戴氏虫草胞外水溶性多糖在体外对细胞免疫及细胞因子的影响

 目的 研究虫草属新种戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖在体外对人扁桃体淋巴细胞和水鼠脾细胞免疫功能的影响。方法 采用³H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖,乳酸脱氢酶法(LDH)测定NK细胞活性,L929细胞杀伤法测定肿瘤坏死因子(TNF),MTT法测定白细胞介素-2(IL-2)活性。结果 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖不仅能够促进人扁桃体及小鼠脾活化T细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺抑制免疫小鼠脾活化T细胞的增殖。它能增高小鼠脾细胞NK活性及分泌IL-2,也能增进人扁桃体活化T细胞分泌TNF β。结论 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖是具有增强细胞免疫功能的生物免疫反应调节剂。     

蜂胶提取物对荷瘤小鼠肿瘤免疫系统的影响研究

目的观察蜂胶提取物对荷瘤小鼠免疫系统的影响。方法通过将荷瘤小鼠移植S180肉瘤,观察蜂胶提取物对荷瘤小鼠NK细胞活性,淋巴细胞增殖以及淋巴细胞IL-2诱生的影响。结果蜂胶提取物对NK细胞杀伤活性有明显增强作用,能够显著提高淋巴细胞增殖能力和IL-2的含量(P<0.01)。结论蜂胶提取物能够显著提高荷瘤小鼠免疫系统的活性。     

不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及相关基因表达的影响

目的研究不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖,左旋多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素合成,采用RT-PCR法、Western-blotting法检测A375细胞中TYR、TRP-1、TRP-2mRNA和蛋白表达。结果 90%高良姜素浓度为1.0～10.0μmol/L对A375细胞具有显著的促增殖作用(P<0.01),而在浓度为20.0μmol/L时,无促A375细胞增殖作用(P>0.05),浓度为0.5～20.0μmol/L均能促进酪氨酸酶活性的升高(P<0.05、0.01),浓度为1.0～20μmol/L具有显著促进黑素升高的作用(P<0.05、0.01),且随着浓度的增加呈增强趋势;99%高良姜素浓度在0.5～20.0μmol/L具有显著促进A375细胞增殖和酪氨酸酶活性升高作用(P<0.01),而对黑素合成无促进作用(P>0.05)。90%高良姜素对TYR、TRP-1 mRNA表达基本无影响,1.0μmol/L时上调TRP-2 mRNA表达(P<0.05);99%高良姜素能上调TYR、TRP-1及TRP-2 mRNA表达;二者均促进TYR蛋白表达,但对TRP-1及TRP-2蛋白表达基本无影响。结论 99%高良姜素能够促进A375细胞增殖及酪氨酸酶活性升高,可能是通过上调TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表达和TYR蛋白表达实现的;而90%高良姜素能够显著促进细胞增殖、酪氨酸酶活性升高及黑素增加,表明90%高良姜素能够促进黑素的合成,但不是通过调节TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表达,可能是通过促进TYR蛋白表达实现的。     

二至丸有效部位群促进T淋巴细胞免疫活性的实验研究

目的考察二至丸有效部位群(女贞子总皂苷、女贞子多糖、墨旱莲总黄酮)促进小鼠T淋巴细胞免疫活性作用的机制。方法环磷酰胺致小鼠免疫力低下,灌胃给药,制备含药血清、细胞悬液和脾总RNA,中性红法测定腹腔巨噬细胞的吞噬能力,MTT法测定脾淋巴细胞的增殖能力,胸腺细胞增殖法和ELISA法测定腹腔巨噬细胞分泌IL-1的水平、脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-12的水平,RT-PCR法检测IL-1、IL-2和IL-12 mRNA的表达。结果免疫力低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、脾淋巴细胞的增殖能力,以及IL-1、IL-2和IL-12的水平,均较正常小鼠明显下降,三种细胞因子的表达也受到抑制,经该方治疗后,上述检测指标均有不同程度的提高。结论该方对免疫失衡机体的保护作用与其改善T淋巴细胞因子的活性水平及其mRNA的表达水平有关。     

左归饮对老年小鼠脾细胞体外增殖和血清白细胞介素-2的影响

目的:探讨左归饮对老年小鼠免疫功能的影响.方法:通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞增殖反应、酶联免疫(ELISA)法测定血清中白细胞介素-2(IL-2)水平.结果:老年小鼠脾细胞对刀豆蛋白A(ConA)应答增殖能力和血清中IL-2水平明显低于青年小鼠(P＜0.01和P＜0.05),左归饮可显著提高老年小鼠IL-2的含量,同时促进体外脾细胞增殖(P＜0.05和P＜0.01).结论:左归饮明显增强老年小鼠的免疫功能,使其恢复或接近青年小鼠状态,具有延缓衰老的作用.     

