氯化铝改性处理前后温石棉的致病活性研究

本文应用整体动物实验对比了国产新康和四川温石棉经氯化铝改性处理前后的致病生物学活性，染尘１０个月后的结果显示，经氯化铝改性处理后的两种温石棉，其引起大鼠全肺干重，全肺胶原蛋白及血清铜蓝蛋白含量的变化，明显低于未改性处理组（Ｐ〈０．０１）；引起大鼠肺灌洗液上清中铜蓝蛋白含量，细胞浓度及灌洗液细胞中羟脯氨酸含量的变化，虽与未改性处理组比较无明显的统计学差异，但仍有使其作用效应下降的趋势，病理结果也显示     

温石棉与纤维水镁石矿物粉尘体外细胞毒性对比

目的比较温石棉与纤维水镁石矿物粉尘对肺泡巨噬细胞体外细胞毒性来评价纤维水镁石的安全性。方法采用体外细胞培养技术,测定细胞死亡率、乳酸脱氢酶及超氧化物歧化酶活力、细胞膜流动性、丙二醛含量,采用光学显微镜以及扫描电镜观察肺泡巨噬细胞形态变化。结果温石棉及纤维水镁石均产生了肺泡巨噬细胞毒性。结论作为温石棉代用品的纤维水镁石对肺泡巨噬细胞的作用也并不是绝对安全的。     

不同煤质的细胞毒性比较

为探讨不同煤质的细胞毒性大小,应用体外细胞毒性试验研究了不同煤质对家兔肺巨噬细胞（ＡＭ）的存活率、吞噬率、吞噬指标及坏变率的影响。分析结果表明,不同煤质的细胞毒性明显不同。无烟煤对家兔肺泡巨噬细胞的存活率、吞噬率、吞噬指数的影响显著高于烟煤（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）,引起家兔肺泡巨噬细胞的坏变程度高于烟煤（Ｐ〈０．０１）。     

蛋白激酶C抑制剂对温石棉诱导肺成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＣＫ）信号通路在温石棉诱导的肺泡巨噬细胞因子致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖中的作用。方法 采用体外细胞培养技术,用四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）颜色反应法检测温石棉处理兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）的上清液刺激ＨＥＰＦ增殖和ＰＫＣ抑制剂对其产生的影响,同时设空白对照、正常对照（未加粉尘处理的ＡＭ培养上清液）、阴性对照（标准ＴｉＯ２）和阳性对照（标准ＳｉＯ２）。结果 温石棉处理ＡＭ２４ｈ后的培养上清液再处理ＨＥＰＦ４８ｈ,ＨＥＰＦ增殖,且与粉尘浓度存在显著的剂量－效应关系（ｒ＝０．６７１８,Ｐ〈０．０１）;１００ｕｇ／ｍｌ温石棉染尘组ＨＥＰＦ的净增殖率达４０．５６％,是正常对照组的２．６５倍,高于标准ＳｉＯ２组和标准ＴｉＯ２组。１００ｕｇ／ｍｌ粉尘处理ＡＭ的培养上清液的稀释程度与其促使ＨＥＰＦ增殖的     

石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响

石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响王为民，施中华，魏自来，孙义敏（８１１０１部队医院）本文通过石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）产生几种细胞因子的影响，探讨石棉致病机理及保护剂的作用。１材料与方法（１）粉尘制备：四川石棉矿的温石棉（０...     

大豆皂甙和人参皂甙抗石棉尘毒性的体外研究

大豆皂甙和人参皂甙抗石棉尘毒性的体外研究孙义敏，王为民，李章，孙慧娟我们通过观察巨噬细胞存活率、吞噬功能、酶学变化、丙二醛产生量等，研究大豆皂甙和人参皂甙对方棉尘所致肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）损伤的影响。一、材料与方法１．粉尘制备：用四川石棉矿的温石棉（...     

