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1.
目的 探讨E-钙黏蛋白基因(CDH1)启动子区甲基化状态及其在卵巢子宫内膜异位症中的作用。方法 选择2011年10月—2013年8月河北医科大学第四医院诊治的50例经手术确诊的卵巢子宫内膜异位症患者和50例由于宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ级行子宫切除或子宫探查的对照妇女为研究对象,采用甲基化特异性聚合酶链式反应检测卵巢子宫内膜异位症患者在位内膜(在位内膜组)、异位内膜(异位内膜组)和对照妇女子宫内膜组织(对照子宫内膜组)CDH1启动子区甲基化状态;采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和流式细胞术检测CDH1启动子区甲基化阳性组织(甲基化阳性组)和甲基化阴性组织(甲基化阴性组)CDH1 mRNA、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。结果 在位内膜组CDH1启动子区甲基化阳性率为26.0%(13/50)、异位内膜组CDH1启动子区甲基化阳性率为32.0%(16/50)、对照子宫内膜组为8.0%(4/50),在位内膜组和异位内膜组CDH1启动子区甲基化阳性率明显高于对照子宫内膜组(P=0.017、0.003)。甲基化阳性组CDH1 mRNA、E-cadherin表达水平〔(0.4±0.2)、(129.0±17.5)〕明显低于甲基化阴性组〔(0.6±0.1)、(158.0±51.0)〕(P=0.023、0.035)。结论 卵巢子宫内膜异位症患者的在位、异位内膜组织存在着CDH1启动子区异常甲基化,甲基化阳性、阴性组织中CDH1 mRNA和E-cadherin表达水平有明显差异。提示CDH1启动子区的异常甲基化可能与卵巢子宫内膜异位症的发生相关。 相似文献
2.
背景 许多证据表明与正常内膜相比,子宫内膜异位症(EMT)患者的在位内膜和异位内膜中存在许多差异甲基化基因,可能在疾病发生中发挥着重要作用。目的 探讨谷胱甘肽硫转移酶mu1(GSTM1)基因启动子区异常甲基化与EMT的关系。方法 选取2013年9月-2015年12月于河北医科大学第四医院妇科行腹腔镜手术治疗并经病理检查证实为卵巢EMT的患者65例,另选取同期在该院因宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ级行全子宫切除术的患者(对照者)53例,术中无菌采集卵巢EMT患者的在位内膜和异位内膜以及对照者的子宫内膜(对照内膜)。采用焦磷酸测序和实时定量荧光聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测内膜组织GSTM1基因启动子区片段一(包含-116、-111、-104、-98 CpG位点)、片段二(包含-40、-23、-16 CpG位点)平均甲基化水平和mRNA表达水平,并分析二者之间的相关性。结果 在位内膜和异位内膜片段一平均甲基化水平低于对照内膜(H=2.588,P=0.046;H=6.496,P<0.001),异位内膜片段一平均甲基化水平低于在位内膜(H=4.213,P<0.001)。异位内膜片段二平均甲基化水平低于在位内膜和对照内膜(H=7.693,P<0.001;H=8.257,P<0.001),在位内膜与对照内膜片段二平均甲基化水平比较,差异无统计学意义(H=0.682,P=0.504)。在位内膜和异位内膜mRNA表达水平高于对照内膜(H=6.994,P=0.011;H=3.414,P<0.001),异位内膜mRNA表达水平高于在位内膜(H=3.846,P<0.001)。GSTM1 mRNA表达水平与其启动子区片段一、片段二平均甲基化水平均呈负相关(rs=-0.61,P<0.001;rs=-0.52,P<0.001)。结论 卵巢EMT患者的在位内膜和异位内膜呈现GSTM1基因启动子区异常低甲基化和mRNA高表达,提示GSTM1启动子区异常甲基化可能在卵巢EMT的发生和发展中起重要作用。 相似文献
3.
目的研究膀胱癌组织中白细胞介素-12B基因(IL-12B)启动子区甲基化的变化及其临床意义.方法应用甲基化特异性聚合酶链反应、Western-blot检测膀胱癌及癌旁组织78例,比较IL-12B基因启动子区甲基化及其蛋白质与膀胱癌发生发展的关系.结果 (1)膀胱癌组织IL-12B启动子区甲基化产物明显多于癌旁组织,差异有统计学意义(χ2=14.8,P=0.001);(2)膀胱癌组织和癌旁组织IL-12B启动子区甲基化产物的PMR水平差异有统计学意义(t=3.42,P=0.001);(3)膀胱癌组织IL-12B蛋白的表达水平显著低于癌旁组织(t=2.832,P=0.012).结论 IL-12B基因启动子区甲基化及其编码蛋白质的失活与膀胱癌的发生相关. 相似文献
4.