补益中药调整应激模型动物免疫细胞受抑及其可能机制

目的 :观察补益中药对应激小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法 :建立小鼠应激模型。观察菟丝子、川断、女贞子、枸杞子等补益中药对应激小鼠免疫细胞增殖过程中胞浆内Ca²⁺ 浓度、细胞膜流动性、IL-2 ,IL-2R以及细胞周期的影响。结果 :补益类中药均可增强应激小鼠脾淋巴细胞的增殖功能 ;降低胞浆内Ca²⁺浓度 ,恢复细胞膜的流动性 ,增强IL-2的活性、提高IL-2R阳性细胞数 ,与应激组比较有显著性差异 (P<0.01)。而四药合用的结果更佳 ,可促进细胞进入DNA合成期 ,减少细胞滞留在G。/G1期 (P<0.01) ,接近正常对照组水平。结论 :补益类中药可调整应激小鼠脾淋巴细胞的增殖功能 ,缓解应激对机体的不利反应。     

清化饮对脾胃湿热证大鼠免疫功能影响的研究

目的:观察清化饮对脾胃湿热证大鼠T淋巴细胞活化及其分泌IL-2的影响。方法:以3H-TdR掺入法测定T淋巴细胞活化、增殖,及用ConA活化的小鼠脾淋巴细胞测定脾条件培养液(SCM)中IL-2水平。结果:脾胃湿热证大鼠自发性和ConA刺激的T淋巴细胞3H-TdR掺入水平显著高于正常对照组(P均0.O01),T淋巴细胞分泌IL-2水平显著低于正常对照组(P0.01);清化饮能显著降低该证大鼠T淋巴细胞自发性和ConA刺激的3H-TdR掺入水平(P0.05,P0.01),显著升高T淋巴细胞分泌IL-2水平(P0.01,P0.001)。结论:脾胃湿热证大鼠细胞免疫呈亢进状态,并伴有免疫调节功能减弱,清化饮具有调整细胞免疫应答和增强免疫调节功能的作用。     

十全大补汤免疫调节作用的实验研究

目的探讨十全大补汤对淋巴细胞活化,增殖及其分泌白细胞介素-2(IL-2)的影响。方法测定ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞3H-TdR掺入水平,及以ConA活化的小鼠淋巴细胞作为反应细胞,测定脾条件培养液(SCM)中IL-2活性。结果该方剂能显著促进小鼠脾淋巴细胞3H-TdR的掺入(P<0.001),显著促进大鼠混合脾淋巴细胞分泌IL-2(P均<0.001),显著促进小鼠和大鼠脾淋巴细胞分泌IL-2(P<0.025)。结果十全大补汤有增强机体细胞免疫功能的作用。     

龙眼壳多糖体内免疫活性研究

目的研究龙眼壳多糖对小鼠免疫活性的影响。方法热水浸提法提取龙眼壳粗多糖,脱蛋白,脱色素,DEAE-纤维素柱层析和丙烯葡聚糖凝胶色谱S-300柱层析纯化龙眼壳多糖,硫酸-苯酚法测定多糖含量。小鼠灌胃给药15d后,MTT测定龙眼壳多糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖能力、ELISA分析龙眼壳多糖对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的作用、LDH释放法测定龙眼壳多糖对NK细胞活性的作用。结果龙眼壳多糖对正常小鼠脾淋巴细胞增殖作用实验中,剂量在250～62.5 mg/L范围内,刺激指数随着其剂量的增加而增加。龙眼壳多糖对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的量,剂量在250～62.5 mg/L范围内,随着剂量的增加而增加。龙眼壳多糖对正常小鼠脾脏NK细胞活性,剂量在250～62.5 mg/L范围内,NK细胞活性随着剂量的增加而增强。结论龙眼壳多糖体内有一定的免疫作用。     

螺旋藻多糖体外对小鼠免疫功能的影响

目的:研究螺旋藻多糖体外对小鼠淋巴细胞转化、NK细胞活性和脾细胞分泌IL-2的影响.方法:以MTT法测定螺旋藻多糖对小鼠淋巴细胞转化的影响,乳酸脱氢酶法测定NK细胞活性,ELISA法测定螺旋藻多糖对脾细胞分泌IL-2的影响.结果:螺旋藻多糖可促进ConA诱导的体外小鼠淋巴细胞转化,且表现出剂量依赖关系.PSP对正常小鼠NK细胞活性无明显影响,但可在一定程度上对抗地塞米松的免疫抑制作用,抑制率由58.7%降低至14.92%～30.09%.ConA及不同浓度的螺旋藻多糖均能不同程度的促进小鼠脾细胞分泌IL-2,与对照组相比有显著差异,其中ConA的刺激作用强于螺旋藻多糖,呈时间依赖性.结论:螺旋藻多糖对小鼠免疫功能有一定的调节作用.     

