补中益气汤对脾气虚证大鼠胃泌素基因表达的影响

目的:探讨补中益气汤不同浓度、不同时间对脾气虚证大鼠胃泌素(gastrin,GAS)基因表达的影响。方法:以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组、补中益气汤低、中、高剂量组,在干预后不同时间(7d,14d,21d),用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测补中益气汤对胃窦GAS mRNA表达的影响。结果:与模型组比较,补中益气汤中、高剂量组血清GAS水平升高(P<0.05,P<0.01)、胃窦GAS mRNA表达上调(P<0.05,P<0.01);中、高剂量组比较,差异有显著性意义(P<0.05),以中剂量组为佳。结论:补中益气汤能上调GAS mRNA表达可能是其治疗脾气虚证的机制之一。     

实验性脾气虚大鼠胃泌素的基因表达及四君子汤的干预作用

目的:观察脾气虚证大鼠胃窦黏膜胃泌素(gastrin,GAS)基因表达的改变及不同用药时间段四君子汤对其调整作用,探讨脾气虚证的本质及四君子汤的作用机制。方法:以三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组、四君子汤组,在干预后不同时间段,用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测四君子汤对脾气虚大鼠胃窦GAS mRNA表达的影响。结果:脾气虚模型组血清GAS水平、胃窦GAS mRNA表达下降,与正常组比较差异有显著性(P<0.05);四君子汤组血清GAS含量、胃窦GAS mRNA表达随用药时间的延长呈递增的趋势,用药21天时,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:GASmRNA表达失衡是脾气虚证的本质之一,而四君子汤上调GAS mRNA表达是其治疗脾气虚证的机制之一。     

补中益气汤配伍对脾气虚大鼠胃泌素及其基因表达的影响

目的研究补中益气汤及其配伍对脾气虚大鼠胃泌素(GAS)及GAS mRNA表达的影响,并探讨相关作用机制。方法以大黄、游泳力竭、饥饿三因素复合方法复制脾气虚大鼠模型,造模成功后,将SD大鼠随机分为正常对照组、脾气虚模型组、补中益气汤组、黄芪-升麻、柴胡配伍组和减方组(原方去"黄芪-升麻、柴胡"配伍组),给药14 d后测定大鼠血清GAS含量和GAS mRNA。结果与脾气虚模型组比较,补中益气汤组能有效升高脾气虚大鼠GAS含量(P<0.01)并增强GAS mRNA的表达(P<0.01),而黄芪-升麻、柴胡配伍组和减方组对脾气虚大鼠GAS含量及GAS mRNA的表达影响不大(P>0.05)。结论补中益气汤能显著提高GAS及GAS mRNA的表达来改善脾气虚,推测是其治疗脾气虚证的机制之一,"黄芪-升麻、柴胡"配伍是方中不可或缺的重要组成部分。     

黄芪建中汤对脾气虚证肺癌小鼠caspase-3表达的影响

目的:探讨黄芪建中汤对脾气虚证肺癌小鼠抑瘤作用的可能作用机制.方法:用苦寒泻下法及接种肿瘤法建立小鼠脾气虚证Lewis肺癌模型,第13天,眼球取血,检测血清木糖水平.模型成功建立后,药物治疗组小鼠分别给予不同浓度的药物处理,同时观察小鼠的整体情况.第28天,脱颈椎处死小鼠,取肿瘤组织.分别称取每只小鼠瘤重,计算抑瘤率,采用RT-PCR方法检测caspase-3的表达.结果:黄芪建中汤可明显改善脾气虚证Lewis小鼠的整体情况,有一定的抑瘤作用,黄芪建中汤低、中、高剂量组抑瘤率分别为23.50％、29.18％、32.69％.黄芪建中汤低、中、高剂量组caspase-3/β3-actin比值均高于肿瘤对照组和模型对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论:黄芪建中汤抑制脾气虚证肺癌小鼠肿瘤的生长可能与上调caspase3-mRNA的表达的转录有关.     

