HPLC-FLD法检测黄酒中9种生物胺

目的建立高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)检测黄酒中色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、酪胺、章鱼胺、组胺、亚精胺及精胺。方法生物胺与内标1,7-二氨基庚烷与衍生试剂丹磺酰氯在特定条件下进行衍生,衍生物用乙醚萃取、N2吹干,再用乙腈定容、混匀,过膜后进HPLC分析。以C18色谱柱为分离柱,FLD检测器检测,流动相为乙腈和水,梯度洗脱,流速为1 ml/min,柱温30℃,以保留时间定性,内标法定量。结果 9种生物胺在1.0 mg/L~75.0 mg/L范围内呈良好的线性关系,加标回收率在80%~121%,该法各组分检测限为0.06 mg/kg~0.71 mg/kg,回收率RSD值在0.69%~2.36%之间。结论本法操作简便、准确可靠,能够同时测定黄酒中9种生物胺的含量。     

啤酒及果汁中生物胺的高效液相色谱快速检测方法

目的建立啤酒及果汁中8种生物胺(组胺、酪胺、腐胺、尸胺、精胺、亚精胺、色胺、2-苯乙胺)的高效液相色谱法(HPLC)。方法采用丹磺酰氯衍生,以1,7-二氨基庚烷为内标,C18柱(250 mm×4.6 mm ID,5μm)分离,二极管阵列检测器波长254 nm检测。结果本法8种生物胺标准曲线线性相关系数均大于0.999,方法检出限为0.2 mg/kg(组胺为0.4 mg/kg),平均回收率为72.57%~104.7%,RSD为2.51%~5.12%。结论本法操作简便、定量准确可靠。     

葡萄酒中生物胺多组分的UVD/FLD串联HPLC方法研究

目的建立葡萄酒中多组分生物胺的柱前衍生反相高效液相色谱-荧光/紫外串联检测器的测定方法。方法以正丁醇/氯仿(1∶1)为萃取液提取葡萄酒中生物胺,丹磺酰氯为衍生剂,1,7-二氨基庚烷为定量内标,采用C18色谱柱分离,甲醇/水为流动相梯度洗脱,流速1.5ml/min,紫外检测波长254nm,荧光激发波长(Ex)350nm,发射波长(Em)520nm。结果色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、精胺和亚精胺在30分钟内得到良好分离。在给定的浓度范围内,各组分生物胺呈现良好线性相关(r>0.99)。在葡萄酒中添加生物胺混合标准溶液,平均回收率为79.2%~127.9%,相对标准偏差RSD小于10%。结论采用荧光/紫外检测器串联方法检测,满足了葡萄酒中多组分生物胺检测的需要。     

柱后衍生-液相色谱法快速检测发酵酒中的生物胺

目的建立发酵酒中色胺、2-苯乙胺、腐胺、组胺、尸胺、酪胺、精胺、亚精胺的柱后衍生-液相色谱分析方法,并探讨其在实际检测中的适用性。方法取2 ml样品经高氯酸涡旋提取,以离子对试剂和乙腈为流动相,高效液相色谱梯度洗脱,Atlantis-C_(18)柱分离,采用邻苯二甲醛(OPA)为柱后衍生试剂,二极管阵列检测器254 nm检测,以1,7-二氨基庚烷为内标进行定量。结果本法8种生物胺在1.0 mg/L~50 mg/L内线性关系良好,相关系数均≥0.998 2,在1.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L的3个添加水平的平均回收率为81.2%~106.0%,相对标准偏差为2.79%~5.21%,方法定量限为0.2 mg/L。结论采用柱后衍生-高效液相色谱法对发酵酒中的生物胺进行分离检测,方法快速、简便、灵敏度高,适用于批量实际样品检测。     

