SOX-9通过调控ADAMTS保护椎间盘

目的　探讨转录因子SOX-9和含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)对椎间盘退行性变的影响及二者之间的关系,为进一步理解椎间盘退行性变发生机制提供实验依据。方法收集不同退行性变等级的椎间盘组织,通过实时荧光定量PCR、免疫组织化学染色和蛋白质印迹分析等方法检测椎间盘组织中SOX-9、DAMTS-4、ADAMTS-5的表达。原代培养正常椎间盘中的髓核细胞,通过转染小干扰RNA(siRNA)干扰SOX-9、ADAMTS-4、ADAMTS-5的表达,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析检测细胞外基质成分——Ⅱ型胶原(COL2A1)、蛋白聚糖(ACAN)、软骨寡聚物基质蛋白(COMP)的表达变化,通过荧光素酶实验评估SOX-9对ADAMTS-4、ADAMTS-5启动子活性的影响。结果与正常椎间盘组织相比,发生退行性变椎间盘组织中SOX-9表达降低,而ADAMTS-4、ADAMTS-5表达升高。单纯干扰髓核细胞中SOX-9的表达,COL2A1、ACAN及COMP表达均下调,ADAMTS-4、ADAMTS-5表达上调;同时干扰SOX-9、ADAMTS-4及ADAMTS-5表达后,COL2A1、ACAN及COMP表达较单纯干扰SOX-9表达明显升高。荧光素酶实验结果显示SOX-9可显著下调ADAMTS-4、ADAMTS-5启动子活性,提示二者具有直接调控关系。结论SOX-9通过直接调控ADAMTS-4、ADAMTS-5表达进而影响髓核细胞外基质成分的表达,最终发挥保护椎间盘的作用。     

兔骨关节炎模型中Wnt/β-catenin信号通路研究

目的:探讨兔骨关节炎软骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路的表达情况及其在骨关节炎中的作用。方法:采用改良伸直位固定法制作兔骨关节炎模型,分阶段酶消化法分离正常软骨细胞和骨关节炎软骨细胞。采用ELISA法检测正常软骨细胞和骨关节炎软骨细胞中β连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、白细胞介素(IL)-1β、IL-18和IL-33的水平。结果:与正常对照组比较,骨关节炎组β-catenin、MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4的蛋白水平均明显升高,Ⅱ型胶原和蛋白聚糖基因的蛋白水平均明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。与正常对照组比较,骨关节炎组IL-1β、IL-18和IL-33蛋白水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:兔骨关节炎中Wnt/β-catenin信号通路明显激活,介导软骨细胞外基质分解代谢、促进软骨破坏,而炎性因子IL-1β、IL-18和IL-33可能在此过程中并未起到关键作用。     

血清透明质酸和层黏蛋白等对肾脏纤维化早期诊断的研究

目的 探讨慢性肾脏病不同分期时血清透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1的变化,初步评价其对肾脏纤维化的早期诊断意义.方法 收集健康对照组以及慢性肾脏病不同分期患者的血清标本,采用放射免疫及酶联免疫吸附法测定各组患者的血清肌酐、尿素氮、肌酐清除率、血清胱抑素C、β2微球蛋白指标水平,同时测定血清透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1指标的变化,分析各组患者血清中透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1与血清肌酐、尿素氮、肌酐清除率、血清胱抑索C、β2微球蛋白血生化等指标的相关性,比较各组患者血清中透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1指标在慢性肾脏病Ⅰ、Ⅱ期中的变化.结果 慢性肾脏病Ⅰ期患者透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1与健康对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).多元相关分析表明,透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1与β2微球蛋白和血清胱抑素C相关(r分别=0.664、0.458、0.566、0.369、0.408,P均＜0.05).结论 随着慢性肾脏病的发展,血清透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1水平逐渐升高,特别是在慢性肾脏病早期(Ⅰ、Ⅱ期)其水平已经升高,可以作为评价慢性肾脏病早期纤维化的标志物.     

