羟基喜树碱对人胚肺成纤维细胞HFLl生长的影响

目的观察羟基喜树碱（HCPT）对体外培养的人胚秭成纤维细胞（HFLI）的增殖抑制和促凋亡作用。,方法采川四甲块偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度的HCVF对HFI．1细胞作用24h、48h、72h的增殖抑制效果,计算细胞生长抑制率和半数抑制量（IC50）,确定HCPT抑制HFL1细胞增殖的最佳给药浓度和最佳作用时间;姬姆萨染色观察细胞形念学变化;流式细胞仪分析细胞周期;琼脂糖凝胶电泳观察捌亡细胞的DNA梯度。对所得数据用SPSS15．0软件进行统计分析。结果HCPT对HFL1细胞增殖有明显的抑制作用,在0．008-32mg／L范围内呈时间和剂量依赖性;与对照组比较,各实验组24h、48h、72hA值及细胞生长抑制率差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）HCPT作用HFL1细胞48h时的IC50为0．466mg／L,故确定48h、0．5mg／L为最佳作用时间和最佳给药浓度;0．5mg／I．HCPT作用HFL1细胞24h后,Cu,／G．期细胞所占比例为（50．46±3．91）％;作用72h后,G0／G．期细胞所占比例为（88．19±2．13）％,怀对照组比较,其余各组各期细胞所占比例差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;姬姆萨染色显示,HFLI细胞形态发生明显变化;琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯度带形成。结论HCVF对体外培养的HLI细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,可能是一种潜在的抗肺纤维化的药物。     

姜黄素对人胚肺成纤维细胞转化生长因子β受体的影响

目的探讨姜黄素对经转化生长因子β(TGF-β)诱导后人胚肺成纤维细胞TGF-βⅠ、Ⅱ型受体(TGF-βRⅠ、RⅡ)在人胚肺成纤维细胞中表达的影响,及其与特发性肺纤维化的关系。方法细胞分为正常组、姜黄素组、模型组、治疗组,采用RT-PCR、Western blotting法检测TGF-βRⅠ、RⅡ在人胚肺成纤维细胞的变化。结果模型组TGF-βRⅠ与RⅡ表达增强,治疗组与正常组、模型组相比,TGF-βRⅠ与RⅡ表达明显减弱。结论姜黄素可抑制人胚肺成纤维细胞的胶原沉积,在延缓肺纤维化形成中起一定作用,其作用机制可能是通过抑制TGF-βRⅠ与RⅡ的表达而实现的。     

姜黄素对人胚肺成纤维细胞外基质影响的试验研究

目的：探讨姜黄素对经转化生长因子β（TGF-β1）诱导后人胚肺成纤维细胞一型胶原与c-jun,在人胚肺成纤维细胞中的表达的影响及其与特发性肺纤维化的关系。方法：细胞分为正常组、姜黄素组、模型组、治疗组采用采用RT-PCR,Western bloting法检测、I型胶原与c-jun在人胚肺成纤维细胞的变化。结果：治疗组与正常组、模型组相比,I型胶原与c-jun,表达明显减弱。结论：姜黄素可抑制人胚肺成纤维细胞的胶原沉积,在延缓肺纤维化形成中起一定作用,其作用机制可能是通过抑制核转录因子c-jun表达而实现的。     

黄芪对体外人胚肺二倍体成纤维细胞抗衰老作用的研究

近年来,由于世界人口年龄结构迅速趋于老化,衰老机理和抗衰老药物的研究日益为人们所重视,成为老年医学研究的重要课题之一。中药是祖国医学的宝库,有些药物已经在医疗实践中显示出了抗衰老效应。但究竟是个体自然长寿还是服药后寿命延长,目前尚缺乏有力的证据,同时它们的作用机理还有待于运用科学的方法进一步的探讨和证实。首都医学院宣武医院孙晓莉等对此项工作进行了研究和探讨。人胚肺二倍体成纤维细胞是研究衰老的理想的体外模型,其衰老特征和黄芪抗细胞衰老研究已有零星报道,但一般集中在细胞寿命方面,均缺乏多方面、动态系统的观察。本研究     

人参皂甙对不同代龄人胚肺成纤维细胞的增殖及Cyclin D1基因表达的影响

目的 :探讨人参皂甙对衰老的人胚肺成纤维细胞增殖及CyclinD1基因表达的调节作用 ,以进一步研究人参皂甙抗细胞衰老的机制。方法 :用体外培养的人胚肺成纤维细胞为细胞衰老模型 ,通过细胞流式分析、免疫组化及RT PCR方法 ,观察了人参皂甙对成纤维细胞的增殖周期、DNA合成 ,CyclinD1mRNA和蛋白质表达情况。结果 :衰老的成纤维细胞用人参皂甙连续处理 4代后 ,处于G1期的细胞数明显减少 ,进入S期的细胞由 16 7%增加到 33% (P <0 0 5 ) ;CyclinD1mR NA表达比对照组下降 ,CyclinD1蛋白质表达由原来的 77 1± 2 9明显下降为 5 2± 6 3(P <0 0 0 1) ,DNA合成增加 17% (P <0 0 5 )。人参皂甙对低代龄细胞的CyclinD1RNA合成有所增加 ,对CyclinD1蛋白质、DNA的作用影响不大。结论 :人参皂甙对人胚肺成纤维细胞具有双向作用 ,对高代龄细胞具有促进细胞增殖 ,调节CyclinD1基因表达的作用     