茶多酚联合维生素C,维生素E对染尘大鼠肺泡巨噬细胞DNA损伤的 …

目的 研究茶多酚联合Ｖｃ、ＶＥ对染尘大鼠肺泡巨噬细胞ＤＮＡ损伤的保护作用。方法 采用单细胞凝胶电泳技术（ＳＣＧＥ）分析大鼠肺泡巨噬细胞ＤＮＡ损伤情况。结果 染法后大鼠肺泡巨噬细胞ＤＮＡ拖尾率增高,拖尾长度增大,与生理盐水组比差异有显著性（Ｐ〈０．００１）。经茶多酚联合Ｖｃ、ＶＥ处理后,肺泡巨噬细胞ＤＮＡ拖尾率降低,拖尾长度缩短,与石英粉尘组比差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。结论 茶多酚联合Ｖｃ、ＶＥ     

温石棉与其3种天然代用纤维矿物粉尘体外细胞毒性的对比研究

目的比较温石棉与3种天然代用矿物纤维粉尘的体外细胞毒性,评价3种粉尘安全性。方法首先比较温石棉及代用纤维的化学组分、在悬液中的性质,其次进行巨噬细胞培养,以细胞死亡率、乳酸脱氢酶及超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量变化来观察温石棉与代用纤维的毒性。结果温石棉与纤维水镁石因含较高的OH-表现出较强的细胞毒性,纤维坡缕石含较低的OH-表现出较低的细胞毒性,斜发沸石未含有OH-而未表现出细胞毒性。结论在温石棉的3种代用纤维中,斜发沸石对肺泡巨噬细胞是安全的。     

石英和温石棉致兔肺泡巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性改变的比较研究

为了探讨石英、石棉对抗氧化酶活性的影响,利用改良Ｍｙｖｉｒｋ 法收集兔肺泡巨噬细胞进行体外培养,采用酶－ 底物反应形成有色物来测定巨噬细胞的细胞裂解液中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）的酶活性。结果发现,随着粉尘浓度的增加,石英组和温石棉组巨噬细胞内的ＧＳＨＰｘ的酶活性相应降低,存在显著的剂量反应关系（Ｐ＜ ０．０１）。在不同的粉尘剂量组,温石棉组和石英组的ＧＳＨＰｘ 酶活性均显著低于二氧化钛组（Ｐ＜ ０．０５）,温石棉组低于石英组,但未发现显著的统计学差异。石英组和温石棉组的巨噬细胞死亡率均随粉尘浓度的增加而增大,存在着剂量反应关系,且温石棉组的死亡率高于石英组。石英组、温石棉组巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性和巨噬细胞的死亡率之间的相关系数分别为－ ０．９３１８ 和－ ０．８９８４,而二氧化钛组只有－ ０．３６３７。这说明石英、温石棉均可致巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性呈剂量反应关系的降低,使得胞内自由基Ｈ２Ｏ２ 不能正常消除,促使脂质过氧化加重,损害细胞;且温石棉的效应强于石英。提示ＧＳＨＰｘ 酶活性的降低在石英、温石棉致病中具有一定的作用     

经活性剂处理对纳米级水镁石纤维细胞毒性的影响

[目的]研究纳米水镁石纤维(nanometerbrucitefiber,NMBF)的细胞毒性及经活性剂处理后其细胞毒作用的变化。[方法]收集大鼠肺泡巨噬细胞,培养后分别加入纳米水镁石纤维、普通水镁石纤维(commonbrucitefiber,CBF)、经活性剂处理后的纳米水镁石纤维(activator-treatednanometerbrucitefiber,ANMBF)、经活性剂处理后的普通水镁石纤维(ac-tivator-treatedcommonbrucitefiber,ACBF)、石英及生理盐水,测定肺泡巨噬细胞死亡率、乳酸脱氢酶(LDH)活力和酸性磷酸酶(ACP)活力。[结果]纳米水镁石纤维组的细胞死亡率、LDH、ACP活力分别为(37.60±8.48)%、(158.93±32.25)U/L、(25.81±10.18)U/L,均高于阴性对照组(P<0.01)和普通水镁石纤维组(P<0.05);以上指标均低于石英组(P<0.01);与经活性剂处理后的纳米水镁石纤维组相比,以上指标均有明显的升高(P<0.05)。[结论]纳米水镁石纤维具有明显的细胞毒性,且其细胞毒作用较普通水镁石纤维强,但明显要弱于石英;经活性剂处理后,其细胞毒作用明显减弱。     

