姜黄素对人肺成纤维细胞凋亡及细胞周期的影响

目的研究姜黄素对人肺成纤维细胞(human lung fibroblasts,HLFs)体外生长、细胞周期及凋亡的影响。方法应用CCK-8、Annexin-V/PI、PI流式细胞分析术、免疫印迹法,检测姜黄素对细胞的增殖、凋亡、细胞周期和Bax蛋白表达的影响。结果姜黄素对HLFs的增殖有抑制作用,可促进HLFs的早期凋亡,对细胞周期可产生G2/M期阻滞,增加HLFs的Bax蛋白的表达。结论姜黄素可抑制HLFs的增殖并能诱导其凋亡,其机制可能与细胞的G2/M期阻滞及凋亡相关蛋白的表达增强有关。     

番茄红素对前列腺癌细胞PC-3增殖和细胞周期的影响

目的研究番茄红素对体外培养的雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3的抑制作用及其可能的作用机制。方法采用MTT法和H3-TdR掺入法观察番茄红素对癌细胞增殖的影响,流式细胞仪观察同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期及凋亡的变化,RT-PCR检测cyclin D1、bcl-2、bax的mRNA的表达的变化。结果番茄红素抑制PC-3细胞的增殖和DNA合成、诱导其凋亡、改变细胞周期分布(使G0/G1期细胞增多、而S期和G2/M期细胞减少)。RT-PCR结果显示,cyclin D1和bcl-2的mRNA表达水平下调,而bax的mRNA表达水平上调。上述作用呈剂量效应关系。结论番茄红素可诱导PC-3细胞凋亡、改变细胞周期分布、影响cyclin D1、bcl-2、bax的mRNA的表达,从而抑制肿瘤细胞增殖。     

三氧化二砷诱导人横纹肌肉瘤RD细胞株凋亡的实验研究

[目的]研究三氧化二砷(As2O3)体外抑制人胚胎型横纹肌肉瘤细胞株RD(RD细胞株)增殖及诱导凋亡的作用. [方法]以不同浓度的As2O3处理RD细胞株,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞的DNA含量及凋亡率. [结果]4～8 μmol/L hs2O3能以时间剂量依赖的方式抑制RD细胞株的增殖,并诱导其凋亡,在流式细胞仪DNA线条图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,细胞周期阻滞于G0/G1期,S期和G2/M期细胞减少;低浓度As2O3(＜2μmol/L)则有轻微促增殖作用,细胞周期向S期和G2/M期集中,G0/G1期细胞减少. [结论]As2O3浓度≥4μmol/L时,可明显抑制RD细胞株的生长并促进细胞凋亡,其临床应用还需进一步研究.     

Tenovin-6对AML1/ETO(+)急性髓系白血病细胞的增殖抑制和促凋亡作用

目的观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)Tenovin-6对人AML1/ETO(+)急性髓系白血病(AML)细胞的增殖、细胞凋亡及周期的影响。方法用CCK-8法及克隆形成试验检测Tenovin-6对AML1/ETO(+)AML细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测不同浓度Tenovin-6作用于细胞后细胞凋亡、细胞周期的变化;并与AML1/ETO(-)AML细胞系进行比较。结果 Tenovin-6对AML1/ETO(+)AML细胞有增殖抑制作用,其抑制作用呈现为时间和浓度依赖性,并使细胞克隆形成能力下降;Tenovin-6可以促进AML1/ETO(+)AML细胞凋亡,并诱导细胞周期阻滞于G1期,表现为G1期细胞比例升高,而G2/M及S期细胞比例下降,且与AML1/ETO(-)AML细胞系相比较具有更高的敏感性。结论 Tenovin-6能抑制AML1/ETO(+)AML细胞增殖,诱导细胞凋亡,使周期阻滞于G1期,并较AML1/ETO(-)AML细胞系具有更高的敏感性。     

苦参碱诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的实验研究

目的 研究苦参碱对人喉癌细胞Hep-2的生长抑制作用及凋亡机制.结果 四甲基噻唑蓝(MTT)法测定苦参碱对细胞的抑制作用,荧光显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪技术(FCM)观察细胞周期及凋亡.结果 不同浓度苦参碱对Hep-2细胞有明显抑制作用,且呈时间依赖性及剂量依赖性;FCM检测结果 显示:S期细胞比例及凋亡率增高,G2/M期细胞比例下降,且呈剂量依赖性;形态学发现Hep-2细胞染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体形成;DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型的梯形条带.结论 苦参碱可能是通过将人喉癌细胞周期阻滞在S期,诱导喉癌细胞凋亡,抑制其增殖,发挥其抗癌功能.     

