电离辐射对小鼠腹水型S180细胞凋亡及小鼠生长的影响

电离辐射诱导细胞凋亡是目前肿瘤放射生物学研究的热点之一[1],但辐射诱导细胞凋亡的机理仍不十分清楚。本文作者通过研究Ｓ180荷瘤小鼠经电离辐射诱导肿瘤细胞凋亡,探讨电离辐射诱导细胞凋亡与照射剂量、照射方式、抑瘤作用及生存期之间的关系。一、材料和方法1材料设备:昆明小鼠(内蒙古大学动物实验中心),Ｓ180细胞(北京肿瘤基础研究所),直线加速器(北京ＢＧ4),流式细胞仪(美国ＢＤＦＡＣｓｃａｎ),透视电镜(日本Ｈ700)。2动物模型建立:取7～8ｄＳ180荷瘤鼠腹水液,按1∶4稀释,接种于鼠腹腔,每只0.2ｍｌ,相当于2×106个瘤细胞,制成腹水型荷…     

不同剂量X射线照射的细胞周期效应

电离辐射对细胞周期进程的影响是放射生物学研究的重要课题。多年来我室大量的研究工作证实 ,低剂量与高剂量照射对免疫系统的影响明显不同[1]。然而 ,不同剂量对细胞周期进程的影响是否符合上述规律尚有待证实。笔者将报道不同剂量X射线全身照射后小鼠胸腺细胞、脾细胞及骨髓细胞的细胞周期效应。一、材料和方法1 动物 :本校实验动物部饲养繁殖的昆明系小白鼠 ,雄性 ,体重 (2 0± 2 )g ,随机分组 ,每组 15只 ,每 3只小鼠的胸腺、脾或骨髓细胞混合为 1个样本以减少个体差异。2 照射条件 :采用Philips深部X射线治疗机照射动物。电压 2 0 0…     

PTC对2Gy全身照射小鼠辐射损伤的防护作用

较大剂量的电离辐射可直接分解水分子产生·ＯＨ,造成细胞ＤＮＡ、蛋白质和膜脂等大分子的氧化损伤,从而导致细胞凋亡。自由基清除剂和抗氧化剂能够预防这种氧化损伤而阻止细胞的凋亡[1-3]。为了进一步探讨辐射损伤的自由基作用机理和自由基清除剂的抗放作用,我们进行了以下实验研究。一、材料和方法1试剂和仪器:原儿茶醛缩氨基硫脲铜(Ⅱ)配合物(ＰＴＣ)由本室合成。60Ｃｏ放射源(第四军医大学钴源室)。ＤＧ3030化学发光光度计(南京华东电子管厂产品)。2实验动物及分组;ＢＡＢＬ/ｃ小鼠(第四军医大学实验动物中心购买),雄性,体重(20±10)ｇ,…     

富氢水对电离辐射引起胸腺细胞损伤的影响

目的 探讨富氢水对6 Gy照射小鼠胸腺细胞内活性氧水平、细胞凋亡及DNA损伤程度的影响。 方法 实验分为对照组、6 Gy照射组、6 Gy照射+富氢水组;对照组和6 Gy照射组小鼠照射前10 min灌胃正常饮用水0.5 ml,6 Gy照射+富氢水组小鼠灌富氢水0.5 ml,照射后连续灌胃,给予小鼠正常饮用水和富氢水7 d,于照射后4、7、15 d处死小鼠获取胸腺细胞。采用流式细胞术检测胸腺细胞内活性氧水平、凋亡细胞比例及磷酸化组蛋白H2AX（γ-H2AX）平均荧光强度。 结果 与对照组的小鼠比较,6 Gy照射组小鼠在照射后4、7、15 d胸腺细胞中的活性氧水平升高,早期凋亡细胞[AnnexinⅤ阳性、碘化丙啶（PI）阴性]和晚期凋亡细胞（AnnexinⅤ阳性、PI阳性）的细胞比例明显增加,γ-H2AX平均荧光强度增加。与6 Gy照射组小鼠相比,6 Gy照射+富氢水组小鼠的胸腺细胞中活性氧水平下降,早期凋亡和晚期凋亡的细胞比例降低,细胞内γ-H2AX平均荧光强度则是下降的,差异均具有统计学意义。 结论 富氢水可以有效减轻电离辐射引起的胸腺细胞损伤,为富氢水作为辐射损伤防护剂提供了实验依据。     