翟宇强 《昆明医科大学学报》2013,34(5)
[摘要]目的 研究膀胱癌组织中白细胞介素-12B基因(IL-12B)启动子区甲基化的变化及其临床意义.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应、Western-blot检测膀胱癌及癌旁组织78例,比较IL-12B基因启动子区甲基化及其蛋白质与膀胱癌发生发展的关系.结果 (1)膀胱癌组织IL-12B 启动子区甲基化产物明显多于癌旁组织,差异有统计学意义(χ2=14.8,P=0.001);(2)膀胱癌组织和癌旁组织IL-12B 启动子区甲基化产物的PMR水平差异有统计学意义(t=3.42,P=0.001);(3)膀胱癌组织IL-12B蛋白的表达水平显著低于癌旁组织(t=2.832,P=0.012).结论 IL-12B基因启动子区甲基化及其编码蛋白质的失活与膀胱癌的发生相关. 相似文献
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同源异形盒A10基因启动子区甲基化及蛋白表达与子宫内膜异位症的关系 总被引:2,自引:2,他引:0
目的DNA甲基化在子宫内膜异位症发病机制研究中倍受到学者们关注。文中检测子宫内膜异位症(endometriosis,EM)患者在位和异位内膜组织中同源异形盒A10(homeobox-A10,HOXA10)基因启动子区CpG岛甲基化程度及HOXA10蛋白表达水平,探讨EM与HOXA10基因异常甲基化和蛋白表达的关系及其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和免疫组织化学法(SP法)检测36例EM患者中异位内膜组织(异位内膜组)、在位内膜组织(在位内膜组)及12例正常对照者子宫内膜组织(对照组)中HOXA10基因启动子区CpG岛甲基化状况和HOXA10蛋白表达情况。结果0)36例EM患者的异位、在位内膜组织中HOXA10基因启动子区CpG岛甲基化率分别为38.9%、25.0%;其甲基化均发生在临床Ⅲ、Ⅳ期;12例正常子宫内膜组织中HOXAIO基因均未发生甲基化;三组间比较差异有统计学意义(P〈0.05)。②EM患者在位、异位内膜HOXA10的表达下降,无明显的分泌中、晚期峰;异位内膜基质HOXA10的表达显著降低,低于对照组正常内膜表达,其差异有统计学意义(P〈0.05)。③异位内膜组织HOXA10的蛋白表达与HOXA10基因启动子甲基化呈负相关,相关系数rs=-0.368。结论EM患者异位内膜组织中存在HOXA10基因启动子区异常甲基化导致基因失活,在EM发生发展过程中起重要作用。 相似文献
6.
目的探讨结直肠癌HOXA11基因启动子异常甲基化及其与临床病理特征之间的关系。方法从89对结直肠癌组织和配对的正常肠黏膜组织中分别提取基因组DNA,采用甲基化特异PCR(MSP)检测HOXA11基因启动子区甲基化状态,比较结直肠癌及正常肠黏膜组织中HOXA11甲基化的发生率,并统计分析结直肠癌组织中甲基化水平与患者临床病理特征的关系。在体外实验中,采用甲基化转移酶抑制剂5-Aza-dC处理细胞,实时荧光定量PCR检测HOXA11mRNA表达水平的变化。结果结直肠癌组织中HOXA11基因启动子甲基化阳性率显著高于配对的正常肠黏膜组织(P<0.01)。HOXA11基因启动子异常甲基化与直肠癌淋巴结转移(P<0.01)及TNM分期(P<0.01)密切相关。结直肠癌细胞经5-Aza-dC处理后HOXA11mRNA表达水平显著增高(P<0.05)。结论在结直肠癌组织中,HOXA11基因启动子区异常甲基化抑制HOXA11基因的转录表达。HOXA11启动子区异常甲基化与结直肠癌患者的淋巴结转移及TNM分期密切相关。 相似文献
7.
