辛伐他汀对心肌肥厚的防治作用及其与JAK激酶/信号转录活化因子通路关系的实验研究

目的 探讨辛伐他汀对心肌肥厚的防治作用及其与JAK激酶/信号转录活化因子(JAK/STAT)信号转导通路的关系.方法 采用心肌营养素-1(CT-1)诱导新生大鼠心肌细胞肥大模型和腹主动脉缩窄术建立心肌肥厚动物模型.通过改良Lowry法测定心肌细胞总蛋白含量.相差显微镜测定心肌细胞表面积.逆转录聚合酶链法检测血管紧张素原(AGT)mRNA及c-fos mRNA表达.尾动脉无创测量大鼠收缩压的变化.称量心脏重量/体重(HW/BW)、左心室重量/体重(LVW/BW)比值.Western blot方法 检测磷酸化-JAK激酶(p-JAK2)和磷酸化-信号转录活化因子(p-STAT3)蛋白表达.结果 (1)辛伐他汀能明显抑制CT-1诱导的心肌细胞总蛋白含量增加(9.20 μg/105cell降至6.66 μg/105cell)和心肌细胞表面积增加(1741.63 μm2降至826.76 μm2).(2)辛伐他汀、JAK激酶抑制剂AG490均可明显抑制CT-1诱导的心肌细胞p-JAK2和p-STAT3蛋白表达以及AGT mRNA和c-fos mRNA表达(P<0.01).(3)辛伐他汀可明显降低腹主动脉缩窄大鼠的收缩压[186.64 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)降至132.56 mm Hg]、HW/BW比值(3.87 mg/g降至3.29 mg/g)、LVW/BW比值(2.74 mg/g降至2.32 mg/g).(4)辛伐他汀可明显抑制腹主动脉缩窄大鼠心肌p-JAK2和p-STAT3蛋白表达(P<0.01).结论 辛伐他汀对CT-1诱导的大鼠心肌细胞肥大和腹主动脉缩窄所致心肌肥厚均具有明显的防治作用,其作用机制可能与其抑制JAK/STAT信号通路的激活,减少肥厚相关基因AGT mRNA、c-fos mRNA表达有关.     

替米沙坦对腹主动脉缩窄大鼠内质网应激相关的心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦对腹主动脉缩窄术后大鼠内质网应激相关的心肌细胞凋亡的影响.方法 30只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=10),腹主动脉缩窄组(n=10),腹主动脉缩窄+替米沙坦组(n=10).术后10周各组大鼠用导管法测量血液动力学指标并留取心肌标本测左心室质量指数,心肌细胞凋亡用TUNEL法检测,心肌内质网应激信号通路分子GRP78、CHOP用免疫印迹法和免疫组化法检测.结果 (1)腹主动脉缩窄组左心室质量指数(3.29±0.19)mg/g明显高于假手术组(2.17±0.22)ms/g(P<0.01),左心室舒张末压(9.71±0.52)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)亦明显高于假手术组(2.79±0.13)mm Hg,左心室收缩末压(105.61 ±6.66)mm Hg明显低于假手术组(135.02 ±5.95)mm Hg(P<0.01),而腹主动脉缩窄+替米沙坦组上述指标分别为(2.34 ±0.08)mg/g、(4.70±0.36)mm Hg、(127.62 ±4.99)mm Hg,明显优于腹主动脉缩窄组(P<0.01).(2)腹主动脉缩窄+替米沙坦组心肌细胞凋亡指数(13.42 ±0.74)%显著低于腹主动脉缩窄组(35.51 ±0.65)%(P<0.01).(3)腹主动脉缩窄组内质网应激信号分子GRP78、CHOP蛋白表达RGRP78/β-actin 0.436 ±0.007、RCHOP/β-actin 0.747±0.034显著高于假手术组RGRP78/β-actin 0.144±0.009、RCHOP/β0.316 ±0.007(P<0.01),而腹主动脉缩窄+替米沙坦组GRP78、CHOP(RGP78/β-actin 0.213±0.007、RCHOP/β0.451 ±0.019),明显低于腹主动脉缩窄组(P<0.01).结论 内质网应激参与了腹主动脉缩窄术后大鼠心肌细胞凋亡,替米沙坦对内质网应激相关的心肌细胞凋亡有保护作用.     

