PCR技术快速检测空肠弯曲菌方法的建立

目的建立空肠弯曲菌的快速检测方法。方法用PCR法扩增标本菌株中弯曲菌属16SrRNA片段、空肠弯曲菌M apA片段和结肠弯曲菌CeuE片段,通过电泳后对产物进行分析。结果11份标本中有7份检出弯曲菌属16SrRNA片段,其中3份样品中检测到空肠弯曲菌M apA片段,4份样品中检测到结肠弯曲菌CeuE片段。结论PCR技术可用于空肠弯曲菌的快速检测。     

多聚酶链反应扩增技术检测空肠弯曲菌

多聚酶链反应扩增技术检测空肠弯曲菌北京市卫生防疫站（１０００１３）王斌刘园任保国空肠弯曲菌不仅是重要的人畜共患病原菌，而且也是引起食源性肠炎暴发的病原菌。空肠弯曲菌能引起人急性腹泻，在夏、秋季的腹泻病防治中，越来越被重视。常规方法检测空肠弯曲菌不仅需...     

空肠弯曲菌多重聚合酶链反应基因鉴定及其毒力相关基因分析

目的建立空肠弯曲菌、结肠弯曲菌多重聚合酶链反应（m-PCR）鉴定方法,并对菌株毒力相关基因cadF、virB11、flaA、cdtA、cdtB、cdtC的分布进行初步分析。方法利用m-PCR的方法对经过传统生物化学方法鉴定的65株弯曲菌进行鉴定,并通过空肠弯曲菌特异基因hipO、结肠弯曲菌glyA基因特异片段的PCR扩增对鉴定的结果进一步验证;利用特异引物PCR方法初步分析其毒力、毒素相关基因cadF、virB11、flaA、cdtA、cdtB和cdtC的分布。结果m-PCR扩增结果发现65株不同来源的弯曲菌,42株为空肠弯曲菌,23株为结肠弯曲菌。hipO、glyA基因PCR扩增结果与m-PCR扩增结果一致。16．9%菌株PCR鉴定结果与传统的生物化学鉴定结果不一致。100%（65/ 65）菌株cadF、flaA基因阳性,并且PCR扩增片段大小一致。virB的阳性率为10．8%（7/65）,其中空肠弯曲菌阳性率11．9%（5/42）,结肠弯曲菌阳性率为8．7%（2/23）。空肠弯曲菌、结肠弯曲菌cdtA的阳性率分别为100%（42/42）和78%（18/23）;空肠弯曲菌cdtB扩增的的阳性率为97．6%（41/42）。而23株结肠弯曲菌扩增结果均为阴性;空肠弯曲菌、结肠弯曲菌cdtC的阳性率皆为100%,但PCR扩增产物大小不一致,空肠弯曲菌为555 bp,结肠弯曲菌约为465 bp。结论m-PCR的方法可以有效的对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌进行属内分型。中国菌株细胞溶涨毒素基因簇cdt基因的特征与文献报道国外菌株存在差异。     

环介导等温扩增法检测空肠弯曲菌

目的 空肠弯曲菌是重要的食源性疾病病例标本的病原菌检测项目,用环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的方法,对食源性致病菌空肠弯曲菌进行快速检测。方法 以空肠弯曲菌 mapA 基因序列为检测靶基因,建立了空肠弯曲菌的LAMP 快速检测方法。空肠弯曲菌的LAMP反应由DNA扩增试剂盒提供的反应体系加入引物和模板进行。做了空肠弯曲菌DNA模板灵敏度的检测、菌液灵敏度的检测和特异性检测。结果 我们方法对空肠弯曲菌DNA 的检测灵敏度为84.5fg/反应管;对空肠弯曲菌菌液检测灵敏度为0.8 CFU/反应管;特异性100%。结论 对食源性疾病腹泻样本的空肠弯曲菌检测项目,可以采用mapA-LAMP方法进行等温扩增初筛,初筛阳性的样品再有针对性地进行后续的传统培养。     

