中国结核分枝杆菌戊滋病病毒双重感染率分析

目的了解国内文献报道的结核分枝杆菌(MTB )和艾滋病病毒(HN)双重感染率。方法系统检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI )、万方数据资源系统和维普中文科技期刊全文数据库中2000-2012年有关MTB/HN双重感染率的研究文献，摘录有关信息，采用广义倒方差模型估计双重感染率，并对性别、样本来源和地区进行亚组分析，使用观察性研究质量评价准则STROBE声明评价文献质量，利用敏感性分析评价研究质量对结果的影响。结果共纳人39篇文献，总样本量为168 286人，利用广义倒方差模型估计结核病患者中HN双重感染率为0.86% ( 95%C1: 0.80%~0.93% )。亚组分析显示，MTB/HN双重感染率男性(1.53%)高于女性( 0.54% )，艾滋病病毒感染者和艾滋病患者(HIV/AIDS)高发地区(0.91 %)高于低发地区(0.71 % ),差异均有统计学意义。HN/AIDS中结核双重感染率为14.44%(95%C1:13.62%~15.30% )。亚组分析显示，MTB/HN双重感染率医院来源( 28.64%)高于社会人群(4.74% )，西部(15.79%)高于中部(13.88%)及东部地区(( 6.47% )，差异均有统计学意义。敏感性分析中在删除了符合条目数少的文献后，Meta分析的结果与原结果接近。结论中国MTB/HN双重感染率较高。     

广西结核菌／艾滋病病毒双重感染人群特征分析

目的了解广西结核菌／艾滋病病毒双重感染人群的特征，为有针对性对该人群实施预防控制策略提供依据。方法对结核菌／艾滋病病毒双重感染者进行疾病相关知识和行为的问卷调查。结果结核菌／艾滋病病毒双重感染者中男性占绝大多数，为94．54％；以中青年为主，占78．2％；文化程度普遍较低，小学占76．4％；来自城乡的比例相近。结核菌／艾滋病病毒双重感染者中艾滋病病毒感染者感染结核菌的危险性较高。结论应针对结核菌／艾滋病病毒双重感染者的特征，加强相关防治知识的健康教育。     

结核杆菌／艾滋病病毒双重感染流行病学研究现况

结核病（TB）已成为HIV／AIDS最常见的机会性感染性疾病,也是HIV／AIDS最常见的死亡原因,而HIV则是已知的、增加TB危险性最重要的因素。HIV与MTB感染相互影响、相互促进。近年全球HIV合并TB病例呈逐年上升趋势。在HIV感染者／AIDS患者中可采取液体培养、Y干扰素释放试验等快速诊断试验来筛查TB患者。TB／HIV双重感染防治策略强调的是加强结核与艾滋病两防治机构的密切合作,同时开展监测和治疗管理工作。     

中越边境地区结核菌/艾滋病病毒双重感染人群特征分析

目的了解广西壮族自治区凭祥市结核菌／艾滋病病毒双重感染人群的特征，为有针对性对该人群实施预防控制策略提供科学依据。方法对新登记的结核菌／艾滋病病毒双重感染者进行与疾病有关的知识和行为的问卷调查。结果结核菌／艾滋病病毒双重感染者中男性60例，占86.96％；女性9例，占13.04％；以中青年偏多，占36例，为52.17％；文化程度普遍较低，小学25例，占36.23％，初中32例，占46.38％，高中以上12例，占17.38％。国藉分布：中国66例，越南3例。地区分布农村（41例）占绝大多数，为59.42％，其次为市区（20例），占28.99％，乡镇最少（8例），占11.59％。结核菌／艾滋病病毒双重感染者中结核菌感染者感染艾滋病病毒的危险性较高。结论针对结核菌／艾滋病病毒双重感染者的特征，因地制宜采取相关防治知识的健康教育措施。     

曲阜市中小学生结核分枝杆菌感染状况调查

目的了解曲阜市城乡中小学生结核分枝杆菌的感染状况,为结核病防治提供可靠的科学依据.方法对曲阜市部分城乡4 437名中小学生进行结核菌素(PPD)试验,并对PPD强阳性者进行透视、拍片、血沉、痰结核菌等检查.结果调查4 437名学生,PPD阳性者539例,感染率为12.15%.结论中小学生的结核分枝杆菌感染不容忽视,将结核病筛查纳入学校的制度化管理非常必要.     