钙离子通道基因mRNA表达在心房颤动发生机制中的作用

目的:探讨钙离子通道基因mRNA表达在心房颤动(房颤)发生机制中的作用.方法:杂种犬15只,随机分为3组,分别为正常对照组、单纯房颤组和房颤加mibefradil组.房颤组置入埋藏式高频率心脏起搏器,起搏频率520次/min.正常对照组不置入起搏器.术后观测24周.采用RT-PCR扩增心房肌组织的L型钙通道α1亚单位、T型钙通道α1H亚单位、钠/钙交换体和Kv4 3基因的mRNA.结果:单纯房颤组与正常对照组相比较,L型钙钙通道α1亚单位的mRNA有轻微下调(P>0 05),T型钙通道α1H亚单位的mRNA明显上调(P<0 05),钠/钙交换体的mRNA下调13%(P>0 05),Kv4 3基因的mRNA明显下调(P<0 05).房颤加mibefradil组与单纯房颤组相比较,钠/钙交换体的mRNA上调10%(P>0 05),Kv4 3基因的mRNA上调(P<0 05).结论:持续性房颤6个月时T型钙通道α1H亚单位mRNA的表达显著增加而Kv4 3 mRNA的表达显著下调,可能是持续性房颤钙超载的主要原因.而L型钙通道α1亚单位和钠/钙交换体mRNA的表达无明显改变,提示它们可能在房颤的发生机制中不起重要作用.     

血脂康对腹主动脉缩窄高血压大鼠左心室肥大的影响

目的:本研究拟探讨血脂康对腹主动脉缩窄(AAC)高血压大鼠左心室肥大的影响。方法:构建腹主动脉缩窄的高血压大鼠模型,采用超声心动图、实时定量PCR和酶联免疫分析法(ELISA)观察血脂康对大鼠左心室肥大的影响。结果:血脂康显著降低AAC高血压大鼠心重/体重比(HW/BW)、左心室重指数(LVW/BW)、收缩期心室前壁厚度(AWTd)、舒张期心室前壁厚度(AWTs)和舒张期心室后壁厚度(PWTd);并可显著降低AAC高血压大鼠左心室中脑利尿肽(BNP)和β-心肌肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA水平以及炎症因子白介素6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白水平。结论:血脂康可显著改善腹主动脉缩窄高血压大鼠左心室肥大,其机制与促炎症因子IL-6、CRP和TNF-α的表达降低有关。     

心肌营养素1在压力超负荷致心肌肥大中的作用

目的研究心肌营养素1在腹主动脉缩窄所致大鼠压力负荷性心肌肥大模型中的作用,观察AG490对心肌肥大及心肌营养素1表达的影响。方法用腹主动脉缩窄的方法建立心肌肥大大鼠模型,检测左心室重量指数,应用逆转录聚合酶链反应检测心肌营养素1、β-肌球蛋白重链mRNA表达,放射免疫分析法测定血浆和心肌血管中血管紧张素Ⅱ水平。结果腹主动脉缩窄术后14天心肌肥大组左心室重量指数明显高于假手术组(P<0.01);AG490干预组左心室重量指数明显低于心肌肥大组(P<0.01),但仍高于假手术组(P<0.01)。心肌肥大组血浆和心肌血管紧张素Ⅱ增高,与假手术组比差异有统计学意义(P<0.01);AG490干预组血管紧张素Ⅱ水平低于心肌肥大组(P<0.05),但仍高于假手术组(P<0.01)。心肌肥大组心肌营养素1mRNA表达较假手术组增加(P<0.01);AG490干预组心肌营养素1表达较心肌肥大组无明显变化(P>0.05),但与假手术组相比表达明显增加(P<0.01)。心肌肥大组心肌β-肌球蛋白重链mRNA表达明显高于假手术组(P<0.01);AG490干预组β-肌球蛋白重链mRNA表达较心肌肥大组明显降低(P<0.01),与假手术组相比表达仍增加(P<0.01)。结论心肌营养素1参与腹主动脉缩窄所致大鼠压力负荷性心肌肥大的发病过程,AG490可抑制心肌营养素1的表达及心肌肥大。     

