杞丹方对糖尿病小鼠降血糖作用及机制研究

  目的  研究杞丹方对糖尿病小鼠降血糖作用并探讨相关机制。  方法  取SPF级ICR雄性小鼠, 禁食16 h后腹腔注射四氧嘧啶120 mg·kg-1, 5 d后禁食12 h测血糖, 血糖值在10~25 mmol·L-1为糖尿病造模成功。将造模成功的ICR雄性糖尿病小鼠, 分为模型组, 二甲双胍组, 杞丹方低、中、高剂量组(0.34、0.67、1.34 g·kg-1·d-1), 正常ICR雄性小鼠为空白组, 给药30 d。每10 d记录体质量和空腹血糖(FBG)1次, 30 d后进行葡萄糖耐量试验(OGTT); ELISA法检测血清胰岛素水平并摘取胰腺、肝脏组织, 进行HE染色, 观察其病理改变; 采用Western blot和qPCR检测肝脏组织IRS-1、PI3K、AKT和GLUT4的表达水平。  结果  与模型组相比, 杞丹方中、高剂量组小鼠FBG水平、糖耐量显著降低(P < 0.01),血清胰岛素水平显著升高(P < 0.01)。杞丹方各剂量组胰腺和肝脏组织结构有明显改善, 胰岛形态得到一定程度恢复, 少见肝脏组织异常与血管充血。杞丹方高剂量组能显著上调肝脏组织中的p-IRS-1/IRS-1、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和GLUT4蛋白表达水平(P < 0.01);显著上调肝脏组织中的IRS-1、PI3Kp85α、AKT1和GLUT4 mRNA水平(P < 0.01)。  结论  杞丹方对糖尿病小鼠具有降血糖作用, 其作用机制是通过调控IRS-1/PI3K/AKT信号通路来实现的。      

大黄素介导IRS-2/PI3K/Akt通路干预大鼠非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的探讨大黄素通过介导IRS-2/PI3 K/Akt通路对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的影响。方法随机选取25只雄性大鼠给予高脂饲料喂养12周制备NASH模型,12周后取5只大鼠进行检测,确定NASH模型制备成功,剩余20只大鼠数字表法随机分为模型组(10只)和大黄素组(10只),另取同龄10只雄性未造模大鼠作为正常对照组。大黄素组大鼠给予20 mg/kg的大黄素灌胃,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,连续给予8周。对大鼠肝脏进行称重,计算肝指数;检测空腹血糖和空腹胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测血生化指标。对肝组织进行HE染色,检测肝组织中IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量。结果模型组大鼠肝指数、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TG、TC和LDL-C水平较正常对照组增高,HDL-C水平较正常对照组降低(P<0.01);大黄素组大鼠肝指数、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TG、TC和LDL-C水平较模型组降低,HDL-C水平较模型组增高(P<0.05)病理检测发现,模型组出现大量脂肪变性,存在炎性细胞浸润和细胞气球样变性,大黄素组病灶明显较模型组减轻。模型组大鼠IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量较正常对照组降低(P<0.05),大黄素组大鼠IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量较模型组增高(P<0.05)。结论大黄素可以提高IRS-2/PI3K/Akt通路的活性,改善高脂诱导的NASH大鼠肝脏脂肪沉积及胰岛素抵抗。     

丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素PI3K/Akt信号通路的调节作用及其机制

目的：观察丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路中胰岛素受体（IR）、胰岛素受体底物1（IRS-1）、PI3K和Akt的调节作用,初步探讨丝胶降血糖的作用机制。方法：36只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和实验组,每组12只。模型组和实验组大鼠采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ,35 mg·kg^-1·d^-1,连续2 d）的方法制备2型糖尿病模型,以STZ注射结束后72 h的空腹血糖≥ 11.1 mmol·L^-1作为成模标准。模型建立成功后,实验组大鼠给予2.4·kg^-1·d^-1丝胶灌胃,正常组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,连续用药35d。取各组大鼠血液标本,采用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖;取各组大鼠肝组织,采用免疫组织化学法和Western blotting法检测各组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白的表达,采用过碘酸-Schiff染色法检测各组大鼠肝糖原含量。结果：模型组大鼠血糖水平明显高于正常组（P<0.05）,实验组大鼠血糖水平明显低于模型组（P<0.05）。正常组和实验组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白呈棕黄色和（或）棕褐色颗粒,小部分呈弥散状;模型组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白表达量明显减少,呈棕黄色和（或）棕褐色颗粒,其中IR、IRS-1和Akt蛋白主要位于肝细胞胞膜和胞质,PI3K蛋白主要位于肝细胞胞质。各组大鼠肝切片均可见肝糖原阳性染色的红色或紫红色颗粒,其中模型组大鼠肝糖原染色浅,面积较小。与正常组比较,模型组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白表达水平及肝糖原含量明显降低（P<0.05）;与模型组比较,实验组大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt蛋白表达水平及肝糖原含量明显升高（P<0.05）。结论：丝胶可通过上调糖尿病大鼠肝组织中IR、IRS-1、PI3K和Akt的表达以增强肝脏胰岛素PI3K/Akt信号通路的转导效应,从而起到降低血糖的作用。     

针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌胰岛素受体底物和葡萄糖转运蛋白4的影响

【目的】观察针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌胰岛素受体底物-1（IRS-1）、胰岛素受体底物-2（IRS-2）和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。【方法】将32只SD大鼠随机分成正常组、正常针刺组、模型组和模型针刺组,采用葡萄糖氧化酶法、酶联免疫吸附法（ELISA）、实时荧光定量PCR等方法,检测并比较各组大鼠空腹血糖(FPG),血浆胰岛素(FINS),胰岛素敏感性指数(ISI),血清C-肽(C-P),骨骼肌IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达。【结果】模型组大鼠的FPG、 FINS、C-P水平较正常组显著升高（P＜0.01), ISI, IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达较正常组显著降低(P＜0.01);模型针刺组的FPG、 FINS、 C-P水平较模型组显著降低（P＜0.05或P＜0.01), ISI, IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达较模型组显著升高(P＜0.01)。【结论】针刺可能在基因转录水平对IRS-1、 IRS-2、 GLUT4产生影响,从而改善PI3K通路的信号转导。     

黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠肝组织PI3K/AKT信号通路影响

目的基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探究黄芪葛根配伍降低糖尿病大鼠血糖、血脂的作用机制。方法 SD大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,随机分为模型组、阳性对照(金芪降糖片)组(1.47 g/kg)、黄芪组(2.7 g/kg)、葛根组(1.35 g/kg)、黄芪葛根汤组(4.05 g/kg),各15只,另设正常组11只,造模同日灌服相应药物或蒸馏水10 mL/kg,连续30 d。检测血糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO),实时荧光定量PCR法检测肝组织胰岛素受体底物-2(IRS-2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT2)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、肝X受体(LXRα)、固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)mRNA相对表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠治疗30 d后血糖、CHO、TG水平明显升高,IRS-2、PI3K、AKT2、LXRαmRNA表达降低,GSK3β、SREBP-1 mRNA表达增加(P0.05)。黄芪组、葛根组及其配伍组能降低模型组大鼠血糖及CHO、TG水平;提升IRS-2、PI3K(葛根组除外)、AKT2(葛根组除外)、LXRαmRNA表达,但两药间无交互作用;同时能降低GSK3β、SREBP-1 mRNA表达,黄芪、葛根二者配伍降低GSK3βmRNA表达的效果优于单用,而降低SREBP-1 mRNA表达的效果不如单用。结论黄芪降糖、降脂作用可能与提升IRS-2、PI3K/AKT、LXRαmRNA表达,降低GSK3β、SREBP-1 mRNA表达有关。葛根降糖、降脂作用可能与提升IRS-2、LXRαmRNA表达,降低GSK3β、SREBP-1 mRNA表达有关。黄芪葛根配伍降低糖尿病大鼠的血糖血脂可能与刺激肝组织IRS-2,激活PI3K/AKT信号通路,调节下游信号分子GSK3β、LXRα、SREBP-1的活性有关。     

丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏IRS-1的调节作用

目的:观察彩色蚕茧水提物-丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体底物-1(IRS-1)的调节作用。方法:48只雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗高剂量组和丝胶治疗低剂量组,每组12只大鼠。采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法制作2型糖尿病大鼠模型,以空腹血糖≥11.1mmol/L作为成模标准。待模型成功建立后,丝胶治疗高(2.4g/kg/d)、低(1.8g/kg/d)剂量组大鼠分别给予不同剂量丝胶灌胃35天,正常对照组、模型组大鼠给予同等剂量生理盐水灌胃35天。釆用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的血糖,采用Real Time PCR法检测各组大鼠肝脏IRS-1 mRNA的表达。结果:模型组大鼠的血糖为(29.45±4.82)mmol/L,明显高于正常对照组大鼠的血糖(10.83±2.03)mmol/L(P<0.05);丝胶治疗高、低剂量组大鼠的血糖分别为(13.20±4.09)mmol/L、(13.18±2.30)mmol/L,均明显低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠肝脏IRS-1 mRNA的表达水平为(0.0099±0.0040)拷贝数/μl,明显低于正常对照组大鼠(0.0251±0.0041)拷贝数/μl(P<0.05);丝胶治疗高、低剂量组大鼠肝脏的IRS-1 mRNA的表达水平分别为(0.0108±0.0039)拷贝数/μl、(0.0131±0.0036)拷贝数/微升,均明显高于模型组(P<0.05)。结论:IRS-1是胰岛素PI3K/Akt信号通路的关键因子,本研究提示丝胶可能通过提高PI3K/Akt信号通路IRS-1的表达发挥降低血糖的作用。     

基于析因设计探讨黄芪葛根汤有效组分对糖尿病大鼠肝脏PI3K/Akt信号转导通路的影响

目的:观察黄芪葛根汤总黄酮与总皂苷及其配伍对糖尿病大鼠肝脏糖代谢的影响。方法:将86只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、总黄酮组、总皂苷组、总黄酮与总皂苷组。采用一次性腹腔注射STZ(按46 mg·kg~(-1))诱导糖尿病大鼠模型。血糖仪检测血糖水平,RTPCR法检测肝组织IRS-2、PI3K、Akt2、GLUT-4、Gsk-3βmRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖明显升高,肝组织IRS-2、PI3K、Akt2、GLUT-4 mRNA水平降低(P0.05);Gsk-3βmRNA水平显著升高(P0.05)。总黄酮、总皂苷均有降糖作用,但无交互作用(P=0.0640.05)。总皂苷能有效提升IRS-2 mRNA水平,总黄酮提升GLUT-4且降低Gsk-3βmRNA水平显著(P0.05),两药存在交互作用,但合用不如单一用药;总黄酮、总皂苷均能提升PI3K、Akt2 mRNA水平,对PI3K mRNA表达则无交互作用。结论:总皂苷的降糖机制可能与IRS-2 mRNA表达有关,总黄酮与Gsk-3β、GLUT-4 mRNA表达有关,两组分相伍之降糖作用呈现各自为用的现象。     

竹节参总皂苷缓解CCl4诱导的大鼠急性肝损伤：基于调控PI3K/Akt/NF-κB信号通路

目的 探讨土家族药用植物竹节参提取物总皂苷对CCl4致急性肝损伤的保护作用及潜在的药理学机制。方法 将6周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组（100 mg/kg）、竹节参总皂苷低、中、高（50、100、200 mg/kg）剂量组,各组8只,除空白组外,其余各组采用CCl4诱导大鼠急性肝损伤模型,处理组于造模中给予药物灌胃干预。比较各组大鼠的血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBil）和碱性磷酸酶（ALP）水平;HE染色观察肝组织病理学改变;免疫组化检测肝脏组织PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关分子的表达;酶联免疫法测定肝脏组织总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）水平;蛋白免疫印迹法检测肝脏组织PI3K-Akt和SIRT6-NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果网络药理学分析显示,竹节参总皂苷对急性肝损伤的有治疗作用,其关键的通路为PI3K/Akt等信号通路。血清学和酶联免疫学实验结果显示,与正常组相比,模型组大鼠血清和肝组织的AST、ALT、ALP、TBil和MDA明显增高（P<0....     

