蝙蝠葛酚性碱对胃癌细胞SGC-7901增殖作用的实验研究

目的测定蝙蝠葛酚性碱对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。方法 通过MTT法和台盼兰法,观察蝙蝠葛酚性碱在不同浓度,不同时间条件下,对胃癌细胞SGC-7901增殖作用的影响。结果 蝙蝠葛酚性碱能明显抑制SGC-7901细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖关系,随浓度增大和作用时间延长其抑制率呈上升趋势。结论 蝙蝠葛酚性碱对胃癌可能具有一定治疗作用。     

蝙蝠葛碱在人乳腺癌MCF-7细胞对5氟尿嘧啶敏感性的研究

目的 探讨人乳腺癌MCF-7细胞受蝙蝠葛碱(Dauricine,Dau)作用后,对5氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的影响。方法 分别以终浓度为2.5 μg/mL的蝙蝠葛碱、50 μg/mL的5-FU、2.5 μg/mL的蝙蝠葛碱和50 μg/mL的5-FU作用于人乳腺癌细胞MCF-7,运用MTT法检测细胞增殖活性,Transwell实验分析细胞的迁移,DAPI染色检测细胞的凋亡,Western blot法检测cyclinD1和Bcl-2蛋白的表达。结果 MTT实验结果显示联合使用阈下浓度的蝙蝠葛碱增强了5-FU对细胞增殖的抑制;Transwell实验表明联合应用阈下浓度的蝙蝠葛碱进一步加剧了5-FU对细胞迁移的抑制;DAPI染色说明联合应用阈下剂量的蝙蝠葛碱加强了5-FU对细胞凋亡的诱导,Western blot实验表明联合应用阈下浓度的蝙蝠葛碱进一步抑制了cyclinD1和Bcl-2蛋白的表达。结论 蝙蝠葛碱可有效增强人乳腺癌MCF-7细胞对5-FU的敏感性。     

吴茱萸碱逆转人肺癌细胞株Ａ５４９／ＤＤＰ耐药机理的实验研究

目的　观察吴茱萸碱逆转人肺腺癌耐药株Ａ５４９／ＤＤＰ细胞耐药性的效果并探讨其与阻断ＮＦ κＢ信号传导通路的相关性。方法　采用ＭＴＴ法检测单用吴茱萸碱、顺铂（ＤＤＰ）以及两药联用在不同时间对Ａ５４９／ＤＤＰ细胞的增殖影响,计算ＩＣ５０及耐药逆转倍数。流式细胞仪检测各组细胞的凋亡情况。ＲＴ ＰＣＲ检测各组ＭＤＲ１、ＮＦ κＢ、Ｂｃｌ-２、ＭＭＰ-２和ＶＥＧＦ的ｍＲＮＡ表达。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测各组细胞的ｐＩκＢ-α、pＩＫＫα蛋白表达水平。结果　吴茱萸碱０.１２５ｍｇ／Ｌ、０.２５ｍｇ／Ｌ针对Ａ５４９／ＤＤＰ细胞对ＤＤＰ的耐药逆转倍数分别为３.６６８和１1.４８。ＲＴ ＰＣＲ显示在吴茱萸碱作用下检测基因的ｍＲＮＡ表达随着吴茱萸碱浓度的增加和时间的延长其表达逐渐下降。当吴茱萸碱与ＤＤＰ联用时,可明显提高Ａ５４９／ＤＤＰ细胞对化疗药的敏感性,凋亡细胞显著增加（Ｐ＜０.０５）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法结果提示Ａ５４９／ＤＤＰ细胞中ｐＩκＢ-α的表达水平随着吴茱萸碱作用时间的延长逐渐下降,ｐＩＫＫα表达则无显著变化。结论　吴茱萸碱可以通过抑制ＩκＢ-α的磷酸化阻断ＮＦ-κＢ信号通路,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加耐药细胞对ＤＤＰ的敏感性。     