高效液相色谱法检测环境水样中的生物胺

目的采用高效液相色谱法检测环境水样中的生物胺组成和含量。方法以邻苯二甲醛为衍生化试剂,采用在线衍生液相色谱法检测环境水样中的6种生物胺。结果该方法能够在20 min内快速分离环境水样中的组胺、尸胺、腐胺、酪胺、精胺和苯乙胺,6种生物胺的检出限为14μg/L~70μg/L,相对标准偏差5%,日间精密度为1.7%~3.3%,加标回收率为95.7%~102.6%。6份不同环境水样的检测结果表明,所检测的6份环境水样均含有组胺,2份水样中存在酪胺,3份水样中存在尸胺和腐胺,而水样中精胺和苯乙胺的含量低于本方法的检出。结论本研究提供了液相色谱自动衍生反应进样程序检测水样中6种生物胺的方法,具有简单、快速分离的优点,方法性能参数均满足水样检测要求。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定发酵型饮品中的8种生物胺

目的建立发酵饮品中8种生物胺的柱前衍生-反相高效液相色谱测定方法。方法样品经酸化超声提取后,以饱和碳酸氢钠溶液为缓冲液,丹磺酰氯为衍生剂,调节p H值,于恒温水浴箱中反应,加入乙醚萃取,氮吹挥干后以初始流动相定容,反相高效液相色谱法测定。结果建立了最优衍生条件及色谱条件,8种生物胺在35 min内得到很好的分离,在0.20 mg/L~50 mg/L线性关系良好,相关系数0.997 9,检出限:色胺为0.52 mg/L,苯乙胺为0.17 mg/L,腐胺为0.11 mg/L,尸胺为0.10 mg/L,组胺为0.75 mg/L,酪胺为0.32 mg/L,亚精胺为0.18 mg/L,精胺为0.21 mg/L。加标回收率在86.5%~103.0%,相对标准偏差为0.90%~2.95%,符合方法学要求。结论本方法操作简便、结果准确、实用性强,能够满足发酵饮品中8种生物胺的检测。     

分散固相萃取-柱前衍生-高效液相色谱法测定人体尿样中6种生物胺

目的 建立人体尿样中色胺、组胺、酪胺、腐胺、精胺、亚精胺的柱前衍生-高效液相色谱测定方法。方法 尿液样品以分散固相萃取法（Bondesil - C18固相萃取材料）富集净化,用0.1 mol/L盐酸溶液洗脱目标物。经Waters Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)分离,以乙腈与0.1 mol/L乙酸铵溶液（含0.1%乙酸）流动相梯度洗脱,在紫外检测波长254 nm检测,标准曲线法定量。结果 6种生物胺的回收率为86.9%～102.3%,相对标准偏差为1.0%～3.3%,检出限为0.03～0.10 mg/L。结论 该方法灵敏、准确,可用于人体尿样中的生物胺的检测。     

苯甲酰氯衍生-高效液相色谱法测定鱼露中的生物胺

目的 建立鱼露中生物胺的灵敏、准确的检测方法,有利于更好地控制鱼露调味品的产品质量。方法 本研究采用苯甲酰氯为衍生化试剂,设置程序进样步骤,高效液相色谱法（HPLC）检测鱼露中的生物胺。结果 鱼露中6种生物胺与苯甲酰氯形成的衍生物在15 min内基线分离,线性范围为1.0～50.0μg/mL,相对标准偏差<2.0%(n=7),样品加标回收率92.7%～103.8%。组胺在鱼露中含量最高,酪胺、尸胺和腐胺含量较高,而精胺和亚精胺的含量较低。结论 该方法简单、快速,适用于批量鱼露调味品中多种生物胺的检测。     

蒸发光散射检测器液相色谱法检测酒类饮料中的5种生物胺

目的建立一种样品无需衍生化反应,简单快速检测酿制型酒类饮料中5种生物胺的液相色谱分析方法。方法采用蒸发光散射检测器,反相高效液相色谱检测酒类中的5种生物胺。结果在1.0 mg/L~50.0 mg/L时,液相色谱的蒸发光散射检测器的响应值与酒类中5种生物胺含量的三次方相关,5种生物胺的检出限为0.16 mg/L~0.97 mg/L,测定的相对标准偏差5%,隔天精密度为1.8%~6.7%,加标回收率为90.5%~103.8%。。结论该方法能在25 min内简单快速测定红酒、啤酒和葡萄酒中的组胺、尸胺、腐胺、酪胺、色胺和精胺的含量,具有无需衍生化反应、重现性好、定量准确等优点。     

