碱性成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞粘附,增殖和分化的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）粘 、增殖和分化等这效应的影响。方法 利用体视学计数四唑盐（ＭＴＴ）比色法及碱性磷酸酶（ＡＬＰ）试剂盒分别测定不同浓度ｂＦＧＦ诱导一定时间后ＢＭＳＣ的粘附特性、增殖和分化情况的变化。结果 １０ｎｇ／ｍｌ ｂＦＧＦ明显促进ＢＭＳＣ的粘附,但是２００ｎｇ／ｍｌ ｂＦＧＦ反而不利于细胞粘附;在细胞增殖和分化测定中,１００ｎｇ／ｍｌ ｂ     

体外培养及成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞生长的 …

目的 研究体外培养及成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞生长的影响。方法 抽取兔骨髓基质细胞体外培养,倒置显微镜动态观察,从原代培养（Ｐ０）中观察到细胞集落的形态有明显差异,提示骨髓基质细胞是一个由多样细胞组成的混合体。在培养液中加入碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ,５ｎｇ／ｍｌ）。结果 第一代细胞（Ｐ１）的生长速度增至对照组的１．５倍。而未经ｂＦＧＦ处理的细胞活跃增殖能力只能保持４～５代,随后即发生     

bFGF对体外培养新生牛RPE细胞非特异性吞噬细胞的影响

目的 为探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对视网膜色素上皮（ＲＰＥ）细胞蚕噬功能的影响。方法 采用新生牛ＲＰＥ细胞培养，并行免疫组化鉴定。对培养的ＲＰＥ细胞于０ｈ、２４ｈ、４８ｈ３个时间点分别给予０ｎｇ／ｍｌ、１ｎｇ／ｍｌ、４ｎｇ／ｎｍ、１６ｎｇ／ｍｌ的ｂＦＧＦ后，加入鸡红细胞悬液，孵育１ｈ，经清洗固定后于光镜下观察、计数，以判断ＲＰＥ细胞吞噬功能。结果 应用ｂＦＧＦ后，ＰＲＥ细胞吞噬及吞噬指     

碱性成纤维细胞生长因子促进小型猪创面修复的剂量与效应 …

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）促进小型猪创面修复和对表皮分离细胞培养的量效关系。方法：利用小型猪创伤模型,分别按３个不同深度的ｂＦＧＦ组（５００Ｕ／ｍｌ,１０００Ｕ／ｍｌ、１５００Ｕ／ｍｌ）处理创面,并用胺嘧啶银（ＳＤ－Ａｇ）及生理盐水做对照,观察创面愈合情况,同时取相应部位的表皮细胞进行培养,ＭＴＴ法观察ｂＦＧＦ对猪表皮细胞体外生长的影响。结果：提示１０００Ｕ／ｍｌ及１５００Ｕ／ｍ     

碱性成纤维细胞生长因子促进小型猪创面修复的剂量与效应关系研究

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）促进小型猪创面修复和对表皮分离细胞培养的量效关系。方法：利用小型猪创伤模型，分别按３个不同浓度的ｂＦＧＦ组（５００Ｕ／ｍｌ、１０００Ｕ／ｍｌ、１５００Ｕ／ｍｌ）处理创面，并用磺胺嘧啶银（ＳＤ－Ａｇ）及生理盐水做对照，观察创面愈合情况；同时取相应部位的表皮细胞进行培养，ＭＴＴ法观察ｂＦＧＦ对猪表皮细胞体外生长的影响。结果：提示１０００Ｕ／ｍｌ及１５００Ｕ／ｍｌ浓度组促创伤修复作用比较明显，体外细胞培养１０～５０μｇ／Ｌ细胞增殖作用最明显。结论：ｂＦＧＦ对促进小型猪创面修复和对表皮分离细胞培养有一定的量效关系。     

小鼠颌下腺组织培养上清液对造血干细胞和骨髓细胞增殖影响的实验研究

本实验采用脾集落形成法和流式细胞术等技术,研究了小鼠颌下腺组织培养上清液（ＳＧＣＭ）对造血干细胞和骨髓细胞增殖的影响。结果表明：正常雄性和雌性ＳＧＣＭ对小鼠造血干细胞增殖和分化有明显促进作用：ＳＧＣＭ能能效促进小鼠骨髓细胞（ＢＭＣ）由相对静止期（Ｇ０／Ｇ１）进行增殖活跃期（Ｓ＋Ｇ２／Ｍ）,并能提高骨髓有核细胞数。研究提示,正常小鼠颌下腺可能通过分泌造血生长因子样物质促进小鼠造血干细胞增殖和全化并加     