肝癌耐药细胞的诱导及其生物学特性的研究

目的诱导肝癌耐药细胞。研究其生物学特性。方法用“剂量递增筛选法”诱导肝癌耐药细胞；斑点杂交法等研究ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的表达及ＧＳＴ的活性。结果经过近９个月的连续培养和１３７次的传代，诱导出耐ＡＤＲ２８倍的ＢＥＬ┐７４０２／ＡＤＲ细胞，并对５┐ＦＵ及ＶＣＲ亦有不同的耐药性。生物学特性研究结果发现，ＢＥＬ┐７４０２／ＡＤＲ细胞ＧＳＴ含量，较另两种细胞的ＧＳＴ明显增高（Ｐ＜０．０１）。ＢＥＬ┐７４０２／ＡＤＲ细胞内的ＭＤＲ１ｍＲＮＡ表达，与ＢＥＬ┐７４０２相比具有统计学差异（Ｐ＜０．０５）。结论诱导的肝癌耐药细胞ＢＥＬ┐７４０２／ＡＤＲ具有明显的多药耐药性     

耐顺铂人肺腺癌细胞系A549DDP的建立及耐药机制

采用递增顺铂（ＤＤＰ）浓度的方法，体外连续培养建成一株耐ＤＤＰ的人肺腺癌细胞系Ａ（５４９）ＤＤＰ，耐ＤＤＰ为亲代Ａ（５４９）的２４．４倍。在无ＤＤＰ的培养基中培养５月余，其耐药性仍稳定。Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞内谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平显著高于亲代细胞（Ｐ＜０．０１）。ＢＳＯ耗竭细胞内ＧＳＨ后，Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞对ＤＤＰ敏感性增加５倍，ＢＳＯ对亲代Ａ（５４９）细胞无增敏作用，Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞ＧＳＴ酶同功酶ＧＳＴ—π含量较Ａ（５４９）高１．６倍，却无ＧＳＴ基因扩增，表明ＧＳＨ／ＧＳＴ解毒系统参与Ａ（５４９）ＤＤＰ耐药性的产生。实验结果亦示Ａ（５４９）ＤＤＰ与卡铂及氨甲喋呤间存在交叉耐药，而与易产生ＭＤＲ或ａｔＭＤＲ之ＡＤＭ、ＶＣＲ、ＶＰ－１６、ＶＭ－２６无交叉耐药，Ａ（５４９）细胞无Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）表达，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ研究Ａ（５４９）ＤＤＰ无ｍｄｒｌＴｏｐｏⅡ基因扩增，提示Ａ（４５９）ＤＤＰ细胞系与ＭＤＲ及ａｔ－ＭＤＲ无交叉耐药。     

钙通道拮抗剂和钙调素拮抗剂对白血病耐药细胞的耐药基因和细胞内Ca~(2+)浓度的影响

目的：探讨白血病耐药细胞的发生机制与细胞内钙离子浓度的关系。方法：分别用Ｆｕｒａ２／Ａｍ方法测定细胞内游离钙浓度及ｄｏｔ杂交法测定细胞ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达。结果：发现ＣＡｓ（Ｖｅｒ或Ｄｉｌ）有降低肿瘤细胞内Ｃａ２＋浓度和降低ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达的作用，ＣａＭＡｓ虽无降低Ｃａ２＋浓度的作用，但可使ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达降低，从而降低了Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞的耐药性。结论：细胞内Ｃａ２＋浓度的变化可能与ＭＤＲ产生有一定关系；ＣＡｓ导致的Ｃａ２＋浓度的变化可能也是其逆转肿瘤细胞ＭＤＲ的机理之一，ＣＡｓ及ＣａＭＡｓ尚可影响耐药性肿瘤细胞的ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达     

