乙型肝炎病毒核心区DNA疫苗接种后H-2d小鼠的特异性免疫应答

目的观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核心区ＤＮＡ疫苗接种后ＢＡＬＢ／ｃ（－２ｄ）小鼠的特异性免疫应答。方法构建ＨＢＶ核心区ＤＮＡ疫苗（ＰＪＷ４３０３／ＨＢｃ）;用基因枪法和肌肉注射祛将该ＤＮＡ疫苗接种ＢＡＬＢ／ｃ小鼠;ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗－ＨＢＣ（ＩｇＧ）及ＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１,ＩｇＧ２ａ）;５１铬释放法检测小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性ＣＴＬ活性。结果该ＤＮＡ疫苗在体外转染细胞中可良好表达ＨＢｃＡｇ。血清抗－ＨＢｃ终点滴度在ＤＮＡ疫苗基因枪组和肌肉注射接种组小鼠分别为１：３２８０５０和１：１０９３５０．两组小鼠的抗－ＨＢｃＩｇＧ亚类均以ＩｇＧ２ａ略占优势。两组小鼠的ＨＢＣＡｔｈｅ异性ＣＴＬ杀伤活性分别达到５１．１％和５５．２％。结论ＨＢＶ核心区ＤＮＡ疫苗在小鼠实验中具有良好的细胞免疫和体液免疫原性。     

检测慢性丙型肝炎患者抗－HCVIgM的临床意义

对８２例输血后慢性丙型肝炎病人丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）ＩｇＭ动态变化进行观察，８２例患者均检测到抗－ＨＣＶ抗体，其中５１例抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性。抗－ＨＣＶＩｇＭ出现规律表现为４种类型：（１）持续检出型２４例（２９．２７％）；（２）间断检出型８例（９．７６％）；（３）短暂检出型１９例（２３．１７％）；（４）阴性型３１例（３７．８０％）。将８２例输血后慢性丙型肝炎抗－ＨＣＶＩｇＭ出现类型与丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、ＨＣＶＲＮＡ消长情况比较，发现阴性型具有较低的ＡＬＴ峰值，而其它３型ＡＬＴ峰值较高（Ｐ＜０．０１）。８例经干扰素治疗的慢性活动性丙型肝炎患者，治疗前均有ＡＬＴ明显异常及ＨＣＶＲＮＡ、抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性，治疗后１～３个月ＡＬＴ均转为正常，ＨＣＶＲＮＡ转为阴性，但其中只有３例伴抗－ＨＣＶＩｇＭ的阴转，随访１年发现，只有抗，ＨＣＶＩｇＭ阴转的３例病人得以痊愈，其余５例均在治疗后半年内病情复发。提示治疗中伴有抗－ＨＣＶＩｇＭ阴转的患者预后良好。     

戊型肝炎IgM和IgG抗体的临床免疫诊断意义

采用标记第二抗体间接ＥＬＩＳＡ发现，ＩｇＧ－抗ＨＥＶ阳性率２３．５％（４６／１９６），其中ＩｇＭ－抗ＨＥＶ阳性１０例（５．１％）。于１９９３年２月～１９９４年１月继续观察ＩｇＭ－抗ＨＥＶ免疫检出率为６．７％（１０１／１５１５），ＩｇＭ－抗ＨＡＶ检出率为１４．２％（３０２／２１３３）。按月和月／年统计阳性率动态，表明戊型与甲型肝炎全年呈双峰型相伴流行。提示ＩｇＭ－抗ＨＥＶ是诊断现患戊型肝炎的主要免疫指标。     

甲型肝炎抗－HAV－IgM持续阳性三例

甲型肝炎抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ持续阳性三例胡岳林（例１）男，４８岁。１９８８年１月５日食用不洁毛蚶。１９８８年２月４日因发热、乏力、食欲不振、恶心、上腹部不适、尿色深入院。肝肋下１．５ｃｍ，脾肋下２ｃｍ。ＳＢ１５７ｕｍｏｌ／Ｌ，ＡＬＴ＞１０００Ｕ，抗－Ｈ...     