目的 探讨O6-甲基鸟嘌呤- DNA甲基转移酶(O6 - methylguanine - DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子区甲基化状态与子宫颈癌的相关关系.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation - specific PCR,MSP)分析子宫颈癌组织中MGMT基因启动子区甲基化状态,结合定量PCR( RT - PCR)检测MGMT mRNA表达情况行综合分析.结果 宫颈癌组织中MGMT基因启动子甲基化率达71.15% (37/52),而非癌对照组织中均无甲基化.不同临床分期的宫颈癌组织MGMT甲基化率也各不相同(P<0.01),组织分化程度越低,MGMT甲基化率越高(P<0.05).37例甲基化的癌组织中有MGMTmRNA表达,不同临床分期和不同组织分化程度的MGMT mRNA表达量差异均有统计学显著性(P<0.01).结论 DNA修复因子MGMT甲基化影响其mRNA的表达,可能与子宫颈癌的发生存在联系. 相似文献
8.
背景 目前子宫内膜异位症(EMs)的病因和发病机制尚不清楚,治疗措施有限,严重影响女性的身心健康。目的 探讨核转录因子κB(NF-κB)p65和骨桥蛋白(OPN)在EMs组织中的表达及二者的相关性。方法 收集2013年1-12月于宁夏医科大学总医院妇产科因EMs行手术的患者35例(病例组),于术中或术后确诊,其中增生期17例,分泌期18例;收集同期行双侧输卵管结扎手术并经病理科诊断排除EMs的正常子宫内膜者30例作为对照(正常子宫内膜组),其中增生期15例,分泌期15例。分别采用免疫组化SP法、RT-PCR法检测正常子宫内膜组、EMs在位内膜组和EMs异位内膜组NF-κB p65、OPN及其mRNA的表达。结果 NF-κB p65、OPN主要表达于子宫内膜腺上皮细胞的胞质中,极少数表达于间质细胞中。EMs在位、异位内膜组NF-κB p65和OPN表达高于正常子宫内膜组,EMs异位内膜组高于EMs在位内膜组(P<0.05)。3组增生期及分泌期NF-κB p65的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05),EMs在位、异位内膜组分泌期OPN的表达均高于增生期(P<0.05);EMs在位内膜组和EMs异位内膜组中NF-κB 与OPN的表达均呈正相关(r在位=0.88,r异位=0.78,P<0.05)。NF-κB p65、OPN mRNA在EMs在位、异位内膜组中的表达高于正常子宫内膜组,EMs异位内膜组高于EMs在位内膜组(P<0.05)。结论 NF-κB p65、OPN及其mRNA在EMs患者在位、异位内膜组织的表达明显增强,并呈正相关,提示二者极有可能通过相互激活进而诱导EMs的发生、发展。 相似文献
9.
目的:检测食管癌组织中hMSH2 mRNA的表达和启动子区甲基化异常. 方法:食管癌标本及相应正常食管黏膜组织32例. 原位杂交法检测hMSH2 mRNA的表达,甲基化特异PCR(MSP)法检测错配修复基因hMSH2启动子区甲基化. 结果:食管癌组织中hMSH2 mRNA阳性表达率为46.9%,正常组织为84.4%(P<0.05). hMSH2 mRNA阳性表达率与食管癌患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、病理类型、组织学分级、淋巴结转移、浸润深度等均无关(P>0.05). 食管癌组织中hMSH2启动子区甲基化发生率为34.4%,正常食管黏膜组织未发现甲基化,2组甲基化阳性率相比较差异有统计学意义(P<0.01);高龄患者(≥70岁)癌组织中hMSH2启动子区甲基化发生率(85.7%)明显高于较低龄患者(<70岁)(20.0%)(P<0.05);病理组织学Ⅲ,Ⅳ级食管癌组织中hMSH2启动子区甲基化发生率(70.0%)高于Ⅰ,Ⅱ级(18.2%)(P<0.05). 食管癌组织中hMSH2 mRNA阳性组启动子区甲基化的发生率(13.3%)低于hMSH2 mRNA表达阴性组(53.0%)(P<0.05). 结论:hMSH2的表达缺失是食管癌发生的早期事件;食管癌组织中hMSH2基因启动子区甲基化与患者年龄和肿瘤病理类型可能有关;hMSH2基因的失活与其甲基化有一定关系. 相似文献
10.
