异丙酚麻醉对小鼠卵巢功能及外周血性激素水平的影响

目的 探讨麻醉药物异丙酚对小鼠卵巢功能及外周血性激素水平的影响,初步评价异丙酚对女性生殖系统功能的影响。方法 选用健康SPF级雌性小鼠,随机分为空白组(不进行药物处理)、生理盐水组(等量生理盐水)、异丙酚低剂量组(15 mg/kg异丙酚)、异丙酚中剂量组(25 mg/kg异丙酚)、异丙酚高剂量组(40 mg/kg异丙酚)和环磷酰胺组(30 mg/kg环磷酰胺)各20只,连续腹腔注射28 d。采用阴道脱落细胞涂片观察小鼠动情周期变化,称重法检测卵巢及子宫器官系数的变化,TUNEL法检测卵巢颗粒细胞凋亡情况,卵巢组织切片观察小鼠成熟卵泡数和黄体数量变化,ELISA法检测外周血卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)及孕酮(P)等性激素水平的变化。结果 与空白组及生理盐水组相比,异丙酚低、中、高剂量组小鼠的平均动情周期、卵巢及子宫器官系数、卵巢颗粒细胞凋亡率、成熟卵泡数、黄体数或外周血性激素水平,均无统计学差异(P 0. 05);而与空白组及生理盐水组相比,环磷酰胺组小鼠动情周期延长,卵巢及子宫器官系数下降,成熟卵泡数、黄体数减少,外周血FSH、LH升高,E2和P均下降,差异均具有统计学意义(P 0. 01)。结论 15～40 mg/kg麻醉药物异丙酚对雌性小鼠的卵巢功能及外周血性激素水平均无显著影响,说明该剂量范围内异丙酚对小鼠作用安全性较高,因此临床上应用该药物时应合理掌控剂量,将其对女性生殖系统功能的负面影响降到最低。     

虎杖苷与姜黄素对百草枯中毒小鼠保护作用及机制的对比研究

目的:观察不同剂量虎杖苷与姜黄素对百草枯(PQ)中毒小鼠行为及炎性因子、氧化应激相关分子表达的影响。方法:将60只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、PQ中毒组、姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组、虎杖苷低剂量组、虎杖苷高剂量组,每组各10只。PQ中毒组小鼠仅予20%PQ水剂以15mg/kg剂量灌胃一次性染毒,2h后予0.9%氯化钠溶液以40ml/kg剂量灌胃,1次/d,连续14d;姜黄素高、低剂量组、虎杖苷高、低剂量组染毒2h后,分别予(20mg/kg、5mg/kg)姜黄素溶液、(20mg/kg、5mg/kg)虎杖苷溶液灌胃,1次/d,连续14d;正常对照组予0.9%氯化钠溶液以75ml/kg剂量灌胃1次,2h后予0.9%氯化钠溶液以40ml/kg剂量灌胃,1次/d,连续14d。观察各组小鼠行为学特性、生存率、肺干湿比等,苏木精-伊红染色后观察肺组织切片,ELISA法测定小鼠血清中MPO、CAT、MDA、SOD水平的变化。结果:与正常对照组比较,PQ中毒组小鼠静伏少动、精神萎靡,死亡主要发生在第7~10天,肺干湿比明显增加,肺组织损伤显著,同时血清中CAT、SOD水平明显降低(P <0.01),MPO、MDA水平明显升高(P<0.01);与PQ中毒组比较,姜黄素高、低剂量组与虎杖苷高、低剂量组小鼠随给药次数增加症状明显减轻,逐渐活动、精神恢复,病死率明显下降,肺干湿比下降,肺组织损伤明显改善,血清中CAT、SOD水平升高(P<0.01),MPO、MDA水平下降(P<0.01)。此外,与同剂量姜黄素组相比,虎杖苷低剂量组MPO水平升高(P<0.01)、虎杖苷高剂量组SOD水平升高(P<0.01)。与同种药物低剂量组相比,虎杖苷高剂量组CAT、SOD水平均明显升高(P<0.01),MPO、MDA水平明显降低(P<0.01);姜黄素高剂量组CAT、SOD水平均明显升高(P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.01)。结论:虎杖苷可通过抑制氧化应激,减轻炎性损伤,从而对PQ导致的小鼠组织损伤发挥保护作用,且虎杖苷与姜黄素的保护作用相当。虎杖苷可作为PQ中毒的潜在治疗药物。     