家庭烹饪燃料和环境与高血压发病的前瞻性研究

目的 探讨家庭烹饪燃料、烹饪环境对高血压发病的影响。方法 以贵州省自然人群队列中基线5600例非高血压人群为研究对象,以随访发生高血压为结局,采用COX生存回归分析烹饪燃料、烹饪地点、排气使用、人均烹饪用油、洁净厨房指数与高血压发生的风险。R 4.0.4软件PAF包计算人群归因危险度百分比。结果 中位随访6.59年,结局发生高血压1207例;气体燃料、独立厨房、使用排气、人均烹饪用油＜25g/d分别降低16%（HR=0.84,95%CI:0.76~0.92）、20%（HR=0.80,95%CI:0.66~0.98）、36%（HR=0.64,95%CI:0.51~0.79）、22%（HR=0.78,95%CI:0.67~0.92）的高血压发病风险;未使用排气的不同烹饪燃料、烹饪地点、人均烹饪用油与高血压发病无统计学差异;使用排气的气体燃料、太阳能/电能、独立厨房、人均烹饪用油≥25g/d、人均烹饪用油<25g/d分别降低25%（HR=0.75,95%CI:0.66~0.86）、9%（HR=0.91,95%CI:0.84~0.99）、51%（HR=0.49,95%CI:0.37~0.64）、33%（HR=0.67,95%CI:0.53~0.83）、71%（HR=0.29,95%CI:0.18~0.45）的高血压发病风险;最高的洁净厨房指数能降低77%（HR=0.23,95%CI:0.13~0.40）的高血压发病风险;人均烹饪用油≥25g/d、未使用排气的高血压发病人群归因危险度百分比分别为19.75%（95%CI:8.61~29.52）、32.69%（95%CI:19.01~44.05）。结论 增加排气使用、减少烹饪用油能有效降低高血压发病的风险,是高血压防控中一种简单、有效的措施。     

同位素稀释-超高效反相液相色谱串联质谱测定尿中尼古丁和可替尼

目的 建立尿液中尼古丁和可替尼的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定方法。方法 尿样经含有同位素标记的尼古丁-d3与可替尼-d3的水稀释后,引入UPLC-MS/MS分离分析。以Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C¹8色谱柱(50mm×3.0mm, 1.8μm)为分离柱,甲醇和0.1%氨水作流动相,梯度洗脱,流速为0.2ml/min;以正离子扫描多反应监测模式检测,用内标校正法定量。结果 尼古丁和可替尼在1.0～1000ng/ml浓度内线性良好,方法检出限分别为0.28和0.32ng/ml;定量限分别为0.93和0.98ng/ml;加标回收率分别为86.3%～101%和81.2%～102%,相对标准偏差分别为1.08%~6.01%和1.22%~2.33%。结论 本法快速、灵敏,操作便捷,定量准确,可为人群烟草暴露情况的调查提供检测方法。     