2018—2021年北京市丰台区腹泻病例弯曲菌耐药特征分析

目的 了解北京市丰台区弯曲菌的耐药率和耐药谱,对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌耐药率进行比较分析。方法 采用双孔滤膜法对辖区哨点医院收集的2018—2021年腹泻病例粪便标本进行弯曲菌的分离培养、实时荧光PCR鉴定、全自动生化鉴定及飞行质谱鉴定,采用琼脂稀释法对弯曲菌进行药敏试验,并进行耐药分析。组间计数资料的比较应用χ²检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 共收集粪便标本1 354份,弯曲菌检出率8.12%,其中空肠弯曲菌82.73%,结肠弯曲菌17.27%。弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星和四环素的耐药率最高,均为73.64%,且2019年弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星和四环素的耐药率高于2018年和2021年。空肠弯曲菌对红霉素、阿奇霉素、庆大霉素、链霉素、泰利霉素和克林霉素的耐药率低于结肠弯曲菌。空肠弯曲菌多重耐药率为36.26%,耐药谱以氟喹诺酮类-四环素类-氯霉素类抗生素三重耐药为主。结肠弯曲菌多重耐药率为57.89%,耐药谱以氟喹诺酮类-四环素类-氨基糖甙类-大环内酯类-林可酰胺类抗生素五重耐药为主。结论 北京市丰台区腹泻病例弯曲菌的耐药情况均较为严重,应加强...     

上海市2013-2016年门诊腹泻患者弯曲菌流行特征及耐药研究

目的 了解2013-2016年上海市门诊腹泻患者弯曲菌流行特征及耐药情况。方法 2013-2016年,采用膜过滤法对上海市23家医院肠道门诊腹泻病例粪便肛拭标本开展弯曲菌检测,并用常规生化试验和PCR方法鉴定分离菌株。采用微量肉汤稀释法对弯曲菌进行8种抗菌药物（阿奇霉素、环丙沙星、红霉素、庆大霉素、四环素、萘啶酸、泰利霉素、克林霉素）敏感试验。结果 在10 444例腹泻患者粪便肛拭标本中共分离到179株弯曲菌,检出率为1.7%,其中空肠弯曲菌占94.4%,结肠弯曲菌占5.6%。不同年龄人群弯曲菌检出率存在差异,儿童的检出率比成年人高。4-6月和10-12月是弯曲菌的发病高峰。空肠弯曲菌对环丙沙星、四环素、萘啶酸的耐药率高,为96.4%、83.4%、81.7%,结肠弯曲菌耐药率高于空肠弯曲菌,人源弯曲菌存在多重耐药菌株。结论 弯曲菌是上海市腹泻病门诊重要病原体之一,存在不同年龄人群、不同季节的分布差异。上海市人源弯曲菌对环丙沙星、四环素、萘啶酸的耐药情况严重。     

广西南宁市腹泻人群空肠弯曲菌流行状况调查

目的了解南宁市腹泻人群中空肠弯曲菌的感染流行状况。方法在南宁市对腹泻病例进行流行病学调查并采集粪便标本,进行实验室空弯菌的分离培养、PCR鉴定以及脉冲场凝胶电泳分型（PFGE）分析。结果在775份粪便样品中,3份空肠弯曲菌阳性,平均阳性率0.39%。所有生化结果阳性的菌株其PCR复核鉴定结果均为阳性。3株空肠弯曲菌经Cluster分析后得到3个PFGE带型。结论南宁市存在空肠弯曲菌感染病例,本研究结果为正确评价南宁市腹泻人群弯曲菌的流行状况和制定防控措施提供了科学依据。     

PCR及其相关技术在腔肠弯曲菌诊断研究中的应用

空肠弯曲菌是人类急性腹泻最重要的病原菌之一，对空肠弯曲菌进行快速的分离和鉴定，具有重要的流行病学意义和临床应用价值。本文就ＰＣＲ及其相关技术在空肠弯曲菌诊断断研究中的应用作一简要综述。     

肉鸡弯曲菌带菌调查报告

目的:调查肉鸡携带弯曲菌情况,评价肉鸡中弯曲菌对食品安全的风险影响,为食品安全风险评估提供科学依据。方法:在7月-11月份随机抽取5个大型养殖场将出栏食用的肉鸡,检测泄殖腔中空肠弯曲菌、结肠弯曲菌、海鸥弯曲菌。结果:弯曲菌检出率为30%,其中空肠弯曲菌为12.2%,结肠弯曲菌为13.3%、海鸥弯曲菌为4.4%,优势类型弯曲菌呈点状分布,10月份检出率最高。结论:肉鸡中弯曲菌携带率较高,存在较高的食品安全风险。     