ADAMTS-1在人卵泡颗粒细胞和卵泡液中的表达研究

目的探讨Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)mRNA和蛋白在人卵泡壁颗粒细胞(GCs)和卵丘颗粒细胞(CCs)中的表达水平及变化。方法收集2014年3月至2016年6月期间在华中科技大学同济医学院生殖医学中心接受ICSI治疗的患者卵泡液,其中大卵泡(直径≥18 mm)和小卵泡(≤10 mm)各86份,离心后上清用于Western Blot和ELISA实验,沉淀用密度梯度离心法分离纯化得到GCs;收集脱颗粒细胞的培养液直接离心法获得CCs。GCs和CCs均分别提取mRNA和蛋白,荧光定量PCR检测GCs和CCs中ADAMTS-1 mRNA水平,Western Blot检测ADAMTS-1蛋白水平,比较ADAMTS-1 mRNA和蛋白在不同颗粒细胞中的表达差异。结果 ADAMTS-1 mRNA在大卵泡GCs、小卵泡GCs、CCs中均有表达,且其在小卵泡GCs中表达量最高,显著高于CCs(P0.05)。ADAMTS-1蛋白在大卵泡GCs、小卵泡GCs、CCs及卵泡液中均有表达,且存在成熟ADAMTS-1蛋白(85 KDa)及前体(110 KDa)两种形式;其在CCs中的表达量最高,显著高于大、小卵泡的GCs(P0.05),在小卵泡液中的含量显著高于大卵泡液(P0.01)。结论 ADAMTS-1 mRNA在人卵泡GCs和CCs中均有表达,ADAMTS-1蛋白在人卵泡GCs、CCs和卵泡液中均存在前体和成熟形式,且以成熟形式为主。ADAMTS-1在人卵泡GCs、CCs和卵泡液中的表达特点及变化可能与其在卵泡发育过程中的功能相关。     

血清部分细胞外基质指标检测在早期肾脏纤维化诊断中的意义

本研究评估血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)、组织基质金属蛋白酶1抑制剂(TIMP-1)在早期肾脏纤维化诊断中的价值.     

骨质疏松与Ⅰ型胶原的代谢

1．1 Ⅰ型胶原的合成 Ⅰ型胶原基因在成骨细胞内转录、剪接成前α链mRNA,转译出前α肽链,三条前α肽链组成前胶原。前胶原N端、C端的多余肽链被切下,为PINP(Ⅰ型胶原前胶原氨端肽原)和PICP,进入血液,余下部分成为原胶原。原胶原被分泌到细胞外,相互聚集形成排列规律紧密的胶原纤维。各分子间逐渐形成共价键连接,成为成熟的胶原纤维。     

低氧通过HIF-1α调控髓核细胞中ADAMTS-4和ADAMTS-5的表达

目的观察低氧环境及低氧诱导因子1α(HIF-1α)对髓核细胞中解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-4和ADAMTS-5启动子活性的影响,探讨可能影响椎间盘退变的分子机制。方法将体外培养的大鼠髓核细胞分别置于常氧和低氧(1%O2)培养箱培养,采用蛋白质印迹分析及PCR方法检测细胞中ADAMTS-4和ADAMTS-5的表达。对获取的ADAMTS-4和ADAMTS-5启动子片段测序,并使用JASPAR数据库分析其中是否存在HIF-1α的结合位点。将HIF-1α过表达质粒、PGL3-ADAMTS-4质粒和PGL3-ADAMTS-5质粒转染至大鼠髓核细胞中,用双荧光素酶报告基因检测系统检测髓核细胞中HIF-1α对ADAMTS-4和ADAMTS-5基因启动子的调控作用。结果蛋白质印迹分析和PCR结果显示,低氧分别在蛋白质水平和m RNA水平抑制髓核细胞中ADAMTS-4、ADAMTS-5的表达。使用JASPAR软件分析后,发现ADAMTS-4启动子中可能包含1个HIF-1α的结合位点,而ADAMTS-5启动子中可能包含2个HIF-1α的结合位点。双荧光素酶报告基因检测结果显示,HIF-1α的过表达能够显著抑制ADAMTS-4和ADAMTS-5启动子活性。结论低氧可能通过HIF-1α抑制ADAMTS-4和ADAMTS-5的表达,保持椎间盘内环境的稳态,延缓椎间盘退变的发生。     