碱性单细胞凝胶电泳检测辐射诱发的外周血淋巴细胞DNA损伤

电离辐射往往通过ＤＮＡ损伤而诱发细胞突变和癌变。由Ｓｉｎｇｈ等改进和建立的碱性单细胞凝胶电泳试验(ＳＣＧＥ),是一种检测哺乳动物单细胞ＤＮＡ断裂的新技术[1,2]。作者应用ＳＣＧＥ检测了受γ射线照射后小鼠及从事Ｘ射线探伤工人的外周血淋巴细胞ＤＮＡ单链断裂(ＤＮＡｓｓｂ)的情况。一、材料和方法1实验动物及照射:雄性昆明系小鼠购自原苏州医学院动物部,6～7周龄,体重(20±2)ｇ。用60Ｃｏ外照射治疗机全身照射小鼠。球靶距70ｃｍ,吸收剂量0.5和5.0Ｇｙ,吸收剂量率为90.3ｃＧｙ·ｍｉｎ-1。2人群检测对象:选择从事Ｘ射线探伤的工人1…     

电离辐射对松果腺细胞功能的影响

目的研究电离辐射对松果腺细胞凋亡、cAMP和褪黑素(MLT)含量的变化规律及特点。方法采用流式细胞术检测松果腺细胞凋亡。采用放免分析法检测松果腺细胞中cAMP含量。采用高效液相色谱分析法检测松果腺细胞中MLT含量。结果小鼠受0．5～6Cy X射线全身照射12h，随剂量增加松果腺细胞凋亡百分率增加；照射后24h，随剂量增加松果腺细胞中cAMP含量降低。小鼠受1～6Cy照射后12h，随剂量增加松果腺细胞合成和分泌MLT功能减弱。结论高剂量电离辐射对松果腺细胞功能有抑制作用．     

低剂量辐射诱导胸腺细胞凋亡的适应性反应

低剂量电离辐射对机体的影响是当前国内外放射生物学界研究的重要内容。阐明低剂量电离辐射生物效应及其适应性反应 ,对放射生物学理论和辐射防护实践均具有重要意义。我室通过流行病学调查和大量的实验研究证实 ,低剂量辐射可增强免疫功能 [1],降低胸腺细胞凋亡 [2 ],具有与高剂量辐射迥然不同的细胞和分子机理[3 ]。低剂量辐射可诱导适应性反应 ,已得到确认[4]。在此基础上 ,我们进一步观察了低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞凋亡适应性反应的剂量、剂量率和时间效应 ,以阐明低剂量辐射诱导适应性反应的规律 ,为深入探讨其机理提供有意义的实验…     

Fas和Bcl-2在受照射小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系

目的　探讨Fas和Bcl 2蛋白在受大剂量60 Coγ射线照射后小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系。方法　小鼠全身一次性γ射线照射 ,吸收剂量分别为 0、6、9、12、15和 2 0Gy ,于照射后 3、6、12、2 4h、3、7、14和 2 8d活杀取材 ,免疫组化LSAB染色观察后进行定量分析。结果　照射后 6h ,Fas的表达呈强阳性 ,6～ 12Gy剂量范围内阳性表达更明显 ,而随时间递增表达逐渐减少 ,但无明显的剂量效应关系 ,7d后表达明显减弱。Bcl 2的表达于 6h几乎为阴性 ,在 <12Gy剂量组更为明显。至照射后 2 8d依然未恢复。 结论　在受大剂量照射小鼠脾淋巴细胞中Fas癌基因蛋白表达升高与细胞凋亡有较好相关关系 ,即Fas蛋白可能有促进凋亡的作用。而在相同剂量照射后 ,Bcl 2抑制凋亡的作用被减弱甚至消失。上述两种癌蛋白对受大剂量60 Coγ射线照射的小鼠脾淋巴细胞凋亡均具有重要调控作用     