潜伏性结核分枝杆菌感染动物模型

全球1/3的人口感染结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB),其中大部分为潜伏感染［1］。研究人员对MTB潜伏感染的关注度日益增高。笔者针对当前研究MTB潜伏感染所使用的各种动物模型进行综述,分析包括小鼠、豚鼠、兔以及非人灵长类的动物模型优势和局限性,以期为研究人员正确选择合适的MTB潜伏感染动物模型以及深入开展潜伏感染的研究提供帮助。     

艾滋病与结核病的双重感染和防治

结核分支杆菌(MTB)与人类免疫缺陷病毒(HIV)的发现相差近一个世纪,由这两种病原体分别引起的结核病和艾滋病(AIDS)目前已受到全球范围的广泛重视。自1981年发现第一例AIDS至今全球累计受HIV感染的男人、妇女和儿童的总数高达4200万例,其中95％以上在发展中国家,我国2002年底31个省市累计上报HIV感染者3万多例。全世界有20亿人感染了结核菌,有600万例为MTB及HIV双重感染者,这些感染者在一生中有50％可能成为结核病患者。     

艾滋病病毒／结核菌双重感染预防控制策略

1艾滋病和结核病疫情 1．1艾滋病疫情 2005年是自艾滋病被发现以来新增感染人数最多的一年，全世界新增艾滋病病毒感染者500万，其中超过一半人年龄在15～24岁之间，该病毒感染者总人数已达4030万。2005年全世界有310万人死于艾滋病，平均每天死亡近万人。其中57万是15岁以下的儿童。在目前所有艾滋病病毒感染者中，近一半是女性。吸毒者共用针管和不安全性行为是艾滋病病毒传播的主要途径。亚洲本年度的艾滋病病毒感染者总数为830万，其中新增感染者110万（联合国艾滋病规划署报告。2005）。     

结核分枝杆菌潜伏感染影响因素研究进展

结核潜伏感染是新发活动性肺结核的主要来源,早期诊断和治疗结核潜伏感染者,可以降低其发展为结核病的风险,阻断结核病的传播.目前,结核潜伏感染尚未形成完善的策略和国家指南,高危人群的界定和干预研究尚处于探索阶段,掌握人群结核潜伏感染的高危因素,对寻找潜伏感染者和进一步开展干预具有重要的公共卫生意义.     

深圳地区艾滋病病毒与结核菌双重感染状况的调查

目的：通过对结核病人群合并艾滋病病毒感染以及艾滋病患者合并结核菌感染状况的调查，了解艾滋病病毒(HIV)与结核分支杆菌(MTB)的相关性。方法：对376例住院结核病患者进行HIV抗体检测，25例艾滋病住院患者做结核菌素试验、痰涂片及培养、胸部X线拍片、CD4^ 淋巴细胞计数并结合临床作出结核病诊断。结果：共查出HIV与MTB双重感染者8例，在结核病和艾滋病人群中的检出率分别为0．26％和28．00％。8例HIV／MTB感染者PPD阴性反应7例，CD^ 淋巴细胞计数均＜200。结论：结核病人群中HIV感染率与艾滋病人群中MTB感染率均大大高于一般人群，PPD试验已不能作为诊断艾滋病患者是否感染结核菌的依据。     

结核分枝杆菌4种新抗原的克隆表达及血清学评价

目的 初步评价结核分枝杆菌4种新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c和Rv1547的血清学诊断价值。方法 以结核分枝杆菌实验室标准参照菌株H37Rv全基因组DNA为模板PCR扩增Rv0432、Rv0674、Rv1566c基因的完整序列,Rv1547基因分为两段（Rv1547-1和Rv1547-2）扩增,与PET-32a表达载体构建重组质粒,重组蛋白利用亲和层析的方法进行纯化。待检测血清和BL21（DE3）菌体蛋白孵育进行预处理。各重组抗原用ELISA对151份待检血清（41份健康组血清和110份细菌学阳性结核患者组血清）进行IgG抗体检测。检测结果用受试者工作特征曲线对其诊断效能进行分析和评价。采用t检验比较目的蛋白在结核患者组和健康组的差异性。结果 成功克隆表达和纯化了蛋白Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2,ELISA结果显示Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数和曲线下面积分别为43.64%~92.73%、80.49%~92.68%、0.92~0.94、0.38~0.80、0.363~0.732和0.649~0.915。目的蛋白在结核组检测到的IgG抗体水平均大于健康组（P<0.000 1）。结论 结核分枝杆菌新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2具有良好的血清学检测价值,可作为结核病免疫学诊断的候选抗原。     