人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞的毒作用研究

目的比较１０种人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞毒作用的差异。方法选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ纤维），在体外用豚鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）作为靶细胞，分别对ＪＦＭ纤维作用于ＡＭ后超氧阴离子自由基（Ｏ－２）、过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）的产生，谷胱甘肽（ＧＳＨ）及细胞内游离Ｃａ２＋浓度的变化进行了测定。结果１０种ＪＦＭ纤维中，大多数都可引起Ｏ－２和Ｈ２Ｏ２的产生增多、ＧＳＨ含量下降及细胞内游离Ｃａ２＋浓度升高，但其作用均低于温石棉。结论ＪＦＭ纤维的一般细胞毒性均低于温石棉。这些人造矿物纤维虽然作为石棉的代用品使用，但对机体仍会产生一定的有害作用。     

Studies of the solubility of constituents of chrysotile asbestos in vivo using radioactive tracer techniques

Radioactive tracer techniques were used to study the solubility of certain minor constituents (iron, chromium cobalt and scandium) of chrysotile asbestos following administration to rats by intrapleural injection. For chrysotiles in which the cobalt substitutes magnesium in the brucite layer, the excretion of cobalt-60 can be used to measure the rate at which structural magnesium dissolves in vivo. The distribution of asbestos in the thoracic cavity was determined from measurements of the associated radioactivity. Similar measurements showed that in the case of one particular chrysotile, a significant fraction of the administered asbestos had migrated to the liver. Additional experiments were performed with this material and examination of the relevant tissues by electron microscopy confirmed that migration to the dome of the liver occurred via adjacent diaphragmatic lesions.     

纳米级水镁石纤维粉尘的体外细胞毒性研究

目的研究纳米级水镁石纤维粉尘的体外细胞毒性。方法收集大鼠肺巨噬细胞,培养后分别加入纳米级水镁石纤维粉尘、普通水镁石纤维粉尘、石英粉尘及生理盐水,测定肺巨噬细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果纳米级水镁石纤维粉尘的细胞存活率与对照组、普通水镁石纤维粉尘组比较明显降低,差异均有显著性(P<0.05或P<0.01),而与石英组比较明显升高,差异有显著性(P<0.01);LDH实验结果的变化与细胞存活率类似。结论纳米级水镁石纤维粉尘具有明显的细胞毒性,其细胞毒作用较普通水镁石纤维粉尘强,较石英粉尘弱。     

蛋白激酶C信号通路在温石棉致肺成纤维细胞的细胞周期和凋亡改变中的作用

目的 探讨蛋白激酶C（PKC）信号通路与温石棉致人胚肺成纤维细胞（HEPF）的细胞周期及细胞凋亡改变的联系。方法 流式细胞技术测定PKC的抑制剂或激活剂对温石棉处理兔肺泡巨噬细胞（AM）的培养上清液致HEPF的细胞周期和凋亡改变的影响。同时设立空白对照、正常对照（不加粉尘的AM）、阴性对照（标准TiO2)和阳性对照（标准SiO2）。结果 温石棉处理AM的上清液刺激HEPF增殖时,HEPF的G／M期细胞百分比为7．2％,高于各对照组,而细胞凋亡百分率为3．5％,低于各对照组,差异均有显著性（P＜0．01）。PRKC抑制剂C25H24N4O2使温石棉所致HEPF增殖时的S期细胞百分比由37．8％减少到27．3％,凋亡百分率由3．5％增加到22．7％,差异均有显著性（P＜0．01）,而PKC激活剂PMA能使此S期细胞百分比增加。结论 温石棉所致HEPF增殖时的细胞周期变化与其上游PKC信号通路有关,PKC抑制剂和激活剂主要是作用 于S期DNA的合成和诱导细胞凋亡。     

人造矿物纤维对肺巨噬细胞的毒作用研究

比较１０种人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞毒作用的差异。方法选用日本纤维状物质研究匠１０种标准人造造矿物纤维，在体外用豚鼠肺泡巨噬细胞作用靶细胞，分别对ＪＦＭ纤维作用于ＡＭ后超氧阴离子自由基、过氧化氢的产生，谷胱甘肽及细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度的变化进行了测定。     

Biological reactivity of calcium silicate composites--in vitro studies

The biological reactivity of three samples of manmade calcium silicate composites (A–C) was compared with chrysotile asbestos and titanium dioxide in simple in vitro test systems. Like chrysotile, composite A was actively hemolytic and its hemolytic potential was increased upon sonication. Heat treatment, coincidental with color changes, produced alterations in their hemolytic potential. All the composites were equally active in reducing alveolar macrophage viability and, like chrysotile, calcium silicate B interfered with collagen deposition in lung fibroblast cultures. Composite A produced little effect on fibroblast cultures except at high doses. The composites were all less reactive than chrysotile but more reactive than titanium dioxide. The order of reactivity of each individual composite was different in the test systems employed which may be related in part to their different physical nature but also to their different surface chemistry.     