开肺化痰解毒法对人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响

目的：研究开肺化痰法对腺病毒作用后的人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响。方法：用31、7b型腺病毒攻击人胚肺成纤维细胞后,分别加入清肺口服液含药血清及利巴韦林注射液,用流式细胞仪检测各组细胞FAS蛋白的表达。结果：经31、7b型腺病毒攻击后,病毒组Fas(CD95)的表达较正常组明显降低,含药血清组、利巴韦林组与病毒组比较,Fas(CD95)的表达均明显升高,空白血清组与病毒组比较无显著性差异,含药血清组与利巴韦林组比较无显著性差异。腺病毒31型攻击后,含药血清组、利巴韦林组与正常细胞组比较有显著性差异。腺病毒7b型攻击后,含药血清组、利巴韦林组与正常细胞组比较无显著性差异。结论：31、7b型腺病毒对人胚肺成纤维细胞Fas的表达有一定的影响,腺病毒可能通过此机制延长其在细胞内的存活时间,以利于自身复制。清肺口服液含药血清对Fas的表达具有一定的调节作用,此作用可能是其清除病毒在体内的感染,对机体起保护作用的机制之一。     

洋参利脑神胶囊对人胚肺成纤维细胞寿命的影响

洋参利脑神胶囊可以提高人胚肺成纤维细胞增殖期群体倍增水平，延长细胞传代天数，延缓衰老细胞的群体死亡的发生，从而延长细胞的体外寿命。     

固本健脑液对人胚肺二倍体成纤维细胞寿命及LPO含量的影响

固本健脑液系以恩施州道地中药材－中国板党为主，辅以健脾，补肾，等中药加工而成的复方制剂本实验观察了固体健脑液对人胚肺二倍体成纤维细胞传代次数及过氧化脂质含量的影响。结果表明，２０－２００ｐｐｍ的固本健脑液能显延长细胞寿命和降低细胞ＬＰＯ的含量，且明显优于维生素Ｅ对照组的治疗作用。     

养阴清肺方对钴60照射后肺成纤维细胞周期和凋亡的影响

目的：探讨养阴清肺方对钴60照射后肺成纤维细胞的生长周期及凋亡的影响。方法：制备实验用含药血清：空白组、中药组、激素组、中药加激素组;采用钴60射线照射肺成纤维细胞后,用不同含药血清培养细胞,分别于24、48、72 h后用流式细胞技术检测各组的细胞周期及细胞凋亡。结果：24 h,各药物组的细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）,中药组的作用最突出。各药物组的细胞周期主要阻滞在G2/M期;空白组与各药物组的S期有显著差异（P〈0.05）。48 h,各药物组细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）,而各药物组之间没有差异（P〉0.05）。72 h,各药物组细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）;各药物组之间亦有差异（P〈0.05）。48、72h各组出现了以G0/G1期比例增高为主的G0/G1期和G2/M期同时阻滞的现象。结论：养阴清肺方能够影响细胞生长周期,减少细胞合成期,诱导G2/M期阻滞,促进肺成纤维细胞的凋亡。     

大黄素对人肾成纤维细胞增殖的影响

目的：研究大黄素对人肾成纤维细胞增殖的影响。方法：在体外人肾成纤维细胞培养的基础上，采用＾３Ｈ－ＴdＲ掺入法观察了不同浓度大黄素（１０、３０、５０、８０、１００ug/ml）对人肾成纤维细胞＾３Ｈ－ＴdＲ掺入率的影响。同时，利用流式细胞仪观察了大黄素（１０、５０、１００ug/ml）对细胞周期的影响。结果：大黄素以剂量信赖方式降低了 人肾成纤维细胞＾Ｈ－ＴdＲ掺入率（r＝０．９９５，Ｐ〈０．０１）。大黄素（５０和１     

大黄素对人肺腺癌细胞Anip973增殖周期及凋亡基因的影响

目的 探讨大黄素对人肺腺癌Anip973细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡基因的影响。方法 采用甲基噻唑（MTT）比色法和生长曲线测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对在体外培养的Anip973细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化,用免疫印迹法检测Caspase-3蛋白表达。结果 大黄素可在G0／G1期阻滞人肺腺癌Anip973细胞的增殖,使S期细胞比率降低,并激活Caspase-3蛋白;在一定范围内,大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高。结论 大黄素能抑制人肺腺癌Anip973细胞生长,其抗肿瘤机制是通过激活Caspase-3,诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。     