大剂量γ射线照射后小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的病理形态学观察

目的　探讨大剂量60 Coγ射线照射后脾脏淋巴细胞的病理形态学改变。方法　小鼠经 6、9、12、15及 2 0Gyγ射线照射 ,于照后 8个不同时间点活杀取材进行光镜及电镜观察。 结果照射后脾淋巴细胞凋亡的发生高峰与照射剂量和照后时间有关 ,淋巴细胞数量显著减少。结论　照射后脾脏淋巴细胞凋亡的病理形态变化有明显的分期 ,而在不同剂量组中细胞的死亡方式是有区别的。     

养阴抗毒散对X射线辐射损伤小鼠巨噬细胞免疫活性的防护作用

已有研究表明[1 ] ,电离辐射可对白细胞与红细胞免疫功能造成严重损伤 ,养阴抗毒散作为一种纯中药制剂 ,对此种损伤有明确的保护作用。笔者在临床上用来减轻肿瘤患者放疗后的副反应 ,并取得了肯定的疗效。本研究旨在观察养阴抗毒散 (ＹＫＰ)对Ｘ射线照射小鼠的巨噬细胞免疫活性的防护作用 ,为基础研究与临床提供实验依据。一、材料和方法1 动物和分组 :健康雄性昆明种小鼠 6 0只 ,体重(2 3 5± 2 5 )ｇ ,周龄 6～ 8周 (二级动物 ,本校动物中心提供 )。随机分为 3组 ,每组 2 0只。正常对照组 (Ａ组 ) ;辐射对照组(Ｂ组 ) ,接受Ｘ射线照射前 …     

亚致死剂量γ射线照射后小鼠脾脏CD95阳性淋巴细胞变化规律的研究

观察γ射线照射后小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的变化规律与ＣＤ９５（Ｆａｓ）表达的关系。方法采用ＰＩ染色及双荧光流式细胞术研究不同剂量γ射线照射后不同时间，小鼠脾脏淋巴细胞凋亡及ＣＤ９５表达的规律。结果小鼠脾脏淋巴细胞对不同剂量照射的凋亡敏感性差异有显著性，４Ｇｙ照射后凋亡率最高（在２～６Ｇｙ之间观察），淋巴细胞表面Ｆａｓ的表达随照射后细胞凋亡率的变化而改变。结论脾脏淋巴细胞在辐射后表现出明显的Ｆａｓ介导的凋亡，Ｂ细胞较Ｔ细胞具有更高的辐射凋亡敏感性。     

亚致死剂量γ射线照射后小鼠脾脏CD95阳性淋巴细胞变…

目的 观察γ射线照射后小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的变化规律与ＣＤ９５（Ｆａｓ）表达的关系。方法 采用ＰＩ染色及双荧光流式细胞术研究了不同剂量γ射线照射后不同时间，小鼠脾脏淋巴细胞凋亡及ＣＤ９５表达的规律。结果 小鼠脾脏淋巴细胞地不同剂量照射的凋亡敏感性差异有显著性，４Ｇｙ照射后凋亡率最高（在２～６Ｇｙ之间观察），淋巴细胞表面Ｆａｓ的表达随照射后细胞凋亡率的变化而改变，结论脾脏淋巴细胞在辐射后表现阳明显的     