抗—HEV免疫吸印法的建立及应用

应用ＨＥＶ基因结构区的重组融合蛋白，建立了免疫吸印法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ＷＢ）检测抗－ＨＥＶＩｇＧ并与现行的酶联免疫试验（ＥＩＡ）进行了比较，结果表明，ＷＢ检出戊型肝炎暴发点急性肝为病人血清抗－ＨＥＶＩｇＧ的阳性率（６８／７３，９３．２％）高于现行的ＥＩＡ（５１／７３，７０．０％），对实验感染猕猴抗－ＨＥＶＩｇＧ检出率前者高于后（分别为７／７和５／７），且检出抗－ＨＥＶＩｇＧ时间较长，滴度也     

抗－HEV免疫吸印法的建立及应用

应用ＨＥＶ基因结构区的重组融合蛋白，建立了免疫吸印法（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ．ＷＢ）检测抗－ＨＥＶＩｇＧ，并与现行的酶联免疫试验（ＥＩＡ）进行了比较。结果表明，ＷＢ检出戊型肝炎暴发点急性肝炎病人血清抗－ＨＥＶＩｇＧ的阳性率（６８／７３，９３．２％）高于现行的ＥＩＡ（５１／７３，７００％），对实验感染猕猴抗－ＨＥＶＩｇＧ检出率前者也高于后者（分别为７／７和５／７），且检出抗－ＨＥＶＩｇＧ时间较长，滴度也较高。对多种对照血清检测结果表明，除５０％（３／５８）的丙型肝炎血清呈阳性外，甲型、乙型、ＥＢＶ、ＣＷＶ肝炎及健康人血清均为阴性，说明该法具有良好的灵敏度和特异性，可望用于流行病学调查和基础研究，也可用于疑是戊型肝炎病例的确诊     

重组干扰素α-1b诱导治疗慢性乙型肝炎的远期随访

我们于１９９７年１月－２０００年３月应用大剂量长疗程重组千扰素ａ－比（ｒＩＦＮａ—１ｂ）诱导治疗慢性乙型肝炎患者５９例，探讨大剂量长疗程干扰素诱导治疗与抗病毒疗效的关系，并进行了一年的随访。 一、资料与方法 １．材料：男９７例，女１９例，年龄１７—４５岁，平均年龄３０．７岁，病程２～７年，血清ＡＬＴ均反复或持续升高（超过正常值３倍以上）达６个月以上，均无黄疸；ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃＩｇＭ、抗－ＨＢＣ ＩｇＧ 放射免疫法，试剂由山东潍坊３Ｖ公司提供）和ＨＢＶ ＤＮＡ（ＰＣＲ法）均为阳性。对…     

163例丙型肝炎八年前瞻性研究

为探讨我国丙型肝炎的特点，对１６３例丙型肝炎患者进行了８年随访。急性丙型肝炎急性期后的主要异常表现为血清丙氨酸转氮酶（ＡＬＴ）升高，病后１年内、１、２、５和８年的ＡＬＴ异常率分别为１００％、７３％、５７％、３７％和２８％；ＡＬＴ异常分持续性和波动性两类，后者约占１／３～１／２。用第二代丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）ＥＬＩＳＡ试剂检测，病后２个月内、２～６个月、７～１２个月及１、２、５和８年的抗－ＨＣＶ阳性率分别为５６％、９３％、９４％、９６％、９７％、９３％和８３％；病后１年起少数患者抗－ＨＣＶ阴转，仅见于ＡＬＴ复常者，病后１、２、５和８年，ＡＬＴ复常者的抗－ＨＣＶ阴转率分别为１０％、８％、１６％和２２％。病后８年时用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测抗－ＨＣＶ阳性血，丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ阳性率为８４％，其中ＡＬＴ异常和正常者无明显差异。用型特异引物ＰＣＲ法测定４５份抗－ＨＣＶ阳性血清，４２份为Ⅱ型，３份待定。８年时未检出甲胎蛋白异常者，肝功能（血清胆红素和白蛋白）９６％～９７％为ＨｏｂｂｓⅠ级，表明还没有明显的失代偿性肝硬化和肝细胞癌者。     