一氧化氮及一氧化碳对碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌 …

目的;研究一氧化氮（ＮＯ）及一氧化碳（ＣＯ）对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）促平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ,ＶＳＭＣ）增殖作用的影响及其机制。方法：以＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定平滑肌细胞增殖程度,放射活性法测定ＶＳＭＣ内蛋白磷酸化程度,蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ,ＰＫＣ）及丝裂     

成纤维细胞生长因子基因表达及对大鼠自体移植静脉内膜增厚的影响

了解自体静脉移植后平滑肌细胞（ＳＭＣ）过度增殖造成内膜增厚的原因。方法以８０只大鼠建立自体静脉移植动物模型，分别于移植早期（２，６，２４小时），移植中期（１，２，４周），利用组织切片原位杂交及反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达的动态变化，以及与ＳＭＣ增殖移行及内膜增厚间关系。结果自体静脉移植后ｂＦＧＦ基因表达水平较移植前不断下降，术后１周达最低水平（Ｐ＜０．０５），２周后重新回升。结论ｂＦＧＦ由损伤及濒死的ＳＭＣ释放，其主要生物学作用是通过自分泌及旁分泌促进ＳＭＣ大量增殖，同时也可加速移植静脉内皮重新再生     

牛肾上腺皮质细胞成纤维细胞生长因子受体观测

目的：检查基础培养条件下牛肾上腺皮质束、网状带细胞（ＢＡＣ细胞）碱性成纤维细胞生长因子（ＢＦＧＦ）受体的分布情况。方法：ＢＡＣ细胞培养，＾１２５Ｉ－ｂＦＧＦ放射怀受体结构标记：γ－计数仪放射活性测定；Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析。结果：在该培养条件下，ＢＡＣ细胞表达的ｂＦＧＦ受体分为高、低两个亚型。它们的数目分别为４５００个／细胞和２８０００个／细胞，它们的平衡解离常数（ＫＤ）分别为２３．５和３８１．９     

MTT法分析PDGF对鼠成骨细胞生长作用的影响

目的：观察ＰＤＧＦ对鼠成骨细胞增殖能力的影响及其与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ联合应用对细胞的生长有否协同作用。方法：酶消化分段收集法分离培养出鼠成骨细胞，利用ＭＴＴ法检测活细胞产生甲月替结晶的含量多少，反映细胞的增殖能力和生长情况。结果：ＰＤＧＦ能促进成骨细胞的增殖生长，其有效浓度为１～１００ｎｇ／ｍｌ，以１００ｎｇ／ｍｌ作用最大；ＰＤＧＦ与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ联合应用可明显增强成骨细胞的增殖能力。结论：ＰＤＧＦ可以刺激成骨细胞的增殖，且与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ有协同作用。ＭＴＴ法是测定成骨细胞增殖能力较理想的方法     

不同浓度碱性成纤维细胞生长因子对兔骨髓基质细胞的影响

目的：观察骨髓基质细胞的培养及不同浓度碱性成纤维生长因子（bFGF）对其生长的影响。方法：采用全麻下抽取兔股骨骨髓，经体外培养的方法并在培养注保加入４种不同浓度的bFGF(0,60,120,240ng/ml)培养后经倒置显微镜观察；并用试剂盒测定细胞碱性磷酸酶的含量。结果：６０、１２０ng/ml的bFGF能明显促进骨髓基质细胞的生长（Ｐ＜0．01），其余两组无明显差异。而4组之间的细胞碱性磷酸酶含量在3天无明显差异，6天时加入bFGF组的细胞碱性磷酸酶含量明显下降。结论：bFGF对骨髓基质细胞的影响是复杂和多方面的；不同剂量浓度对骨髓基质细胞生长的影响亦不一样，并不呈正相关，合适的有效浓度为60－120ng/ml。     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的兔骨髓基质细胞生长特性的影响