柚皮素对肺鳞癌大鼠的抗肿瘤作用及microRNA34a/Sirt1/p53信号通路的调控机制

目的观察柚皮素对肺鳞癌大鼠的抗肿瘤作用,并探讨其对microRNA34a/Sirt1/p53信号通路的调控机制。方法选取50只Wistar大鼠,随机分为模型组,低、中、高剂量组和对照组,前4组利用3-甲基胆蒽(MCA)及二乙基亚硝胺(DEN)灌注左肺叶支气管建立肺鳞癌模型,对照组同时灌注等量的碘油。建模成功后,低、中、高剂量组分别给予10 mg/(kg·d)、20 mg/(kg·d)、40 mg/(kg·d)剂量的柚皮素注射液经尾静脉注射,模型组和对照组给予等量的无菌生理盐水。观察各组大鼠的一般情况,均于8周后处死,比较瘤体质量、抑瘤率;采用TNUEL检测凋亡指数(LI);采用RT-PCR检测肺组织中microRNA34a、Sirt1mRNA、p53 mRNA的表达;以WB检测肺鳞癌组织中Sirt1蛋白、p-p53蛋白的相对表达量及p-p53/p53。结果对照组大鼠状态良好,模型组大鼠状态最差,低剂量组明显优于模型组,中剂量组明显优于低剂量组,高剂量组明显优于中剂量组,但是3剂量组大鼠状态均不如对照组;各组大鼠瘤体质量、抑瘤率、LI比较差异均有统计学意义(P 0. 05),瘤体质量比较模型组最高,低剂量组稍低,中剂量组更低,高剂量组最低;抑瘤率比较高剂量组最高,中剂量组次之,低剂量组最低; LI比较高剂量组最高,中剂量组次之,低剂量组最低;各组microRNA34a、Sirt1 mRNA及蛋白、p53 mRNA、p-p53蛋白的相对表达量及p-p53/p53比较差异均有统计学意义(P 0. 05),其中microRNA34a、p53 mRNA、p-p53蛋白的相对表达量及p-p53/p53比较,模型组最高,低剂量组次之,中剂量组稍低,高剂量组更低,对照组最低; Sirt1 mRNA及蛋白的相对表达量比较,对照组最高,高剂量组次之,中剂量组稍低,低剂量组更低,模型组最低。上述指标每两组间比较均可见显著性差异(P 0. 05)。结论柚皮素对肺鳞癌大鼠有良好的抗肿瘤效果,能够控制瘤体质量,提高LI,并其作用呈剂量依赖性,推测与调控microRNA34a/Sirt1/p53信号通路,上调Sirt1 mRNA及蛋白表达,抑制microRNA34a、p53 mRNA、p-p53蛋白表达有关。     

黄芪对慢性肾功能衰竭大鼠抗氧化作用的研究

目的 探讨黄芪对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾功能和血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响.方法 将大鼠随机分为假手术组、模型组及黄芪低、中、高剂量组,每组8只.采用切除5/6肾的方法制备CRF模型.黄芪各组予不同浓度的黄芪水煎液2 ml/d灌胃(低、中、高剂量组分别含生药量0.1、0.2、0.4 kg/L),模型组及假手术组均予等量蒸馏水灌胃.8周后观察各组大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及血浆SOD、MDA水平的变化.结果 模型组大鼠SCr、BUN、MDA明显高于假手术组,SOD活性明显低于假手术组(P均<0.01);黄芪各剂量组SCr、BUN、MDA均较模型组显著降低,SOD活性则显著升高(P<0.05或P<0.01),其中以黄芪高剂量组最为明显(P均<0.05).结论 黄芪能明显改善CRF大鼠的肾功能及体内的氧化应激反应;高剂量的黄芪抗氧化能力优于低剂量.     