电离辐射对EL-4细胞凋亡与坏死的影响

目的 研究不同剂量电离辐射对EL－4细胞凋亡和细胞坏死的影响。方法 采用PI和Hoechst 33342双染、流式细胞术检测。结果 实验结果表明：给予50－200mGy低剂量照射后6h,EL－4细胞凋亡和坏死较对照组没有升高,而给予1．0－8．0Gy大剂量X射线照射后6h,细胞凋亡较对照组有明显升高,4．0Gy以上剂量,细胞坏死显著升高。结论 一定剂量的电离辐射不仅可以诱导凋亡的产生,而且可直接导致细胞坏死,即细胞的死亡模式与受照剂量有关。     

冠状动脉内照射预防PTCA术后再狭窄的进展

经皮冠状动脉 (简称冠脉 )腔内成形术 (ＰＴＣＡ)是治疗急性心肌梗死的一种常规而有效的方法。ＰＴＣＡ术后 1～ 4个月内 30 %～ 5 0 %的再狭窄是影响其疗效的主要原因[1] 。冠脉内照射可使再狭窄率降低 ,所以倍受关注[2 ,3 ] 。一、内照射的理论基础与实验研究ＰＴＣＡ术后导致血管内皮损伤 ,引起内皮细胞增生、淋巴细胞和单核细胞粘附 ,并刺激肌纤维出现异位增生。内照射使分裂期细胞内ＤＮＡ结构发生不可逆性破坏 ,因而抑制了增生。这种抗增生作用与照射剂量、时间和细胞所处的分裂阶段有关[4 ] 。Ｗｉｅｄｅｒｍａｎｎ等[5 7] 用192 Ｉ…     

中子及γ射线照射后小鼠肠免疫组织病理特点及淋巴细胞凋亡研究

目的 比较研究中子及γ射线照射对肠黏膜免疫组织损伤的病理特点及淋巴细胞凋亡情况。方法 经不同剂量的中子及γ射线照射350只BALB／c小鼠，于照后6h、12h、1～5d、7d、14d、21d及28d活杀取全肠，经光镜、电镜和原位末端标记等技术研究肠黏膜免疫组织的病理变化及淋巴细胞死亡方式。结果 中子照后肠免疫组织的基本病变为淋巴细胞变性、凋亡、坏死及数目减少，中子4．0及5．5y照射后未见明显再生，2．5Gy组则见再生修复现象，且呈剂量相关性；中子2．5Gy照后6h～3d，黏膜内及下淋巴组织中淋巴细胞逐渐减少，核固缩及大量核碎片形成，3d时淋巴组织中仅残留间质细胞，隐窝细胞见再生。5d时淋巴组织始见增生，至照后21d基本恢复至正常水平。γ射线照射后基本病变与中子类似，5．5Gy组见再生恢复，而12．0Gy组未见明显再生。原位末端标记显示各照射组于照射后6h肠黏膜免疫组织中凋亡的淋巴细胞明显增加，尤以中子4．0Gy和了射线12．0Gy更为明显。结论 2．5～5．5Gy中子及5．5～12．OGyγ射线照射均可致明显肠壁淋巴组织损伤，且在相同剂量下，中子对免疫组织损伤重于γ射线；免疫组织损伤重，且恢复慢；4．0Gy以上中子照射多见淋巴细胞坏死，而5．5～12．0Gyγ射线则以凋亡为主。     

淫羊藿甙对辐照小鼠的抗凋亡作用与半胱天冬酶活性的相关性研究

目的：观察淫羊藿甙抗辐射损伤作用，并探讨其抗辐射损伤机制。方法：KM种小鼠于60Coγ射线照射前48，24h及照后即刻灌胃淫羊藿甙，剂量分别为1，10，100mg/kg，照射剂量8．0Gy，观察受照射小鼠30d存活率和死亡动物平均存活时间。另外观察淫羊藿甙对l锄种小鼠受5．5Gy 60Coγ射线照射后小鼠胸腺、脾脏和骨髓细胞凋亡率、半胱天冬酶-3(caspase-3)和半胱天冬酶-8(caspase-8))活性的影响。结果：中剂量淫羊藿甙组30d存活率较照射对照组提高50％，死亡动物平均存活时间延长2．5d。照射对照组胸腺、脾脏和骨髓细胞在照射后6，12和24h均有凋亡。胸腺和脾脏于照射后12h凋亡率最高，骨髓于照后6h凋亡率最高。照射24h后，3种组织的凋亡串均明显降低。中剂量淫羊藿甙可降低照射后6，12h胸腺、脾脏、骨髓细胞凋亡率和照射后24h脾脏、骨髓细胞凋亡率，抑制照射后6hcaspase-3活性，对半胱天冬酶-8活性无影响。结论：淫羊藿甙具有抗辐射损伤作用，其机制之一可能是通过抑制caspase-3活性降低细胞凋亡率。     