名医验方加味黄芪建中汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜细胞增殖相关蛋白的调控

目的:探讨加味黄芪建中汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠胃黏膜细胞增殖的影响及机制。方法:选择SPF级SD大鼠48只,随机分为正常组、模型组、维酶素阳性对照组、加味黄芪建中汤低、中、高剂量组,每组8只,采用自由饮用MNNG复制CAG大鼠模型,运用HE染色观察胃黏膜组织病理形态学改变,运用Western blot检测胃黏膜组织中PCNA、Cyclin E表达及其含量。结果:加味黄芪建中汤可有效治疗模型大鼠的CAG。与模型组、维酶素阳性对照组相比,加味黄芪建中汤能够降低胃黏膜组织中PCNA、Cyclin E蛋白表达,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:加味黄芪建中汤通过降低CAG模型大鼠胃黏膜中PCNA、Cyclin E的表达水平,抑制G1/S期的转换,能够调节胃黏膜细胞的异常增殖,可能是治疗CAG的关键机制之一。     

四君子汤对脾气虚证大鼠血清胃泌素影响的实验研究

目的:探讨四君子汤对脾气虚证大鼠血清胃泌素(GAS)的影响。方法:以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组和四君子汤组,在用药后不同时间(7d1、4d、21d)观察四君子汤对血清GAS含量的影响。结果:四君子汤组的血清GAS含量随着用药时间的延长呈递增的趋势,用药21d时与模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:四君子汤能改善脾气虚证大鼠的低GAS水平,这可能是其治疗脾气虚证的机理之一。     

加味黄芪建中汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜细胞PCNA、bcl-2、bax的影响

目的:探讨加味黄芪建中汤治疗慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis,CAG)的分子机制。方法:选取清洁级SD大鼠,雌雄各半,随机数字表法分正常组、模型组、对照组、加味黄芪建中汤高、中、低剂量组,每组8只,共计48只。采用自由饮用MNNG复制CAG大鼠模型,HE染色观测胃黏膜组织病理学改变,运用SABC免疫组织化学法检测胃黏膜组织中PCNA、bcl-2、bax的表达。结果:加味黄芪建中汤能够改善CAG大鼠胃黏膜病理形态学改变,能够下调增殖蛋白PCNA、上调抑制凋亡蛋白bax、下调促凋亡蛋白bcl-2的表达(P0.05),尤其以中、高剂量加味黄芪建中汤效果明显(P0.05)。结论:加味黄芪建中汤能够通过调节抑制胃黏膜细胞的过度增殖,调节胃黏膜细胞的过度凋亡,对CAG发挥治疗作用,对细胞增殖与凋亡相关因子的调节是其发挥治疗作用的关键环节。     

补中益气汤对脾气虚证大鼠血清胃泌素影响的实验研究

目的:探讨补中益气汤不同浓度、不同时间段对脾气虚证大鼠血清胃泌素的影响。方法:以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组,补中益气汤低、中、高剂量组,以及四君子汤组,在干预后不同时间(7、14、21d)观察各组血清胃泌素等指标。结果:与模型组比较,补中益气汤中、高剂量组血清胃泌素含量升高(P<0.05,P<0.01),以中剂量组疗效显著;低剂量组变化不明显;四君子汤组血清胃泌素含量亦升高(P<0.05),但效果不如补中益气汤中剂量组(P<0.05)。结论:补中益气汤提高脾气虚证大鼠血清胃泌素含量可能是其治疗脾气虚证的机理之一。     

参苓白术散对脾气虚证大鼠血清胃泌素影响的实验研究

目的 探讨参苓白术散不同浓度、不同时间段对脾气虚证大鼠血清胃泌素的影响.方法 以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组,参苓白术散高、中、低剂量组,四君子汤组,在干预后不同时间(7,14,21d)观察各组血清胃泌素等指标.结果 与模型组比较,参苓白术散高、中剂量组血清胃泌素含量升高(P<0.01,P<0.05),以中剂量组疗效显著,低剂量组变化不明显;四君子汤组血清胃泌素含量亦升高(P<0.05),但效果不如参苓白术散中剂量组(P<0.05).结论 参苓白术散提高脾气虚证大鼠血清胃泌素含量可能是其治疗脾气虚证的机理之一.     