利多卡因抑制乳腺癌和前列腺癌细胞侵袭的作用和机制研究

目的 研究利多卡因对乳腺癌和前列腺癌细胞侵袭、迁移的作用及作用机制。方法 不同浓度利多卡因处理人乳腺癌MDA-MB-231细胞和前列腺癌PC-3细胞。采用MTT试验测定细胞活力,划痕实验评估细胞迁移距离,Transwell试验检测细胞侵袭能力。同时,使用Fluo-3 AM荧光探针对细胞内游离 Ca2+([Ca2+]i)进行测量,并测定各细胞中瞬时受体电位阳离子通道亚家族V成员6(TRPV-6)mRNA和蛋白质的表达水平。结果 划痕试验及Transwell侵袭试验结果显示:与0μM利多卡因相比,100μM、1mM利多卡因处理后对MDA-MB-231、PC-3癌细胞迁移(MDA-MB-231:q100μM=4.549,q1mM =6.675;PC-3:q100μM =3.618,q1mM=5.992)、侵袭(MDA-MB-231:q100μM=3.480,q1mM =4.156;PC-3:q100μM =4.828,q1mM=7.331)均存在抑制作用。Fluo-3 AM染色后发现100μM、1mM处理的MDA-MB-231、PC-3 的[Ca2+]i下降(P<0.05)。qPCR与Western blot结果显示,100μM、1mM利多卡因处理后,两类癌细胞中的TRPV-6 mRNA及蛋白表达含量均降低(P＜0.05)。结论 利多卡因在低于临床浓度的情况下可抑制MDA-MB-231,PC-3细胞的侵袭和迁移,此机制可能与钙流入速率及TRPV-6表达下调相关。     

加速溶剂萃取/凝胶渗透色谱净化-气质联用法测定烟熏腊肉中24种多环芳烃

目的 建立烟熏腊肉中24种多环芳烃的气相色谱-质谱联用快速检测方法。方法 腊肉样品与硅藻土充分混合后置于萃取池中加速溶剂萃取,萃取液经过凝胶渗透色谱(GPC)去除油脂,SPE硅胶柱去除极性组分,经DB-EUPAH色谱柱分离后,质谱检测,内标法定量。结果 24种PAHs的线性范围为 1.0～300ng/ml,线性相关系数r为0.9975～0.9999。方法检出限在0.5～5.0μg/kg之间,加标回收率为70.4%～118.5%,相对标准偏差为5.43%～9.74%(n=3)。结论 该方法准确度高,重现性好,适合于烟熏肉中24种PAHs的同时测定。     

NaAsO2对L-02肝细胞氧化应激性损伤及SOD1、AUF1表达影响

目的 观察不同剂量亚砷酸钠（NaAsO2）对L-02肝细胞氧化应激性损伤作用及超氧化物歧化酶1（SOD1）、AU 碱基富集元件RNA 结合因子1（AUF1）表达影响。方法 用0、10、20、40μmol/L NaAsO2分别处理L-02肝细胞24小时，化学比色法检测谷胱甘肽巯基转移酶（GST）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）活力及总胆汁酸（TBA）含量和SOD1、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性；荧光探针2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯检测细胞内活性氧族（ROS）相对荧光密度；实时荧光定量PCR和Western Blotting分别检测SOD1和AUF1转录和蛋白表达。结果 （1）与对照组比较，20、40μmol/L NaAsO2组GST活性和TBA含量均升高（P<0.05）；10、20、40μmol/L NaAsO2组γ-GT活性也升高（P<0.05）。（2）与对照组比较，20、40 μmol/L NaAsO2组SOD1活性均下降（P<0.05）；GPx活性仅在10μmol/L升高（P<0.05）；细胞内ROS先降低后升高（P<0.05）。（3）与对照组比较，20和40μmol/L NaAsO2组AUF1和SOD1 mRNA表达均升高（P<0.05），AUF1蛋白表达先升高后降低（P<0.05）；10、20μmol/L NaAsO2组SOD1蛋白表达升高（P<0.05），但40μmol/L NaAsO2组SOD1蛋白表达有降低趋势。结论 NaAsO2对L-02肝细胞产生氧化应激性损伤，其机制可能是NaAsO2通过降低AUF1的蛋白表达降低，从转录后调控降低了SOD1 mRNA的稳定性而使其蛋白表达和酶活力降低。     

气相色谱法测定工作场所空气中芳香族硝基化合物的方法改进

目的 改进工作场所空气中芳香族硝基化合物的气相色谱测定方法。方法 硅胶管和超细玻璃纤维滤纸采集的芳香族硝基化合物,分别用丙酮和5%乙醇-正己烷解吸和洗脱,DB-17MS毛细管色谱柱分离,电子捕获检测器检测,外标法定量。结果 9种芳香族硝基化合物均在9.5min内出峰,分离良好,平均解吸或洗脱效率为93.6%~100.9%,检出限范围0.0015~2.5μg/ml,相对标准偏差0.5%~3.6%。结论 改进后的方法精密度和准确度高,适用于工作场所空气中芳香族硝基化合物的测定。     

