补肾法对IL—1诱导的破骨细胞性骨吸收及破骨细胞MMP—9

用从出生２４小时的乳鼠长骨中分离出来的破骨细胞,从１月龄大鼠长骨中分离出来 的骨在质细胞,建破骨细胞培养和破骨细胞、骨髓基质细胞培养系。在白细胞介素－１（ＩＬ－１α）作用的同时,加入不同剂量的密骨片药液,分别与牛骨片共同培养２０小时。计数骨片形成的陷窝数及测算吸收陷窝面积。并采用原位杂交技术,研究密骨细胞基质金属蛋白酶９（ＭＭＰ－９）ｍＲＮＡ表达的调控。结果显示,在基质细胞存在的条件下,ＩＬ－１可     

补肾法对IL-1诱导的破骨细胞性骨吸收及破骨细胞MMP-9的影响

用从出生２４小时的乳鼠长骨中分离出来的破骨细胞,从１月龄大鼠长骨中分离出来的骨髓基质细胞,建立破骨细胞培养和破骨细胞、骨髓基质细胞培养系。在白细胞介素１（ＩＬ１α）作用的同时,加入不同剂量的密骨片药液,分别与牛骨片共同培养２０小时。计数骨片形成的陷窝数及测算吸收陷窝面积。并采用原位杂交技术,研究密骨片对破骨细胞基质金属蛋白酶９（ＭＭＰ９）ｍＲＮＡ表达的调控。结果显示,在基质细胞存在的条件下,ＩＬ１可使骨吸收性增强２～４倍,ＭＭＰ９ｍＲＮＡ呈高表达。密骨片则可对抗ＩＬ１对基质细胞的影响,间接地抑制破骨细胞活性,使ＭＭＰ９ｍＲＮＡ表达降低,减少骨吸收。     

脑出血患者治疗前后谷氨酸、基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9表达分析

目的探讨脑出血患者治疗前后谷氨酸、基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9表达变化及其意义。方法对住院脑出血患者60例采用颅内血肿微创清除术治疗。2组在治疗前后进行谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达测定,同时进行预后CSS评分与疗效评价。结果本组患者痊愈35例,显著进步15例,进步7例,无变化3例,无死亡患者,有效率为95%。同时治疗后CSS评分有明显下降(P<0.05)。脑出血患者治疗后的谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达量明显高于入院时,有显著性差异(P<0.05)。入院时与治疗后患者的谷氨酸、MMP-2及MMP-9含量与NDS评分都有明显正相关性(P均<0.05)。结论脑出血患者治疗前后谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达变化可反应预后情况,可作为评价治疗效果的生物学指标。     

密骨片对PMOP的骨密度、MMP-2及骨代谢指标的影响

目的：观察密骨片(Migu tablet)治疗绝经后骨质疏松症的血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平及骨密度(BMD)、骨代谢指标的变化。方法：将年龄55～62岁的192名自然绝经的妇女进行骨密度测定,骨质疏松妇女160例随机分为：密骨片(MG)组68例,仙灵骨葆(XLGB)组50例,钙剂组42例；绝经后正常妇女32例作为正常组。各组均于用药前后12,24周,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定的血清MMP-2水平、骨碱性磷酸酶(sBAP)、骨钙素(sOC)、Ⅰ型胶原交联C端肽(sCTx)和尿Ⅰ型胶原交联N端肽(uNTx),用双能X线吸收法(DEXA)测定腰椎正位,股骨颈,Ward’s三角和大粗隆的骨密度(BMD)。结果：经治疗后,密骨片组和仙灵骨葆组骨密度均有不同程度的提高,而钙剂组和正常组骨密度均下降；密骨片组和仙灵骨葆组的sBAP,sOC均有明显升高,而MMP-2,sCTx,uNTx明显下降,钙剂组和正常组变化不明显。结论：密骨片治疗绝经后骨质疏松症疗效显著,与仙灵骨葆相仿。单纯服用钙剂不能治疗绝经后骨质疏松症,且继续骨流失。     