舒胃汤对FD肝郁脾虚证模型大鼠胃肠平滑肌Beclin-1、mTOR、Cx43蛋白与mRNA表达的影响

目的通过研究舒胃汤(柴胡、香附、白术,等)对功能性消化不良(FD)肝郁脾虚证模型大鼠胃窦和幽门区平滑肌中自噬调控基因Beclin-1、雷帕霉素靶蛋白mTOR、连接蛋白Cx43蛋白与mRNA表达的影响,从自噬与细胞间缝隙连接通道探讨舒胃汤对功能性消化不良的治疗作用及机制。方法取60只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,莫沙必利组(1.37 mg/kg),舒胃汤低、中、高剂量组(7.67、15.34、30.68 g/kg)。除空白组外,各组大鼠按复合病因造模法造模21 d复制FD肝郁脾虚证大鼠模型。于造模结束后第1天开始给药,空白组与模型组大鼠给予等量蒸馏水,其余各组大鼠按剂量要求灌胃给药,每天1次,连续给药14 d。末次给药2 h后,颈静脉放血处死大鼠,摘取各组大鼠胃窦与幽门组织,Western blot法检测Beclin-1、mTOR、Cx43蛋白表达,RT-qPCR法检测Beclin-1、mTOR、Cx43 mRNA表达。结果 Western blot结果显示,舒胃汤低、中、高剂量组Beclin-1表达明显降低(P0.01),舒胃汤高剂量组Cx43表达明显升高(P0.05);RT-qPCR结果显示,舒胃汤中、高剂量组Beclin-1表达明显降低(P0.01),mTOR表达明显升高(P0.01),舒胃汤低、中、高剂量组Cx43表达明显升高(P0.01)。结论舒胃汤可通过上调FD模型大鼠胃肠平滑肌细胞mTOR mRNA、Cx43蛋白及mRNA表达,下调Beclin-1蛋白及mRNA表达,抑制细胞自噬及增强细胞间缝隙连接治疗功能性消化不良。     

金匮肾气丸对肾阳虚大鼠垂体ACTH基因表达的影响

目的探讨金匮肾气丸(简称肾气丸)不同浓度、不同时间对肾阳虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)基因表达的影响。方法造模大鼠随机分成模型组,肾气丸高、中、低剂量组,在喂药后不同时间(10、20、30天),用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肾气丸对垂体组织ACTH基因表达的影响。结果与模型组比较,肾气丸中、高剂量组大鼠血清ACTH水平升高(P<0．05或P>0．01)及垂体组织ACTH基因表达明显上调,差异有显著性(P<0．05);中剂量组与高、低剂量组比较明显增高(P<0．05或P<0．01)。结论肾气丸能上调ACTH基因表达可能是其治疗肾阳虚的机理之一。     

益气健脾中药对脾气虚大鼠一氧化氮信号通路及胃泌素水平的影响

目的观察一氧化氮（NO）信号通路及胃泌素（GAS）水平在大鼠脾气虚证进程中的变化及益气健脾中药的干预效应。方法将受试动物随机分为正常组、模型组（7、14、21 d组）、益气健脾组,每组10只。采用大黄法、力竭法及饥饿法复合建立脾气虚证大鼠模型,分时段测定各组大鼠胃肠组织、血清一氧化氮合酶（NOS）、NO、GAS动态表达水平。结果与正常对照组比较,模型大鼠胃肠组织及血清NOS、NO、GAS水平逐渐降低（P〈0.05,P〈0.01）,且以21 d组显著,而益气健脾组大鼠NOS、NO、GAS水平未见明显变化,且与模型21 d组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 NO、NOS、GAS在脾气虚的形成过程中主要以低水平表达为主,而益气健脾中药具有促进NO信号通路及GAS表达的作用。     

模拟中医病因所致脾气虚、脾阳虚大鼠模型的证候比较研究

目的:以多因素复合法分别建立脾气虚证、脾阳虚证大鼠模型,对两组模型大鼠进行比较研究以探讨脾气虚、脾阳虚的证候实质与差异。方法:动物随机分为正常组、脾气虚组和脾阳虚组,以相应造模方法进行模型复制,并以四君子汤和理中汤进行药物反证。结果:脾气虚和脾阳虚大鼠宏观证候计分高于正常组(P0.01),且以脾阳虚组为著(P0.01);两组血清GAS均低于正常组(P0.01);脾气虚组的血浆MTL低于正常组(P0.01),而脾阳虚组高于正常组(P0.01);经健脾中药干预后,各项脾虚症状和体征逐渐缓解或消失;血清GAS、血浆MTL紊乱回复。结论:多因素复合法复制的脾气虚、脾阳虚证大鼠模型符合证候的生物学特征,稳定性良好,且经得起药物反证;脾气虚、脾阳虚大鼠的脾虚宏观证候呈递进关系;血浆MTL在脾气虚和脾阳虚中变化趋势不一致,可作为鉴别两证的微观指标。     