大豆苷原对体外培养人胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:了解二羟异黄酮对胃癌细胞有无促增殖与诱导凋亡作用。方法:以不同浓度的二羟异黄酮处理人胃癌细胞系MGC-803细胞。然后分别用MTT法测定细胞增殖情况、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳测定细胞周期和细胞凋亡等。结果:MTT 结果显示:二羟异黄酮对胃癌细胞具有促进和抑制增殖的双相作用-在低浓度(0.1-1 μmol/L)时促进细胞生长,在较高浓度(10-100 μmol/L)时对细胞生长则有抑制作用。流式细胞术结果显示:癌细胞群阻滞在G1期,没有明显凋亡峰的出现;凝胶电泳也末检测到明显的DNA阶梯状条带。结论:二羟异黄酮对体外培养的胃癌细胞的生长有双相作用,较高浓度可抑制胃癌细胞的生长并使细胞阻滞在G1期,而无诱导细胞凋亡的作用。     

姜黄素对人宫颈癌SiHa细胞株增殖、凋亡和COX-2表达的影响

目的:体外研究中药姜黄素(Cur)对子宫颈癌SiHa细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用及与环氧合酶(COX-2)表达的关系。方法:以不同浓度的姜黄素(10～30μmol/L),分12～72 h四个时间点处理SiHa细胞,光镜观察细胞形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;用DNA梯状电泳(DNA ladder)检测凋亡的发生;Western blot检测COX-2蛋白的表达;用放射免疫法检测细胞PGE2释放水平。结果:姜黄素可抑制SiHa细胞增殖,作用呈明显的时效和量效关系,差异有统计学意义(P<0.01);姜黄素可诱导SiHa细胞凋亡,DNA ladder呈梯状条带;姜黄素可明显抑制COX-2的表达,差异有统计学意义(P<0.01),并呈浓度依赖性;姜黄素明显抑制SiHa细胞PGE2释放水平,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:姜黄素体外对SiHa细胞具有增殖抑制作用和促进凋亡作用,其机制可能与抑制COX-2蛋白表达、降低PGE2释放水平有关。     

姜黄素对宫颈癌细胞系体外增殖的影响及机制研究

目的 探讨姜黄素对宫颈癌细胞系SiHa细胞体外增殖的影响及其对细胞周期的作用.方法 10～60μmol/L姜黄素分别处理SiHa细胞后,苔盼蓝染色和四甲基偶氮唑蓝法检测癌细胞的生长活性,流式细胞仪分析细胞周期各时相的变化.结果 不同浓度的姜黄素对宫颈癌细胞系SiHa细胞的增殖均有抑制作用,并呈剂量依赖性.药物处理后的细胞G1期的比例增加,S期减少,G2/M期细胞比例相对增多.与对照组比较,不同浓度姜黄素(10、20、40、60μmol/L)处理后,G2/M期比例分别为8.7%±2.1%、10.4%±1.3%、10.9%±2.2%、11.8%±1.4%.结论 姜黄素能抑制宫颈癌细胞的体外增殖,其机制可能与细胞周期阻滞有关.     