人参皂甙Rg3与环磷酰胺并用对EMT-6乳腺癌小鼠肿瘤血管生成的影响

目的:研究持续低剂量人参皂甙Rg3并用环磷酰胺对EMT-6乳腺癌肿瘤血管生成的影响。方法:以荷EMT-6乳腺癌的BALB/c小鼠为模型,分为组(每组520只,低剂量环磷酰胺组:环磷酰胺30mg/kg·d)灌胃;最大耐受剂量)((maximumtolerateddose,MTD)环磷酰胺组:环磷酰胺150mg/kg隔日皮下注射,3次后间歇两周再重复;Rg3组:人参皂甙Rg310mg/(kg·d)灌胃;联合组:环磷酰胺30mg/(kg·d)+人参皂甙Rg310mg/(kg·d)灌胃;对照组:每日等体积生理盐水灌胃。观察肿瘤体积、小鼠质量和外周血白细胞计数及小鼠生存期,实验终末时行免疫组化染色,测定肿瘤微血管密度(microvasculardensity,MVD)、核增殖抗原表达基因Ki-67、血管内皮生长因子(vascularendothlialgrowthfactor,VEGF)、凋亡抑制基因Bcl-2、突变型P53表达情况。结果:低剂量环磷酰胺组肿瘤生长比较缓慢,小鼠质量及外周血白细胞数均无明显下降(P>0.05),生存期延长P<0.05);合用人参皂甙(Rg3时抑瘤效果更持久而稳定,毒副作用未增加,小鼠生存期最长(P<0.05)。低剂量环磷酰胺组较MTD环磷酰胺组MVD下降明显(P<0.05);与对照组相比,低剂量环磷酰胺组MVDVEGF,及Ki-67表达均下降,在合用人参皂甙Rg3时下降更多,同时Bcl-2,P53表达也下降(P<0.05)。结论:环磷酰胺的持续低剂量给药方式增加了其     

肝复康影响小鼠免疫功能的特点

目的:探讨具有补益元气、疏肝升阳、安神益智功效的肝复康对小鼠免疫功能的影响。方法:实验于2004-03/10在泰山医学院分析实验室完成。①选用成年昆明种小白鼠70只,雌雄各半。按随机抽签法将小鼠分为7组,每组10只:高、中、低剂量肝复康组、高、中剂量肝复康 环磷酰胺组、正常对照组、模型组。高、中、低剂量肝复康组:按3.0,1.5,0.75g/(kg·d)剂量灌胃肝复康混悬液10mL/kg;高、中剂量肝复康 环磷酰胺组:按3.0,1.5g/(kg·d)剂量灌胃肝复康混悬液10mL/kg;模型组和正常对照组:灌胃等量生理盐水。模型组及高、中剂量肝复康 环磷酰胺组在给药后第3,5天腹腔注射环磷酰胺(75mg/kg)1次。②于给药后第15天通过巨噬细胞吞噬功能试验(计数巨噬细胞吞噬率)、溶血素测定[以上清液吸光度(A值)表示]、淋巴细胞增殖实验(记录A570～630值),观察肝复康对小鼠免疫功能的影响。③计量资料差异比较采用t检验。结果:小鼠70只均进入结果分析。①高剂量肝复康组巨噬细胞吞噬率明显高于正常对照组(P<0.05),高、中剂量肝复康 环磷酰胺组明显高于模型组(P<0.01)。②高、低剂量肝复康组溶血素水平明显高于正常对照组(P<0.01),高、中剂量肝复康 环磷酰胺组明显高于模型组(P<0.01)。③各种剂量肝复康组脾淋巴细胞增殖作用明显强于正常对照组(P<0.01),高、中剂量肝复康 环磷酰胺组明显强于模型组(P<0.01)。结论:肝复康对小鼠细胞和体液免疫均有一定保护和增强作用。     

益智仁提取物对糖尿病肾病小鼠肾氧化应激损伤的影响及机制研究

【目的】探讨益智仁提取物对糖尿病肾病(DN)小鼠肾氧化应激损伤的影响及机制。【方法】将40只SPF级SD雄性小鼠随机分为对照组、模型组及益智仁提取物低、高剂量组,每组10只。低剂量组、高剂量组及模型组成功建立DN模型后,同时间分别给予5 g/(kg?d)、20 g/(kg?d)益智仁提取物溶液、等量生理盐水灌胃处理(连续4周),对照组于同时间给予等量生理盐水灌胃处理。采用全自动生化分析仪测定24 h尿蛋白、血肌酐、血尿素氮水平;采用苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理变化;采用比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,采用ELISA法检测谷胱甘肽(GSH-px)含量;采用免疫印迹法测定肾组织中核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路蛋白Nrf2、HO-1水平。【结果】DN模型建立成功;与对照组比较,模型组及低剂量组、高剂量组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐水平均升高,SOD、GSH-px水平及Nrf2、HO-1蛋白水平均降低(P<0.05);与模型组比较,低剂量组、高剂量组大鼠24 h尿蛋白、尿素氮、血肌酐水平均降低,SOD、GSH-px水平及Nrf2、HO-1蛋白水平均升高(P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐水平均升高,SOD、GSH-px水平及Nrf2、HO-1蛋白水平均降低(P<0.05)。【结论】益智仁提取物对DN小鼠肾脏发挥保护作用,可能是通过促进Nrf2/HO-1通路活化抑制肾脏氧化应激损伤实现。     