低剂量X射线照射选择性诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应

目的 研究低剂量X射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应。方法 昆明雄性小鼠接受诱导剂量(D1，75mGy)和攻击剂量(D2，1．0，2．0和3．0Gy)全身照射。通过不连续泛影葡胺密度梯度离心法分离小鼠睾丸组织不同种类生精细胞，流式细胞术(FCM)检测各类生精细胞凋亡。结果 当D2照射前6h给予D1预照射时明显减轻D2对睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的损伤作用，而对精子细胞和精子影响不明显。当D1和D2间隔3，6，12和24h，发现D2剂量较小(1．0和2．0Gy)时，精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少出现较早、较明显，而且持续时间较长；反之，D2剂量较大(3．0Gy)时，精原细胞和精母细胞凋亡百分率变化不明显。结论 低剂量X射线照射可以选择性诱导小鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应，并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关。     

LACA小鼠骨髓辐射损伤后干细胞因子受体表达的免疫 …

目的 至今，尚未见到采用免疫经技术研究骨髓辐射损伤后干细胞因子受体表达及其在造血重建中的意义。方法 经＾６０Ｃｏγ射线全身照射ＬＡＣＡ小鼠，于照射后４周内分批活杀动物，采用光镜、电镜及ＬＳＡＢ免疫组化方法，研究了辐射诱导的造血细胞凋亡及Ｃ－ｋｉｔ的表达及意义。结果 全身照射ＬＡＣＡ小鼠时，５．５Ｇｙ为其亚致死剂量，此剂量照射小鼠可导致外周血白细胞及骨髓有核数减少，骨髓明显损伤及损伤后重建现象；在照     

大剂量γ射线照射后小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的病理 …

目的 探讨大剂量＾６０Ｃｏγ射线照射后脾脏淋巴细胞的病理形态学改变。方法 小鼠经６、９、１２、１５及２０Ｇｙγ射线照射,于照后８个不同时间点活杀取材进行光镜及电镜观察。结果 照射后林巴细胞凋亡的发生高峰与照射剂量和照后时间有关,淋巴细胞数量显著减少。结论 照射后脾脏淋巴细胞凋亡的病理形态变化有明显的分期,而在不同剂量组中细胞的死亡方式是有区别的。     

DNA损伤在电离辐射诱导凋亡中的重要性:重度联合免疫缺陷突变和DNA倍体对小鼠淋巴细胞系辐射敏感性的影响

目的 :通过研究重度联合免疫缺陷 ( scid)突变和 DNA倍体对电离辐射诱导小鼠淋巴细胞系凋亡敏感性的影响 ,判定 DNA损伤是否是凋亡的关键始动因子。方法 :采用γ射线 ( 1 3 7　 Cs,剂量率约为 0 .9Gy/ min)或DNA相关的 1 2 5 　 I衰变 (细胞在培养基内培育约 2 4小时 ,其中含 5 0～ 10 0 Bq/ m l的 1 2 5 　 I-碘代脱氧尿苷 )比较野生型及 scid纯合或杂合突变小鼠前 B和前 T细胞系在照射后致死的敏感性和凋亡产生速率。用小鼠前 T细胞系假 2倍体和倍体克隆研究 DNA倍体的不同对细胞的辐射敏感性和凋亡的影响。应用荧光显微镜观察凋…