扩张型心肌病新型抗钙通道抗体的发现

目的:观察扩张型心肌病(DCM)患者血清中是否独立存在抗心肌细胞L型钙离子通道(Human Cav1.2)自身抗体(简称:抗钙通道抗体)。方法:以合成多肽片段作为抗原,用ELISA法检测DCM患者(DCM组)及正常人(正常对照组)(各60例)血清中的抗钙通道抗体和抗心肌细胞线粒体内膜ADP/ATP载体蛋白(ANT)抗体。用亲合层析法提纯DCM患者(DCM组)血清中的抗钙通道抗体,以制备的大鼠抗Human Cav1.2α1亚单位多克隆抗体作为阳性对照,用免疫印记技术,免疫荧光组织化学技术检测DCM患者血清中抗钙通道抗体。结果:ELISA检测60例DCM患者中29例抗钙通道抗体阳性(29/60,阳性率48.33%),明显高于正常对照组(4/60,6.67%,P<0.01)。抗钙通道抗体和抗ANT抗体检出结果无一致性(P>0.05)。免疫印记中亲合层析法提纯的DCM患者抗钙通道抗体可特异地识别240000的多肽(Human Cav1.2α1c亚单位),结果与阳性对照相符。抗钙通道抗体经抗原充分吸附后特异性识别被阻断。免疫荧光实验显示,抗钙通道抗体能特异性地结合在大鼠心室肌细胞膜上。结论:DCM患者血清中存在新型的抗钙通道抗体。     

辛伐他汀对舒张功能不全大鼠心房肌细胞L型钙通道电流及蛋白表达的影响

目的探讨辛伐他汀对舒张功能不全衰大鼠心房肌细胞L型钙通道电流和L型钙通道相关基因Cav1.2蛋白表达的影响。方法30只雄性SD大鼠,随机分组:对照组、模型组、辛伐他汀组。采用腹主动脉缩窄建立舒张功能不全心力衰竭模型,对照组只开腹和分离腹主动脉。辛伐他汀组大鼠术后灌胃给予辛伐他汀2mg/(kg·d);对照组和模型组大鼠灌胃给予同等量的生理盐水共4周。4周末颈动脉插管记录血流动力学变化,用急性酶解法获得单个大鼠心房肌细胞和标准全细胞膜片钳技术记录通道电流。凝胶电泳法记录心房肌细胞Cav1.2的蛋白表达。结果(1)与对照组比较,模型组大鼠血流动力学显示左心室收缩压和左心室舒张末期压升高,左心室松弛时间常数延长,平均左心室内压最大下降速率下降;辛伐他汀组左心室收缩压、左心室舒张末期压和左心室松弛时间常数明显低于模型组,平均左心室内压最大下降速率明显高于模型组;三组大鼠心率、平均左心室内压最大上升速率以及三组细胞膜电容无明显差异。(2)与对照组比较,模型组L型钙通道电流密度峰值明显少于对照组,激活、失活和复活动力学特征无显著差异;辛伐他汀组L型钙通道电流密度峰值明显大于模型组,失活减慢,激活和复活动力学特征差异均无显著性。(3)与对照组比较,模型组大鼠心房肌细胞Cav1.2蛋白表达水平明显下降;辛伐他汀组心房肌细胞Cav1.2蛋白表达水平明显大于模型组。结论辛伐他汀明显抑制舒张功能不全心力衰竭大鼠心房肌L型钙通道电流下调,此作用与增加心房肌Cav1.2蛋白表达水平有关。     

苯肾上腺素对腹主动脉缩窄诱导心肌间质纤维化的影响

目的观察苯肾上腺素对腹主动脉缩窄导致心肌纤维化的作用及可能机制。方法雄性昆明(KM)小鼠42只,体重24~30 g,其中28只采用腹主动脉缩窄术(AAC)建立压力超负荷诱导心肌反应性纤维化的动物模型,8周后将模型小鼠随机分为4组,AAC组、苯肾上腺素(PE)组(AAC+PE组)、哌唑嗪(Praz)组(AAC+Praz组)和普萘洛尔(Prop)组(AAC+Prop组),每组7只,其中AAC+PE组给予PE 0.65 mg/(kg·d)腹腔注射,AAC+Praz组予Praz 5 mg/(kg·d)灌胃,AAC+Prop组给予Prop 10 mg/(kg·d)灌胃,AAC组给等量生理盐水灌胃,连续4周;另设空白对照组及假手术组各7只,其中假手术组只分离腹主动脉而不结扎,二组均给予等量生理盐水持续灌胃。给药4周后处死动物,取左心室游离壁组织,HE染色观察组织细胞形态学变化,胶原容积分数(CVF)、羟脯氨酸(Hyp)含量测定及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白免疫组化染色观察心肌胶原,Western blot方法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、p-Smad2和p-Smad3蛋白表达。结果 ACC术后12周小鼠心脏均发生明显纤维化,与空白对照组相比,CVF、Hyp含量显著升高(P0.01),Ⅰ、Ⅲ型胶原表达增多(P0.01),α-SMA、TGF-β1、p-Smad2及p-Smad3蛋白表达增加(P0.01),假手术组CVF、Hyp含量以及α-SMA、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化不明显。与AAC组比较,AAC+PE组和AAC+Prop组左心室CVF、Hyp含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达均明显减少(P0.01),α-SMA、TGF-β1、p-Smad2和p-Smad3的蛋白表达水平降低(P0.05),而AAC+Praz组上述各指标无明显变化(P0.05);AAC+PE组与AAC+Prop组相比,上述指标均无统计学差异(P0.05)。结论苯肾上腺素可能通过TGF-β1/Smads信号通路改善压力超负荷介导的小鼠心肌间质纤维化,其作用与普萘洛尔相似。     

