戊型肝炎的实验室诊断指标与临床应用

戊型肝炎病毒(HEV)感染引起的戊型肝炎已成为我国最主要的急性病毒性肝炎之一。近年来HEV各检测指标, 包括HEV RNA、HEV抗原、抗-HEV IgM及抗HEV-IgG等指标, 在方法学上有了新进展及在实验室诊断中有了新发现。急性戊型肝炎患者、慢性戊型肝炎患者、肝外临床症状患者诊断以及病原体携带者、相关职业体检人员检测等不同人群中应进行多指标联合诊断。不同人群各指标检测结果有各自的临床意义。     

HEVⅣ型ORF2编码蛋白N-端合成肽的抗原性检测

目的　检测戊型肝炎病毒 (HEV)Ⅳ型开放阅读框架 2 (ORF2 )编码蛋白N 端表位的抗原性 ,寻找良好的抗原肽 ,以便用于HEV抗体测。方法　根据HEVORF2编码蛋白N 端中含有的抗原表位 ,从HEV中国株蛋白的氨基酸序列中选取 2 5～ 38位序列氨基酸 ,用固相化学合成法合成抗原肽 ,并用ELISA检测抗原性。结果　HEVⅣORF2编码蛋白N 端氨基酸顺序为2 5～ 38的抗原肽与急性期戊型肝炎病人血清有较高的反应性 ,与Genelab诊断试剂盒的符合率达 93.8%。结论　为提高HEV抗体的检出率 ,在包被抗原中应含有HEVⅣ型ORF2编码蛋白N 端的抗原肽     

急性戊型肝炎患者血清病毒抗原检测的临床意义

目的：探讨戊型肝炎抗原诊断试剂在临床诊断戊型肝炎病毒感染中的作用。方法：应用酶联免疫吸附试验方法检测戊型肝炎病毒抗原（HEV-Ag）试剂,对387例急性戊型肝炎患者血清标本进行检测,同时进行HEV RNA、抗HEV-IgM、抗HEV-IgG检测。结果：387例急性戊型肝炎患者血清HEV-Ag 140例（36.18%）阳性;单纯抗HEV-IgM阳性组的HEV-Ag阳性率最高;12例患者早期血清HEV-Ag阳性,随访过程中抗HEV-IgM与抗HEV-IgG阳转。结论：通过HEV-Ag检测,可以提高戊型肝炎病毒感染的诊断水平。     

散发性戊型肝炎的临床和血清学特征

目的　探讨散发性戊型肝炎的临床和血清学特征。方法　对 117例散发性戊型肝炎的临床表现、血清学检查进行回顾性分析。结果　 6 0岁以上组肝功能TBil、DBil、GGT与 6 0岁以下组相比较 ,存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;117例单纯戊型感染 94例 (80 .3% ) ,甲、乙、戊型重叠感染 3例 (2 .6 % ) ,甲、戊型合并感染 10例 (8.5 % ) ,乙、丙、戊型重叠感染 1例 (0 .8% ) ,乙、丁、戊型重叠感染 2例 (1.7% ) ,乙、戊型重叠感染 7例 (6 .0 % )。 117例血清抗 HEV阳性 113例 ,其中 113例血清HEV RNA阳性 4 2例 (37.2 % ) ,余 4例血清抗 HEV阴性而血清HEV RNA阳性 (19例已知肝炎病毒标志物均阴性的急性肝炎患者 ,血清HEV RNA阳性 4例 (2 1.1% )。结论　散发性戊型肝炎老年患者黄疸发生率高 ,且淤胆现象多见 ;目前临床检测的抗 HEV是诊断戊型肝炎的主要方法 ,感染HEVⅣ型或HEV变异株的戊型肝炎 ,可用RT PCR方法检测HEV RNA确诊。     

应用蛋白芯片技术筛选戊型肝炎病毒优势表位抗原

目的筛选戊型肝炎病毒优势表位抗原以便研发新型戊型肝炎诊断试剂。方法通过计算机辅助软件分析,利用改构的高效表达载体表达了HEV1型与HEV4型ORF2和OBF3的17种表位抗原,利用蛋白芯片技术平台筛选优势表位抗原。结果在所获得的17种表位抗原中筛选到4种可以作为研发新型戊型肝炎诊断试剂候选抗原的优势表位抗原。结论利用蛋白芯片技术快速准确地筛选到4种可用于研发新型戊型肝炎诊断试剂的候选优势表位抗原。     