黄芪建中汤对脾气虚肺癌小鼠免疫功能及cyclin D_1基因表达的影响

目的观察黄芪建中汤对脾气虚肺癌小鼠免疫功能及cyclin D1基因表达的影响,探讨黄芪建中汤对脾气虚肺癌小鼠抑瘤作用的可能机制。方法用苦寒泻下法建立小鼠脾气虚模型,并接种Lewis肺癌瘤株。造模小鼠随机分成正常组、肿瘤对照组、模型对照组、黄芪建中汤低、中、高剂量组,用药14 d后,眼球取血,检测血清木糖及胃泌素水平;取肿瘤组织,用RT-PCR方法检测cyclin D1-mRNA表达。结果黄芪建中汤明显改善脾气虚小鼠的整体状况;抑制肿瘤的生长,提高小鼠脾指数、胸腺指数;提高脾气虚小鼠的血清木糖、胃泌素;下调肿瘤组织cyclin D1-mRNA的表达。结论黄芪建中汤可能是通过改善脾气虚肺癌小鼠的免疫水平、下调肿瘤组织cyclin D1-mRNA的表达,达到抑制肿瘤的生长。     

脾虚发热证大鼠模型的研究

目的:复制并评价脾虚发热大鼠模型。方法:大鼠随机分为正常对照组、单纯脾虚组、脾虚发热组。大鼠采用饮食失节+过度疲劳法复制脾虚模型,于造模第22天腹腔注射LPS(80μg/kg)诱导发热,测定各时间点的肛温、体重、外观行为变化积分值、尿D-木糖排泄率和外周血相关指标。结果:①与正常对照组比较,脾虚发热组大鼠体温除在30min有一过性降低外,其余各观察点均呈显著性升高(P0.01,P0.05);单纯脾虚组大鼠体温除在60min时有一过性升高外,其余各点无显著性差异;脾虚发热组与单纯脾虚组大鼠在第1、2、3周末的体重均明显降低;第2、3周末的外观行为变化总积分值呈显著性增加(P0.05,P0.01);第3周末的尿D-木糖排泄率、血GAS、MTLI、L-1β、IL-2、T3、T4、TSH均降低I,L-6和SS升高(P0.05,P0.01);②与单纯脾虚组相比,脾虚发热组大鼠体温在30min时有一过性降低,之后体温一直呈显著性升高(P0.01);外周血T4含量显著性降低(P0.01),其余各指标的差异无显著性。结论:饮食失节+过度疲劳+LPS注射可引起大鼠出现类中医脾虚发热证。     

黄芪多糖对脾虚水湿不化模型大鼠血清GAS、CCK、VIP及尿D木糖排泄率的影响

目的:观察黄芪多糖对脾虚水湿不化模型大鼠血清胃泌素(GAS)、胆囊收缩素(CCK)、血管活性肠肽(VIP)及尿D木糖排泄率的影响,探讨黄芪多糖健脾祛湿机制。方法:将48只大鼠随机分为模型组和空白组,将模型组大鼠按高脂低蛋白加力竭游泳法建立脾虚水湿不化大鼠模型,模型组分为参苓白术散组,黄芪多糖低、中、高剂量组,每组8只。按分组情况分别进行干预,观察模型大鼠一般状况,检测GAS、CCK、VIP水平及5 h尿D木糖排泄率。结果:与模型组比较,黄芪多糖各组血清GAS、CCK、VIP水平均升高(P0.05或P0.01),5 h尿D木糖排泄率增加(P0.05)。结论:黄芪多糖可纠正脾虚水湿不化大鼠胃肠激素水平及尿D木糖排泄率,进而改善饮食物消化吸收,发挥健脾祛湿作用。