结核分枝杆菌对环丝氨酸耐药分子特征的初步研究

目的 探讨结核分枝杆菌对环丝氨酸耐药性与alrA、ddlA和cycA基因突变的关系,分析环丝氨酸耐药与基因型的关联性。方法 从菌株库中选取145株临床分离株,采用比例法测定菌株对环丝氨酸耐药表型、微孔板刃天青显色法测定最小抑菌浓度,PCR扩增、DNA直接测序法测定目的基因全长,与标准菌株H37Rv比对。间隔区寡核苷酸基因分型（spoligotyping）进行菌株基因型鉴定,分析耐药表型与基因型的关系,采用χ²检验分析差异有无统计学意义。结果 145株临床分离株中,环丝氨酸耐药菌株为24株,敏感株为121株。24株耐药菌株中,3株（12.5%）发生cycA非同义突变,涉及的密码子为188位、318位和508位,1株（4.2%）发生alrA非同义突变,涉及密码子为261位。敏感菌株的目的基因中仅检出同义突变。药敏试验证实,突变株的最小抑菌浓度均有不同程度的升高。北京基因型为88株,环丝氨酸耐药率为20.5%（18/88）,非北京基因型为57株,环丝氨酸耐药率为10.5%（6/57）,两者耐药率差异无统计学意义（χ²=2.47,P>0.05）。结论 alrA和cycA单核苷酸非同义基因突变可能是环丝氨酸耐药的机制之一。尚不能确定北京基因型或非北京基因型菌株与环丝氨酸耐药有相关性。     

青海省结核分枝杆菌临床分离株可变数目串联重复序列基因多态性研究

目的 初步了解青海省结核分枝杆菌临床分离株基因多态性和基因分型特征。方法 2009-2012年收集青海省疾病预防控制中心分离的结核分枝杆菌临床分离株,提取DNA,对15个可变数目串联重复序列(VNTR)位点进行PCR扩增和产物电泳分析,使用BioNumerics软件对菌株进行聚类分析。结果 共检测251株结核分枝杆菌临床分离株的15个VNTR位点,显示这些菌株有明显的基因多态性,15个VNTR位点中Hunter-Gaston指数>0.6的VNTR位点有6个,位点分辨能力最高的是MIRU26,经聚类分析,可分为4个基因群,238个基因型。4个基因群分别占4.9%、91.9%、1.6%和1.6%。结论 青海省流行的结核分枝杆菌菌株存在明显的VNTR基因多态性。     

基于全基因组测序的我国耐多药结核分枝杆菌耐药突变特征分析

目的 利用全基因组测序数据分析中国耐多药结核分枝杆菌的耐药相关基因突变谱及主要突变类型与菌株基因型的相关性。方法 查询并下载NCBI数据库中截至2019年8月公开发表的中国结核分枝杆菌全基因组测序数据,利用全基因组数据预测菌株分子药敏结果,统计不同药物耐药相关基因的突变类型,并分析耐药突变类型与菌株基因型的相关性。结果 根据分子药敏结果从2 019株菌株中鉴定出1 024株耐多药菌株,对常用抗结核药物的耐药相关基因主要突变类型分别为katG S315T（73.2%,异烟肼）、rpoB S450L（63.1%,利福平）、rpsL K43R（70.0%,链霉素）、embB M306V（37.4%,乙胺丁醇）、pncA启动子区T（-11）C（7.9%,吡嗪酰胺）、gyrA A90V（32.3%,氟喹诺酮类）、rrs A1401G（67.7%,二线注射类）、fabG1启动子区C（-15）T（87.0%,乙硫异烟胺）、folC I43T（30.4%,对氨基水杨酸）。其中,katG S315T、rpsL K43R、embB M306V、gyrA D94G在L2系菌株中的频率显著高于L4系菌株,folC I43T仅在L2系菌株中发现;katG S315T在古典北京型菌株中比例较高,而rpsL K43R在现代北京基因型菌株中的比例更高,其差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 本研究提供了基于全基因组测序的我国耐多药结核分枝杆菌对多种常用抗结核药的耐药相关基因主要突变类型,为研发敏感、特异的快速分子检测方法提供了依据;同时也发现多种耐药相关基因主要突变类型与菌株基因型有关。     