蛋白酶与骨关节炎软骨退变

蛋白酶在关节软骨基质胶原纤维网及蛋白多糖降解过程中发挥重要作用.与关节软骨退变相关的蛋白酶主要有胶原酶、基质溶解素、明胶酶、间质溶素、纤维蛋白溶解酶和组织蛋白酶,其中胶原酶1、3在胶原原纤维的降解过程中发挥重要作用,明胶酶和间质溶素-1主要降解软骨基质中的非胶原成分.目前研究认为胶原酶3在软骨中表达水平升高是导致骨关节炎关节软骨退变的主要因素之一,胶原酶1和组织蛋白酶,特别是组织蛋白酶K在早期关节软骨退变过程中起重要作用.     

不同浓度hTNFa对软骨细胞及其基质相关基因表达 的影响

目的探讨软骨细胞在肿瘤坏死因子(TNFa)作用下对其分泌基质蛋白及相关基因mRNA表达的影响。方法体外培 养的小鼠软骨细胞用25,50,100 ng/ml的hTNFa干预,不加人TNFa作为对照,通过RT-qPCR检测hTNFa对软骨细胞分泌基质 蛋白及相关基因mRNA表达的影响。结果hTNFa能降低软骨细胞分泌的n型胶原及刺激促n型胶原分泌的SOX9基因的表达; 对基质可提高基质酶MMP~9,MMP43,ADAMTS-4和ADAMTS-5基因的表达,提高炎性因子IL4a,TGFp,并增加凋亡基因BAX, caspase3的表达。结论hTNFa通过不同途径影响软骨细胞及基质相关基因的表达,从而促进了关节软骨的降解。     

从Wnt/β-catenin信号通路探讨透骨消痛胶囊对关节软骨的保护作用

目的:从Wnt/β-catenin信号通路观察透骨消痛胶囊对大鼠膝骨关节炎关节软骨的保护作用。方法:60只健康清洁级2月龄雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组和透骨消痛胶囊组,每组20只。模型对照组和透骨消痛胶囊组采用质4%木瓜蛋白酶双膝关节腔注射,成功复制骨关节炎模型后,透骨消痛胶囊组给予透骨消痛胶囊287.5 mg·kg~(-1),正常对照组和模型对照组给予相同剂量的生理盐水。给药2个月后,采用Western blot法观察各组关节软骨中含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)、Wnt-4、β-catenin和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组ADAMTS-5、Wnt 4、β-catenin和MMP-13表达升高(P0.05);与模型对照组比较,透骨消痛胶囊组ADAMTS-5、Wnt 4、β-catenin和MMP-13表达降低(P0.05)。结论:透骨消痛胶囊对关节软骨的保护作用与其降低Wnt/β-catenin信号通路表达相关。     

妊娠糖尿病患者骨代谢标志物水平分析

目的 探讨妊娠糖尿病患者血清N端-骨钙素、总I型胶原氨基端延长肽、β-胶原特殊序列、25-羟基维生素D和甲状旁 腺激素水平的变化。方法 采用病例对照研究,选取妊娠糖尿病患者（GDM组）与同孕周糖耐量正常的孕妇（NGT组）各50 例,测定N端-骨钙素、总I型胶原氨基端延长肽、β-胶原特殊序列、25-羟基维生素D和甲状旁腺激素水平,比较两组人群临床资料和骨代谢标志物水平的差异并进行统计学分析。结果 GDM组孕妇的血清总I型胶原氨基端延长肽为（47. 87 ±34. 84) μg /L,明显高于NGT组的（35.48±10.61)| μg /L (P=0.018),血清β-胶原特殊序列为（0. 226 ±0. 095 ) μg /L ,明显高于NGT组 的（0. 193 ± 0. 054) μg /L（P = 0. 038),血清 N 端-骨钙素为（9. 82 ± 4. 74) μg/L,明显高于 NGT 组的（7. 74 ± 1. 92) μ g/L( P = 0.005。25-羟基维生素D和甲状旁腺激素水平两组间差异无统计学意义。结论 GDM组患者的骨代谢状态主要表现为骨合成代谢和骨吸收代谢均有升高,同时骨转换率也明显升高,尚未发现维生素D和甲状旁腺激素水平与糖耐量正常的孕妇之间有明显差异。     