人骨唾液蛋白和基质金属蛋白酶-9在风心病患者瓣膜表达的研究

目的观察人骨唾液蛋白和基质金属蛋白酶-9在风湿性心脏病(风心病)患者二尖瓣瓣膜的表达情况。方法将手术切除的二尖瓣瓣膜按病史分为风心病组和非风心病组,采用SP法进行免疫组化染色观察人骨唾液蛋白和基质金属蛋白酶-9在2组中的表达。结果风心病组的人骨唾液蛋白和基质金属蛋白酶-9均较非风心病组表达增高。结论风湿瓣膜的钙化与基质金属蛋白酶-9所引起的细胞外基质降解和重塑以及人骨唾液蛋白所诱导的成骨样骨形成密切相关。     

丹莪妇康煎膏对子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA表达的影响

 目的 探讨子宫内膜异位症大鼠在位和异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）表达的差异以及丹莪妇康煎膏对其影响。方法 采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏高剂量组、低剂量组以及假手术组,共5组。给药30 d后,以反转录聚合酶链反应法检测大鼠在位以及异位内膜组织中基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA表达。结果 丹莪妇康煎膏能显著降低子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达（P＜0.01）,显著升高基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA的表达（P＜0.01）。结论 丹莪妇康煎膏可调节基质金属蛋白酶-9/基质金属蛋白酶抑制剂-1的平衡,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一。     

24-乙酰泽泻醇A对Ox-LDL诱导的大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:探讨24-乙酰泽泻醇A对氧化性低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,阐明其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 :采用酶消化法培养大鼠VSMCs,在Ox-LDL(50mg/L)、24-乙酰泽泻醇A(10μg/mL)作用下,将所有大鼠分为空白对照组、Ox-LDL组和泽泻A组三组,采用RT-PCR方法检测平滑肌细胞MMP-9中mRNA的表达,采用Western blotting法检测MMP-9蛋白表达的变化。结果:与空白对照组比较,Ox-LDL刺激平滑肌细胞,MMP-9中mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05);24-乙酰泽泻醇A(10μg/mL)可抑制Ox-LDL诱导的平滑肌细胞MMP-9中mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:24-乙酰泽泻醇A可抑制Ox-LDL诱导的大鼠平滑肌细胞迁移,抑制其MMP-9表达,为动脉粥样硬化的临床治疗提供新方法。     

贞清方对2型糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制物-1表达的调节作用

目的探讨中药贞清方(含女贞子、地龙等中药)对2型糖尿病大鼠肾脏结构及肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法采用高糖高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射的方法建立2型糖尿病模型。将成模大鼠随机分成模型组,贞清方高、低剂量组,依那普利组,并设立正常对照组,治疗8周。用免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1以及纤维连结蛋白(FN)在肾脏的表达,光镜观察肾小球和肾小管形态。结果糖尿病模型组较对照组TIMP-1、FN表达增强,MMP-9表达减弱；治疗组TIMP-1、FN表达较模型组减弱,MMP-9表达增强。其中贞清方高剂量组作用最明显。形态学观察显示治疗组肾小球和肾小管病变比模型组减轻。结论贞清方可能通过影响糖尿病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1的表达而发挥其对糖尿病大鼠肾脏结构的保护作用。     

心血瘀阻证心肌微环境基质金属蛋白酶-2、9表达的实验研究

目的:观察基质金属蛋白酶-2、9在心血瘀阻证心肌微环境的变化。方法:建立大鼠急性心梗心血瘀阻证模型,分为假手术组、健康对照组、心虚瘀阻证组,然后用ELISA方法观测其基质金属蛋白酶2、9的表达。结果:基质金属蛋白酶2血瘀阻证表达高于健康对照和假手术组(P<0.05),基质金属蛋白酶9三组间均有差异,其中心血瘀阻证组最高,其次为假手术组、健康对照组(P<0.05)。结论:基质金属蛋白酶-2、9参与心血瘀阻证心肌微环境的变化,是中医证候本质的物质学基础。     

基质金属蛋白酶-2-9与卵巢周期性变化的研究进展

卵巢的正常功能依赖细胞外基质（EcM）周期性的重建。由于纤溶酶家族的酶不能独立完成蛋白水解，它们不能降解ECM的胶原成分，而基质金属蛋白酶家族能够降解几乎所有的ECM。近年来，大量研究证实，基质金属蛋白酶在这一过程的代谢平衡调节中起决定性作用。而水解Ⅳ型胶原的明肢酶MMP-2和MMP-9在这一过程中的调节具有更为特殊的意义。     