博来霉素性肺纤维化大鼠NADPH氧化酶介导的细胞外基质重构机制研究

目的探讨博来霉素性肺纤维化大鼠NADPH氧化酶介导的细胞外基质重构机制。方法 40只SD大鼠随机分为4组:对照组、模型组、乙酰香草素低剂量和高剂量组。一次性气管注入博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,乙酰香草低剂量组灌胃乙酰香草素1μmol/L,高剂量组灌胃乙酰香草素10μmol/L治疗,对照组大鼠给予等剂量的生理盐水。分析各组大鼠肺组织羟脯氨酸及丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,Western Blotting法分析各组大鼠肺组织NADPH氧化酶亚基及细胞外基质重构相关酶系的表达。结果模型组大鼠肺组织羟脯氨酸及MDA水平明显增高,SOD水平明显降低;模型组大鼠肺组织NADPH氧化酶亚基p22phox及p47phox表达明显增强,且MMP2/9及TIMP1/2的表达也明显增强。低剂量和高剂量的乙酰香草素均可以明显改善上述指标的异常(P0.05,P0.01),且具有剂量依从性效果。结论乙酰香草素通过抑制NADPH氧化酶的过度激活及细胞外基质重构改善博来霉素性肺纤维化损伤。     

姬松茸复合多糖对环磷酰胺的增效作用及其机制

目的:观察姬松茸复合多糖是否对环磷酰胺的抗肿瘤作用有增效效应,并分析其作用机制。方法:实验于2003-03/2004-04在齐齐哈尔医学院医药科学研究所完成。①选用健康成年昆明种小鼠135只,按随机数字表法分为9组:正常对照组,荷瘤对照组,环磷酰胺组,姬松茸复合多糖高、中、低剂量组,姬松茸复合多糖高、中、低剂量 环磷酰胺组,每组15只。②除正常对照组小鼠外,将0.2mL浓度为1×1010L-1S180肿瘤细胞接种于其余小鼠腋窝皮下。正常对照组和荷瘤对照组灌胃0.5mL生理盐水,1次/d,共10d。环磷酰胺组先灌胃0.5mL生理盐水,6h后腔注射环磷酰胺10mg/穴kg·d雪;姬松茸复合多糖高剂量、中剂量、低剂量组分别按700,350,175mg/穴kg·d雪灌胃姬松茸复合多糖眼姬松茸多糖(50%)、香菇多糖(33%)、茯苓多糖(94%)均购自浙江庆元县金源真菌多糖有限公司。姬松茸多糖、香菇多糖、茯苓多糖以质量比4∶2∶1的比例混合,用前以蒸馏水稀释至所需浓度演1次/d,共10d。姬松茸复合多糖高、中、低剂量 环磷酰胺组先分别灌胃350,175,88mg/穴kg·d雪姬松茸复合多糖,6h后各组小鼠腹腔注射环磷酰胺5mg/kg;正常对照组和荷瘤对照组胃饲给予等体积蒸馏水。1次/d,共10d。③用药4周后,计算抑瘤率眼(1-实验组平均瘤重/荷瘤对照组平均瘤重)×100%演。依q值评价联合用药增效情况。q=两药合用时的抑瘤率/眼A药的抑瘤率 (1-A药的抑瘤率)B药的抑瘤率演。q=0.85～1.25为两药作用相加,q>1.25为两药作用增强(或协同),q<0.85为两药拮抗。④应用电子显微镜观察肿瘤细胞形态变化,采用酶联免疫分析法检测血清白细胞介素2和P27蛋白表达变化。⑤组间比较采用t检验。结果:在实验过程中,荷瘤对照组造模失败1只,死亡3只,环磷酰胺组死亡3只,造模失败2只,姬松茸复合多糖高剂量组死亡2只,联合用药组死亡2只,造模失败1只。有121只进入结果分析。①抑瘤率:姬松茸复合多糖高、中、低剂量组和环磷酰胺组分别为10.6%,52.5%,30.2%,72.1%,姬松茸复合多糖高、中、低剂量 环磷酰胺组分别为65.8%,83.4%,82.7%,q值分别为0.876,0.962,1.027,均>0.85,表明不同剂量的复合多糖能增强环磷酰胺的抗小鼠S180肿瘤的作用。②血清白细胞介素2水平:荷瘤对照组明显低于正常对照组(t=11.655,P<0.01),复合多糖中、低剂量组,姬松茸复合多糖中、低剂量 环磷酰胺组明显高于荷瘤对照组和环磷酰胺组(t=2.413～9.935,P<0.05～0.01)。③P27蛋白表达:荷瘤对照组明显低于正常对照组穴t=68.976,P<0.01雪,而各治疗组明显高于荷瘤对照组(t=3.188～2.684,P<0.01)。姬松茸复合多糖中、低剂量和姬松茸复合多糖高、低剂量 环磷酰胺组明显高于环磷酰胺组(t=3.132～5.511,P<0.01)。④透射电镜观察结果:单用姬松茸复合多糖各剂量组可见肿瘤细胞核固缩明显,凋亡细胞数量增多,部分细胞核崩解形成小体。姬松茸复合多糖各剂量 环磷酰胺组可见肿瘤细胞体积变小,细胞核固缩明显,细胞表面微绒毛消失,细胞内游离核蛋白体明显减少,胞质内线粒体空泡变性。结论:不同剂量的复合多糖均能增强环磷酰胺的抗小鼠S180肿瘤作用,其作用机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡,增强白细胞介素2、抑癌基因p27的表达有关。     