对硫磷对PEO4卵巢癌细胞凋亡的影响

目的:探讨有机磷农药对硫磷对PEO4卵巢癌细胞凋亡的影响。方法:应用耗尽细胞内雌激素的常规传代培养的PEO4细胞,采用流式细胞仪观察细胞周期分布及其凋亡情况。结果:雌激素耗尽可诱导PEO4细胞发生凋亡。1×10-6mol/L对硫磷处理细胞72小时显著抑制细胞的凋亡作用并可促进细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期。结论:有机磷农药污染可能与近年来卵巢癌发病率升高有关。     

漆姑草水提物对K562细胞凋亡及细胞周期影响

目的 探讨漆姑草水提物(HSJ)对人白血病细胞株K562细胞凋亡及细胞周期影响。方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HSJ对K562细胞的增殖抑制作用;台盼蓝拒染法观察HSJ对细胞生长曲线影响;流式细胞仪检测HSJ对K562细胞凋亡影响;DNA倍体分析法检测HSJ对K562细胞周期时相影响。结果 HSJ对K562细胞增殖抑制率随剂量增加而增加,作用48 h半数抑制浓度(IC₅₀)为1.35 mg/mL; 1.0、2.0、4.0 mg/mL HSJ处理后,K562细胞凋亡率分别为(8.39±0.81)%、(8.88±1.12)%、(13.42±2.04)%,均高于对照组的(4.60±1.09)%(P<0.05);HSJ能够引起细胞周期进程的改变,与对照组比较,HSJ增加K562细胞中G2期细胞比例(P<0.05),降低S期时相细胞比例(P<0.05),降低增殖指数(PI)(P<0.05),HSJ将K562细胞阻滞于G2期。结论 HSJ对K562细胞具有增殖抑制作用,其机制与诱导细胞凋亡和阻滞K562细胞在G2期有关。     

蔬菜粉提取物和β-胡萝卜素对人肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 :　探讨蔬菜粉脂溶性提取物 ( FEVP)、β-胡萝卜素对人肺癌细胞 YTMLC- 90增殖和凋亡的影响。方法 :　采用体外培养 ,细胞毒 ( MTT法 )试验、形态学、DNA凝胶电泳、流式细胞术等方法。结果 :　高、中、低浓度 FEVP(分别为相当于 β-胡萝卜素 2 .5× 1 0 -6、2 .5× 1 0 -7、5× 1 0 -8mol/L )和高、中浓度β-胡萝卜素 ( 1× 1 0 -4和 1× 1 0 -5mol/L)能显著抑制 YTMLC- 90细胞增殖。高、中浓度 FEVP和高浓度 β-胡萝卜素可显著抑制 YTMLC- 90细胞核分裂。高、中浓度FEVP、高浓度 β-胡萝卜素组细胞出现细胞核固缩 ,染色质凝聚 ;典型 DNA断裂梯状条带 ;细胞凋亡峰。这些现象符合细胞凋亡的特征。结论 :　蔬菜、β-胡萝卜素可能通过抑制细胞核分裂、诱导凋亡抑制人肺癌细胞增殖 ,有剂量反应关系 ,且蔬菜的作用比 β-胡萝卜素的作用强。     

姜黄素诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡机制

目的 探讨姜黄素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的可能机制。方法 体外培养人胃癌细胞SGC-7901,细胞计数盒8（CCK8）法观察不同浓度姜黄素对胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用;流式细胞仪检测SGC-7901细胞周期;Western blot检测SGC-7901细胞核转录因子κB（NF-κB）、livin、caspase-3蛋白表达情况。结果 与对照组比较,各剂量姜黄素组SGC-7901细胞增殖活力均受到抑制,呈剂量效应关系（r=0.901,P<0.01）与时间效应关系（r=0.389,P<0.01）;与对照组（2.8%）比较,20、40、60 μmol/L姜黄素组SGC-7901细胞凋亡率[分别为7.7%、13.4%、20.7%]明显升高（P<0.05）;与对照组（58.59%）比较,20、40、60 μmol/L姜黄素组SGC-7901细胞周期G1期比例[分别为60.24%、65.13%、68.35%]明显升高（P<0.05）;与对照组比较,姜黄素组SGC-7901细胞内NF-κB、livin蛋白表达降低,caspase-3蛋白表达升高（P<0.05）,呈剂量效应关系。结论 姜黄素可抑制人胃癌细胞SGC-7901的活性,其机制可能与姜黄素下调NF-κB信号通路,促进livin解除对caspase的抑制效应而激活caspase-3,发挥其诱导细胞凋亡作用有关。     