骨质疏松与I型胶原的代谢

型胶原的代谢１１　Ｉ型胶原的合成　Ｉ型胶原基因在成骨细胞内转录、剪接成前α链ｍＲＮＡ,转译出前α肽链,三条前α肽链组成前胶原。前胶原Ｎ端、Ｃ端的多余肽链被切下,为ＰＩＮＰ（Ｉ型胶原前胶原氨端肽原）和ＰＩＣＰ,进入血液,余下部分成为原胶原。原胶原被分泌到细胞外,相互聚集形成排列规律紧密的胶原纤维。各分子间逐渐形成共价键连接,成为成熟的胶原纤维［１,２］。１２　Ｉ型胶原的降解破骨细胞分泌一组Ｉ型胶原水解酶,水解Ｉ型胶原,释放出Ｉ型胶原羧端交联肽原（ＩＣＴＰ,含三条肽链各一部分）,及其他肽段,进入…     

肾络宁对IgA肾病大鼠肾间质损害影响的实验研究

目的:探讨中药复方肾络宁对IgAN大鼠肾间质病变的影响.方法:通过口服并定时尾静脉注射牛血清白蛋白后葡萄球菌肠毒素感染复制IgA肾病模型,同时给予肾络宁治疗,观察血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白定量、尿NAG酶的变化,利用原位分子杂交和免疫组织化学的方法,结合计算机病理图像分析,观察肾络宁对肾间质Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶(MMP-1)和组织型金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)基因及蛋白表达的影响.结果:(1)肾络宁组的血尿素氮、血肌酐、尿蛋白、尿NAG含量与模型组相比明显降低.(2)图像分析表明模型组肾间质Ⅲ型胶原、TIMP-1表达均较正常组增高,肾络宁组上述指标表达低于模型组;模型组MMP-1表达较正常组升高,肾络宁组较模型组升高更为明显.结论:肾络宁能改善肾功能,延缓IgAN模型大鼠肾间质纤维化的发生,这可能与其抑制肾间质Ⅲ型胶原、TIMP-1的表达及提高MMP-1表达有关.     

原发性骨质疏松症患者骨密度和骨代谢指标的对比研究

目的探讨骨密度（BMD）和骨代谢指标在原发性骨质疏松症的诊治过程中的临床意义.方法采用XR-36型双能X线骨密度仪和放射免疫方法,对252例中老年志愿者不同部位的BMD及血清骨钙素（BGP）、Ⅰ型前胶原氨基端前肽、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽的含量进行测定.结果①无论是对照组还是骨质疏松组（OP）,老年男性BMD均明显高于老年女性BMD,其差异具有非常显著性（P＜0.01）;②OP组的BGP值明显低于对照组,其差异具有显著性（P＜0.05）;OP组的血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽（PINP）值均明显低于对照组,而血清Ⅰ型胶原交联羧基末端肽（ICTP）值均明显高于对照组,其差异具有显著性（P＜0.05）.结论联合检测BGP、HNP和ICTP水平可直接反映骨胶原合成和降解状态,对于判断老年OP的进程以及指导OP的用药有着重要的意义.     

利用胶原构建皮肤组织工程支架的研究

目的利用胶原构建皮肤组织工程支架。方法用Na2S、弹性蛋白酶预处理胎牛皮得到胶原纤维；经蛋白酶M降解胶原纤维后，0．5mol／L醋酸溶液溶解得到酸溶性胶原；再用蛋白酶N处理上述酸溶性胶原，最终得到生物相容性良好的胶原溶液；将胶原溶液构建皮肤组织工程支架。通过SDS-PAGE试验，分析酸溶性胶原分子量及基本结构；用皮肤组织工程支架材料包覆大鼠创面，观察创面愈合情况，研究支架材料对大鼠创伤愈合的影响；在支架材料上种植成纤维细胞，观察细胞扩增情况，以及支架材料对细胞移植影响。结果通过特异性蛋白酶M处理得到的酸溶性胶原，显示典型的1型胶原SDS-PAGE图谱；构建的皮肤组织工程支架呈多孔海绵状，孔径为50～200μm；在支架材料上种植成纤维细胞扩增情况良好；用于修复大鼠创面，具有促进创面愈合作用。结论酸溶性胶原经蛋白酶N处理后，生物相容性良好，适合于皮肤组织工程支架的构建，并具有良好生物活性。     