姜黄素对大鼠急性呼吸窘迫综合征致肾纤维化的影响

目的探讨姜黄素对通过气道内雾化脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导SD成年大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)引起肾纤维化的影响。方法 24只雄性SD大鼠按照随机数字法分为:对照组、ARDS组、低剂量组、高剂量组, 每组6只。对照组仅气道内雾化生理盐水2 mL/kg, ARDS组、低剂量组和高剂量组气道内雾化等容积的LPS 4 mg/kg, 低剂量组每天灌胃姜黄素100 mg/kg, 高剂量组每天灌胃姜黄素200 mg/kg。7 d后处死大鼠, 比色法检测肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde, MDA)及谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量, 蛋白印迹法(Western Blot)检测各组肾脏组织核因子κB p65(nuclear factor kappa-B p65, NF-κB p65)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)蛋白的表达,...     

白藜芦醇对小鼠超排卵子质量的影响

目的 研究白芦藜醇（RSV）对小鼠超排卵效果及胚胎发育的影响。方法 以2~3月龄的CD-1小鼠为研究对象,在超排卵同时腹腔注射RSV（RSV组）或二甲基亚砜（DMSO组）,观察RSV对小鼠超排卵子质量的影响。选取了小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）、卵巢和睾丸组织的模板DNA,通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分别检测沉默信息调节因子（SIRT1） mRNA在这三者中的表达情况。另外获取小鼠P1卵丘细胞,设置DMSO组、RSV（1 μmol/L）组和EX-527（SIRT1的抑制剂,10 μmol/L）组,使用荧光免疫染色检测各组SIRT的相对荧光强度、qRT-PCR检测各组的mtDNA相对表达量。 结果 RSV组的卵裂率和囊胚率均高于DMSO组（P均< 0.05）。体外实验结果显示,SIRT1 mRNA的相对表达量在卵巢是MEF的15~25倍（P < 0.001）。小鼠P1卵丘细胞在经RSV处理后SIRT1荧光相对强度升高（P < 0.001）。在用RSV和EX-527分别处理小鼠卵丘细胞48 h后,RSV组mtDNA相对表达量高于DMSO组（P < 0.001）,而EX-527组mtDNA相对表达量低于DMSO组（P < 0.01）。结论 小鼠超排卵时补充RSV能够显著改善卵子的发育潜能。     