芪蛭降糖胶囊对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及其机制

目的：探讨芪蛭降糖胶囊(QJ)对糖尿病大鼠胰岛素抵抗(IR)的作用,阐明其药物作用的分子药理机制。方法：100只Wistar大鼠采用高脂饮食联合注射链脲佐菌素（STZ）的方法复制2型糖尿病大鼠模型。将建模成功大鼠随机分为模型组（DM）,参芪降糖颗粒阳性对照组（SQ）,芪蛭降糖胶囊低（QJL）、中 (QJM)和高剂量组(QJH),同时设立正常对照组（NC）。芪蛭降糖胶囊低、中和高剂量组药物浓度分别为0.34、0.68和1.35 g?kg-1;参芪降糖颗粒药物浓度为0.27 g?kg-1。大鼠建模成功后,给予相应浓度药物干预治疗8周。经药物干预后,应用血糖检测仪及全自动生化分析仪测定大鼠空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（IRI）和脂质代谢相关生化指标,Real Time PCR法测定肝脏组织中胰岛素受体底物1（IRS-1）、磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）和葡萄糖转运体4（GLUT4）基因的mRNA表达水平,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和脂联素（ADPN）水平。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠FBG、FINS和IRI显著升高（P<0.05或P<0.01）;血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白（LDL）水平显著升高（P<0.05）,血清高密度脂蛋白（HDL）水平显著降低（P<0.05）;肝脏组织中IRS-1、PI3K和GLUT4基因的mRNA表达水平显著下降（P<0.05）,血清TNF-α水平显著升高（P<0.05）,血清ADPN水平显著降低（P<0.05）。与模型组比较,芪蛭降糖胶囊低、中、高剂量组及参芪降糖颗粒阳性对照组大鼠FBG和IRI显著降低（P<0.01）;芪蛭降糖胶囊中、高剂量组及参芪降糖颗粒阳性对照组FINS显著降低（P<0.05）;芪蛭降糖胶囊中剂量组及参芪降糖颗粒阳性对照组血清TC、TG和LDL水平显著降低（P<0.05或P<0.01）,HDL水平显著升高（P< 0.05）;肝脏组织中IRS-1、PI3K和GLUT4基因的mRNA表达水平显著上调（P<0.05）;芪蛭降糖胶囊中、高剂量组及参芪降糖颗粒阳性对照组血清TNF-α水平显著降低（P<0.05）,血清ADPN水平显著升高（P<0.05）。结论：芪蛭降糖胶囊具有改善糖尿病大鼠IR的作用,其作用机制与改善糖脂代谢、影响胰岛素信号传导通路有关。     

罗格列酮对实验性2型糖尿病大鼠肝脏组织IRS-2表达的调节

目的观察罗格列酮对实验性2型糖尿病大鼠肝脏组织中IRS-2表达的调节,进一步探讨其可能的作用机制.方法采用低剂量链脲佐菌素尾静脉注射联合高脂饲料喂养建立2型糖尿病大鼠模型.未予上述处理的大鼠作为正常对照组(NC组),成模大鼠随机分为糖尿病对照组(UD组)和罗格列酮干预组(RI组).药物干预4周后,称重,检测血清葡萄糖、胰岛素、甘油三酯和胆固醇,检测大鼠肝脏组织中IRS-2蛋白及mRNA的表达.结果(1)RI组大鼠空腹血糖、胰岛素、甘油三酯水平均低于UD组(P＜0.05),高于NC组(P＜0.05);RJ组血清胆固醇高于NC组(P＜0.05),与UD组差异无显著性(P=0.318);(2)免疫印记法示:UD组与NC组相比,肝脏IRS-2蛋白表达明显减少,RI组肝脏IRS-2蛋白表达增加,介于前两者之间,差异均有显著性(P＜0.05).RT-PCR示,UD组较NC组肝脏IRS-2mRNA表达下调,而RI组IRS-2mRNA表达水平介于二者之间.结论IRS-2的继发性减少可能是2型糖尿病的发病机制之一;罗格列酮能够上调IRS-2mRNA及蛋白的表达,这可能是其改善胰岛素抵抗、保护胰岛β细胞的另一作用机制.     

