不同剂量的射线作用;用MTT试验(噻唑蓝)、克隆形成能力检测细胞的增殖能力,采用流氏细胞仪检测细胞代谢变化,并进行结果分析.结果(1)雷帕霉素药物浓度不同,mTOR、p70S6K、p-4EBPI及AKT水平随之变化;(2)观察组细胞存活能力低于对照组(P<0.05).结论 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,可提高非小细胞肺癌对放疗的敏感性.     

miR-93-5p对非小细胞肺癌A549细胞增殖和迁移的影响

目的研究miR-93-5p对非小细胞肺癌A549细胞增殖和迁移的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养非小细胞肺癌细胞和正常肺细胞,检测细胞中miR-93-5p、P53表达水平,将A549细胞分为miR-93-5p低表达(miR-93-5p inhibitor)组、阴性对照(NC)组和空白对照(CK)组,转染48 h后,CKK-8法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移能力,生物信息学预测P53是miR-93-5p的直接靶标,进一步采用双荧光素酶实验进行验证,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测miR-93-5p低表达对P53蛋白表达及STAT3信号通路相关蛋白表达的影响。结果与正常肺细胞比较,H1299、HCC827、A549肺癌细胞中miR-93-5p表达水平升高,差异有统计学意义(P0.05),P53表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05);转染miR-93-5p inhibitor后,A549细胞中miR-93-5p、p-STAT3、JAK、STAT3表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05),P53相对表达量增加,差异有统计学意义(P0.05);与CK组、NC组相比,A549细胞的增殖、迁移能力均下降,差异有统计学意义(P0.05);TargetScan数据库预测显示P53是miR-93-5p的直接靶标,双荧光素酶报告基因试验证实二者存在靶向关系。Western Blot结果显示:过表达P53后,与CK组、NC组相比,A549细胞中P53蛋白相对表达量增加,差异有统计学意义(P0.05),p-STAT3、JAK、STAT3蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 MiR-93-5p可通过靶向P53调控STAT3信号通路的激活,进而调控肺癌A549细胞的增殖与迁移。     

骨髓间充质干细胞抗肺泡上皮细胞凋亡作用研究

目的 研究骨髓间充质干细胞对LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡的影响及作用.方法 用人肺泡上皮细胞株(A549细胞株)与人骨髓间充质干细胞株(第3代hBMMSC株)建立Transwell非接触分层共培养体系,分4组:(1)空白对照组;PBS+A549; (2) LPS诱导组;LPS+A549; (3) BMMSC对照组:BS+A549+BMMSC; (4) BMMSC干预组:LPS+A549+BMMSC.采用Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测A549细胞凋亡率;Western blotting检测caspase 3、bcl-2和bax蛋白表达.结果 10 μg/mL LPS可体外诱导A549细胞凋亡;BMMSC干预组A549细胞凋亡率、caspase-3与bax蛋白表达水平明显低于LPS诱导组、空白对照组和BMMSC对照组(P＜0.01);bcl-2蛋白表达水平显著高于LPS诱导组、空白对照组和BMMSC对照组(P＜0.01).结论 与LPS诱导的A549细胞共培养,BMMSC能促进A549细胞表达抗凋亡蛋白bcl-2和抑制促凋亡蛋白caspase-3和bax的表达,具有抗细胞凋亡作用.     

腺病毒E1A基因对吸烟所致肺泡上皮细胞IL-8表达的影响

目的探讨腺病毒E1A基因对吸烟所致肺泡上皮细胞IL-8表达的影响.方法通过脂质体转染的方法,将腺病毒E1A基因转染肺泡上皮细胞(A549细胞),经G418筛选、Western blot鉴定E1A阳性表达A549细胞单克隆,不同浓度的香烟提取物(CSE)活化,测定细胞IL-8 mRNA表达和上清液中IL-8浓度.结果与未转染和对照质粒转染A549细胞相比较,经CSE活化后E1A阳性表达A549细胞IL-8mRNA表达和蛋白释放显著增加.结论腺病毒E1A基因显著增加吸烟所致的肺泡上皮细胞IL-8表达,提示腺病毒潜伏感染可能通过放大吸烟所致的气道炎症反应在慢性阻塞性肺疾病的发病中发挥重要作用.     

腺病毒E1A基因对吸烟所致肺泡上皮细胞IL-8表达的影响

目的 探讨腺病毒E1A基因对吸烟所致肺泡上皮细胞IL-8表达的影响。方法 通过脂质体转染的方法，将腺病毒E1A基因转染肺泡上皮细胞(A549细胞)，经G418筛选、Western blot鉴定E1A阳性表达A549细胞单克隆，不同浓度的香烟提取物(CSE)活化，测定细胞IL-8 mRNA表达和上清液中IL-8浓度。结果 与未转染和对照质粒转染A549细胞相比较，经CSE活化后E1A阳性表达A549细胞IL-8 mRNA表达和蛋白释放显著增加。结论 腺病毒E1A基因显著增加吸烟所致的肺泡上皮细胞IL-8表达，提示腺病毒潜伏感染可能通过放大吸烟所致的气道炎症反应在慢性阻塞性肺疾病的发病中发挥重要作用。     