ω-3PUFA及其诱导的外源性跨膜型TNFα对肿瘤细胞生长的影响

目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)及其诱导的外源性跨膜型TNFα对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:将ω-3PUFA可调控的跨膜型TNFα真核表达载体转导入HL-60和MCF-7细胞,免疫荧光细胞化学方法检测ω-3PUFA对转染细胞外源基因表达的调控,生长曲线、流式细胞和DNA梯形带分析检测ω-3PUFA对转染细胞增殖能力和凋亡的影响。结果:在6.0×10-5mol/Lω-3PUFA诱导下转染细胞外源性跨膜型TNFα表达增加。HL-60和MCF-7细胞经6.0×10-5mol/Lω-3PUFA处理后增殖能力减弱,但只有HL-60细胞周期阻滞于G0/G1期及形成DNA梯形带。经ω-3PUFA处理后,以上变化在HL-60和MCF-7转染细胞中均更为显著。结论:ω-3PUFA诱导的外源性跨膜型TNFα基因产物可以增强ω-3多不饱和脂肪酸的抗肿瘤能力,而诱导细胞凋亡可能是其中重要机制之一。     

甲基叔丁基醚对细胞周期及细胞凋亡的影响

目的：探讨汽油添加剂甲基叔丁基醚（ＭＴＢＥ）对细胞周期和细胞凋亡的影响。方法 采用流式细胞仪检测ＭＴＢＥ对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞周期（染毒浓度分别为１、２、４μｌ／ｍｌ,染毒时间为２４ｈ）的影响;应用结晶紫染色法,通过检测Ｈｅｌａ细胞的存活情况,了解ＭＴＢＥ对细胞凋亡的影响。结果 流式细胞仪结果显示,ＭＴＢＥ可使ＮＩＨ／３Ｔ３细胞周期发生改变。表现为Ｓ期细胞减少,而处于Ｇ２＋Ｍ期的细胞增多,提示ＭＴＢ     

绿茶主要活性成分对叙利亚地鼠胚胎癌前细胞生长和凋亡的影响

目的建立叙利亚地鼠胚胎细胞（Syrian hamster embryo cell,SHE细胞）混合培养模型,研究表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-Gallate,EGCG）对SHE癌前细胞生长、增殖和凋亡的作用,探讨EGCG的抑癌机制。方法将SHE癌前细胞和正常细胞分别按1：10000、1：1000、1：100、1：10比例接种于6孔的培养皿中,培养7d,建立SHE细胞混合培养模型。以0μmol／L EGCG为对照组,分别选取浓度为0．5、1、5、10、50μmol／L的EGCG,通过SHE细胞生长实验,原位细胞凋亡实验、原位细胞增殖实验和基因芯片检测EGCG对SHE正常细胞、SHE癌前细胞和混合培养模型中SHE癌前细胞的生长、增殖、凋亡及相关调控基因表达的影响。结果SHE癌前细胞与正常细胞的比例为1：100是合适的混合培养模型。0．5、1、5、10μmol／L的EGCG促进了SHE正常细胞的生长,而浓度为50μmol／L的EGCG抑制了SHE正常细胞的生长。在1：200比例的SHE癌前细胞和正常细胞混合培养模型中,与对照组相比,浓度为5、10μmol／L的EGCG抑制了不同大小的SHE癌前细胞克隆的生长。对照组中SHE癌前细胞的DNA合成指数和凋亡指数分别是39．3％和6．5％,5、10p,mol／LEGCG作用后SHE癌前细胞的DNA合成指数分别降至25．6％和24．8％,细胞凋亡指数分别升至12．65％和14．5％。EGCG抑制了混合培养模型中SHE癌前细胞的生长和增殖,促进了其凋亡。EGCG对于细胞凋亡的调控可能通过p53、NF—KB、bcl-2通道的基因表达来实现;EGCG对于细胞增殖的调控可能通过阻滞细胞周期G1／S期实现。结论EGCG可能是通过抑制癌前细胞的增殖和促进其凋亡进而抑制癌症。     