祛胰抵方对2型糖尿病大鼠肝脏IRS-2蛋白表达的影响

目的 :观察2型糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素浓度和胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate 2,IRS-2)的蛋白表达变化及祛胰抵方对其变化的影响。方法 :以小剂量链脲佐菌素(30 mg/kg)腹腔注射合并高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型,给予不同剂量祛胰抵方治疗12周。分别测定其血糖、血清胰岛素浓度、肝脏组织的IRS-2蛋白表达。结果 :造模后2型糖尿病大鼠的血糖、血清胰岛素升高,肝脏组织的IRS-2蛋白表达下降;祛胰抵方能降低模型大鼠的血糖和血清胰岛素,并能显著升高肝脏组织IRS-2的蛋白表达。结论 :祛胰抵方治疗2型糖尿病可能与其提高肝脏组织IRS-2的蛋白表达从而改善胰岛素信号传导有关。     

黄芪甲苷对肥胖糖尿病大鼠肾脏氧化应激、Nrf2蛋白表达和胰岛β细胞的影响

目的观察黄芪甲苷(AS-IV)对肥胖糖尿病(DM)大鼠肾脏氧化应激、Nrf2蛋白表达和胰岛β细胞的影响。方法 2018年1-6月于武汉大学人民医院动物实验室进行实验。最终纳入健康雄性Wistar大鼠24只,随机数字表法分为对照组(n=8)、DM组(n=8)、AS-Ⅳ组(n=8),DM组给予链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性单剂量腹腔注射建立DM模型,AS-Ⅳ组在DM组基础上给予AS-Ⅳ80 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃给药,8周后处死大鼠,检测各组.血尿相关指标、体质量及肾脏氧化应激指标,并观察胰岛细胞病理改变与胰岛细胞凋亡情况,采用Western免疫印迹检测Nrf 2蛋白。结果 (1)DM组及AS-Ⅳ组空腹血糖(FPG)、24h尿白蛋白排泄率(UAER)及体质量显著高于对照组,空腹胰岛素(FINS)显著低于对照组(F=59. 526、69. 342、19. 272、37. 934,P均=0. 000); AS-Ⅳ组FPG、UAER及体质量显著低于DM组,FINS显著高于DM组(P<0. 01)。(2) DM组及AS-Ⅳ组丙二醛(MDA)含量显著高于对照组,总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著低于对照组(F=29. 581、53. 546,P <0. 01); AS-Ⅳ组MDA含量显著低于DM组,T-SOD活性显著高于DM组(P <0.01)。(3)与对照组比较,DM组胰岛细胞数目显著减少,且出现肿胀、坏死及空泡变性,呈不规则排列,AS-Ⅳ组胰岛细胞较DM组显著改善;DM组及AS-Ⅳ组大鼠胰岛细胞凋亡率显著高于对照组(t=9.991、5.987,P均=0.000),AS-Ⅳ组大鼠胰岛细胞凋亡率显著低于DM组,差异均有统计学意义(t=6.952,P=0. 000)。(4) Western免疫印迹结果显示,DM组大鼠肾组织总Nrf 2、核Nrf 2蛋白表达显著低于对照组及AS-Ⅳ组(t=2.542、3.881、2.642、2.267,P=0.024、0.002、0.019、0.040),AS-Ⅳ组大鼠肾组织总Nrf 2、核Nrf 2蛋白表达显著高于DM组,差异均有统计学意义(t=2.985、2.928,P=0.010、0.011)。结论 AS-Ⅳ可有效减轻肥胖DM大鼠肾脏氧化应激反应,上调Nrf2蛋白表达,并延缓胰岛β细胞凋亡,其作用机制可能与Nrf2-ARE通路被激活相关。     