分级诊疗背景下徐州市慢性病患者基层就诊现状及影响因素研究

目的 了解徐州市慢性病患者基层就诊现状和影响因素,为加强慢病管理、促进合理就医提供建议。方法 采用分层随机抽样方法,抽取徐州市3个县区的600名慢性病患者进行问卷调查。利用SPSS 25.0统计软件进行统计描述、〖XC小五号.EPS;P〗检验和logistic回归分析。结果 徐州市慢性病患者就医率为73.22%,基层首诊率为54.22%。Logistic回归结果显示,有基层就医经历（OR=2.427,95%CI:1.539~3.829;OR=6.263,95%CI:3.215~12.201）、知晓分级诊疗制度（OR=2.093,95%CI:1.340~3.269;OR=3.900,95%CI:2.262~6.723）的慢性病患者就医率和基层首诊率均高;城市（OR=1.835,95%CI:1.171~2.876）、年医疗费用高（OR3000~=5.301,95%CI:1.906~14.739;OR≥5000=3.088,95%CI:1.346~7.089）、有健康体检者（OR=1.956,95%CI:1.268~3.015）就医率高;文化程度低（OR高中/中专=2.433,95%CI:1.053~5.623;OR大专及以上=0.210,95%CI:0.048~0.914）、月均收入低（OR1000~=0.442,95%CI:0.236~0.829;OR3000~=0.075,95%CI:0.029~0.195）、年医疗费用低（OR1000~=0.108,95%CI: 0.033~0.349;OR3000~=0.108,95%CI:0.031~0.372;OR≥5000=0.093,95%CI:0.028~0.310）、距二/三级医疗机构远者（OR=2.759,95%CI:1.565~4.865）基层首诊率高。结论 徐州市慢性病患者就医率和基层首诊率较低,建议从健康管理、基层建设、流程简化、制度引导等方面,促进慢性病患者合理就医,保障慢性病患者健康。     

气相色谱-三重四极杆串联质谱法测定蔬菜水果中12种有机磷农药残留

目的 建立固相萃取提取净化样品、气相色谱-三重四极杆串联质谱法(GC-MS/MS)多反应监测(MRM)模式测定蔬菜水果中12种有机磷农药残留的方法。方法 样品经乙腈提取,氯化钠盐析离心,Carb/NH2固相萃取柱净化,后经DB-5MS气相色谱柱分离,MRM模式测定,保留时间及离子对定性,外标法定量。结果 12种农药的浓度在20μg/L～500μg/L范围内线性良好,相关系数(r)均大于0.997,在3个添加水平(10,20和100μg/kg)下,除三唑磷外,11种组分的回收率85.2%～120%;相对标准偏差0.9%～15.0%(n=7)。方法定性限(S/N=3)0.03～6.38μg/kg。结论 本法操作简单、快速、灵敏,适用于蔬菜水果中痕量多组分有机磷农药残留进行准确的定性和定量分析。     