绞股蓝总皂甙对小鼠脾淋巴细胞增殖反应及白细胞介素2产生的作用

绞股蓝总皂甙(GP)皮下注射可增强正常小鼠和环磷酰胺所致免疫低下小鼠由Con A诱导的脾T淋巴细胞增殖反应和由LPS诱导的脾B淋巴细胞增殖反应,并且提高脾细胞白细胞介素2的生成。GP对免疫低下小鼠的作用更为显著。     

白附子对人T细胞和单核细胞的调节活性

目的：研究中药白附子的免疫学调节活性。方法：用^3H介入法测定了中药白附子提取物（Rhizoma typhonii extract,RTE)对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性；用绵羊红细胞花结形成试验分离纯化淋巴细胞后，检测了RTE的效应细胞；用^51Cr游离实验测定了人杀伤细胞和自然杀伤细胞的杀伤活性，用ELISA法和生物法研究了单核细胞的细胞因子产生，并用^3H介入法分析了单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能；用层析法分析了白附子的化学成分，并用SDS－PAGE法测定了其有效成分的分子量。结果：RTE对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性有很强的促进作用，并有较好的量效关系；RTE的效应细胞是T细胞；RTE增强人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性和自然杀伤细胞的非特异性杀伤活性、增强单核细胞的细胞因子（肿瘤坏死因子和白细胞介素1）产生，并增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能。白附子的化学成分为66道尔顿的糖蛋白。结论：RTE对人的T细胞和单核细胞有免疫增强作用，并通过刺激机体的免疫系统杀伤或吞噬肿瘤细胞和外来抗原，这些活性可应用于临床调节免疫功能和治疗肿瘤等疾病。     

小柴胡汤及其药群配伍抗小鼠H22肝肿瘤及免疫调节作用

目的:观察小柴胡汤及其药群配伍对小鼠H22肝癌实体瘤的抑制作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响,研究小柴胡汤抗肝肿瘤的作用、量效关系及作用机制,探讨小柴胡汤及药群内在配伍意义。方法:建立小鼠H22肝癌模型,分别灌服高、中、低剂量的小柴胡汤煎剂(27,13.5,6.75 g.kg^-1),腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-FU)(20mg.kg^-1)做阳性对照;给药10 d后检测各组的瘤重、体重、脾脏和胸腺指数。进一步观察有效剂量(13.5 g.kg^-1)小柴胡汤药群配伍煎剂(柴-芩、姜-夏、参-枣-草、柴-芩+姜-夏、柴-芩+参-枣-草、姜-夏+参-枣-草,全方)对小鼠H22肝癌模型的上述作用。在此基础上,观察小柴胡汤及其有效药群(参-枣-草)对该荷瘤小鼠自然杀伤(NK)细胞、T淋巴细胞增殖及白细胞介素-2(IL-2)的影响。结果:小柴胡汤高、中、低3个剂量组对小鼠H22肝癌实体瘤均有明显抑制作用,抑瘤率分别为49.66%,48.52%,36.91%,药群配伍研究中参-枣-草组和全方组的抑瘤率为41.55%和43.65%。与正常组比,H22荷瘤小鼠脾脏指数显著升高(P<0.001),小柴胡汤高、中、低剂量组和各药群配伍组脾脏指数均明显升高(P<0.01);胸腺指数除全方组外,不同药群配伍组与正常组比均有显著降低(P<0.05),5-FU组有极显著降低(P<0.001);小柴胡汤各组小鼠体重均无明显变化,而5-Fu组小鼠体重下降明显(P<0.001)。与模型组比,小柴胡汤组小鼠NK细胞、T淋巴细胞增殖及IL-2活性均明显升高(P<0.001);参-枣-草组NK细胞和IL-2活性均升高(P<0.05);5-FU组NK细胞、T淋巴细胞增殖及IL-2活性均显著降低(P<0.01)。结论:小柴胡汤及其方中参-枣-草配伍药群有抑制小鼠H22肝癌实体瘤生长和提高荷瘤宿主免疫功能作用,其抑瘤作用机制与5-氟尿嘧啶的直接抑瘤有所不同,可能与增强荷瘤宿主免疫功能有关,提示该方中的扶正作用药群(人参、大枣和甘草)可能是其抑瘤作用的核心药群。     

膜荚黄芪茎叶总黄酮对小鼠细胞免疫功能的影响

研究黄芪茎叶总黄酮的免疫调节作用。方法：用单克隆抗体检测实验小鼠药物处理前后Ｔ细胞总数及亚群变化；用核素标记法测定ＬＡＫ细胞活性的变化。结果：ＦＭＡ能促进ＣｏｎＡ诱导的淋巴细胞增殖，增加Ｔ细胞总数并调整Ｔ细胞亚群紊乱；提高ｒＩＬ－２所诱导的ＬＡＫ细胞活性。结论ＦＡＭ对免疫功能低下小鼠具有免疫刺激和免疫调整作用，为临床应用提供了实验依据。     