氯沙坦协同辛伐他汀对心力衰竭大鼠心室基质金属蛋白酶2、9及其组织抑制因子1、2基因表达的影响

目的 探讨心力衰竭(心衰)时心脏基质金属蛋白酶2(MMP-2)、9(MMP-9)及其组织抑制因子1(TIMP-1)、2(TIMP-2)基因表达及其与心肌纤维化的关系.方法 用降主动脉缩窄术建立心衰模型.SD大鼠随机分成6组.分别在氯沙坦5 mg/kg、辛伐他汀2 mg/kg以及两药合用(联合投药组)投药后1、3,5周动态测定左室舒张末期内径、左室收缩末期内径及左室后壁厚度、左室短轴缩短率.ELISA法检测B型利钠肽浓度.Masson染色观察心肌胶原情况.RT-PCR法检测心室MMP-2、MMP-9和TIMP-1、TIMP-2基因表达.结果 投药后5周各组胶原容积分数比较差异有统计学意义(P<0.01),投药各组较降主动脉缩窄(模型)组下降(P<0.05),尤其联合投药组下降更明显(P<0.01).MMP-2 mRNA和MMP-9 mBNA在投药各组与模型组差异无统计学意义(P>0.05);但TIMP-1 mRNA和TIMP-2 mRNA在投药各组明显低于模型组(P<0.01),联合投药组降低更明显(P<0.05).结论 心衰模型大鼠MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA、TIMP-2 mRNA表达升高可能是压力负荷大鼠心肌胶原含量增加的分子机制之一,氯沙坦、辛伐他汀以及联合投药均能下调TIMP-1 mRNA、TIMP-2 mRNA水平,缓解心肌重构,尤其联合投药组效果更明显.     

兔肥厚心肌慢反应延迟整流钾通道表达的变化

目的:慢反应延迟整流钾通道(IKs)是心肌细胞复极的重要组成部分,本实验观察左心室肥厚对心外膜下心肌(Epi)和心内膜下心肌(Endo)IKs的mRNA表达水平变化。方法:家兔16只随机分为假手术组和心肌肥厚组。心肌肥厚组通过部分结扎腹主动脉的方法造成兔压力负荷性心肌肥厚模型,假手术组只暴露腹主动脉而不行缩窄术。应用RT-PCR技术检测IKs通道基因KvLQT1(α亚单位)和minK(β亚单位)的mRNA表达。结果:假手术组EpiIKs通道α亚单位基因KvLQT1为Endo的2.5倍,EpiIKs通道β亚单位基因minK为Endo的3.3倍。与假手术组相比,心肌肥厚组Epi和EndoIKs通道α亚单位基因KvLQT1表达分别降低40%和25%,心肌肥厚组Epi和EndoIKs通道β亚单位基因minK表达分别降低50%和33%。结论:IKs通道基因KvLQT1和minK的mRNA表达存在跨室壁的差异。心肌肥厚可造成Epi和EndoIKs的mRNA表达不均一的下降。     

心肌肥厚的PTEN负性调控与卡托普利干预对其影响的实验研究

目的检测异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌肥厚大鼠PTEN mRNA、蛋白水平表达及卡托普利(captopril,Cap)对其表达的影响,从而探讨PTEN的负性调控在心肌肥厚中的作用。方法24只大鼠随机分为对照组、ISO组、Cap+ISO组。利用小剂量ISO持续背部皮下注射大鼠,建立心肌肥厚模型。在观察期末,分别测定各组大鼠体重、心脏湿重、左室湿重,计算出心脏重量/体重及左室重量/体重;电镜观察超微结构的变化,并测定左室收缩末压、左室舒张末压、左心室压力上升及下降最大速率等指标。RT-PCR测定心肌组织PTEN mRNA,Western blot测定其蛋白表达。结果(1)与对照组比较,ISO组、Cap+ISO组的左室重量/体重、心脏重量/体重、左室收缩末压、左室舒张末压均升高(P≤0.05),左室压力上升及下降最大速率(±dp/dtmax)均下降(P≤0.05)。(2)与ISO组相比,Cap+ISO组的左室重量/体重、心脏重量/体重、左室收缩末压、左室舒张末压均下降(P≤0.05,P≤0.01),左室压力上升及下降最大速率(±dp/dtmax)均升高(P≤0.05,P≤0.01)。(3)与对照组比较,ISO组、Cap+ISO组的PTEN mRNA、蛋白表达均增加。(4)与ISO组比较,Cap+ISO组的PTEN mRNA、蛋白表达增加。结论ISO诱导心肌肥厚PTENmRNA、蛋白表达升高,心肌肥厚过程中存在负性调控,PTEN是一种内源性抑制心肌肥厚的重要因子。卡托普利不仅能明显抑制心肌肥厚,改善血液动力学参数,而且还能上调心肌PTEN水平,这是其抑制心肌肥厚的又一机制。     