结直肠癌中沉默信息调节因子1与耐药基因的表达及临床意义

目的 研究沉默信息调节因子1(SIRT1)在结直肠癌中的表达,分析SIRT1与结直肠癌患者相关临床病理指标及多药耐药基因P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽转移酶π(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPO-Ⅱ)之间的关系.方法 应用免疫组化方法检测60例结直肠癌组织和24例正常结直肠黏膜中SIRT1的表达情况.结果 60例结直肠癌中,SIRT1在结直肠癌中的阳性表达率高于正常结直肠黏膜(P＜0.05),60例结直肠癌中,浸润深度T3～T4者比T1～T2者SIRT1阳性表达率高,86.8％ vs 42.9％(P ＜0.05);有淋巴结转移的比无转移的SIRT1阳性表达率高,93.3％ vs70.0％(P＜0.05);pTNM分期Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期比Ⅰ期SIRT1阳性表达率高85.7％、83.3％、90.9％ vs20.0％(P＜0.05);SIRT1表达与结直肠癌浸润深度(r=0.365,P＜0.05)、淋巴结转移(r=0.302,P＜0.05)、pTNM分期(r=0.292,P＜0.01)、p53蛋白的表达(r=0.335,P＜0.05)、P-gp的表达(r=0.271,P＜0.05)均呈正相关.结论 SIRT1在结直肠癌组织中高表达,且与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、临床分期、多药耐药有关,可能参与了结直肠癌的发生发展及耐药,有可能成为结直肠癌恶性程度及预后评估的生物学指标之一.     

2种手术治疗卵巢囊肿的临床疗效分析

目的探讨和比较腹腔镜下手术与开腹卵巢囊肿剥除术治疗卵巢囊肿的临床疗效。方法将151例卵巢囊肿患者按随机数字表法分为腹腔镜组(77例)和腹式组(74例),分别采用腹腔镜下手术和传统开腹手术。对2组患者的治愈率、手术效果(手术时间、术中出血量、术后排气时间、住院时间及术后镇痛),术前、术后各项激素指标水平变化及术后3、6个月卵巢储备卵泡情况进行比较。结果腹腔镜组术中出血量、手术时间和术后排气时间均低于腹式组(P<0.05或P<0.01);腹腔镜组术后1个月的治愈率为77.9%,术后3个月的治愈率为92.2%;腹式组患者术后1个月的治愈率为71.6%,术后3个月的治愈率为94.6%。2组术后1、3个月的治愈率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。2组患者术后1个月E2均明显下降,FSH、LH明显增高(P<0.05或P<0.01)。腹腔镜组FSH、LH、及E2水平与腹式组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组患者术后3个月各种激素水平与术前比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。2组术后3个月窦卵泡数均较术前明显减少,腹式组较腹腔镜组减少的更明显(均P<0.05)。2组术后6个月窦卵泡数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜手术治疗卵巢囊肿疗效好,但必须准确掌握手术指征,以最小的创伤达到最佳的治疗效果。     

RNA干扰survivin基因对HepG2细胞凋亡及化疗影响

目的探讨RNA干扰survivin基因对HepG2细胞凋亡及化疗敏感性的影响。方法构建针对HepG2细胞survivin基因的shRNA真核表达载体pshRNA-survivin-387。将HepG2细胞接种于6孔板中,分为空白对照组（不加药物）、阴性对照组（每孔加pshRNA-survivin-NC为3.2μg）、低浓度转染组（每孔加pshRNA-survivin-387为0.8μg）、中浓度转染组（每孔加pshRNA-survivin-387为1.6μg）、高浓度转染组（每孔加pshRNA-survivin-387为3.2μg）,作用48 h后收集细胞,流式细胞术检测各组细胞凋亡指数;将HepG2细胞接种于96孔板中,分为3组：空白对照组（不加药物）、阴性对照组（每孔加pshRNA-survivin-NC为0.2μg）、实验组（每孔加pshR-NA-survivin-387为0.2μg）,四甲基偶氮唑蓝法检测各组细胞分别与顺铂（2.0 mg/L）作用24、36、48、60 h后的增殖水平。结果各浓度转染组细胞的凋亡指数明显高于空白对照组和阴性对照组（F=228.87,q=10.45～38.21,P〈0.01）,高浓度转染组细胞凋亡指数高于低浓度转染组（q=23.99,P〈0.01）。顺铂对实验组细胞的细胞抑制率在24、36、48、60 h时明显高于空白对照组和阴性对照组（F=235.88～910.86,q=28.04～52.28,P〈0.01）。结论 pshRNA-survivin-387转染能诱导肝癌细胞的凋亡,增强肝癌细胞对顺铂化疗的敏感性。     