维拉帕米抑制肝癌耐药细胞增殖的研究

目的探讨维拉帕米抑制肝癌耐药细胞增殖的机理。方法同位素掺入法研究细胞的增殖；荧光分光光度法测定细胞内抗癌药物浓度。结果单独应用ＶＰＭ对耐药肝癌细胞ＢＥＬ┐７４０２／ＡＤＲ有不同程度的抑制作用。而与ＡＤＲ合用，ＡＤＲ与对细胞增殖基本无影响的２．５μｇ／ｍｌ浓度的ＶＰＭ合用时，ＩＣ５０较单独用ＡＤＲ时明显降低（Ｐ＜０．０５）；而与５．０μｇ／ｍｌ的ＶＰＭ合用时，其ＩＣ４０较单独用ＡＤＲ降低更显著（Ｐ＜０．０１）。ＶＰＭ可显著增加细胞内的抗癌药浓度（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结论ＶＰＭ降低ＡＤＲ的ＩＣ５０、增加抗癌药的细胞毒性，可能与其拮抗ｐ┐１７０糖蛋白有关     

人体膀胱癌细胞对丝裂霉素耐药机制的研究

作者以对丝裂霉素分别敏感和耐药的人体膀胱癌细胞Ｊ８２和ＳＣａＢＥＲ进行对照，研究ＳＣａＢＥＲ对ＭＭＣ的耐药机制。药物作用１小时，对ＳＣａＢＥＲ细胞的ＩＣ＿（５０）是对Ｊ＿（８２）细胞的２．７倍。ＳＣａＢＥＲ细胞中，两种生物激活酶，即ＮＡＤＰＨ细胞色素Ｐ＿（４５０）还原酶和ＤＴ－黄递酶较Ｊ＿（８２）细胞显著降低，提示该细胞对ＭＭＣ相对低敏感性是由于药物活化过程障碍。ＢＭＹ２５２８２苯醌还原能力弱，易于活化，其对两种细胞的ＩＣ＿（５０）值相似，进一步支持上述观点。ＳＣａＢＥＲ细胞的氧自由基形成较Ｊ＿（８２）细胞稍高，抗氧化酶活性无明显变化，提示ＳＣａＢＥＲ细胞对ＭＭＣ耐药不是由于氧自由基形成减少。此外，ＭＭＣ所致ＳＣａＢＥＲ细胞的ＤＮＡ链间交联（ＩＳＣ）较Ｊ＿（８２）细胞明显减少。研究结果表明，ＳＣａＢＥＲ细胞对ＭＭＣ耐药是由药物活化障碍和ＩＳＣ减少所致。     

蝙蝠葛提取物对人肺癌细胞系A549诱导凋亡作用的研究

目的探讨蝙蝠葛提取物对人肺癌细胞系A549诱导凋亡和抗增殖作用及其机制,为开发抗肿瘤新中药提供实验依据。方法应用MTT法测定蝙蝠葛提取物对人肺癌细胞系A549的生长抑制作用;通过倒置显微镜、光学显微镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学变化;采用流式细胞术检测A549细胞的凋亡率;应用免疫组织化学技术检测药物处理前后凋亡相关蛋白酶caspase-3、caspase-8、caspase-9的表达。结果 （1）MTT法检测结果：蝙蝠葛提取物对人肺癌细胞系A549有明显的抑制生长的作用,且呈现出浓度的依赖性;（2）倒置显微镜观察结果：实验组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱;（3）HE染色观察结果：实验组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质浓缩或染色质块形成,有的细胞膜起泡形成凋亡小体;（4）流式细胞术检测结果显示：蝙蝠葛提取物可以诱导A549细胞发生凋亡,加药组出现亚二倍体峰。结论 （1）蝙蝠葛提取物在体外对人肺癌细胞系A549有显著的诱导凋亡作用;（2）蝙蝠葛提取物诱导凋亡作用机制可能通过上调caspase-3、caspase-8和caspase-9蛋白表达,经由细胞凋亡的死亡受体和线粒体通路完成凋亡的启动和执行;（3）蝙蝠葛提取物具有显著的体外抗肿瘤作用,有望开发成一种新的抗肿瘤药物。     