骨关节炎骨赘发生过程中的分子表达特征

目的探讨Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型、Ⅹ型胶原以及氨基多糖等分子在骨关节炎骨赘发生过程中的表达特点。方法取全膝关节置换术中取下的原发性骨关节炎骨赘标本25例,男6例,女19例;平均年龄69.1岁。固定脱钙后制成石蜡切片,行HE和甲苯胺蓝染色了解基质含量、细胞数量和蛋白多糖的表达。采用S-P法进行Ⅰ型、Ⅱ型（Ⅱa和Ⅱb）、Ⅹ型胶原分子的免疫组化染色。结果根据骨赘中主要组织的细胞形态学和Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型、Ⅹ型胶原以及氨基多糖分子的表达特点,共获得五种主要不同类型的骨赘组织。Ⅰ型组织主要含有间充质细胞表达的Ⅰ型胶原;Ⅱ型组织内出现了前软骨细胞分化,并表达Ⅱa型胶原和蛋白多糖;Ⅲ型组织表达Ⅱb型胶原及多量蛋白多糖,同时也表达Ⅰ型和Ⅱa型胶原;Ⅳ型组织的软骨细胞呈明显的带状分布,表达丰富的Ⅱb型胶原和蛋白多糖,深层的肥大软骨细胞表达Ⅹ型胶原;Ⅴ型组织的成分与正常关节软骨接近,主要表达Ⅱb型胶原及丰富的氨基多糖分子。这五种组织可能分别代表骨赘发生过程中的间充质细胞期、前软骨细胞期、软骨细胞期、早期骨赘期和成熟骨赘期。结论在骨关节炎骨赘发生的不同阶段,Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型、Ⅹ型胶原分子以及氨基多糖分子存在特异的分化表达,据此可将骨赘的发生过程分期进行研究。     

骨关节炎早期的Ⅱ型胶原代谢产物

骨关节炎是以关节软骨渐进性破坏为特点的、普遍的致残性疾病。临床上需要一些早期即可以测量的、敏感的、特异性的标志物来诊断疾病。软骨的主要组成是Ⅱ型胶原,所以其合成和降解所产生的生物学标志物已成为研究重点。对关节滑液、血清、尿中的生物学标志物的检测可以早期诊断疾病、监测疾病的发展、了解机体对治疗药物的反应。Ⅱ型胶原合成的产物包括:Ⅱ型胶原C前肽、ⅡA型胶原N前肽。Ⅱ型胶原降解产物包括:Ⅱ型胶原C端肽、Ⅱ型胶原新抗原表位、Ⅱ型螺旋、单克隆抗体C2C结合肽段、可氰溴化的9.7肽段、Ⅱ型胶原-1和硝化的Ⅱ型胶原-1。本文仅对Ⅱ型胶原合成、降解所产生的生物学标志物与早期骨关节炎之间的关系加以阐述。     

lncRNA HOXA11-AS抑制骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡与基质降解的作用研究