环孢素A对心房颤动犬心房L型钙离子通道蛋白αlc亚单位的影响

目的 研究环孢素A(CsA)作用下心房颤动(房颤)犬心房电生理特性及心房L型钙离子通道蛋白αlc亚单位(Lαle)表达变化.方法 实验犬分为CsA组、房颤组及假手术组(Sham组),快速起搏心房建立犬房颤模型,记录标测并对比各组起搏前后P波时程、心房有效不应期(AERP)的差异,应用Western blot免疫印迹技术比较各组问Lαlc表达的差异.结果 房颤组、CsA组较Sham组P波时程延长(P<0.05),AERP缩短P<0.05).CsA组较房颤组AERP延长(P<0.05).房颤组较Sham组Lαlc表达明显降低(P<0.01).CsA组较房颤组Lede升高(P<0.01),CsA组与Sham组之间差异无统计学意义.结论 CsA 应用逆转了房颤犬心房Lαlc表达变化并改善了心房电生理重构,可能会在房颤的治疗中发挥积极的意义.     

醛固酮诱导的心肌重构及非洛地平的干预作用

目的 研究非洛地平（felodipine,Fel）在醛固酮（aldosterone,Ald）诱导的心肌重构中的保护作用及其可能的机制。方法 SD大鼠32只随机分为4组（每组n=8）,即对照组、Ald组、Ald+Fel组和Ald+螺内酯（spironolactone,Spi）组。Ald组:以Ald 18 μg/d皮下注射,连续4周;对照组:注射等量生理盐水4周;Ald+Fel组:以Ald 18 μg/d皮下注射,同时给于Fel 5 mg/(kg·d)灌胃,连续4周;Ald+Spi组:以Ald 18 μg/d皮下注射, 同时给予Spi 20 mg/(kg·d)灌胃,连续4周。比较各组大鼠的左心室质量(LVW)及全心质量(HW)与体质量(BW)的比值,心肌组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量,心肌胶原面积（CA）,以及心肌细胞凋亡指数（AI）。结果 与Ald组相比, 对照组、Ald+Fel组和Ald+Spi组大鼠的LVW/BW,HW/BW,CA和AI均减少,对照组和Ald+Spi组大鼠MDA的含量较Ald组减少,SOD的含量较Ald组增加（P<0.01）;Ald+Fel组大鼠SOD和MDA的含量与Ald组相比无明显差异。结论 Fel能够改善Ald诱导的心肌肥大和心肌细胞凋亡,但不能改善Ald诱导的氧化应激水平的增加。     

辛伐他汀抑制RhoA蛋白表达、Rho GTPase活性表达逆转兔心室重构

目的:在兔前后负荷增加心力衰竭模型,观察辛伐他订对心肌肥厚、心功能的影响,探讨辛伐他订抑制心肌肥厚、改善心功能的机制。方法:24只新西兰白兔分为4组,一组假手术组,为健康对照。2、3、4组通过破坏主动脉瓣和缩窄腹主动脉,增加左心室前、后负荷,建立慢性心力衰竭模型;2组:心力衰竭对照组;3组:心力衰竭早干预组,术后每天给与辛伐他汀5 mg/kg灌胃,观察8周;4组:心力衰竭晚干预组:手术4周后每天给与辛伐他汀5 mg/kg灌胃,观察4周。各组术后及观察结束时行超声心动图检查;Western blot分析心肌细白膜RhoA蛋白表达,[γ-32P]GTP结合分析检测Rho GTPase活性。结果:早干预组及晚干预组室间隔厚度(IVST)、左心室舒张期内径(LVIDd)、左心室后壁厚度(LVPwd)、左心室收缩期内径(LVIDs)、心脏质量(HW)、左心室质量(LVW)、心脏/体质量比(HW/BW radio)、显著低于心力衰竭对照组,射血分数(EF)、左室长轴缩短率(FS)显著高于心衰对照组。早干预组左心室/体质量比(LVW/BW radio)显著低于心力衰竭对照组。心力衰竭组心肌细胞膜RhoA蛋白表达、Rho GTPase活性明显高于健康对照组,辛伐他汀早干预组及晚干预组心肌细胞膜RhoA蛋白表达及Rho GTPase活性显著低于心力衰竭对照组。结论:辛伐他订通过抑制RhoA蛋白由胞浆转至新胞膜、抑制Rho GTPase活性而抑制心肌肥厚,改善心功能。     