目的：研究骨髓基质细胞（BMSC）在体外培养条件下分化为成骨细胞的能力，及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对其贴附、增殖、分化的影响。方法：将各组BMSC传代后加入bFGF，其浓度分别为0、5、10、50、100、200?ng/ml，用倒置相差显微镜、电镜、四唑盐比色法、碱性磷酸酶（ALP）染色、钙染色和电子探针等方法观察其形态、贴附、生长增殖活性、分化成熟和体外钙化的状况。结果：经10?ng/ml bFGF诱导后，BMSC贴附细胞数量明显增加。当100?ng/ml时，bFGF对BMSC的促增殖作用达到最大值。当加入bFGF时，ALP染色阳性率降低，当bFGF浓度为100?μg/L时阳性率最低（P<0.01）。传代细胞连续培养30?d后钙染色结果呈阳性，电子探针检测矿化区的Ca/P值与羟基磷灰石结晶中Ca/P值相符。电镜观察可见培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征，并能产生胶原纤维。结论：BMSC在体外培养条件下具有分化为成骨细胞的能力，bFGF能够促进细胞的贴壁和增殖，但对其分化成熟具有抑制作用。     

IGF-Ⅰ联合BMP-2促MC 3T3-E1和NIH 3T3细胞的增殖和分化及钙化效应

目的：探讨重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ（rhIGF—Ⅰ）和重组人骨形成蛋白-2（rhBMP-2）单独或联合应用对MC3T3-E1和NIH 3T3细胞增殖、分化和钙化的影响。方法：单独或联合应用不同浓度rhIGF—Ⅰ和rhBMP-2作用于小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1和小鼠成纤维细胞株NIH 3T3，采用四唑盐比色法（MTT）和流式细胞技术检测细胞增殖，碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测细胞分化，放射免疫法检测细胞分泌的骨钙素水平（OC），以及Von kossa钙化染色法观察细胞的钙化。结果：1～50ng／ml rhIGF—Ⅰ作用于MC 3T3-E1细胞或5～75ng／ml rhIGF—Ⅰ作用于NIH 3T3细胞后，均能显示明显的促细胞增殖作用（P〈0．01），使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少，以及使胞内ALP活性、钙化面积百分比增高（P〈0．05）。10～100ng／ml rhBMP-2也可促进MC 3T3-E1和NIH 3T3细胞的增殖作用（P〈0．01），使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少，并使2种细胞ALP活性、钙化面积百分比升高（P〈0．05）。各浓度rhIGF—Ⅰ或rhBMP-2对MC 3T3-E1及NIH 3T3细胞作用8h、24h和48h的MTT检测结果相似。rhIGF—Ⅰ和rhBMP-2联合作用后，对2种细胞的促增殖、增强ALP活性、促钙化的作用均较各自单独作用更为明显（P〈0．05）。单独或联合应用不同浓度rhIGF—Ⅰ和rhBMP-2对细胞分泌的OC水平均无显著性差异（P〉0．05）。结论：rhIGF—Ⅰ和rhBMP-2具有明显的促进细胞增殖、早期分化及钙化的协同作用，但对成骨末期细胞分化影响不大，而其活性主要与使用剂量有关。     

碱性成纤维细胞生长因子和地塞米松联合诱导骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和地塞米松联合对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和成骨分化的影响。方法:以第三代BMSCs为实验材料,分别给予10%FBS的DMEM培养基,含80μg/LbFGF的10%FBS的DMEM培养基,含bFGF80μg/L+地塞米松10-8mol/L+β-甘油磷酸钠10mmol/L+维生素C50mg/L的10%FBS的DMEM培养基处理,通过计数BMSCs细胞数评价其增殖能力,同时行碱性磷酸酶(ALP)活性检测及茜红素染色评价其成骨分化的能力。结果:与对照组相比较,bFGF可以显著提高骨髓间充质干细胞的增殖能力,bF-GF和地塞米松联合不仅促进了骨髓间质干细胞的增殖,而且促进碱性磷酸酶的表达和钙结节的形成。结论:bFGF和地塞米松联合促进了骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化。     

BMP/FGF对骨髓基质细胞生长作用的研究进展

骨形态发生蛋白(BMP)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)因能够促进骨髓基质细胞的生长和分化引起广泛关注,单一或组合因子以及不同剂量、不同浓度配比的BMP/FGF发挥促进细胞生长的作用可能不同,细胞因子在骨组织工程构建中具有重要的作用,有利于诱导成骨,形成新生血管,探讨其骨生物学效应成为骨组织工程的一个重要方向。     