中国6个省份结核分枝杆菌耐药状况及影响因素分析

目的 分析北京、吉林、新疆、陕西、湖南、河南6省份结核分枝杆菌耐药性数据,了解耐药性结核病分布特征及影响因素。方法 在6省份采用问卷调查收集背景资料,并使用比例法药物敏感性试验对4种一线抗结核药物（异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇）进行检测,再利用SPSS 20.0软件分析其危险因素。结果 总体耐药率和耐多药率分别为23.42%和13.51%。北京、吉林、湖南、河南、陕西、新疆分离株耐药率分别为21.50%、12.24%、36.27%、42.86%、27.78%、24.39%,耐多药率分别为4.67%、8.16%、24.51%、26.53%、15.28%、14.15%。χ²检验结果显示,各省份间单种药物耐药率、总体耐药率和耐多药率差异均有统计学意义（P=0.000）。单因素分析结果显示,结核病的复发、治疗史与耐药结核病的产生具有明显的相关性,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 我国耐药结核病的形势非常严峻,调查地区结核病耐药性存在明显差异,应针对各地区主要的危险因素加强预防干预。     

rpoB gene sequencing and spoligotyping of multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis isolates from India

Multi drug-resistant Mycobacterium tuberculosis (MDR TB) has been well studied in outbreaks in settings of low endemicity in developed countries. However, the characteristics of MDR TB in the community with high endemicity such as India have not been well investigated. Mutations in the 81-bp rifampicin resistance-determining region of the rpoB gene were analyzed by DNA sequencing of 187 M. tuberculosis clinical isolates (149 resistant and 38 sensitive) from different parts of India. 146-Point mutations and two insertions were found in 146 of 149 resistant isolates in seven codons. The most common mutations were in codons 531 (59%), 526 (22%), and 516 (11.5%). Mutations were not found in three (2%) of the resistant isolates. N-terminal sequencing in these isolates showed no mutation at codon V176. None of the drug-susceptible isolates showed any mutation in the 437-bp rpoB gene segment sequenced. Genotypic analysis revealed a total of 80 different spoligotypes. A unique pattern was found in 65 (43.6%) isolates, whereas 84 (56.4%) were in 15 clusters. Comparison with an international spoligotype database showed ST26, Delhi type (18.1%), ST1, Beijing type (9.4%), and ST11 (5.4%), as the most common. The majority of isolates in the Beijing genotype (13/14) were associated with mutation 531TTG and similar drug-resistance patterns while other major clusters showed that the nature and frequency of occurrence of mutations in the rpoB gene were independent of spoligopatterns.     

结核分枝杆菌Rv3529c蛋白的生信分析及原核表达

目的 通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。 方法 利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS -MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法、IEDB数据库和STRING数据库等生物信息学预测软件对Rv3529c编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及免疫表位进行分析预测。利用分子克隆技术构建表达质粒载体pET-32a-Rv3529c并进行原核表达,运用UniprotKB数据库的Blast工具对氨基酸序列进行比对,采用MEGA 11软件构建进化树,进行系统进化分析,运用STRING数据库分析蛋白间相互作用。 结果 Rv3529c基因全长1 155 bp,共编码384个氨基酸。Rv3529c基因编码蛋白分子量为43.35 kDa,等电点为6.04,二级结构以α-螺旋为主,该蛋白为稳定的亲水性蛋白,无跨膜区、无信号肽,预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中或细胞膜上,存在多个抗原抗体表位,与多个蛋白质有相互作用。经克隆、表达、鉴定、纯化后获得浓度和纯度较高的Rv3529c蛋白。 结论 成功克隆、表达、纯化结核分枝杆菌Rv3529c蛋白,并初步预测其结构及功能。     

广西地区结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变特征分析

目的 分析广西地区结核分枝杆菌异烟肼(INH)耐药基因的突变特征,为耐药结核病的分子诊断提供依据。方法 选取2018年广西30个结核病耐药监测点收集的结核分枝杆菌菌株库中122株耐INH菌株和530株全敏感菌株进行全基因组测序。结果 652株结核分枝杆菌复合群菌株中,127株(19.48%)发生INH耐药基因突变,分别为katG(15.64%,102株)、fabG1(1.69%,11株)、ahpC(1.07%,7株)、kasA(0.61%,4株)和inhA(0.46%,3株)基因突变。INH耐药表型与基因突变的符合率为90.03%,比例法药敏检测INH耐药与基因测序检测基因突变结果吻合度不高(Kappa=0.677)。突变类型共有19种,单位点突变占96.85%,联合位点突变占3.15%。突变比率最高的位点为katG315(71.65%),碱基变化以AGC-ACC形式占比最高(12.13%)。katG、ahpC和kasA基因突变比例在INH耐药株中高于敏感株(均P<0.05),INH耐药株和敏感株inhA、fabG1基因突变比例比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。北...     