北京市房山区腹泻患者空肠弯曲菌感染及菌株分型耐药特征

目的了解北京市房山区感染性腹泻患者空肠弯曲菌感染及分离株的病原学特征。方法 2017年5—12月,收集2家医院腹泻患者的粪便标本,进行弯曲菌的分离、培养及鉴定。对分离的空肠弯曲菌进行11种抗生素的敏感性检测,并对菌株进行多位点序列分型。结果共检测标本286份,分离到弯曲菌31份,检出率为10.80%;经质谱鉴定28株为空肠弯曲菌,3株为结肠弯曲菌。空肠弯曲菌可分为23种不同的ST型,其中4株为ST22,2株为ST760,2株为ST6500,其他20株分别属于20种ST型别;研究发现3个新的ST型,分别为ST9253、ST9254和ST9255。28株空肠弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星、四环素的耐药率达100.00%,对氟苯尼考的耐药率为39.29%,对红霉素、阿奇霉素、泰利霉素、克林霉素敏感。结论北京市房山区腹泻患者空肠弯曲菌感染率较高,对喹诺酮、氟喹诺酮类、四环素类药物耐药严重,对大环内酯类、酮内酯类和林可酰胺类药物敏感;菌株的ST型呈多样性分布。     

空肠/结肠弯曲菌的生物分型和质粒分析及其在流行病学中的初步应用

本文对来自成都地区的弯曲菌进行了生物分型和质粒分析,并结合血清学分型应用于弯曲菌肠炎病人家庭的调查。116株弯曲菌中,空肠弯曲菌生物1型、生物2型和结肠弯曲菌分别占58.6%、4.3%和37.1%;人源菌和鸡源菌均以空肠弯曲菌生物1型为主,猪源菌主要为结肠弯曲菌。弯曲菌质粒检出率为18.9%,检出的质粒株中,大多含2~3个质粒带,分子量﹤1.4~58×10⁶道尔顿;结肠弯曲菌的质粒检出率(34.21%)明显高于空肠弯曲菌(10.29%)。两个病家的调查结果说明:生物分型和质粒分析在追踪弯曲菌感染的传播中具有一定价值,可以作为弯曲菌感染流行病学调查的有用工具。     

Campylobacter jejuni in broiler chickens: colonization and humoral immunity following oral vaccination and experimental infection

A formalin inactivated, Campylobacter jejuni whole cell vaccine, either with or without Escherichia coli heat labile toxin (LT) as a mucosal adjuvant, was administered orally to broiler chickens. Three vaccine trials were performed, differing in the number of vaccinations, and time of administration, as well as the inclusion and dose of LT. The overall reductions of C. jejuni colonization in the vaccinated chickens ranged from 16 to 93% compared with non-vaccinated controls. Enhanced levels of anti-C. jejuni secretory IgA antibodies were demonstrated in vaccinated chickens. Vaccination also appeared to induce an anamnestic response to C. jejuni antigens in the 14–33 kDa range, as demonstrated by Western immunoblots. Interestingly, the inclusion of LT in the vaccine regimen did not appear to boost the immunogenicity of the vaccine. These results are encouraging and suggest that future development of successful oral vaccines for the control of enteropathogenic Campylobacter in poultry is feasible.     

一起空肠弯曲菌导致急性胃肠炎暴发事件的病原特征分析

目的 对一起急性胃肠炎暴发事件进行实验室检测分析。方法 对暴发事件中采集的病例粪便标本、厨师粪便标本、环境涂抹、食品原材料等样本进行实时荧光定量PCR检测和细菌分离培养分析。对分离菌株进行PFGE分型分析并对病例分离株进行抗生素敏感性检测和全基因组测序分析。结果 4例病例粪便标本空肠弯曲菌核酸检测阳性,其中1例未服用抗生素的病例分离到空肠弯曲菌;从4份生鸡样本中获得12个空肠弯曲菌单菌落和7个结肠弯曲菌单菌落。病例分离株对萘啶酸、环丙沙星、氯霉素、氟苯尼考和四环素耐药;基因组测序分析确定该菌株为ST10075型,并确定其染色体上含有cmeABCR、tetO/M和blaOXA-61等耐药元件,而23S rRNA的2 074和2 075位点均未发生突变,gyrA基因的257位点发生了C-T的突变。结论 实验室检测结果表明空肠弯曲菌的感染可能是导致此次急性胃肠炎暴发的主要病原。     

小儿空肠弯曲菌肠炎的流行特征及血清型分布的研究

本文在对小儿空肠弯曲菌肠炎进行全年流行情况和临床观察的基础上,采用Penner法对菌株分型,以初步了解其流行动态和成都地区流行株的全年血清型分布情况。1984年7月至1985年6月,1017例急性腹泻患儿粪便培养出空肠弯曲菌者116例,阳性率为11.41%;健康儿305例,检出3例,阳性率0.98%。1~5岁最易罹患,男女患病率无明显差异。夏季为发病高峰。采用Penner法作血清分型定型率为73%,说明Penner法也适用于我国,但尚有不能分型的菌株存在。全年主要流行株血清型为3、21和45型。流行株有时间集中现象,说明空肠弯曲菌感染存在流行性趋势,在流行病学上应引起高度重视。     