老年人流行性出血热合并肝脏损害的临床特点

动态检测３５例老年流行性出血热（ＥＨＦ）患者的血清总胆红素（ＳＢ）、丙氮酸转氨酶（ＡＬＴ）、总蛋白（Ｔ）、白蛋白（Ａ）和球蛋白（Ｇ），并与３５例青中年患者比较。结果表明：老年人重型ＥＨＦ中ＳＢ（２９．９±１１．８μｍｏｌ／Ｌ）和ＡＬＴ（１３２．９±６１．４Ｕ／Ｌ）增高，Ｔ（６０．０±８．１ｇ／Ｌ）和Ａ（２９．１±５．１ｇ／Ｌ）降低，与青中年患者比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１或（０．０５）；恢复期末老年人ＥＨＦ的ＳＢ（２１．９±９．１μｍｏｌ／Ｌ）、ＡＬＴ（８０．２±３６．６Ｕ／Ｌ）、Ｔ（６４．２±９．１ｇ／Ｌ）和Ａ（３２．３±７．１ｇ／Ｌ）均异常（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），而青中年患者仅ＡＬＴ（４９．９±２０．５Ｕ／Ｌ）稍高；ＥＨＦ的肝脏损害主要与病型、病期和年龄有关。提示动态检测老年人ＥＨＦ的肝功能有助于判断病情和估计预后。     

应用丁型肝炎病毒27肽抗原检测丁型肝炎病毒抗体

采用中科院上海生化所合成丁型肝炎病毒（ＨＯＶ）抗原２７肽酶联法，检测重庆地区乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者中血清丁型肝炎病毒抗体（抗－ＨＤ）结果：３００例献血员中１例阳性（此人ＡＬＴ较正常升高２倍）１１３例甲型肝炎、５８例非乙型肝炎均为阴性；ＨＢＶ标记阳性者８８２例中抗－ＨＤ（＋）１０６例（１２．０２％），其中乙型肝炎表面抗原携带者１３／４１０例（３．１７％）、急性肝炎１１／７６例（１４．４％）、慢性迁延性肝炎１／１３例（７．６９％）、慢性活动性肝炎２２／１２１例（１７．６８％）、重型肝炎１７／８６例（１９．７７％）、肝硬化２３／７８例（２９．４９％）、原发性肝细胞癌１９／９８例（１９．３９％）。结果与已往报告基本一致。与ＡｂｂｏｔｔＥＩＡ试剂相符率为７４／７８例（９４．９％）。采用天然丁型肝炎病毒抗原（ＨＯＡｇ）与之竞争抗－ＨＤ，４份阳性转为阴性，２份阴性结果不变，提示本ＨＤＶ抗原合成肽具有天然ＨＤＡｇ活性，可特异识别抗－ＨＤ，是一新的、稳定、安全、可靠的诊断用试剂。     

“急性非甲非乙型”肝炎的病原学分析

对抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ、ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｃ－ＩｇＭ均（一）、临床诊断为急性非甲非乙肝炎７２例进一步病原学鉴定。以聚合酶链反应检出乙型和丙型肝炎病毒；血清学包括酶免疫法检测抗－ＨＣＶ、抗－ＨＤＶ－ＩｇＭ、抗ＨＥｖ－ＩｇＧ（Ｇｅｎｅｌａｂｓ）、抗－ＣＭＶ－ＩｇＭ和抗－ＥＢＶ－ＩｇＭ。结果诊断丙型肝炎１７例（２３．６％），戊型肝炎１４例（１９．５％），最多的竟是慢性无症状ＨＢＶ感染的急性活动（３４例，４７．２％），其中合并ＨＣＶ例、ＨＤＶｌ例、ＨＥＶ１０例和自发性活动１７例。因而，我国“急性非甲非乙”肝炎的病原学可能相当复杂。     

输血后乙型和丙型肝炎病毒感染的前瞻性调查

目的 了解输血所致ＨＢＶ和ＨＣＶ感染现状及ＨＢｓＡｇ抗ＨＣＶ和ＡＬＴ筛检供血的效果。方法 对１３８例输血者输血前，后１，３，６，９个月血清标本及其供血检测ＨＢｓＡｇ，抗ＨＢｓ，抗ＨＢｃ，抗ＨＣＶ和ＡＬＴ，并对部分血清标本用ＰＣＲ及巢式ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果和结论 输血后ＨＢＶ和ＨＣＶ感染率分别为１．４％（２／１３８）和３４．８％（４８／１３８），输血后乙型和丙型肝炎发生     