实时荧光逆转录PCR检测戊型肝炎病毒RNA的临床应用

目的 探讨实时荧光逆转录(RT)-PCR方法检测急性戊型肝炎患者血清戊型肝炎病毒(HEV)RNA的意义.方法 采用实时荧光RT-PCR方法,对HEV ORF3基因保守区进行扩增和检测.收集北京佑安医院住院和门诊434例急性戊型肝炎患者血清;甲型肝炎患者40例、乙型肝炎患者100例、健康献血员110名作为对照组;提取HEV RNA进行荧光RT-PCR检测.结果 434例急性戊型肝炎患者血清中232例(53.5%)为HEV RNA阳性.对照组血清HEV RNA检测均为阴性.与血清抗-HEV IgM检测比较,434例急性戊型肝炎患者HEV RNA检测的总符合率为67.1%,两种检测方法差异有统计学意义(Kappa=0.308,P=0.000).5例患者的首份血清检测为HEV RNA阳性,但抗-HEV IgM为阴性,系列追踪检测,相继出现抗-HEV IgM阳性.急性戊型肝炎患者的血清HEVRNA的检出多在发病的2～10 d内.结论 荧光RT-PCR方法有较高的特异性,应用实时荧光RT-PCR方法能对Ⅰ和Ⅳ戊型肝炎病毒感染的患者血清中的RNA进行定性检测.在临床使用可以提高对HEV早期诊断的水平.     

戊型肝炎IgM抗体诊断试剂的临床应用评价

目的评价2种戊型肝炎病毒(HEV)IgM抗体诊断试剂的可靠性。方法用捕获法试剂(E2 IgM)和间接法试剂(GL IgM)对349例临床诊断为急性戊型肝炎及急性非甲~戊型肝炎患者的血清进行HEV IgM检测。同时结合其HEV RNA检测结果作为戊型肝炎的确认标准,以此为依据对2种HEV IgM诊断试剂和以往常用的ELISA试剂的可靠性进行评估。同时检测69例散发性急性肝炎患者血清的HEV IgM及甲型肝炎病毒(HAV)IgM,分析HAV IgM对HEV IgM检测可能造成的干扰。结果E2 IgM试剂的敏感性为98.2%,特异性为100.0%;GL IgM试剂的敏感性仅为60.0%,特异性为91.7%;而传统诊断方法的敏感性为77.9%,特异性仅66.0%,三者差异有统计学意义(P<0.05)。E2 IgM、GL IgM及传统诊断方法的总符合率分别为99.1%、85.5%和70.5%。HAV IgM有可能导致GL IgM试剂的假阳性。结论E2 IgM试剂是一种良好的戊型肝炎急性诊断试剂,在临床应用中优于GL IgM试剂和传统诊断方法。     

重组蛋白与合成肽抗原对戊型肝炎的诊断价值比较

目的　比较重组蛋白与合成肽抗原建立的酶联免疫吸附试验 (ELISA)在戊型肝炎实验室诊断中的应用价值。方法　选择戊型肝炎病毒第二开放读码框架 (ORF2 ) ,分别采用重组蛋白及合成肽抗原 ,建立酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,同时检测 97份戊型肝炎急性期患者 ,4 7份甲、乙、丙、丁、庚型肝炎患者及 12 0份健康献血者的血清抗 HEV。结果　重组蛋白ELISA、合成肽ELISA与Genelabs重组抗原ELISA试剂盒检测结果的总符合率分别为 96 .9%和 92 % ;重组蛋白ELISA与合成肽ELISA的一致率为 91% ;合成肽ELISA对重组蛋白ELISA的灵敏度为 90 % ,特异度为 10 0 %。结论　戊型肝炎病毒相同表位的重组蛋白和合成肽抗原用于抗 HEVELISA检测有较好的一致性。     

戊型肝炎病毒IgA抗体的研究进展

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的经消化道传播的急性传染病,发病率逐年升高,目前尚无特效治疗方法,也无特异性被动和主动免疫制剂可供预防。在急性戊型肝炎患者中,血液或粪便中HEV RNA持续时间较短,操作复杂、成本高,不能在临床广泛开展。HE的诊断主要依靠血清HEV抗体检测,抗-HEV IgM是HE急性感染的诊断指标之一,类风湿因子等的存在会影响血清IgM的检测,造成假阳性。抗-HEV IgG一般在发病2周后可检测到,可持续1年甚至数年,因此抗-HEV IgG不能鉴别患者为HEV急性感染还是既往感染。有研究表明抗-HEVIgA是HE的急性指标,可代替或辅助现有IgM诊断试剂用于HE诊断,既增加了检测特异性,又能有效减少漏诊。     