基于IRS-1/PI3K/AKT/GLUT4通路探讨二苯乙烯类化合物改善胰岛素抵抗作用机制

[目的] 探讨3种中药（虎杖、桑白皮、何首乌）来源的二苯乙烯类化合物改善胰岛素抵抗（IR）的作用机制。[方法] 利用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作用于3T3-L1脂肪细胞96 h建立IR细胞模型;采用噻唑蓝（MTT）法检测二苯乙烯类化合物白藜芦醇（RES）、虎杖苷（PD）、桑皮苷A（Mul A）、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡糖糖苷（THSG）对脂肪细胞生存率的影响;葡萄糖氧化酶法检测细胞培养基上清液中葡萄糖含量;采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测胰岛素受体底物-1（IRS-1）、磷酸化IRS-1（p-IRS-1）、磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT（p-AKT）、葡萄糖转运体4（GLUT4）的蛋白表达水平;采用实时定量荧光聚合酶链反应（RT-PCR）法检测GLUT4 mRNA表达水平。[结果] 与空白对照组相比,模型组的葡萄糖消耗量显著下降,模型组的p-IRS-1（Ser307）蛋白表达显著增加,p-PI3K、p-AKT（Ser473）、GLUT4蛋白表达显著下降,模型组GLUT4 mRNA表达显著降低;与模型组相比,RES、Mul A、THSG组的葡萄糖消耗量显著增加,PD组的葡萄糖消耗量无明显变化,Mul A、THSG组均能显著逆转p-IRS-1（Ser307）、p-PI3K、p-AKT（Ser473）、GLUT4的蛋白表达,RES仅能够逆转p-IRS-1（Ser307）、GLUT4的蛋白表达;与模型组相比,THSG组GLUT4 mRNA表达显著增加。[结论] Mul A、THSG能够通过IRS-1/PI3K/AKT/GLUT4信号通路改善脂肪细胞IR,而RES则通过激活IRS-1和GLUT4,但不通过PI3K/AKT途径发挥改善脂肪细胞IR的作用。PD无降糖活性。     

辛开苦降方对初发2型糖尿病KKay小鼠肝脏IRS-2/PI3K通路的影响

目的 研究辛开苦降方对KKay 2型糖尿病（T2DM）小鼠肝脏胰岛素受体底物-2/磷脂酰肌醇3-激酶通路（IRS-2/PI3K）的影响.方法 将小鼠随机分为辛开组、苦降组、辛开苦降组、罗格列酮组、模型组.对照组选10周龄雄性C57BL/6J小鼠10只.对照组及模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液（CMC）.灌胃给药四周后测血浆葡萄糖（FBG）,及胰岛素浓度（FINS）,免疫蛋白质印迹法（Western blotting）测定肝组织IRS-2、P-IRS-2（磷酸化胰岛素受体底物-2）、PI3K、P-PI3K（磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶）、IRS-3、IRS-4蛋白表达水平,RT-PCR法测定肝组织PI3K 、IRS-2、IRS-3、InsR（胰岛素受体）的mRNA表达水平.结果 与模型组比较,苦降组、马来酸罗格列酮组血糖明显降低（P＜0.05）.与模型组比较,各给药组小鼠胰岛素浓度均降低,IAI均升高（P＜0.05）.辛开苦降组、辛开组、苦降组可增强T2DM KKay小鼠IRS-2及其磷酸化形式的蛋白表达（P＜0.05）,抑制负性调节因子IRS-3、4蛋白表达（P＜0.05）.辛开苦降组可以增强PI3K、P-PI3K蛋白表达量及PI3-K mRNA表达（P＜0.05）.各给药组间相比,各指标差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 辛开苦降方及其拆方可改善胰岛素抵抗,可能是通过恢复肝脏细胞内正调控和负调控IRS蛋白的平衡实现的.     