钙通道阻滞剂增强抗白血病药物作用的实验研究

对异搏停、汉防己甲素及硝苯吡啶３种钙通道阻滞剂（ＣＣＢ）分别增强Ｋ５６２细胞对足叶乙甙（ＶＰ１６～２１３）、阿霉素、三尖杉酯碱及长春新碱（ＶＣＲ）等４种化疗药物的敏感性进行比较研究，同时研究异搏停、汉防己甲素对耐药Ｋ５６２细胞（Ｋ５６２／ＶＰ１６细胞）对上述药物毒性增强作用。结果提示汉防己甲素作用最优，其次为异搏停，两者对Ｋ５６２／ＶＰ１６细胞毒性增强作用大于ＶＰ１６敏感的Ｋ５６２细胞。ＣＣＢ的抗耐药性作用在一定范围内的药物浓度中以及耐药白血病细胞中作用显著。ＣＣＢ与化疗药物合用表现一定程度毒性作用，但与两者单用的毒性改变相似，因此认为ＣＣＢ在增强化疗药物作用中有一定临床应用价值。     

The Paper Symposium on PLC VIRAL HEPATITIS（HBV AND HCV）BACKGROUND IN CHINESE PATIENTS WITH HEPATOCELLULAR CARCINOMA

ＴｈｅＰａｐｅｒＳｙｍｐｏｓｉｕｍｏｎＰＬＣＶＩＲＡＬＨＥＰＡＴＩＴＩＳ（ＨＢＶＡＮＤＨＣＶ）ＢＡＣＫＧＲＯＵＮＤＩＮＣＨＩＮＥＳＥＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＨＥＰＡＴＯＣＥＬＬＵＬＡＲＣＡＲＣＩＮＯＭＡＹｕＺｈｕｙｕａｎ；余竹元；ＴａｎｇＺｈａｏｙｏ...     

A MICROCOMPUTER PROGRAM FOR CALCULATINGTHE CONFIDENCE INTERVALS OF SURVIVAL PROBABILITY IN MEDICAL FOLLOW－UP STUDIES

ＡＭＩＣＲＯＣＯＭＰＵＴＥＲＰＲＯＧＲＡＭＦＯＲＣＡＬＣＵＬＡＴＩＮＧＴＨＥＣＯＮＦＩＤＥＮＣＥＩＮＴＥＲＶＡＬＳＯＦＳＵＲＶＩＶＡＬＰＲＯＢＡＢＩＬＩＴＹＩＮＭＥＤＩＣＡＬＦＯＬＬＯＷ－ＵＰＳＴＵＤＩＥＳＸｉａｎｇｙｏｎｇｂｉｎｇ项永兵；Ｇａｏｙｕ...     

5-氟尿嘧啶、长春新碱与去甲二氢愈创木酸配伍对人恶性胶质瘤细胞株的作用

 目的 观察体外应用去甲二氢愈创木酸（ＮＤＧＡ）、予氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）、长春新碱（ＶＣＲ）三种药物单用或合用对人恶性胶质瘤细胞系 ＳＨＧ－４４细胞的作用，并探讨其作用的可能机制。方法用 ＭＴＴ法检测药物作用效应，用免疫组化染色法检测细胞 ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的蛋白表达情况。结果 （１）三种药物单用及两药合用时随着药物浓度的增加其抗肿瘤效应也增加，且两药合用时药物的效应增强；（２）先给ＮＤＧＡ ２４ｈ后再给 ５－Ｆｕ或 ＶＣＲ，与同时给药对该细胞的抗肿瘤效应无显著差异（Ｐ＞０．０５），而先给 ５－Ｆｕ或 ＶＣＲ ２４ｈ后再给 ＮＤＧＡ，与同时给药对细胞的抗肿瘤效应有显著差异（Ｐ＜０．０５）；（３）免疫组化染色结果表明，与对照组相比，ＮＤＧＡ处理后该细胞 ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的蛋白表达明显降低。结论 ＮＤＧＡ与 ５Ｆｕ或 ＶＣＲ间有协同作用，且这种作用可能与 ＮＤＧＡ降低细胞 ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的蛋白表达有关。     