阿替洛尔对小鼠心肌肥厚干预作用的研究

目的:观察β1受体阻滞剂阿替洛尔(atenolol,ATE)对主动脉弓缩窄术(aortic arches constriction,AAC)诱导的C57BL小鼠心肌肥厚模型的治疗作用。方法:通过AAC建立心肌肥厚小鼠模型,将24只雄性C57BL小鼠随机分为正常对照组、假手术(Sham)组、AAC组和AAT+ATE组,每组6只小鼠(n=6)。给予ATE 4周后,进行心脏超声检查,并测量心脏质量/体质量(HW/BW)、左心室质量/体质量(LVW/BW)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVEDS)、左室射血分数[LVEF(%)]和短轴缩短率[FS(%)]。应用PCR检测心肌组织中心房钠尿肽(ANP)、脑尿钠肽(BNP)和肌球蛋白重链(α-MHC)基因表达的水平,并行病理学检查。结果:与AAC组比较,正常对照组、Sham组和AAC+ATE组的LVEDD分别降低24.9%、17.7%和18.2%,LVEDS分别降低32.9%、34.1%和26.3%;LVEF(%)分别提高65.6%、75.8%和49.5%,FS(%)分别提高79.7%、100.0%和62.6%(均P<0.05);AAC+ATE组与AAC组相比,LVM/BW和心肌细胞平均横截面积均明显降低(P<0.01);而与正常对照组相比,细胞平均面积明显增大(P<0.05)。AAC+ATE组中ANP、BNP和α-MHC的表达水平显著低于AAC组(P<0.05)。结论:通过阻断β1受体ATE,可以对压力超负荷等原因诱导的心肌肥厚发挥治疗作用。     

胆固醇酯转运蛋白在家兔心脏肥大中表达的实验研究

目的 复制异丙肾上腺素致家兔心脏肥大模型,考察胆固醇酯转运蛋白（CETP）的表达变化。 方法 将雄性新西兰兔随机分为正常组和模型组。模型组采用腹腔注射异丙肾上腺素15 mg/(kg·d)（分早晚2次进行）建立家兔心脏肥大模型,正常组腹腔注射等体积的生理盐水,连续14 d后,取血、心脏和肺脏,分离左、右心室,考察脏器指数;HE染色观察心肌组织形态学改变;RT-PCR法检测心脏肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC mRNA表达;检测血清TG、TC、LDL-C及HDL-C的含量;检测左心室CETP的mRNA水平、蛋白表达及含量。 结果 与正常组比较,模型组家兔心脏质量指数（HW/BW）和左心室质量指数（LVW/BW）显著增加（P<0.05）,右心室质量指数（RVW/BW）和肺脏质量指数（LW/BW）有增加的趋势,左心室心肌细胞体积明显增大,间质增宽,左心室ANP、β-MHC的mRNA表达显著上调（P<0.05）。与正常组比较,模型组家兔血清TG含量显著升高（P<0.05）,TC、LDL-C水平呈升高趋势,HDL-C水平呈下降趋势,模型组家兔左心室组织中CETP mRNA水平和蛋白表达均显著上调（P<0.05）,CETP含量显著增加（P<0.05）。 结论 在异丙肾上腺素诱导的家兔心脏肥大模型中,CETP表达上调,但其是否与心脏肥大有关还有待进一步深入研究。本研究结果为后续研究CETP与心脏肥大的关系提供了理想动物模型。     