艰难梭菌感染诊断团体标准解读

艰难梭菌是引起抗生素相关性腹泻和医疗机构相关性腹泻的重要病原,在欧美引起暴发流行,造成沉重疾病负担。然而我国艰难梭菌感染调查缺乏统一的诊断原则和检测技术规范,我国艰难梭菌感染率和疾病负担尚不明确。因此中国CDC传染病预防控制所联合全国其他11家单位撰写《艰难梭菌感染诊断（T/CPMA 008-2020）》中华预防医学会...     

Campylobacter enteritis in Portugal: Epidemiological features and biological markers

From 1984 to 1989, stool samples from 2811 gastroenteritis cases were examined for the presence ofCampylobacter jejuni andC. Coli, Salmonella, Shigella andYersinia species. Isolation rates were:Campylobacter jejuni andC. Coli, 5.3%,Salmonella spp., 14.8%,Shigella spp., 4.6% andYersinia enterocolitica, 1.1%. Age group distribution analysis shows a higherCampylobacter isolation rate in children under one year of age. Seasonal distribution revealed a peak incidence in winter as in other Meditteranean countries. Predominant biotypes wereC. jejuni I (51%),C. jejuni II (21.5%) andC. coli I (18.8%). Antimicrobial susceptibility testing did not reveal resistance to erythromycin. Thirty of the strains harboured plasmids with 7 different profiles.     

Prevalence,characterisation and antimicrobial resistance of Campylobacter and Salmonella in raw poultrymeat in the UK, 2003–2005

This study was conducted to determine the prevalence and antimicrobial resistance of Campylobacter and Salmonella isolates from retail poultrymeat in the UK during 2003–2005. Poultrymeat (n = 2104) were more frequently contaminated with Campylobacter (57.3%) than with Salmonella (6.6%). Chicken exhibited the highest contamination from Campylobacter (60.9%), followed by duck (50.7%), turkey (33.7%) and other poultrymeat (34.2%). Duck had the highest contamination from Salmonella (29.9%), compared with chicken (5.6%), turkey (5.6%), and other poultrymeat (8.6%). C. jejuni predominated in raw chicken, whereas C. coli predominated in turkey and duck. C. coli isolates were more likely to exhibit antimicrobial drug resistance, including quinolones, than C. jejuni. Salmonella Enteritidis was the most frequent Salmonella serotype isolated. Salmonella isolates from turkey exhibited higher rates of multiple drug resistance (55.6%) than isolates from chicken (20.9%) and duck (13.6%). The findings reinforce the importance of thorough cooking of poultrymeat and good hygiene to avoid cross-contamination.     

Heat-stable antigen serotyping of Campylobacter jejuni strains isolated from hospitalized children in Athens, Greece

A hundred and twentynine Campylobacter jejuni strains isolated from hospitalized children with gastroenteritis were serotyped by the heat-stable antigen scheme (HS, Penner's method). Isolates belonged to two different periods. Group A contained strains isolated in 1987–1988 and group B contained strains which were isolated in 1998–2000. A variety of serotypes was found. Serotype HS:2 was predominant, followed by the HS:4 complex and HS:1,44. Many clinically important Guillain-Barré Syndrome associated serotypes – like HS:19 – were identified. There were no significant differences in the distribution of serotypes between the two periods. The present report provides reference data, as this is the first C. jejuni serotyping study ever made in Greece.     

一起空肠弯曲菌感染在托幼机构中的传播

本文报告一起1982年8月发生于托幼机构中的空肠弯曲菌感染的传播。此次传播造成班内反复出现腹泻患儿达月余。13名入托婴幼儿中，大便培养为空肠弯曲菌者8例，阳性率61.5%。其中3例为腹泻患儿，5例为无症状带菌者。经红霉素、庆大霉素等药物治疗，症状迅速消失。定期复查大便培养三个月，均为阴性。通过追溯，考虑造成此次流行的传染源为一与院内放养的鸡有密切接触史的腹泻患儿。作者指出空肠弯曲菌为婴幼儿重要的肠道致病菌；鸡可能为其重要储存宿主。通过粪——口途径完成的人——人传播是导致托幼机构中空肠弯曲菌感染流行的主要方式。