戊型肝炎IgM抗体诊断试剂的临床应用评价

目的评价2种戊型肝炎病毒（HEV）IgM抗体诊断试剂的可靠性。方法用捕获法试剂（E2 IgM）和间接法试剂（GL IgM）对349例临床诊断为急性戊型肝炎及急性非甲~戊型肝炎患者的血清进行HEV IgM检测。同时结合其HEV RNA检测结果作为戊型肝炎的确认标准,以此为依据对2种HEV IgM诊断试剂和以往常用的ELISA试剂的可靠性进行评估。同时检测69例散发性急性肝炎患者血清的HEV IgM及甲型肝炎病毒（HAV）IgM,分析HAV IgM对HEV IgM检测可能造成的干扰。结果E2 IgM试剂的敏感性为98.2%,特异性为100.0%;GL IgM试剂的敏感性仅为60.0%,特异性为91.7%;而传统诊断方法的敏感性为77.9%,特异性仅66.0%,三者差异有统计学意义（P〈0.05）。E2 IgM、GL IgM及传统诊断方法的总符合率分别为99.1%、85.5%和70.5%。HAV IgM有可能导致GL IgM试剂的假阳性。结论E2 IgM试剂是一种良好的戊型肝炎急性诊断试剂,在临床应用中优于GL IgM试剂和传统诊断方法。     

中国戊型病毒性肝炎院内筛查管理流程专家共识(2023年版)

戊型病毒性肝炎(简称戊型肝炎)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的一种急慢性传染病。全球每年约发生2 000万例HEV感染, 其中约有330万例戊型肝炎, 7万例与HEV感染相关的死亡病例。过去10年, 我们对戊型肝炎的认识发生了巨大变化, 我国仍有大部分HEV感染者, 尤其是重症及慢性戊型肝炎患者被漏诊或误诊。根据世界卫生组织提出的到2030年消除病毒性肝炎这一公共卫生危害的目标, 并基于医疗机构是目前我国诊断和治疗HEV的主要场所这一事实, 中国戊型肝炎研究协助组(CCSHE)、中国医师协会感染科医师分会和国家感染性疾病临床医学研究中心共同制订了该共识, 希望促进医疗机构管理、疾病预防控制、临床、检验、感染控制的多学科、多部门联合, 有效筛查和诊断HEV感染人群;帮助戊型肝炎患者及时会诊和转诊, 优化患者随访及复诊管理流程, 提供正确的治疗方法。同时加强非感染、非肝病专科医师对戊型肝炎的认知, 以便在日常医疗活动中及时发现HEV感染者。     

039 HEV抗体检测方法的比较

对戊型肝炎病毒(HEV)进行血清学检测,早期的血清学检测局限于免疫电镜方法,特异性虽好但较为繁琐,而用HEV重组抗原进行检测,结果极佳.现在许多实验室所用的方法是用HEV不同的表达蛋白质作抗原来检测.有代表性的是NIH和GL两个实验室以表达在昆虫细胞内的分子量为55kD的ORF2外壳蛋白和ORF2或ORF3表达在E.Coli中的GST融合蛋白作抗原,用ELISA法检测抗HEVIgM和IgG.     

戊型肝炎病毒研究进展

戊型肝炎病毒(HEV)属嵌状病毒科,人HEV是HEV样病毒属,为无外膜的正链RNA病毒。病毒颗粒存在于HEV感染者的粪便和胆汁中。哺乳动物HEV分为4种基因型,但只有1种血清型。HEV检测常采用酶联免疫吸附试验检测HEV抗体(包括IgM和IgG抗体)和HEV抗原,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HEV-RNA。采用先进的RT-PCR可在猪、鹿、鸡等动物体内检测到HEV-RNA。本文综述了HEV的生物学和分子生物学特性、检测方法、感染人和动物的情况及其疫苗研制情况。     

四种国产戊型肝炎病毒IgM抗体检测试剂的比较

戊型肝炎是经肠道传播的一种急性病毒性肝炎，其爆发性流行和散播性传播都时有发生。目前对HEV感染的血清学诊断主要依据HEV-lgM抗体和HEV—lgG抗体的测定来判断，同时检测HEV—lgM抗体和HEV—lgG抗体可大大减少HEV感染的漏检率，而HEV—lgM作为早期诊断和鉴别意义更大，为此我们对市场上常见的四种国产HEV—lgM试剂作了以下比较试验，今报道如下：     