密骨片对绝经后骨质疏松症骨密度、血清骨保护蛋白及其配体水平和骨代谢指标的影响

目的 观察密骨片治疗绝经后骨质疏松症患者骨密度（BMD）、血清骨保护蛋白（OPG）和骨保护蛋白配体（OPGL）水平及骨代谢指标的变化.方法 将年龄48～65岁的192名自然绝经的妇女进行骨密度测定,对其中160例骨质疏松妇女进行随机分组,其中密骨片组54例,仙灵骨葆组53例,乐力钙组53例;其余BMD正常32例作为对照组.各组均于用药前、后12、24周,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清OPG与OPGL水平、骨碱性磷酸酶（sBAP）、骨钙素（sOC）、Ⅰ型胶原交联C端肽（sCTx）和尿Ⅰ型胶原交联N端肽（uNTx）,用双能X线吸收法（DEXA）测定腰椎正位、股骨颈、Ward＇s三角和大粗隆的BMD.结果 治疗24周后,密骨片组和仙灵骨葆组BMD均有不同程度的提高,OPGL、sBAP、sOC均有明显升高,而OPG、sCTx、uNTx/Cr明显下降,乐力钙组和对照组变化不明显.结论 密骨片治疗绝经后骨质疏松症疗效较显著,与仙灵骨葆相仿.单纯服用钙剂不能治疗绝经后骨质疏松症,且继续骨流失.     

冠心病稳定型心绞痛患者MPO及MMP-9表达变化

目的 探讨冠心病稳定型心绞痛患者血清髓过氧化物酶（MPO）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达变化.方法 采用液相芯片分析系统同步检测206例经冠状动脉造影证实的稳定型心绞痛患者及28名健康对照者血清MPO和MMP-9表达程度,并分析其与冠脉病变程度的相关性.结果 稳定型心绞痛患者血清MPO、MMP-9表达程度较健康对照者升高（P〈0.01）;二者变化具有显著正相关（P〈0.01）,且与冠脉病变程度Gensini积分无明显相关.结论 稳定型心绞痛患者冠脉斑块具有一定程度炎性反应和不稳定性,其中表达程度升高者可能处于向不稳定型心绞痛过度的阶段.MPO和MMP-9可能成为判定稳定型心绞痛患者危险分层的依据.     

清络通痹颗粒含药血清对破骨细胞骨吸收的影响

目的:确定清络通痹颗粒(QLT)含药血清的制备方法并观察其对体外培养破骨细胞的活性和骨吸收的影响。方法:选用高效液相色谱外标一点法测定,QLT含药血清中青藤碱的含量以确定含药血清的制备条件;乳鼠破骨细胞1×108/mL加入96孔板,将QLT 3.6,7.2,14.4 g.kg-1给药的大鼠含药血清1∶10稀释,分别加入各孔培养48 h,观察其对破骨细胞增殖、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性及破骨细胞形成的骨吸收陷窝的影响。结果:QLT 7.2,14.4 g.kg-1给药的含药血清可明显抑制破骨细胞的增殖能力和吸收陷窝面积(P<0.05,P<0.01),QLT 3.6,7.2,14.4 g.kg-1给药的含药血清可明显抑制破骨细胞的TRAP活性(P<0.05,P<0.01)。结论:QLT含药血清可抑制破骨细胞增殖、TRAP活性和骨吸收能力,对破骨细胞引起的骨质破坏产生抑制作用。     

密骨片防治去睾大鼠骨质疏松症的研究

使用不同剂量的补肾中药密骨片对去睾大鼠骨质疏松模型进行治疗，并与正常对照组、模型组和对照药物氟钙定组进行了比较。统计学结果显示，密骨片可明显抑制去睾大鼠造成的大鼠骨质丢失，对骨骼有保护作用；治疗后大鼠骨载荷，骨桡度等生物力学指标与模型组比较明显提高（Ｐ＜０．０５或＜０．０１）。使用密骨片治疗的大鼠部分骨检验指标与药物对照组比较亦有明显提高，差异有显著性（Ｐ＜０．０５或＜０．０１），提示该药促进骨生成的作用可能优于氟钙定。     