结核分枝杆菌抗原Rv0585c人T细胞抗原表位鉴定及其免疫原性评价

目的 研究结核分枝杆菌抗原Rv0585c的抗原表位及其免疫原性,为结核病特异免疫诊断技术和疫苗的研发提供基础。方法 利用生物信息学TE-predict和IEDB人T细胞抗原表位预测软件进行结核分枝杆菌抗原Rv0585c的人T细胞抗原表位预测,根据预测结果,合成表位多肽,用ELISpot试验检测预测表位在临床结核病患者中的免疫反应性。分别采用高、低剂量（100 μg/只和50 μg/只）的Rv0585c抗原表位多肽、同时以高、低剂量（50 μg/只和20 μg/只）的Ag85B蛋白抗原为对照,对随机分组的BALB/c小鼠进行免疫。利用ELISA方法检测IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的水平。结果 经生物信息学技术预测到Rv0585c 66个人T细胞抗原表位,选取合成了表位分布集中的抗原表位多肽9条。人群ELISpot试验筛选出3条阳性人T细胞表位多肽：P10110、P10112、P10117,用于肺结核检测的灵敏度分别为14.00%、12.00%和6.00%,特异度分别为100.00%、100.00%和97.96%;联合用于肺结核检测的灵敏度和特异度分别为22.00%和97.96%。动物免疫试验结果显示,P10110多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10,P10112多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2和IL-10,均高于阴性对照组,差异有统计学意义（P<0.001）。结论 Rv0585c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性,能刺激机体产生较强烈的细胞免疫应答,具有潜在的结核病细胞免疫诊断和新型结核疫苗的应用价值。     

2013—2018年河南省5个耐药监测点结核分枝杆菌耐药性

目的 了解河南省5个耐药监测点结核分枝杆菌的耐药情况,为制定结核病疫情控制策略提供参考。 方法 收集2013—2018年河南省5个耐药监测点1 716例结核病患者临床分离株及临床信息,采用比例法测定9种常用抗结核药物敏感性,并分析其耐药特征变化。 结果 结核病患者的总耐药率为24.07%(413/1 716),耐多药率为3.73%(64/1 716)。一线抗结核药物耐药率由高到低依次为：链霉素(SM)13.34%(229株)、异烟肼(INH)10.08%(173株)、利福平(RIF)5.19%(89株)、乙胺丁醇(EMB)4.49%(77株);二线抗结核药物耐药率由高到低为：氧氟沙星(OFX)3.15%(54株)、卡那霉素(KAM)2.51%(43株)和卷曲霉素(CPM)2.51%(43株)、对氨基水杨酸(PAS)1.98%(34株)、丙硫异烟胺(PTO)1.46%(25株)。耐药谱结果显示,413株菌分布在68种不同耐药类型中,单耐药中SM、多耐药INH+SM组合、耐多药组合中INH+RIF和INH+RIF+SM组合的耐药率较高。初治患者耐药率和耐多药率分别为20.13%(216/1 073)、2.80%(30/1 073),复治患者耐药率和耐多药率分别为30.64%(197/643)、5.29%(34/643),复治患者耐药率和耐多药率均高于初治患者(均P＜0.05)。41~60岁年龄组患者耐药率最高(29.25%),2~20岁年龄组患者耐药率最低(13.56%),各年龄组耐药率比较,差异有统计学意义(P < 0.05)。耐药趋势分析结果显示,2013—2018年仅耐多药率呈逐年升高趋势(P＜0.05)。 结论 河南省5个耐药监测点结核分枝杆菌耐药情况仍然较为严重,耐药谱结果显示耐药类型表现多样化和复杂化,41~60岁年龄组患者耐药率较高,复治患者耐药率较高,耐多药呈上升趋势。因此需要规范治疗,同时开展耐药筛查,减少耐药患者产生,加强耐多药患者的治疗和管理,防止传播。