急性白血病患者多药耐药基因表达及其临床意义

目的：研究急性白血病（ＡＬ）多药耐药（ＭＤＲ１）基因表达临床耐药的关系。方法：应用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），检测６８例ＡＬ患者骨髓和１０名正常人外周血单个核细胞中ＭＤＲ１基因的表达。结果：复发难治组ＭＤＲ１阳性率最高，与正常对照组、初治组、完全缓解组相比均有显著差异（Ｐ〈０．０５）。初治组ＭＤＲ１阳性病例与ＭＤＲ１阴性病例的首次完全缓解率（分别为４５．４５％和８８．８９％）之间有显著差异。ＭＤＲ１的表达在ＦＡＢ各亚型间略有差异。ＭＤＲ１阳性的复发难治ＡＬ患者，经环孢酶素Ａ（ＣｓＡ）逆转多药耐药后，完全缓解显著增高。结论：ＭＤＲ１基因过度表达可临床耐药，是预后的重要不得因素，是判断疗效及早期复发的一个重要标志。ＣｓＡ有较好的逆转复发难治ＡＬ多药耐药的作用。     

化疗期间卵巢癌细胞及外周血淋巴细胞多药耐药基因表达产？…

目的 探讨卵巢癌细胞及外周血淋巴细胞多药耐药基因（ＭＤＲ１）表达产物Ｐ１７０的变化及临床意义。方法 从３８例首次手术及１５例复发卵巢癌腹水中提取癌细胞（ＡＣＣ），并抽静脉血提取淋巴细胞（ＰＢＬ），用荧光单克隆抗体Ｐ１７０标记上述细胞，经流式细胞术检测，。结果①化疗前２１％卵巢癌细胞Ｐ１７０阳性；②复发组ＡＣＣ之ＭＤＲ１表达明显高于初发组（Ｐ〈０．０５）；③化疗期间及ＰＢＬ及ＡＣＣ的ＭＤＲ１，表达随     

肝癌多药耐药细胞株P—gp,MRP,GST—π表达水平的观察

为研究人肝癌多药耐药细胞株的耐药机理，应用ＢＥＬ－７４０２细胞株，通过不断提高培养液中阿霉素（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）的浓度，长期筛选培养，得到肝癌多药耐药株ＢＥＬ－７４０２／Ｄｏｘ。经ＭＴＴ法检测ＢＥＬ－７４０２对长春新碱（ＶＣＲ）等８种抗癌药的抗性提高了２７倍～１１００倍。采用流式细胞技术检测了细胞株表面ＭＤＲ１蛋白Ｐ－ｇｐ、多药耐药相关蛋白ＭＲＰ及谷脱甘肽硫转移酶ＧＳＴ－π的表达；用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了ＭＤＲ及ＭＲＰ基因表达水平。流式细胞分析发现，９３．５％～９７．４％的ＢＥＬ－７４０２／Ｄｏｘ细胞表面Ｐ－ｇｐ表达阳性；８４．７％～９０．２％的ＢＥＬ－７４０２／Ｄｏｘ细胞表面ＭＲＰ表达阳性；ＢＥＬ－７４０２细胞与ＢＥＬ－７４０２／Ｄｏｘ细胞ＧＳＴ－π的表达无明显变化。ＲＴ－ＰＣＲ证实此细胞株中有ＭＤＲ及ＭＲＰｍＲＮＡ的较高表达。     

INDEPENDENT AND SYNERGIC INHIBITION OF VERAPAMIL AND ELECTRIC BEAM RADIATION ON CLONOGENIC GROWTH IN K562 AND K562／ADM CELL L

ＩＮＤＥＰＥＮＤＥＮＴＡＮＤＳＹＮＥＲＧＩＣＩＮＨＩＢＩＴＩＯＮＯＦＶＥＲＡＰＡＭＩＬＡＮＤＥＬＥＣＴＲＩＣＢＥＡＭＲＡＤＩＡＴＩＯＮＯＮＣＬＯＮＯＧＥＮＩＣＧＲＯＷＴＨＩＮＫ５６２ＡＮＤＫ５６２／ＡＤＭＣＥＬＬＬＩＮＥＳＩＮＶＩＴＲＯ￥ＸｉｅＺｕｏ...     