瑞舒伐他汀干预野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的实验研究

目的 探讨他汀类药物改善内皮细胞功能、抗增殖等降脂外作用在防治肺动脉高压中的作用及可能机制.方法 雄性SD大鼠,体重(255.7±12.5)g,皮下注射野百合碱诱导大鼠形成肺动脉高压,肺动脉高压形成前后分别接受瑞舒伐他汀预防和治疗.预防实验:32只SD大鼠随机分为4组,分别为瑞舒伐他汀低剂量(2 mg·kg-1·d-1)预防组(n=8)、瑞舒伐他汀高剂量(10 mg·kg-1·d-1)预防组(n=8)、肺动脉高压4周组(n=8)和正常对照4周组(n=8),野百合碱注射当日起预防组每日予瑞舒伐他汀灌胃至第4周末,正常对照组、肺动脉高压4周组仅予生理盐水灌胃.治疗实验:52只SD大鼠随机分为4组,分别为瑞舒伐他汀低剂量(2 mg·kg-1·d-1)治疗组(n=12)、瑞舒伐他汀高剂量(10 mg·kg-1·d-1)治疗组(n=12)、肺动脉高压8周组(n=20)和正常对照8周组(n=8),野百合碱注射4周后治疗组每日予瑞舒伐他汀灌胃至第8周末,正常对照组、肺动脉高压8周组仅予生理盐水灌胃.比较各组生存率、平均肺动脉压(mPAP)、肺小动脉管壁厚度、右心室肥厚程度,比较肺小动脉增殖细胞核抗原(PCNA)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达水平,比较肺组织Rho激酶1(ROCK-1)、eNOS mRNA表达水平.结果 预防实验大鼠均存活,肺动脉高压形成之后瑞舒伐他汀治疗能改善生存率(瑞舒伐他汀低剂量治疗组、瑞舒伐他汀高剂量治疗组与肺动脉高压8周组比较为58%、75%比30%,P均＜0.05);肺动脉高压形成之前和之后瑞舒伐他汀预防和治疗均能降低mPAP[预防实验:瑞舒伐他汀低剂量预防组、瑞舒伐他汀高剂量预防组与肺动脉高压4周组比较为(27.53±3.43)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)、(25.72±1.76)mm Hg比(36.05±2.45)mm Hg,P均＜0.01;治疗实验:瑞舒伐他汀低剂量治疗组、瑞舒伐他汀高剂量治疗组与肺动脉高压8周组比较为(30.39±3.17)mm Hg、(27.59±1.99)mmHg比(40.68±1.39)mm Hg,P均＜0.01],减轻肺小动脉管壁增厚、右心室肥厚程度(P均＜0.01),下调肺小动脉平滑肌细胞PCNA表达(P均＜0.01),上调内皮细胞eNOS表达(P均＜0.05),抑制ROCK-1基因表达(P均＜0.05),有一定的剂量依赖性(P均＜0.05).结论 瑞舒伐他汀防治肺动脉高压可能是通过抑制ROCK-1基因表达,抑制肺动脉平滑肌增殖和恢复内皮细胞功能等机制来实现的.

Abstract：

Objective To investigate the effects of rosuvastatin on monocrotaline (MCT)-induced pulmonary artery hypertension in rats. Methods Pulmonary arterial hypertension was induced by a single subcutaneous injection of monocrotaline (50 mg/kg) in rats. In the prevention protocol, 32 male SpragueDawley rats were randomly divided into four groups ( n = 8 each): low-dose rosuvastatin prevention group (2 mg · kg-1 · d-1 ), high-dose rosuvastatin prevention group ( 10 mg· kg-1 · d-1 ), pulmonary arterial hypertension group, normal control group. Beginning on the MCT injection day, rats were treated with rosuvastatin by daily gavage for 4 weeks. Normal control group and pulmonary arterial hypertension group received vehicle by garage. In the treatment protocol, 52 male Sprague-Dawley rats were randomly dividedinto four groups (n = 13 each): low-dose rosuvastatin treatment group (2 mg · kg-1 · d-1), high-dose rosuvastatin treatment group( 10 mg · kg-1 · d-1), pulmonary arterial hypertension group, normal control group. Four weeks after MCT injection, rats were treated with rnsuvastatin by daily gavage for 4 weeks.Normal control group and pulmonary arterial hypertension group received vehicle by gavage. At the end of study, survival rates, mean pulmonary arterial pressure (mPAP), wall thickness of small pulmonary artery and right ventricular hypertrophy among groups were compared. The expression levels of proliferating cell nuclear antigen (P CNA) and endothelial nitricoxide synthase (eNOS) protein in small pulmonary artery,the expression levels of Rho kinase 1 ( ROCK-1 ) and eNOS mRNA in lung tissue were also detected. Results All rats in the prevention protocol survived. Rosuvastatin treatment improved survival in the treatment protocol (58%, 75% vs. 30%, P ＜0. 05 ). Rosuvastatin therapy in both preventment or treatment protocols significantly lowered mPAP [prevention protocol: ( 27.53 ± 3.43 ), ( 25.72 ± 1.76 ) vs. ( 36. 05 ± 2. 45 )mm Hg(1 mm Hg =0. 133 kPa), P ＜0.01; treatment protocol: (30. 39 ±3. 17), (27.59 ±1.99) vs.(40. 68 ± 1.39) mm Hg, P ＜0. 01], reduced thickening of small pulmonary artery wall (P ＜0. 01 ) and right ventricular hypertrophy ( P ＜ 0. 01 ). Rosuvastatin also inhibited PCNA expression of SMC ( P ＜0. 01 ), restored eNOS expression of EC ( P ＜ 0. 05) and inhibited ROCK-1 mRNA expressions in lung tissue (P ＜ 0. 05 ). Conclusions Rosuvastatin therapy reduced mPAP in monocrotaline-induced pulmonary arterial hypertension rat model and this effect is linked with inhibition of ROCK-I expression, inhibition of smooth muscle cell proliferation and restoration of endothelial cell functions.     