运动对2型糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号通路PI3K/PKB磷酸化与表达的影响

目的 探讨运动对2型糖尿病大鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)与蛋白激酶B(PKB)磷酸化和蛋白表达及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和mRNA表达的影响.方法 30只SD雄性大鼠随机分为对照组、糖尿病组与糖尿病运动组.糖尿病组与糖尿病运动组大鼠经高脂饲料喂养8周后,一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg),注射后3周确认2型糖尿病建模成功,糖尿病运动组大鼠进行4周游泳训练.糖尿病组与糖尿病运动组大鼠建模过程始终喂养高脂饲料;对照组大鼠喂养普通饲料.糖尿病运动组大鼠4周游泳训练结束,于最后一次运动后恢复48 h,取材各组大鼠腓肠肌.采用Western blot法分析PI3K与PKB的磷酸化水平和蛋白表达,检测GLUT4蛋白表达:RT-PCR检测GLUT4 mRNA表达.结果 与糖尿病组比较,运动改善2型糖尿病大鼠腓肠肌PKB磷酸化水平与蛋白表达(P<0.05);增加了糖尿病大鼠腓肠肌GLUT4蛋白与mRNA表达(P<0.01,P<0.05).结论 运动可能通过改善2型糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号通路蛋白激酶磷酸化和蛋白表达,增加对葡萄糖的吸收与利用.     

青蒿琥酯对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏TLR4及MyD88表达的影响

目的 观察青蒿琥酯对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝脏Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子S8(MyD88)和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)表达的影响.方法 70只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、青蒿琥酯高[60 mg/(kg·d)]、中[30 mg/(kg ·d)]、低[15 mg/(kg·d)]剂量组.采用高脂饲料构建NAFLD小鼠动物模型,于给药后12周末处死,观察肝脏病理变化,酶法检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,RT-PCR法检测肝组织TLR4、MyD88、PI3K mRNA表达.结果 各青蒿琥酯剂量组小鼠血清TG、TC和ALT水平比模型组显著降低,肝脏脂肪变性明显减轻,肝组织TLR4、MyD88及PI3K表达量也显著降低(P＜0.01,P＜0.05).与正常对照组相比,模型组肝组织TLR4、MyD88及PI3K表达量显著升高(P＜0.01),且三者有相同的变化趋势.结论 TLR4/MyD88及其下游PI3 K/AKT通路可能在NAFLD发病中起重要作用.青蒿琥酯可通过降低TLR4、MyD88、PI3K mRNA表达,减轻NAFLD小鼠肝脏脂肪变性程度,降低血脂,改善肝功能指标.     

吉非替尼对糖尿病大鼠胰岛素敏感性的影响

目的 探讨吉非替尼对2型糖尿病鼠胰岛素敏感性的影响及其相关机制.方法 高糖高脂饲料喂养大鼠1个月后腹腔注射链脲霉素制成2型糖尿病鼠模型,分为生理盐水对照组、吉非替尼低剂量组(12.5 mg/kg)和高剂量(25 mg/kg)组、各干预8 d测量给药前、后以及停药7 d后大鼠的体重、空腹血糖和基础胰岛素水平;第二轮给药后留取肝脏组织,提取RNA进行半定量逆转录-聚合酶链反应比较胰岛素受体底物-1(IRS-1)和磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)基因的表达.结果 成功建立2型糖尿病鼠模型,高剂量干预组大鼠的胰岛素敏感指数(ISI)较对照组显著增高(2.96±1.38比0.92±0.20,P<0.05),低剂量组和高剂量组差异无统计学意义(2.95±1.51比2.96±1.38,P>0.05);停药7 d后ISI无明显变化(2.03±0.72比2.99±0.63,P>0.05);3组大鼠体重改变差异无统计学意义(P>0.05);肝脏组织内IRS-1基因的表达对照组显著高于干预组[(6.3±2.4)%比(3.3±1.5)%,(3.2±1.8)%,P<0.05],低剂量组和高剂量组间差异无统计学意义(P>0.05);PI3K基因的表达干预组显著高于对照组[(1.27±0.73)%,(1.43±0.71)%比(0.41±0.24)%,P<0.05],低剂量组和高剂量组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 吉非替尼可以改善2型糖尿病鼠的胰岛素敏感性,停药2个半衰期之后该改善作用仍然存在.可能与增强胰岛素信号传导的PI3K/Akt途径相关,与体重无明显相关性.     