输血后HCV感染的前瞻性研究

在无国产抗－ＨＣＶ试剂供应的１９９０和１９９１年，甲地观察输血者９０名（不筛查ＡＬＴ），乙地筛查ＡＬＴ观察输血者６４名。输血后ＨＣＶ感染率甲地４５．６％，乙地１８．８％，ｐ＜０．０１；其中输血后丙型肝炎发生率甲地４１．１％，乙地１４．１％Ｐ＜０．０１，甲地观察二年未发现抗－ＨＣＶ阴转；输血距抗－ＨＣＶ阳转甲地３８．４±１１．８天，乙地４２．９±１５．９天；输血后ＡＬＴ异常率甲地４４．４％，乙地２１．９％，输血距ＡＬＴ异常甲地４８．２±１６．８天（观察二年ＡＬＴ异常率２７．８％），乙地５１．９±２０．９天。输抗－ＨＣＶ阳性、阴性血受血者，其ＨＣＶ感染率８８．２％（４５／５１）和７．８％（８／１０３）。既往ＨＣＶ隐性感染的受血者，输后丙型肝炎发病率５２．９％（１１／２２），同时发现３例输血后抗－ＨＣＶＳ／ＣＯ值渐低，２例阴转，似有ＨＣＶ中和性抗体存在。     

戊型肝炎系列血清抗－HEV61例检测分析

用酶联免疫吸附试验检测戊型肝炎病人的系列血清抗－ＨＥＶ。结果表明，病后２～８周和２～４个月ＩｇＭ抗－ＨＥＶ阳性率分别为６５．６３％（２１／３２）和３３．３３％（２／６），４个月后未检出。ＩｇＧ抗－ＨＥＶ于发病后４天即可阳转，至病后２～４周和５～８周ＩｇＧ抗－ＨＥＶ累积阳转率分别为８６．８９％（５３／６１）和９８．３６％（６０／６１）。多数病人ＩｇＧ抗－ＨＥＶ持续时间较短，病后６个月内和２年内分别为６７．２１％（４１／６１）和９１．８０％（５６／６１）阴转。多数病人ＩｇＧ抗－ＨＥＶ在急性期处于高水平，恢复期迅速下降。     

人巨细胞病毒感染与脑血栓形成关系的研究

采用高敏感性ＥＬＳＡ法和ＰＣＲ技术分别检测５８例脑血栓病人的血清特异性ＨＣＭＶ－ＩｇＡ、ＩｇＭ及悄ＨＣＭＶ－ＤＮＡ。结果显示，脑血栓病人活动性ＨＣＭＶ感染率（ＩｇＭ／ＩｇＡ）和尿ＨＣＭＶ ＤＮＡ阳性率分别为２４．１４％和８．６２％，而对照组为２．７８％和０，两组有显著性差异（Ｐ〈０．０１）提示ＨＣＭＶ活动性感染与脑血栓形成有关。     

戊型肝炎合并溶血性贫血1例

女, ９岁,于２０００年７月 ４日就医。主诉乏力,尿黄１月。体检：体温３６．８℃,脉搏 ７２次／ｍｉｎ,血压 １４ ｋＰａ／８ ｋＰａ（１０ ｍｍＨｇ／６０ ｍｍＨｇ）。巩膜皮肤徽黄,腹软,肝脾肋下未及,肝区叩痛（＋）。实验室检查：血清总蛋白 ７８ ｇ／Ｌ,白蛋白２７ ｇ／Ｌ,球蛋白 ５１ｇ／Ｌ, ＡＬＴ ５３３ Ｕ／Ｌ, ＡＳＴ ４１８ Ｕ／Ｌ,总胆红素（ＴＢ） ５９６μｍｏｌ／Ｌ,直接胆红素（ＤＢ） ２４．５ μｍｏｌ／Ｌ。抗－ＨＥＶ ＩｇＭ （＋）,抗－ＨＢｓ（＋）,甲、丙、丁、庚、ＴＴＶ肝炎病毒血清标记均阴性…     