目的:探讨组织因子( TF)和血管内皮生长因子( VEGF)在子宫内膜异位症( EMs)组织中的表达及意义。方法通过腹腔镜活检或开腹手术,取得60例卵巢子宫内膜异位病灶组织及在位内膜40例,另取同期子宫肌瘤手术患者的正常子宫内膜组织25例作为对照,应用免疫组织化学技术对组织中的TF和VEGF蛋白的表达情况进行检测。结果 TF在EMs中异位内膜的表达与在位内膜中的表达差异无统计学意义(P>0.05),异位内膜及在位内膜中的表达明显高于正常子宫内膜(P<0.05);VEGF在EMs中异位内膜的表达与在位内膜中的表达差异无统计学意义(P>0.05),异位内膜及在位内膜中的表达明显高于正常子宫内膜(P<0.05)。结论 TF和VEGF在EMs中诱导血管生成,促进EMs的发生发展。 相似文献
11.
目的检测子宫内膜异位症(EMS)在异位内膜、在位内膜及正常子宫内膜的PTEN启动子甲基化,探讨其与子宫内膜异位症发生发展的关系。方法收集共计45例子宫内膜异位症患者术后子宫内膜异位症在位、异位内膜标本作为病例组及35例正常子宫内膜标本作为对照组,应用巢式甲基化特异性PCR(nMSP)测定PTEN启动子的甲基化,分析PTEN启动子的甲基化与EMS的相关性。结果与对照组比较,病例组PTEN启动子甲基化水平明显提高,甲基化率分别为24.4%(11/45)和0(0/45),差别具有统计学意义(χ2=9.99,P0.05)。结论 PTEN基因甲基化与子宫内膜异位症的发生发展密切相关。 相似文献
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目的研究卵巢巧克力囊肿异位内膜腺上皮、间质细胞及其在位内膜P450芳香化酶蛋白和mRNA表达,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及其临床意义.方法采用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测45例巧囊壁、32在位内膜和35例正常内膜中P450芳香化酶(P450A)mRNA及蛋白的表达.结果巧囊壁异位内膜P450AmRNA表达量高于在位内膜(P<0.01);35例正常内膜中仅有2例表达;免疫组化检测巧囊壁P450A蛋白其表达特征与mRNA一致.结论子宫内膜异位症P450A的表达在其发病中起到重要作用. 相似文献
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目的 研究卵巢巧克力囊肿异位内膜腺上皮、间质细胞及卵巢内异症的在位内膜中P450芳香化酶蛋白和mRNA表达,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及其临床意义.方法 采用反转录聚合酶联反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测45例卵巢巧克力囊肿的囊壁(巧囊)、32例卵巢内异症的在位内膜和35例正常子宫内膜中P450芳香化酶(P450A)mRNA及蛋白的表达.结果 巧囊壁异位内膜P450A mRNA表达量高于在位内膜(P<0.01);35例正常子宫内膜中仅有2例表达;免疫组化检测巧囊壁P450A蛋白其表达特征与mRNA一致.结论 子宫内膜异位症异位灶中有P450A表达,这种雌激素的合成酶能在异位灶局部合成异常的雌激素;卵巢内异症的在位内膜有P450A表达,提示在位内膜本身局部有雌激素的合成,其保护机制劣于正常内膜.子宫内膜异位症中P450A的表达在其发病中起到重要作用. 相似文献
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目的探讨细胞周期蛋白(CyclinB1)及Cyclin-Dependent kinasel(Cdc2)在子宫内膜异位症发生发展中的作用及其与卵巢激素之间的相关关系。方法采用RT-PCR,Western印迹以及免疫组织化学的方法检测了子宫内膜异位症患者(异位症组)的异位内膜(29例)和在位子宫内膜(20例)以及正常生育期的其他良性疾病妇女的子宫内膜(对照组,30例)中CyclinB1及Cdc2的表达。结果CyclinB1在异位症组异位内膜上的表达量明显高于在位内膜及对照组(P〈0.05)。异位症组在位内膜上CyclinB1的表达量与对照组相比没有显著性差异(P〉0.05)。Cdc2在各组患者中的表达差异无统计学意义(P〉0.05)。结论CyclinB1高表达可能与子宫内膜异位症异位内膜的增生相关。 相似文献
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Yuan Jianhui Zhou Jianmeng JiNana Xu Xinyun Liu Jianjun Ke Yuebin Cheng Jinquan. Zhuang Zhixiong 《中国人民解放军军医大学学报》2011,26(5):243-253
The aim of this study is to investigate epigenetic mechanism of ABCG2 induced drug-resistance.It is not only expatiate for drug-resistance regulation mechanism in all-round,but also to provide scientific experimental basis for selecting target to reverse its drug-resistance.Apply methylation-specific PCR (MSP) to have tested methylation of ABCG2 promoter region -359 to -353 specific