大黄素对体外人肺腺癌细胞增殖抑制作用的影响

目的探讨大黄素对人肺腺癌Anip973细胞(简称肺癌细胞)作用的机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和生长曲线测定比较不同浓度的大黄素在不同作用时间内对体外培养的肺癌细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞凋亡率,并对此进行电镜分析。结果在一定范围内,大黄素的浓度越大、作用时间越长对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高,60μmol／L大黄素处理肺癌细胞72h后增殖抑制率达90％。结论大黄素可明显抑制肺癌细胞的增殖,其抑制作用具有时效和量效关系。     

苦参碱对人胚肺成纤维细胞增殖和凋亡的干预作用

目的：观察苦参碱对人胚肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法：选择苦参碱为干预药物,以不同浓度梯度作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞,采用MTT法检测细胞增殖,用流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率。结果：MTT结果显示,各干预组对HFL-1细胞生长均有显著抑制增殖作用,其强度呈时间-剂量依赖性。苦参碱作用于HFL-1细胞48 h后,各干预组细胞总凋亡率均明显高于对照组（P〈0.05）;与对照组比较,苦参碱各浓度组HFL-1细胞G0/G1期百分率显著上升（P〈0.05）。结论：苦参碱可在一定程度上抑制人胚肺成纤维细胞增殖,并诱导其凋亡。     

大黄素和器官纤维化

探讨大黄素抗器官纤维化的作用机制,阐明大黄素可作为治疗器官纤维化的有效中药制剂.     

大黄素抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤的实验研究

目的:观察大黄素(Emodin)对胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长、转移的抑制作用并探讨其机制。方法:建立胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型(SOI),随机分为对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组等3组(n=10),第3周开始分别经灌胃给予溶媒(0.1%二甲基亚砜)0.2mL/只、大黄素20mg/kg、大黄素40mg/kg,每周3次,共两周。术后第8周处死裸鼠,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率;观察荷瘤裸鼠肿瘤转移情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织的增殖指数(PI)、微血管密度(MVD)以及金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果:与对照组相比,实验Ⅰ组肿瘤生长未受明显抑制,但转移明显被抑制;实验Ⅱ组肿瘤生长和转移均受显著抑制;实验Ⅰ、Ⅱ组肿瘤组织中PI、MVD及MMP-9的表达均明显降低。结论:大黄素具有抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,这可能是通过抑制胰腺肿瘤MMP-9的表达而实现。     

大黄素对大鼠肝纤维化形成的影响

目的；研究大黄素对肝纤维化的影响。方法：采用４０％的四氯化碳（ＣＣｌ４）给予大鼠皮下注射诱导肝纤维化，并以小，中和大剂量大黄素（２０，４０和８０ｍｇ／ｋｇ体重）干预，测定血清透明质酸，层粘连蛋白及肝组织羟脯氨酸，并通过光镜和电镜观察肝组织病理变化。结果：大黄素组较模型组；（１）血清透明质酸及层粘连蛋白显著降低；（２）肝组织胶原蛋白含量明显减少；（３）肝组织纤维化程度明显改善；（４）肝细胞损伤减轻。     

敏咳清颗粒对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响

目的：通过观察敏咳清颗粒对体外培养的肺成纤维细胞（lung fibroblast,LFB）增殖、凋亡的影响,探讨敏咳清颗粒治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制。方法：将常规培养LFB分为空白组、模型组、对照组、敏咳清高浓度组、敏咳清低浓度组、养阴清肺糖浆高浓度组、养阴清肺糖浆低浓组、地塞米松组,加入肝素刺激后分别加入对应的含药血清,采用MTT法检测LFB增殖,TUNEL法检测LFB凋亡。结果：①各组含药血清均可以不同程度地抑制肝素刺激下LFB的增殖,以敏咳清颗粒高剂量组抑制LFB增殖的作用最强,48h的抑制作用强于24h,呈剂量依赖性;②各组均出现不同程度细胞凋亡的形态改变,以敏咳清高剂量组诱导LFB凋亡细胞最多。结论：敏咳清颗粒能显著抑制LFB增殖,诱导LFB凋亡。     

玉金方对人胚肺成纤维细胞的传代与微细结构的影响

目的 测定玉金方对人胚肺成纤维细胞的传代与微细胞结构的影响.方法 用含玉金方的血清培养人胚肺成纤维细胞,同时设空白对照组和福康乐阳性对照组,比较细胞传代情况和微细结构.结果 玉金方组与阳性对照组细胞传代数均比空白对照组多,且细胞衰老现象比空白对照组出现的迟缓.结论 玉金方胶囊有显著的体外抗衰老作用,也为其临床应用提供了血清药理学的依据.