目的研究长链非编码RNA(long-nocoding RNA,lncRNA)HOXA11-AS在骨关节炎(osteoarthritis,OA)的大鼠软骨细胞中的表达情况,及其对软骨细胞凋亡、基质降解以及核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路的影响。方法采用弗氏完全佐剂注射大鼠构建OA大鼠模型,造模后分离培养软骨细胞;小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术抑制软骨细胞中HOXA11-AS表达;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测转染siRNA不同时间后软骨细胞的活力;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测软骨细胞中HOXA11-AS及基质金属蛋白酶13(matrix metallo protein-13,MMP-13)、血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(a disintesrin and metalloprotease with thrombospondin type 5 motifs,ADAMTS-5)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)mRNA的表达情况;流式细胞术检测软骨细胞的凋亡情况;酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)检测软骨细胞上清液中Bcl-2相关X蛋白(Bcl 2-associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达情况;蛋白质印迹法(western blot)检测MMP-13、ADAMTS-5、CollagenⅡ、aggrecan和抗核因子κB抑制蛋白(anti-nuclear factor kappa B inhibitory protein,IκBα)、抗磷酸化核因子κB抑制蛋白(anti-phosphorylated nuclear factor kappa B inhibitory protein,p-IκBα)、抗核因子κB 65(nuclear factor kappa B,NF-κB 65)的表达,免疫荧光染色检测NF-κB在软骨细胞细胞核中的表达情况。结果与正常组大鼠软骨细胞相比,HOXA11-AS在OA大鼠软骨细胞中高表达;与NC siRNA组比较,HOXA11-AS siRNA组细胞活力显著下降,细胞凋亡率及促凋亡因子Bax、Caspase-3的表达水平显著升高,而抑凋亡因子Bcl-2的表达水平显著下降;同时,与NC siRNA组比较,HOXA11-AS siRNA组细胞collagenⅡ和aggrecan的基因和蛋白表达水平明显降低,MMP-13和ADAMTS-5基因及蛋白表达水平明显升高,IκBα蛋白表达水平显著下降而p-IκBα和NF-κB p65的表达水平显著增高,此外,NF-κB在HOXA11-AS siRNA组细胞核中明显表达。结论 lncRNA HOXA11-AS可以抑制骨关节炎大鼠软骨细胞的凋亡以及基质降解,并阻止NF-κB信号通路的激活。     

成都地区不同年龄城乡妇女维生素D和骨代谢指标及骨密度的状况分析

目的评价成都市不同年龄城乡女性居民血清25-羟基维生素D水平并计算维生素D缺乏和不足的患病率,计算各种骨转换指标的平均值,研究维生素D水平与骨转换指标的关系。方法选择2个城镇社区和2个农村社区,30~90岁健康妇女376例,采用酶联免疫法测定1,25-二羟基维生素D、25-羟基维生素D,化学发光免疫分析法测定骨碱性磷酸酶、胶原C端肽、N端骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶、甲状旁腺素、1型前胶原氨基,用双能X线吸收仪检测腰椎骨密度。结果 25-羟基维生素D平均值为17.2±0.7 ng/m L,N端骨钙素平均值为7.6±0.3 ng/m L,1型前胶原氨基端肽平均值为59.6±4.2 ng/m L,维生素D不足者患病率为:97.0%,缺乏者患病率为:76.86%。同时,25-羟基维生素D与胶原C端肽、抗酒石酸酸性磷酸酶呈负相关,1,25-二羟基维生素D与骨碱性磷酸酶呈正相关关系。50岁以后骨密度显著下降。结论成都市女性居民在冬季维生素D普遍不足,不良的生活方式及低维生素D的摄人应引起重视。     

腰椎间盘基质降解酶的研究

椎间盘基质大分子的变化可使其生物力学性能丧失,这种变化涉及到能使基质中的胶原和蛋白多糖发生改变的细胞外酶。作者以氚－Ⅰ型胶原为底物,对４１例手术治疗的腰椎间盘突出者的椎间盘组织及３４个正常尸检腰椎间盘组织作了胶原酶活力的测定,纤维环与髓核分别测定。用ＰＡＧＥ法以变性胶原为底物,光密度扫描峰值面积自动积分法对６个正常与１６个退变椎间盘作了中性蛋白酶相对含量的初步研究。结果显示,正常纤维环与髓核的胶原酶活力相似,仅含极微量的中性蛋白酶,退变椎间盘胶原酶与中性蛋白酶活性明显增强,尤其是退变髓核。破裂型椎间盘突出者的髓核胶原酶活力高于凸起型。提示基质降解酶在腰椎间盘退变过程中起重要作用,退变程度的差异是临床不同突出类型的生化基础。