间充质干细胞条件培养基对HPV18型阳性人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的观察人脐带间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)对HPV18型阳性人子宫颈癌HeLa细胞(HPV18 HeLa细胞)凋亡相关基因的调控作用,以及对HPV18 HeLa细胞凋亡的影响。方法制备MSC-CM,设置空白组、低剂量组和高剂量组,配制相应浓度分别为0%、20%和60%的MSC-CM处理HPV18 HeLa细胞,使用CCK-8法、克隆形成实验检测细胞活力和克隆形成能力;磷脂结合蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法凋亡染色和流式细胞术检测细胞凋亡的变化;实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因mRNA表达量。结果与空白组相比,在低剂量组或高剂量组的MSC-CM作用下,HPV18 HeLa细胞的生长活性和克隆形成能力均降低,细胞凋亡率升高(P均<0.05),且高剂量组作用效果均比低剂量组明显(P均<0.05)。与空白组相比,HPV18 HeLa细胞在低剂量或高剂量组MSC-CM的作用下,HPV18 HeLa细胞中p53、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-9、Bax的mRNA表达量升高,而B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的mRNA表达量降低(P均<0....     

中国红树科植物角果木中Dolabrane型二萜的抗肿瘤作用

目的探讨中国红树植物角果木中Dolabrane型二萜Tagalsins A的抗肿瘤作用及其初步作用机制。方法建立小鼠H22肝癌实体瘤及H22肝癌腹水瘤模型,随机分为Tagalsins A高、中、低剂量组（20、10、5 mg.kg-1）、生理盐水组（空白对照）、环磷酰胺组（CTX 10 mg.kg-1）,每组小鼠各10只。建模24 h后开始给药,Tagalsins A各剂量组给予Tagalsins A连续灌胃7 d,对照组灌胃给予同体积生理盐水,CTX组连续腹腔给予CTX7 d。末次给药24 h后处死动物,计算抑瘤率、生命延长率、脏器指数;流式细胞术测细胞凋亡率。结果 TagalsinsA各剂量组小鼠H22实体瘤生长较空白对照组明显减慢（F=8.90,q=3.31~6.52,P〈0.01）。Tagalsins A低、中、高剂量组的抑瘤率分别为24.49%、35.37%、48.30%,其中Tagalsins A中、高剂量组抑瘤作用与CTX组比较差异无显著性（q=2.85、1.01,P〉0.05）。Tagalsins A明显延长H22腹水瘤小鼠生存时间（F=17.06,q=5.45~11.26,P〈0.01）;降低小鼠的胸腺指数（F=21.82,P〈0.01）,而升高肝脏指数（F=121.84,P〈0.01）。Tagalsins A各组肿瘤细胞的凋亡率较空白对照组明显升高（F=127 7.68,q=51.11~82.02,P〈0.01）。结论 Dolabrane型二萜Tagalsins A对小鼠H22移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

组蛋白乙酰化修饰调控NF-κB驱动的PNPLA3基因表达的机制初探

目的 探讨禁食/再喂食后小鼠肝脏Patatin样磷脂酶域蛋白3（PNPLA3）基因启动子核因子-κB（NF-κB）结合区域组蛋白H3K9乙酰化（H3K9ac）水平以及相关去乙酰化酶（HDAC）和乙酰化转移酶（HAT）的变化特点。方法 根据体质量将18只C57BL/6小鼠随机分为3组各6只,分别为自由饮食组、禁食组（夜间饥饿24 h）和再喂食组（饥饿24 h后再自由摄食高蔗糖含量饲料12 h）,分别予自由饮食、禁食和禁食后再喂食干预,检测并比较各组肝脏PNPLA3、NF-κB、HDAC（SIRT1、SIRT6）和HAT（GCN5、Elp3）基因表达情况,用染色质免疫共沉淀-定量PCR检测H3K9ac富集水平,并分析H3K9ac与PNPLA3表达的相关性。结果 3组比较,C57BL/6小鼠肝脏PNPLA3、NF-κB基因表达在禁食时下调,再喂食后又上调（P均< 0.001）。H3K9ac水平变化与PNPLA3变化趋势一致（P均< 0.05）,相关分析提示两者具有相关性（r_s = 0.958, P < 0.001）;禁食组SIRT1和SIRT6表达水平较自由饮食组高,再喂食组两者水平均下降（P均< 0.05）,与H3K9ac变化趋势相反;GCN5、Elp3表达变化与SIRT1及SIRT6类似（P均< 0.05）。结论 SIRT1和SIRT6相关H3K9去乙酰化涉及饮食调节NF-κB驱动的PNPLA3的表达。     