戊型肝炎病毒实验室诊断技术的现状

戊型肝炎与甲型肝炎相似,是一种经肠道传播的自限性疾病.戊型肝炎病毒(HEV)是引起戊型肝炎的病原体.HEV主要通过粪-口途径传播.HEV主要分为4个基因型,1和2型主要在人群中传播,可引起流行和散发的戊型肝炎;3和4型可在人群与动物之间传播,是人畜共患性疾病,主要引起散发性的戊型肝炎.HEV是一种直径为27～34 nm的无包膜单股正链RNA病毒,基因组全长约7 500 bp,其5'端和3'端各含有一个非编码区,在5'和3'非编码区之间含有3个开放读码框架(ORF),依次为ORF1、ORF2和ORF3,ORF1编码病毒复制所需要的酶类,ORF2编码衣壳蛋白,可诱导机体产生保护性免疫反应;ORF3功能尚不清楚,但含有可被患者血清抗体识别的抗原表位[1-3].     

DNA微列阵技术检测戊型肝炎病毒方法的建立及初步应用

目的建立DNA微列阵技术检测戊型肝炎病毒方法,进而探讨该方法用于检测临床标本的可行性。方法通过生物医学数据库戊型肝炎病毒基因进行检索和筛选,应用分子生物学软件,进行序列分析、引物及探针设计,并进行验证,建立了戊型肝炎病毒DNA微列阵技术检测方法。结果试验所设计的探针仅与HEV的PCR产物杂交呈阳性,与乙肝、丙肝等对照病毒的PCR产物杂交呈阴性。敏感性试验显示,该方法比同巢式PCR方法检测戊型肝炎病毒敏感度要高,用该方法检测了长春地区50份疑似HEV临床病料,38份阳性;而用巢式PCR法扩增HEV ORF1基因确诊为阳性的只有35份。结论利用DNA微列阵技术检测戊型肝炎病毒方法,特异性和敏感性强,可作为HEV临床标本检测方法。     

不同人群戊型肝炎病毒感染情况调查

戊型肝炎(HE)被人们认识仅有十余年历史。由于缺乏特异的血清学诊断方法,有关该病的诊断和流行病学调查多用“排除法”,但其影响准确性。最近,我们采用 ELISA 法,对西安地区部分献血员以及肝功能不正常的患者做了血清抗—HEV 检测,以了解 HEV 在     

无偿献血者戊型肝炎病毒现症感染情况调查

目的 对武汉地区无偿献血人群进行戊型肝炎病毒核酸筛查,调查无偿献血者戊型肝炎病毒现症感染情况,为完善血液筛查策略提供依据。方法 对2020年11～12月武汉地区经常规筛查合格的献血者血液标本进行HEV核酸检测,对筛查结果进行分析,并对检测结果呈重复反应性的献血者进行追踪随访以明确其感染状态。结果 2020年11～12月共收集17 409份献血者标本,对其中经常规筛查合格的17 322份标本进行了HEV核酸检测,检出HEV RNA反应性1例,追踪随访结果显示该献血者献血时处于HEV血清学窗口期。本地区无偿献血人群的戊型肝炎病毒现症感染率为0.058‰(1/17 322)。结论 武汉地区无偿献血人群的戊型肝炎病毒现症感染率相对较低,通过对献血者采取选择性筛查的策略,可进一步降低输血感染戊肝的潜在风险。     

柳州地区合格献血者戊型肝炎感染情况调查

目的 调查柳州地区无偿献血者戊型肝炎病毒感染情况.方法 对2019年10～11月柳州地区合格献血者血液标本进行ELISA法戊肝病毒抗原(HEV-Ag)、抗体(HEV-IgG和HEV-IgM)检测;对HEV-Ag阳性和(或)HEV-IgM阳性者进行HEV RNA检测;对各检测结果 进行统计分析.结果 本次检测5 751人...     

树状DNA杂交技术在戊型肝炎病毒检测中的应用

目的　研究树状DNA杂交 (DDH)技术在戊型肝炎病毒 (HEV)检测中的应用。方法　以逆转录巢式PCR法 (RT nPCR)检测筛选HEV阳性标本 ,逆转录产物进行DDH。研究DDH技术检测HEV病毒的敏感性和通用性。结果　 2 5份HEV阳性标本的逆转录产物DDH检测均显阳性 ,HEV 5个不同基因型和亚型逆转录产物DDH检测也呈阳性。结论　RT DDH检测HEV病毒有较好的敏感性和通用性