大鼠骨髓基质干细胞的神经分化以及神经生长因子的表达

目的 探讨大鼠骨髓基质干细胞神经分化以及神经生长因子的表达.方法 体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cell,BMSC),传代至第6代,进行神经诱导分化.先以bFGF (10 ng/ml)预诱导24 h,然后以胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)10 ng/ml在胎肠培养基(fetal gut condition midium,FGCM)条件下诱导10 d.免疫荧光法检测神经元标志神经特异性烯醇化酶(NSE)和神经丝蛋白(NF)的表达.RT-PCR法检测神经营养因子GDNF和神经生长因子(nerve growth factor,NGF) mRNA的表达.结果 流式细胞检测BMSC高表达CD90(99.7%), 而CD45表达阴性.诱导10 d后,部分细胞在形态上表现出神经元样改变,免疫荧光染色神经元标志NSE和NF阳性,而胶质细胞标志GFAP阴性.RT-PCR检测显示,BMSC诱导前低表达神经营养因子NGF和GDNF mRNA,而诱导后表达水平显著增加.结论 GDNF不仅能在体外诱导BMSC分化为神经样细胞,而且能促进神经营养因子表达显著增加.     

胰岛素样细胞生长因子-1、碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子α对人表皮干细胞增殖的影响

目的 表皮干细胞是组织工程化皮肤的"种子细胞".文中研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、胰岛素样细胞生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)和转化生长因子α(transforming growth factor α,TGFα)对人表皮干细胞增殖的影响.方法 采用两步酶消化法和Ⅳ型胶原差速贴壁相结合的方法获得人原代表皮干细胞,将表皮干细胞分为A组(K-SFM)、B组(K-SFM+bFGF)、C组(K-SFM+IGF-1)及D组(K-SFM+TGFα)进行培养.比较不同组之间表皮干细胞的克隆形成率、生长增殖、生长曲线和细胞周期等指标.结果 B组、C组及D组培养的表皮干细胞在细胞增殖、细胞克隆率方面检测结果均明显高于A组(P<0.05);流式细胞仪检测B组、C组与A组及D组处于G0/G1细胞比例比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 IGF-1、bFGF及TGF-α均对表皮干细胞的增殖有促进作用,IGF-1及bFGF对表皮干细胞表型的维持有较好的作用.     

碱性成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞增殖与成骨活性的影响

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓基质细胞的增殖及成骨活性的影响。方法：传代骨髓基质细胞的培养中加入不同浓度的bFGF，行细胞增殖和蛋白含量测定以及碱性磷酸酶的活性检测与钙结节的形成观察。结果：bFGF浓度在0～10ng／ml，蛋白含量及细胞数量随浓度的增高而增多，10ng／ml达到最大，浓度为100ng／ml反有下降。各组ALP活性没有降低，Von Kossa染色均为阳性。结论：bFGF可促进骨髓基质细胞的增殖，并保持骨髓基质细胞成骨的特性。     

EGF,bFGF单独及联合应用对原代培养的兔角膜缘干细胞增殖的影响

目的探讨EGF,bFGF及二者共同作用对培养的兔角膜缘干细胞增殖的影响。方法用DMEM和F12(1:1)培养基,20%胎牛血清,加入不同浓度EGF,bFGF和二者的混合液,采用MTT法检测细胞的OD值。结果EGF的5~160ng/mL各浓度组增殖效应均明显大于对照组(P<0.05),10ng/mL组明显大于其它各浓度组(P<0.01),bFGF各浓度组从5~80ng/mL各组均明显大于对照组(P<0.025),20ng/mL各组明显大于与其它各组(P<0.025);EGF与bFGF混合液各浓度组从5~80ng/mL各组增殖效应均明显大于对照组及单独使用EGF或bFGF组(P<0.05),EGF10ng/mL+bFGF20ng/mL组促增殖效果最强(P<0.025)。结论EGF,bFGF对培养的兔角膜缘干细胞有促增殖作用,此作用均呈剂量依赖性,EGF和bFGF共同表现为明显的促增殖作用。     

神经生长因子对人牙周膜细胞增殖与分化作用的研究

目的 研究神经生长因子对体外培养的人牙周膜细胞增殖和分化作用的影响.方法 采用四唑盐比色法(MTT)和碱性磷酸酶(ALP)活性检测法,测定不同浓度(0.1 U/ml、1 U/ml、10 U/ml、100 U/ml)的神经生长因子对体外培养的第5-6代人牙周膜细胞增殖及碱性磷酸酶活性的作用.结果 与对照组(2?S的DMEM培养液)相比,1,10,100 U/ml的神经生长因子都可促进人牙周膜细胞的增殖,但10 U/ml作用最显著;100 U/ml的神经生长因子可显著促进碱性磷酸酶的活性(P＜0.01).结论 不同浓度的神经生长因子可显著促进人牙周膜细胞的增殖与分化.