松口蘑菌丝体蛋白对HeLa细胞凋亡的影响

目的 :　研究松口蘑发酵菌丝体水提液中菌丝体蛋白质 (TMP- B)的体外抗癌作用。方法 :　体外培养 He La细胞 ,培养时添加不同浓度的 TMP- B,绘制细胞生长曲线。利用扫描电镜、流式细胞术及 DNA凝胶电泳等进行体外抗人子宫颈癌 He La细胞增殖和诱导细胞凋亡机制的研究。结果 :　 TMP- B在体外具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。扫描电镜观察到 TMP- B处理细胞产生明显的凋亡小体 ;TMP- B对细胞周期的影响是通过抑制细胞从 S到 G2 /M期的转化来抑制He La细胞增殖 ,诱导细胞发生凋亡的 ;流式细胞仪分析图上出现凋亡峰 ;DNA电泳出现以 2 0 0 bp左右为单位的 DNA碎片。结论 :　采用液体培养方法生产的松口蘑菌丝体蛋白质 ,具有显著的抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡作用。     

天然红心蛋中类胡萝卜素提纯物对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨天然红心蛋中类胡萝卜素提纯物(carotenoidsextractsfromnaturalredyolk,CENRY)对人肝癌细胞QGY-7703细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用体外培养,细胞增殖实验,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态及钙离子浓度变化,采用流式细胞术检测细胞周期等。结果:CENRY1.0、0.5、0.25μmol/L三个剂量能显著抑制人肝癌QGY-7703细胞增殖,细胞凋亡指数随剂量增加及时间延长而上升;CENRY对QGY-7703细胞存在G2/M期阻滞作用;处理组细胞内Ca2+浓度极显著地升高。结论:CENRY能抑制QGY-7703增殖、诱导凋亡。     

甲基丙烯酸环氧丙酯对人支气管上皮细胞周期及凋亡影响的研究

目的探讨甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)对人支气管上皮细胞周期及凋亡的影响。方法人支气管上皮细胞(16HBE)经1~16μg/ml剂量的GMA染毒不同次数后,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及凋亡率的改变,同时测定细胞分裂指数(MI)。结果经1次染毒处理后,随着染毒剂量的增加,G0/G1期细胞显著减少(P<0.01),S期和G2/M期细胞显著增加,凋亡细胞数增多,细胞分裂指数下降;随着染毒次数的增加,各剂量组细胞周期均明显阻滞于G0/G1期,但高剂量组细胞仍表现出S期和G2/M期增多现象;经3次染毒后,高剂量组细胞出现凋亡率下降、分裂指数升高现象。结论经GMA染毒处理后,16HBE细胞周期由G0/G1期向S期和G2/M期移动而呈现增殖性改变。     

茶色素对叙利亚地鼠胚胎正常细胞和癌前细胞生长选择性作用的机制研究

目的利用叙利亚地鼠胚胎细胞(SHE)混合培养模型,研究不同剂量的红茶提取物活性物质茶色素(TP)对SHE正常细胞和癌前细胞生长、增殖、凋亡及相关调控基因表达的影响。方法以0μg/ml的TP为对照组,通过细胞生长实验、原位细胞增殖实验、细胞凋亡实验、Microarray实验来研究不同浓度的TP(0.5、1、5、10和50μg/ml)对单独培养的HE正常细胞和癌前细胞及混和培养模型SHE癌前细胞凋亡、增殖和相关调控基因表达的作用。结果TP促进SHE正常细胞的生长和增殖,对其凋亡没有影响;TP抑制SHE癌前细胞的生长和增殖,促进癌前细胞的凋亡;TP抑制混合培养模型中SHE癌前细胞的生长和增殖,促进其凋亡;TP对于细胞凋亡的调控可能通过Caspase3、Caspase8、p53、bad、bax、GADD45等上调基因及mdm2基因下调来实现;TP对于细胞增殖的调控可能通过阻滞细胞周期G2期实现。结论TP通过促进细胞凋亡直接或者通过促进正常细胞的增殖间接来抑制癌前细胞向肿瘤的转变,这种选择性作用可能与TP的抑癌机制有关。