ＡＢＶ方案化疗对艾滋病相关晚期卡波氏肉瘤外周血ＣＤ４淋巴细胞的影响

目的　探讨艾滋病相关晚期卡波氏肉瘤（ＫＳ）在高效抗逆转病毒治疗（ＨＡＡＲＴ）耐药后联合应用ＡＢＶ方案化疗的疗效及其对患者ＣＤ４的影响。方法　收集经ＨＡＡＲＴ无效且ＣＤ４降低,进展为晚期ＫＳ的１７６例患者,给予６个周期ＡＢＶ方案化疗,观察化疗前、后ＣＤ４的变化及其与临床疗效之间的关系。结果　ＡＢＶ方案化疗后的临床有效率（ＣＲ＋ＰＲ）为９３.７％,无效（ＰＤ＋ＮＣ）为６.３％。ＣＤ４增加占８９.８％,ＣＤ４降低占１０.２％;化疗前ＣＤ４数值在有效组和无效组之间差异无统计学意义,化疗后ＣＤ４数值在两组之间有显著的统计学差异,有效组化疗后ＣＤ４升高（Ｐ＜０.０５）,无效组化疗后ＣＤ４略降低（Ｐ＞０.０５）。结论　ＡＢＶ方案化疗能有效治疗艾滋病相关晚期ＫＳ,并能有效提高患者ＣＤ４数值。     

几种肿瘤多药抗药性逆转剂对耐药细胞膜脂流动性及P-糖蛋白表达的影响

目的：探讨几种有效的抗肿瘤药多药抗药性（ＭＤＲ）逆转剂对ＭＤＲ细胞膜脂流动性及Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）表达的影响,以阐明其逆转ＭＤＲ机理。方法：细胞株为抗阿霉素人乳腺癌细胞ＭＣＦ７／ＡＤＲ及其相应的敏感株ＭＣＦ７。Ｐｇｐ表达测定采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法,膜脂流动性的测定采用ＤＰＨ标记的荧光分光光度计法。结果：在无逆转剂存在时,ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞的荧光偏振度显著低于ＭＣＦ７细胞,吲哚衍生物２苯３（３’,５’双吗啉甲基４’羟基）苯甲酰吲哚（ＨＷＬ１２）及吗丙嗪（Ｐｒｏ）显著增加ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞的荧光偏振度,即降低膜脂流动性。苄普地尔（Ｂｅｐ）及维拉帕米（Ｖｅｒ）对ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞的荧光偏振度无影响,即不能改变膜脂流动性。Ｖｅｒ、Ｂｅｐ、ＨＷＬ１２能显著地降低Ｐｇｐ表达,而Ｐｒｏ无此作用。结论：ｐｒｏ逆转ＭＤＲ的作用可能与降低ＭＤＲ细胞膜脂流动性有关;Ｂｅｐ及Ｖｅｒ可能与降低Ｐｇｐ表达有关;ＨＷＬ１２可能既与降低ＭＤＲ细胞的膜脂流动性有关,也与降低Ｐｇｐ表达有关。     

温热联合化疗对人颊癌细胞的体外效应

目的：观察 办同化疗对体外培养的人颊鳞癌ＢＣａＣＤ８８５细胞的杀伤作用。方法：采用ＭＴＴ法研究了ＢＣａＣＤ８８５细胞对４３℃温热、几种临床常化疗药单独应用及联合４３℃ 民化疗药时的敏感性。结果：实验表明ＢＣａＣＤ８８５细胞对热不敏感,４３℃作用４０分钟时的细胞死亡率仅７．６％艇药时,细胞对ＡＤＭ最敏感,其次为ＤＤＰ、ＶＰ－１６、ＶＣＲ,再次为ＭＭＣ、ＢＬＭ,对５－Ｆｕ,ＭＴＸ不敏感,４３℃温热能显