沉默Pin1表达抑制高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡中SIRT1核-浆穿梭

目的 通过沉默Pin1表达观察高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡中组蛋白去乙酰化酶(SIRT1)核-浆穿梭改变.方法 在体外常规培养A549细胞及A549-Pin1shRNA细胞,随机分为对照组(常规培养)和高氧组、A549-Pin1shRNA细胞组(均给予高体积分数氧诱导细胞).密闭培养24 h后,倒置相差显微镜下观察各组细胞形态改变;免疫组织化学方法检测各组细胞中Caspase 3、p53蛋白在各组细胞中的表达情况;免疫荧光法定位SIRT1核-浆穿梭变化.结果 对照组细胞生长状态良好,细胞呈梭形,活细胞数量较多.高氧组细胞生长状态差,细胞由原来的梭形变成椭圆形.A549-Pin1shRNA组细胞生长状态欠佳,贴壁欠佳,活细胞数量较高氧组有所增加,但是未达到对照组的水平.对照组密闭培养24 h,高氧组、A549-Pin1shRNA组通氧后密闭培养24 h后,对照组中Caspase 3、p53表达最少,与高氧组相比,差异有统计学意义(P＜0.05);而A549-Pin1shRNA组在通氧后密闭24 h,Caspase 3、p53表达介于对照组与高氧组之间,与各组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).在免疫荧光法定位SIRT1核-浆穿梭改变中,对照组未见SIRT1核-浆穿梭改变,而A549-Pin1shRNA组较高氧组减少.结论 抑制Pin1表达能够减少人肺泡上皮细胞凋亡中SIRT1核-浆穿梭.     

谷氨酰胺对产生内质网应激反应的A549细胞JNK,pJNK,CHOP,GRP78表达水平的影响

[目的]探讨谷氨酰胺对产生内质网应激反应的A549细胞的保护作用.[方法]取A549细胞进行培养,分为5个组,其中空白对照组培养液中只有A549细胞,衣霉素组培养液中加入A549细胞和衣霉素1mg/L,GLN4组培养液中加入A549细胞、衣霉素1mg/L和4mmol/L谷氨酰胺,GLN8组培养液中加入A549细胞、衣霉素1mg/L和8mmol/L谷氨酰胺,GLN12组培养液中加入A549细胞、衣霉素1mg/L和12mmol/L谷氨酰胺.利用Western blot方法检测各组细胞培养12h后的JNK,pJNK,CHOP及GRP78表达水平.[结果]与空白对照组比较,衣霉素组pJNK,CHOP及GRP78表达水平均明显升高(P<0.001),而JNK表达水平未见明显改变(P>0.05),提示衣霉素诱导A549细胞产生了内质网应激.与衣霉素组比较,GLN4,GLN8及GLN12组pJNK,CHOP,GRP78表达水平均明显降低(P<0.05).[结论]谷氨酰胺对产生内质网应激的A549细胞具有保护作用.     

miR-16-5p靶向PTEN/PI3K/AKT信号通路对非小细胞肺癌细胞活性和迁移能力的影响

目的 探讨AS-miR-16-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞活性和迁移能力的影响及潜在的作用机制.方法 将NSCLC A549细胞分为3组,分别为Black组、miR-NC组和AS-miR-16-5p组.miR-NC组和AS-miR-16-5p组分别转染阴性对照miRNA(miR-NC)及AS-miR-1...     

低氧条件下RNA干扰阻断Notch3通路对人肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的 观察低氧条件下RNA干扰阻断Notch3对人肺腺癌A549细胞增殖的影响.方法 低氧条件下(1％O2)培养人肺腺癌A549细胞,以Notch3 siRNA转染A549细胞(Notch3 siRNA组),RT-PCR和Western blotting法分别检测A549细胞内Notch3及其信号通路下游基因HES1 mRNA和蛋白表达,MTT法检测转染24、48、72 h A549细胞的细胞活力;另设阴性对照组和空白对照组.结果 Notch3 siRNA转染A549细胞后,Notch3、HES1 mRNA和蛋白表达均显著降低(P＜0.05);Notch3 siRNA转染后时间依赖性抑制A549细胞生长,Notch3 siRNA组转染48、72 h细胞活力与阴性对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低氧条件下Notch3 siRNA转染人肺腺癌A549细胞可有效抑制Notch3及其下游靶基因HES1的表达,并抑制A549细胞生长.     

雷帕霉素靶蛋白复合物1对Hela细胞微管蛋白稳定性的影响

目的: 探讨雷帕霉素靶蛋白复合物1 (mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1）对Hela细胞微管稳定性的影响及可能机制。方法: 使用50 nmol/L雷帕霉素预处理Hela细胞24 h后,加入5 μmol的诺考达唑处理30、60和120 min,免疫荧光检测微管蛋白的稳定性;使用50 nmol/L雷帕霉素处理Hela细胞24 h后,蛋白质印迹检测促微管解聚蛋白stathmin、KIF2A,促微管聚合蛋白CLIP170,微管切割蛋白Katanin、Spastin的表达变化。转染ATG5-shRNA抑制自噬相关基因5（autophagy-related gene5, ATG5）后,免疫荧光检测微管蛋白稳定性的改变。使用50 nmol/L雷帕霉素预处理Hela细胞24 h后,蛋白质印迹检测Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,RhoA)的表达;转染GFP RhoA-Q63L或GFP RhoA-N19、p190RhoGAP-siRNA质粒后,免疫荧光检测微管稳定性的改变。结果： 用雷帕霉素抑制mTORC1的活性后Hela细胞微管的稳定性增强,但微管稳定性相关蛋白stathmin、KIF2A、CLIP170、Katanin、Spastin无明显变化。抑制细胞自噬后,微管的稳定性无明显改变。雷帕霉素抑制 mTORC1的活性后RhoA GTP酶的活化水平下调;下调p190RhoGAP的活化水平后,微管的稳定性减弱。结论： RhoA在mTORC1介导的Hela细胞微管稳定性中起重要作用。