四川省贫困农村地区儿童营养改善项目对儿童生长发育的促进作用

目的 在健康扶贫背景下,评估四川省贫困农村地区儿童营养改善项目对儿童生长发育的影响。方法 采用监测与横断面调查相结合的综合研究方法。收集2015-2019年四川省5岁以下儿童生长发育状况以及四川省儿童营养改善项目县儿童营养包服用情况的监测数据,对儿童生长发育及营养包服用情况的变化趋势进行描述性分析;在四川省儿童营养改善项目县中开展横断面现场调查,选取6~24月龄儿童及其看护人作为研究对象,通过问卷调查收集其社会人口学特征及儿童营养包服用情况,并通过测量儿童的身长和体重评估其生长发育状况。运用多因素logistic回归分析有效服用营养包对儿童生长发育的影响。结果 监测数据显示,四川省5岁以下儿童的生长迟缓率由2015年的0.80%（2.64万/328.18万）下降至2019年的0.65%（2.19万/335.69万）,低体重率由2.12%（3.97万/328.18万）下降至1.11%（3.71 万/335.69 万）;儿童营养包有效服用率由2015年的89.55%（1.67万/1.86万）上升至2019年的91.18%（10.89万/11.94万）。横断面研究共纳入872对儿童及其看护人,回归分析显示,在控制相关混杂因素后,有效服用营养包能够降低儿童营养不良的风险（OR = 0.61, 95%CI:0.43~0.90）。结论 儿童营养改善项目在促进贫困农村地区儿童生长发育方面发挥了积极作用,有效服用营养包可降低儿童营养不良的风险。     

维生素AD胶囊对反复呼吸道感染儿童血清25-羟基维生素D水平、机体免疫功能及疗效的影响

目的　探讨维生素AD胶囊对反复呼吸道感染儿童血清25-羟基维生素D水平、机体免疫功能及疗效的影响。方法　反复呼吸道感染患儿116例,随机数字表法分为观察组干预组和对照组,每组58例。对照组常规治疗呼吸道感染,观察组干预组在对照组治疗基础上,加用维生素AD胶囊。比较两组患儿血清25-羟基维生素D水平、免疫功能变化及临床疗效。结果　随访期间,干预组患儿呼吸道感染的发作次数为（2.35±0.59）次,少于对照组患儿的（4.21±0.73）次;治疗前后,干预组外周血CD4+T与CD8+T细胞变化水平高于治疗组,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗前后,干预组血清25-羟基维生素D以及免疫球蛋白变化水平高于治疗组,差异有统计学意义（P＜0.05）。干预组患儿治疗前后的血清25-羟基维生素D变化值为（25.22±7.65）nmol/L,IgA变化值为（0.91±0.21）g/L,IgM变化值为（0.72±0.13）g/L,IgG变化值为（6.03±0.95）g/L。血清25-羟基维生素D与IgA、IgM、IgG均呈正相关。观察组干预组总有效率为93.10％,高于对照组的74.14％,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　维生素AD胶囊治疗儿童反复呼吸道感染能够有效促进患儿免疫功能的提高,减少呼吸道感染的发生次数,疗效显著。     

安阳市2005-2019年流行性腮腺炎流行病学特征分析

目的 分析2005-2019年安阳市流行性腮腺炎流行病学特征，预测疾病发病趋势，为流行性腮腺炎的科学防控提供参考依据。方法 运用描述流行病学方法对法定传染病监测系统筛选的安阳市2005-2019年流行性腮腺炎病例和突发公共卫生事件管理信息系统的流行性腮腺炎暴发疫情进行分析，应用时间序列分析方法预测2020年流行性腮腺炎发病趋势。结果 2005-2019年安阳市累计报告流行性腮腺炎病例18796例，年均报告发病率为31.06/10万，各年度流行性腮腺炎报告发病率未见明显变化趋势（APC=0.85%，t=0.407，P=0.691）。发病呈4-6月、11月至次年1月两个高峰，分别占总病例数的31.11%和29.42%；城区发病率67.66/10万，高于农村的17.19/10万；病例主要为5~9岁的学生和幼托儿童，分别占59.62%和24.85%；男女发病比为1.57:1。2005-2019年安阳市累计报告流行性腮腺炎暴发疫情17起，均为校园内暴发。预测2020年流行性腮腺炎发病与2019年同期基本持平。结论 5~9岁学生和幼托儿童是流行性腮腺炎的主要防控人群，2020年发病仍将处于较高水平。需认真落实2剂次麻腮风疫苗常规免疫策略，加强学校等集体单位流行性腮腺炎的监测和防控，对高风险人群可考虑第3剂次含腮腺炎疫苗接种。