HBcAg DNA疫苗诱导小鼠（H—2^b）特异性细胞和体液免疫应答

目的 观察ＨＢｃＡｇ ＤＮＡ疫苗（ｐＪＷ４３０３／ＨＢｃ）免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠（Ｈ－２＾ｂ）的特异性细胞和体液免疫应答。方法 基因枪和肌肉注射两种方法接种ＤＮＡ疫苗;ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗－ＨＢｃ（ＩｇＧ）及ＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１,ＩｇＧ２ａ）;＾５１铬释放法检测小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性ＣＴＬ活性。结果 该ＤＮＡ疫苗体外可表达ＨＢｃＡｇ;小鼠经基因枪或肌肉注射接种该疫苗后血清抗－ＨＢｃ滴度分     

17-β-雌二醇对原代人脐静脉内皮细胞一氧化氮生成的影响

目的观察１７β雌二醇对原代人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）一氧化氮（ＮＯ）生成的影响。方法采用胰蛋白酶灌流消化法培养原代ＨＵＶＥＣ，以原代ＨＵＶＥＣ为对象，观察不同浓度的１７β雌二醇（１００ｎｍｏｌ／Ｌ，３０ｎｍｏｌ／Ｌ，１０ｎｍｏｌ／Ｌ，１ｎｍｏｌ／Ｌ，０．１ｎｍｏｌ／Ｌ）作用于原代ＨＵＶＥＣ一定时间下ＮＯ产量（测代谢产物ＮＯ－２），采用Ｇｒｅｉｓ反应测定ＮＯ－２的量。结果１００ｎｍｏｌ／Ｌ１７β雌二醇作用１小时，ＮＯ－２即明显增高（Ｐ＜０．００１）；３０ｎｍｏｌ／Ｌ的１７β雌二醇作用下，４小时起ＮＯ－２产量即明显增高（Ｐ＜０．００１）；１０ｎｍｏｌ／Ｌ的１７β雌二醇作用１２小时及１ｎｍｏｌ／Ｌ的１７β雌二醇作用１８小时，ＮＯ－２产量均有明显增高（Ｐ＜０．０５）。０．１ｎｍｏｌ／Ｌ的１７β雌二醇作用２４小时内，ＮＯ－２产量与对照组比较无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。１７β雌二醇作用的阈浓度可能在０．１ｎｍｏｌ／Ｌ－１ｎｍｏｌ／Ｌ之间。结论１７β雌二醇可促进原代人脐静脉内皮细胞ＮＯ的生成，可能为其抑制动脉粥样硬化形成、降低血管阻力的重要机理之一。     

基因型和核苷酸序列分析研究丙型肝炎病毒母婴传播

为研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的母婴传播，应用ＥＩＡ方法检测１８１６例孕妇血清抗－ＨＣＶ抗体。结果抗体阳性者１６例（０．８８％），进一步用逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）检测病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ）１４例孕妇为阳性，对其中１３例孕妇所生１３例婴儿随访至出生后６个月，３例婴儿检出ＨＣＶＲＮＡ，其中２例为短暂ＨＣＶ感染者，１例为慢性ＨＣＶ感染者伴ＡＬＴ异常，母婴传播率为２３．０％     

套式PCR法检测HIV感染者血清中HCV RNA

用套式ＰＣＲ法对２５例人类免疫缺陷病毒Ｉ型（ＨＩＶ－Ｉ）感染者和１７例对照组血清作了ＨＣＶ－ＲＮＡ检测。ＨＣＶＲＮＡ阳性者９例，其中４例有输血或接受过血制品史，３例为静脉药瘾者（ＩＶＤＵＳ），另２例与ＨＩＶ阳性患者有ＩＶＤＵＳ和性接触史，对照组无１例阳性。有输血／血制品和ＩＶＤＵＳ危险因素的患者的ＨＣＶＲＮＡ检测的阳性率最高（８０％和５０％）。在ＨＩＶ伴ＨＣＶ感染的全部病例中，仅２例曾有ＡＳＴ和ＡＬＴ轻度升高。本研究表明，这两种病毒伴随感染率之高是与其相同的传播途径危险因素有关，而未发现此两种病毒间可能相互影响的证据。