祛胰抵方对2型糖尿病大鼠肝脏IRS-2蛋白表达的影响简

目的：观察2型糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素浓度和胰岛素受体底物-2（insulin receptor substrate 2,IRS-2）的蛋白表达变化及祛胰抵方对其变化的影响。方法：以小剂量链脲佐菌素（30 mg/kg）腹腔注射合并高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型,给予不同剂量祛胰抵方治疗12周。分别测定其血糖、血清胰岛素浓度、肝脏组织的IRS-2蛋白表达。结果：造模后2型糖尿病大鼠的血糖、血清胰岛素升高,肝脏组织的IRS-2蛋白表达下降;祛胰抵方能降低模型大鼠的血糖和血清胰岛素,并能显著升高肝脏组织IRS-2的蛋白表达。结论：祛胰抵方治疗2型糖尿病可能与其提高肝脏组织IRS-2的蛋白表达从而改善胰岛素信号传导有关。     

基于IRS-1/PI3K信号轴探究补肺健脾方对COPD大鼠骨骼肌线粒体损伤的影响

目的 探究补肺健脾方(Bufei Jianpi formula, BJF)通过调控IRS-1/PI3K信号轴对COPD大鼠骨骼肌线粒体损伤的影响。方法 将60只SPF级SD大鼠随机分为空白(Control)组、COPD稳定期模型(Model)组、氨茶碱(Am)组、补肺健脾方(BJF)组、吡格列酮(PIO)组以及补肺健脾方+吡格列酮(BJF+PIO)组,10只/组。采用烟熏加鼻腔滴菌(肺炎克雷伯杆菌)的方法建立COPD稳定期大鼠模型,自第9周开始给药至20周结束后取材,每周给予大鼠体重测量。分别对肺组织和骨骼肌组织进行常规切片与HE染色,并于光镜下观察其相应的病理学改变。分别于第0、8、20周采用非束缚全身体积描记系统观察大鼠肺功能,包括VT、PEF、EF50。采用qPCR技术检测大鼠骨骼肌组织中IRS-1、PI3K、PGC-1α以及Leptin mRNA的表达。采用Western blot技术检测大鼠骨骼肌组织中IRS-1、PI3K、AKT、p-AKT、PGC-1α、TFAM和Leptin蛋白的表达。结果 光镜观察显示与Control组比,Model组肺病理可见肺泡间质以及肺支气管存有...     

健脾化湿通络方对佐剂关节炎大鼠滑膜血管新生的影响

目的观察健脾化湿通络方对佐剂关节炎大鼠滑膜血管PI3K/AKT/m TOR信号通路及缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子A(VEGF-A)、滑膜微血管密度(MVD)、内皮抑素(ES)的影响。方法 50只大鼠随机均分成5组:正常对照组,模型对照组,甲氨蝶呤组,雷公藤多苷片组,健脾化湿通络方组。除正常对照组外,其余各组均采用弗氏完全佐剂建立佐剂关节炎大鼠模型。造模成功后,各治疗组给予相应药物灌胃,连续30 d。采用免疫组化法检测滑膜血管MVD表达,酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、HIF-1α、VEGF-A表达,免疫印迹法检测滑膜血管PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、ES蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数升高,滑膜组织MVD计数升高,血清IL-6、VEGF、HIF-1α和滑膜血管PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、ES表达显著升高,IL-10降低(P0.05或P0.01)。与模型对照组比较,健脾化湿通络方组MVD计数和血清VEGF-A、HIF-1α、IL-6表达降低,滑膜PI3K、p-AKT、m TOR、ES降低,血清IL-10升高。结论健脾化湿通络方通过调节PI3K/AKT/m TOR通路、HIF-1α及ES表达改善滑膜血管新生。