还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响

目的观察还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响,并探讨其延缓衰老的机制。方法将小鼠随机分成对照组、模型组和还少丹低、高剂量组。采用皮下注射D-半乳糖溶液制备亚急性衰老模型,还少丹低、高剂量组给予相应剂量的还少丹水煎液灌胃,对照组和模型组给予等量的蒸馏水灌胃,连续6周。测定各组小鼠胸腺指数和脾脏指数、脾组织IL-2水平及T淋巴细胞的增殖活性。结果与对照组比较,模型组小鼠胸腺和脾脏指数、IL-2水平和T淋巴细胞增殖活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,还少丹低、高剂量组均能增加胸腺指数和脾脏指数,提高IL-2水平和T淋巴细胞增殖活性,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论还少丹可通过增加胸腺和脾脏指数来保护免疫器官,通过提高IL-2的水平及T淋巴细胞的增殖活性增加机体免疫活性,这可能是还少丹发挥抗衰老作用的机制之一。     

复方茵陈片对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响

目的:观察复方茵陈片对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,分析药物对细胞免疫功能的影响.方法:采用3H-TdR掺入法,从体内、外不同角度定量考察复方茵陈片对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响.结果:复方茵陈片高、中、低三个剂量及阳性对照药佐旋咪唑均使3H-TdR掺入值明显增加,提示复方茵陈片对Cy所致小鼠淋巴细胞功能降低具有明显的改善作用.体外结果亦表明,复方茵陈片体外对小鼠淋巴细胞增殖反应具有增强作用.结论:复方茵陈片可增强机体的细胞免疫功能.     

Restoration of the immune functions in aged mice by supplementation with a new herbal composition, HemoHIM

The effect of a new herbal composition, HemoHIM, on immune functions was examined in aged mice, in which various immune responses had been impaired. The composition HemoHIM was prepared by adding the ethanol-insoluble fraction to the total water extract of a mixture of three edible herbs, Angelica Radix, Cnidium Rhizoma and Paeonia Radix. Supplementation to the aged mice with HemoHIM restored the proliferative response and cytokine production of splenocytes with a response to ConA. Also, HemoHIM recovered the NK cell activity which had been impaired in the aged mice. Meanwhile aging is known to reduce the Th1-like function, but not the Th2-like function, resulting in a Th1/Th2 imbalance. HemoHIM restored the Th1/Th2 balance in the aged mice through enhanced IFN-gamma and IgG2a production, and conversely a reduced IL-4 and IgG1 production. It was found that one factor for the Th1/Th2 imbalance in the aged mice was a lower production of IL-12p70. However, HemoHIM restored the IL-12p70 production in the aged mice. These results suggested that HemoHIM was effective for the restoration of impaired immune functions of the aged mice and therefore could be a good recommendation for immune restoration in elderly humans.     

碎米花杜鹃原花青素A-1对小鼠免疫细胞的影响

目的:研究碎米花杜鹃提取物乙酸乙酯部分分离得到的化合物原花青素A-1(Proanthocyanidin A-1,简称PAA-1)的免疫调节活性。方法:采用MTT法,通过PAA-1体外刺激,研究了其对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的增殖、NK细胞杀伤活性及对巨噬细胞吞噬活性和释放效应分子NO的影响。结果:PAA-1在浓度为5～100 mg/L时能刺激脾细胞增殖,增加腹腔巨噬细胞能量代谢能力,增强巨噬细胞对中性红的吞噬能力及NO的分泌量,激活自然杀伤细胞(NK细胞)对YAC-1细胞的杀伤能力。结论:PAA-1能增强小鼠的免疫功能。     

Immunomodulatory effects of Abnormal Savda Munsiq,a traditional Uighur medicine,on the combined stress mice

Objective

To investigate the immunomodulatory effects of ASMq, a herbal preparation used in Traditional Uighur Medicine, on the combined stress mice.

Materials and methods

The combined stress was induced on mice by application of the electric-foot shock in a cold–dry environment and three different doses of ASMq were orally administered to the animals for 14 days. The effect of ASMq on the immune apparatus weight index, lymphocytes proliferation, serum levels of the cytokines, immunoglobulins, hemolysin and NK cells as well as the phagocytic activity of the macrophages were evaluated.

Results

Oral administration of ASMq was found to increase the thymus and spleen indices, lymphocytes proliferation induced by Con A and LPS, the percentage of CD4⁺ in thymus, spleen and peripheral blood and restore the CD4⁺/CD8⁺ ratio. The serum concentrations of INF-β, IL-2, IL-6, IgG, NK cells and hemolysin were also increased. The macrophage phagocytic activity was also enhanced.