positions in breast cancer tissues and paired adjacent tissue of 22 cases,and test their methylation positions with MSP products for sequencing; and adopt fluorescent quantitation RT-PCR to test expression level DNMT1,DNMT3A,DNMT3B and ABCG2; to make analysis on relationship between them with statistical spearman correlation.Specific positions of ABCG2 gene promoter region of 18 cases among the 22 cases with breast cancer (18/22,82%) existed high methylation (P<0.05),MSP products sequencing proved methylation of the specific position,and mRNA expression level was relative higher in remarkable positive correlation (P<0.05).ABCG2,DNMT1,DNMT3A,DNMT3B mRNA expression levels in breast cancer tissues were obviously higher than adjacent tissues (P<0.01),and DNMT3B expression level was obviously higher than DNMT1 and DNMT3A (P<0.01)in negative correlation with ABCG2 gene expression (P-0.001).-359 to -353 positions of promoter regions of ABCG2 gene existed high methylation capable to push expression of this gene in beast cancer tissue.DNMT3B is involved in expression regulation in ABCG2 gene,and provides new scientific basis tor drug-resistance target as reverse ABCG2 induction. 相似文献
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目的 研究细胞骨架相关蛋白ezrin在子宫内膜异位症(endometriosis,EM)患者中的表达情况,探讨ezrin蛋白在EM发生、发展中的作用.方法 选择卵巢EM患者异位内膜标本60例作为异位内膜组,其在位内膜标本30例作为在位内膜组;正常子宫内膜20例作为正常内膜组,应用免疫组化EnvisionTM二步法检测ezrin蛋白在卵巢EM异位内膜、在位内膜和正常内膜的表达情况.结果 在位内膜组ezrin表达值高于正常内膜组,异位内膜组ezrin表达高于在位内膜组,在位内膜组及异位内膜重度组ezrin表达水平高于轻度组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 ezrin蛋白可能在EM的发病机制中起着重要作用,ezrin蛋白的表达水平和EM的临床分期密切相关,提示ezrin可能在EM的发生、发展中起重要作用. 相似文献
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目的:检测第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)在子宫内膜异位症(EMS)中的表达,探讨其在EMS发病机制中的作用. 方法: 收集EMS患者子宫内膜病灶37(卵巢巧克力囊肿20,子宫肌腺症17)例和正常子宫内膜33例,采用原位杂交技术检测PTEN mRNA在异位内膜组织中的定位和表达强度,并比较PTEN基因表达与EMS临床分型的关系. 结果: PTEN mRNA主要表达于腺体细胞的胞质中;与正常子宫内膜相比,PTEN基因在异位内膜组织中的表达显著降低(48.6% vs 93.9%, P=0.0002);PTEN mRNA的表达呈明显的周期性改变,在增殖期内膜呈低水平表达,分泌期表达增加,但这一差异仅在正常子宫内膜组织中有意义(P=0.0102);PTEN mRNA的表达水平随临床分期的增加而降低(P=0.0026);但在子宫肌腺症和卵巢巧克力囊肿组织中,PTEN基因表达水平无差异(55.0% vs 52.9%, P=0.4018). 结论: PTEN mRNA表达水平的降低可能是EMS的发病机制之一. 相似文献
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目的:探讨P53蛋白表达在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法:应用免疫组织化学SP法检测30例异位子宫内膜、25例在位子宫内膜和30例正常子宫内膜及20例卵巢癌组织标本中P53蛋白的表达情况。结果:P53在子宫内膜异位症患者中的阳性表达率为20.0%(6/30),高于其在正常子宫内膜及在位内膜中的表达(P<0.05);P53在卵巢癌组织中的阳性表达率为50%(10/20),显著高于异位内膜组织的表达(P<0.05)。结论:P53可在子宫内膜异位症的发生、发展中发挥着重要作用。 相似文献