米诺环素对大鼠脑出血损伤的保护作用及对Bcl-2和MMP-9表达的影响

 目的 观察B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2和基质金属蛋白酶-9（MMP-9在大鼠脑出血后脑损伤机制中的作用及米诺环素（minocycline对脑损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠随机分为3组：假手术组（Sham、模型组（Model及米诺环素组（Minocycline,每组又按时间点不同分为6,12 h,1,2,3,5,7 d亚组。根据大鼠脑立体定位术,制备大鼠脑内囊出血模型。采用神经系统功能评分和体感诱发电位对脑出血模型进行评价。并于不同时间点开颅取脑组织对针眼前脑组织进行含水量的测定,针眼后脑组织制成病理切片,苏木精-伊红染色法用于脑组织形态学的观察,免疫组化染色用于检测出血周围脑组织Bcl-2和MMP-9蛋白的表达情况。 结果 大鼠内囊出血模型制备成功。免疫组化结果表明,与假手术组相比,模型组各时间点出血周围脑组织的Bcl-2和MMP-9蛋白表达增加（P<0.001,脑组织含水量增加（P<0.001;与模型组相比,米诺环素组各时间点出血周围脑组织Bcl-2表达明显增加,MMP-9表达明显下降,脑组织含水量明显下降。结论 米诺环素对脑出血后脑损伤有保护作用,可能与Bcl-2表达增加以及MMP-9表达减少有关。     

复方藤梨根制剂对胃癌细胞乙酰肝素酶、基质金属蛋白酶-9mRNA表达的影响

目的:探讨复方藤梨根制剂抑制胃癌转移机制。方法:建立裸鼠胃癌腹腔移植瘤模型24只,随机分成生理盐水组、复方藤梨根制剂低剂量、中剂量和高剂量组;18天后,给予复方藤梨根制剂灌胃21天。随后观察裸鼠生存天数和死亡后肿瘤转移浸润情况;用RT-PCR方法检测各组肿瘤组织中HPA、MMP-9 mRNA的表达。结果:对照组与低剂量治疗组转移部位的赋值评分显著高于中、高剂量组;对照组胃癌细胞的HPA mRNA表达高于中、高剂量组(P<0.05);对照组胃癌细胞的MMP-9 mRNA表达明显高于各给药组(P<0.05)。结论复方藤梨根制剂可能通过下调HPA、MMP-9基因的表达而抑制胃癌转移并延长生存时间。     

参芪泄浊饮对腺嘌呤肾间质纤维化模型大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1基因表达的影响

目的:观察参芪泄浊饮对慢性肾衰大鼠肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因表达的影响。方法:采用Yokozawa法复制慢性肾衰大鼠模型,随机分为参芪泄浊饮高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组、模型组及空白组,高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组分别予参芪泄浊饮水煎液20 m L/(kg·d)、参芪泄浊饮10 m L/(kg·d)、氯沙坦9 mg/(kg·d),模型组与空白组大鼠均予纯净水10 m L/(kg·d),连续给药8周,全部大鼠麻醉后腹腔采血,取左肾,ELLISA法测量血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸转氨酶(ALT)并采用荧光定量PCR检测肾脏MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达。结果:1高剂量组Scr水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;2高剂量组MMP-9 mRNA表达水平明显高于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均高于模型组;高剂量组TIMP-1 mRNA表达水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;3各组ALT水平较空白组比较均无显著差别。结论:参芪泄浊饮可通过调节MMP-9及TIMP-1表达来缓解慢性肾衰肾脏功能的恶化。     

急性脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9变化及醒脑静注射液的干预作用

目的探讨血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与急性脑梗死的关系,观察醒脑静注射液对MMP-9的干预作用。方法选择急性脑梗死患者46例,随机分为常规组与治疗组。常规组单纯采用西药常规治疗,治疗组在常规组基础上加用醒脑静注射液静滴,并在第1天、第3天、第8天、第14天时清晨空腹抽取肘静脉血,对比MMP-9变化。结果治疗组治疗后第14天MMP-9浓度降至正常,MMP-9浓度下降程度明显高于常规组,特别在大面积梗死亚组。结论MMP-9血清浓度与急性脑梗死面积大小成正比。经药物治疗后,MMP-9血清浓度无高峰出现,呈缓慢下降曲线,醒脑静注射液干预治疗组下降更明显。