接触温石棉女工恶性肿瘤死亡的队列研究

目的调查接触温石棉女工的恶性肿瘤死亡率。方法以1960年1月1日至1980年12月31日曾经从事家庭内温石棉手工纺织作业一年以上的女工为调查对象,采用历史性队列流行病学方法进行研究。结果在5681名接触温石棉纺织女工中,有144名死于癌症,其中有74名女工死于肺癌,病死率最高;其次为肝癌,死亡数为27例;占第三位的是胃癌,死亡数为18例。以当地女性年龄组别恶性肿瘤死亡率均值为对照组计算标准化死亡比(SMR),所有除肺癌外的恶性肿瘤与肺癌的SMR分别为1.16(P<0.05)和4.17(P<0.01)。结论接触温石棉的女性纺织工人有明显的肺癌死亡高发倾向。     

Cytotoxicity of a short-fiber chrysotile asbestos for human alveolar macrophages: preliminary observations

Studies were performed to compare the cytotoxicity for human alveolar macrophages of a naturally occurring short-fiber chrysotile asbestos (RG 144) to that of a standard reference mixed-fiber (long and short) chrysotile asbestos (UICC chrysotile A. Rhodesian). Parallel studies were also performed with quartz (Min-U-Sil 15), a known macrophage toxin. On a mass basis, and after 24 hr incubation, RG 144 was more cytotoxic than the UICC standard reference fiber and less toxic than quartz (silica). The cytotoxic potential of RG 144 chrysotile was further enhanced after size reduction by milling. These findings may have important biologic implications with respect to the use of short-fiber asbestos in industry.     

温石棉诱导人支气管上皮细胞凋亡及氧化的作用

目的 研究温石棉诱导永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的凋亡和活件氧(ROS)的生成,并观察自南基清除剂对其诱导作用的拮抗作用.方法 选用BEAS-2B,用0、5、10、20、100、200μg/cm2浓度的温石棉悬液及0、100、200、400、800、1600 μg/ml的温石棉浸出液,设立正常空白对照、阴性对照(标准硅灰石)和阳性对照(标准石英),用锥虫蓝排斥法检测细胞存活率,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞凋亡片段,流式细胞术检测细胞凋亡率及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测凋亡相关基因caspase-3的表达水平.采用荧光探针2',7'-二氯双氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)测定温石棉刺激后细胞产生的ROS水平,并观察自由基清除剂过氧化氢酶、二甲业砜和甘露醇对ROS生成和基因表述水平的影响.结果 温石棉刺激BEAS-2B 24 h后,0、5、10 μg/cm2温石棉悬液和0、100、200μg/ml温石棉浸出液的细胞存活率大于90%.并且检测到凋亡细胞DNA凋亡片段.随着温石棉悬液和浸出液浓度的增加,BEAS-2B凋亡率上升,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).温石棉悬液和浸出液可明显增强细胞caspase-3 mRNA的表达和诱导ROS产生.过氧化氢酶、二甲亚砜和甘露醇等自由基清除剂则可减轻caspase-3表达和阻断ROS生成,对温石棉悬液组细胞的ROS阻断率分别为23.7%、21.6%和11.2%,对温石棉浸出液组ROS阻断率分别为37.9%、40.3%和10.6%.结论 温石棉可诱导BEAS-2B发生凋亡,ROS在BEAS-2B的凋亡中起重要作用.     

温石棉对红细胞膜蛋白构象的影响及氯化铝的拮抗作用

应用５ＮＳ、１６ＮＳ和ＭＳＬ自旋标记物，研究石棉粉尘致细胞膜损伤的机制及可溶性铝剂的拮抗作用。结果表明，在石棉的作用下，人红细胞表层和深层的膜脂流动性未见变化，而用ＭＳＬ标记的膜蛋白结构则发生了松散变化（Ｐ＜０．０１）；同时观察到可溶性铝剂能明显拮抗石棉粉尘的此种作用（Ｐ＜０．０５）。