肾素-血管紧张素系统和过氧化物酶体增殖物激活受体与酒精性心肌病关系的实验研究

目的 酒精性心肌病形成过程中发生肾素-血管紧张素系统(RAS)激活、能量代谢紊乱和心脏重构,本研究探讨RAS和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和PPARγ在酒精性心肌病发病机制中的作用.方法 实验动物分为3组,即酒精组、酒精+厄贝沙坦组、对照组.采用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹方法检测心肌RAS系统相关指标mRNA、PPARα和PPARγ蛋白表达,放射免疫法测定RAS系统活性,光镜、电镜和超声法检测心脏结构和功能.结果 (1)与对照组比较,酒精组心肌血管紧张素(Ang)Ⅰ、Ang Ⅱ和肾素浓度在酒精性心肌病形成过程中(0到6个月)渐次升高(P<0.05).(2)6个月时,酒精组心肌组织肾素、血管紧张素原、血管紧张素转化酶和血管紧张素Ⅱ1型受体表达高于对照组(P<0.05).(3)2、4和6个月时,酒精组和酒精+厄贝沙坦组心肌组织PPARα蛋白表达渐次减少(酒精组PPARα蛋白表达量分别为50.30%、34.3%和27.1%,酒精+厄贝沙坦组分别为86.4%、75.4%和59.4%),均少于对照组(P分别<0.01,0.05),且酒精组蛋白表达量低于酒精+厄贝沙坦组(P<0.05).(4)6个月时,酒精组、酒精+厄贝沙坦组PPARγ蛋白表达低于对照组(P分别<0.01,0.05),且酒精组表达量低于酒精+厄贝沙坦组(P<0.05).结论 RAS系统激活、PPARα和PPARγ蛋白表达异常与酒精性心肌病进展相关,RAS表达和PPARα及PPARγ蛋白改变可能存在紧密联系.     

血管紧张素-(1-7)对腹主动脉缩窄大鼠的抗心肌肥厚效应

目的　探讨血管紧张素 (1 7)能否预防和减轻腹主动脉缩窄所诱导的大鼠心肌肥厚。方法　 45只大鼠随机分为假手术组、腹主动脉缩窄组、腹主动脉缩窄 +血管紧张素 (1 7)治疗组 ,每组 15只。在腹主动脉缩窄术后 1d开始 ,腹主动脉缩窄血管紧张素 (1 7)治疗组大鼠经置入式微量泵持续颈静脉给予血管紧张素 (1 7) ,给药剂量 2 5μg·kg- 1 ·h- 1 ,假手术组及腹主动脉缩窄组经微量泵只给予同量的生理盐水 ,4周后检测颈动脉血压、心率、血浆和心肌血管紧张素Ⅱ浓度、左心室重量指数和心肌胶原容积分数。结果　腹主动脉缩窄可导致颈动脉血压升高、心率加快、心肌血管紧张素Ⅱ浓度升高、左心室重量指数和心肌胶原容积分数增加 ;血管紧张素 (1 7)不改变腹主动脉缩窄所诱导增高的血压、心率和心肌血管紧张素Ⅱ浓度 ,但能明显减轻腹主动脉缩窄所诱导增高的左心室重量指数和心肌胶原容积分数。结论　外源性血管紧张素 (1 7)能减轻腹主动脉缩窄所诱导的大鼠心肌肥厚。其机制不是通过改变血流动力学或心肌血管紧张素Ⅱ浓度所致 ,可能与它抑制血管紧张素Ⅱ的细胞内信号转导有关。