腹腔镜良性卵巢囊肿剥除术对卵巢功能的影响

目的：探讨腹腔镜卵巢囊肿剥除术中使用单、双极电凝及缝合对卵巢功能的影响。方法：137例单侧卵巢良性囊肿患者,均行腹腔镜下卵巢囊肿剥除术,按不同的止血方法,将患者分为3组：单极电凝组40例、双极电凝组50例、镜下缝合组47例,分别于术前、术后3个月、术后6个月的月经第3天抽空腹血检测雌二醇（E2）、促卵泡激素（FSH）,并经阴道超声计数窦卵泡数。结果：3组病例术后3个月较术前均出现E2水平下降和FSH水平增高,窦卵泡数减少,其中单极电凝组和双极电凝组分别与术前比较有显著性差异（P〈0.05）。与镜下缝合组比较,单极电凝组和双极电凝组术后窦卵泡数以及E2、FSH均有显著差异（P〈0.05）。术后3个月双极电凝组的E2较单极电凝组高,有显著差异（P〈0.05）;术后6个月两组的E2较术后3个月增高,也有显著差异（P〈0.05）,但窦卵泡数术后6个月较术后3个月无显著差异。结论：腹腔镜下卵巢囊肿剥除创面采用电凝止血会引起对卵巢功能的损害,而使用镜下缝合止血可更好地保留其功能。     

经阴道彩色多普勒超声检查对卵巢储备功能下降患者卵巢基础状态的评价

目的采用经阴道彩色多普勒超声检查探讨卵巢基础状态与卵巢储备功能的关系,评价其对卵巢储备功能的预测价值。方法 74例不孕患者于自然月经周期第2～3天测定基础性激素水平,同时经阴道彩色多普勒超声检测卵巢最大平面平均直径(MOD)、窦卵泡数(AFC)、卵巢间质动脉峰值流速(PSV)、阻力指数(RI)、搏动指数(PI),并于同一周期行克罗米芬刺激实验(CCCT),应用人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导成熟卵泡排卵,指导同房或行宫腔内人工受精(IUI)。超声监测卵泡发育,同时计数注射hCG日优势卵泡数。结果依据基础性激素测定及CCCT结果将患者分为卵巢储备功能正常组和下降组。卵巢储备功能下降组AFC和PSV值均显著低于正常组(P<0.001),卵巢储备功能下降组MOD低于正常组,但二者差异无统计学意义(P>0.05);卵巢储备功能下降组注射hCG日所获优势卵泡数少,妊娠率低于正常组,二者差异有统计学意义(P=0.021)。卵巢间质动脉PSV与注射hCG日优势卵泡数呈正相关(r=0.432,P=0.014)。结论卵巢基础窦卵泡数和PSV值与卵巢储备功能密切相关,可作为临床预测卵巢储备功能的有效指标。     

腹腔镜下卵巢子宫内膜异位囊肿剥除术不同止血方法对卵巢功能的影响

【目的】探讨腹腔镜下卵巢囊肿剥离中不同止血方式对卵巢功能影响。【方法】卵巢子宫内膜囊肿患者66例,均行腹腔镜下囊肿剥除术,并将其分成两组：镜下缝合组36例、电凝组30例,观察两组术前、术后6个月性激素雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FS H ）、黄体生成激素（L H ）水平及窦状卵泡数、卵巢功能正常例数及卵巢储备功能下降例数。【结果】术前两组卵巢功能正常率和卵巢储备功能下降率比较差异无统计学意义（ P ＞0．05）;术后缝合组卵巢功能正常率83．33％（30/36）显著高于电凝组53．33％（16/30）（ P ＜0．05）,而卵巢储备功能下降率16．67％（6/36）显著低于电凝组46．67％（14/30）（ P＜0．05）。缝合组E2、窦状卵泡数分别为（198．4±24．90）pmol/L、（7．13±2．25）个显著高于电凝组（153．40±16．8）pmo/L、（5．8±0．9）个（ P＜0．05）,而FSH和FSH/LH分别为（10．56±4．56）U/L、2．35±1．26显著低于电凝组（13．72±2．81）U/L、（2．82±0．88）U/L （ P ＜0．05）。【结论】腹腔镜下卵巢保守性手术中,正确的镜下缝合止血与传统电凝术相比,对卵巢组织损伤更小,可更好地保留其功能。