创伤脓毒症患者外周血Th17/Treg平衡变化及临床意义

目的 探讨严重创伤患者外周血中Th17和调节性T细胞(Treg)比例变化及其临床意义. 方法 35例多发伤患者根据治疗期间是否发生脓毒症分为创伤组(22例)和脓毒症组(13例),选择9例健康志愿者设为对照组.采集外周血,流式细胞术检测Th17和Treg比例,实时荧光定量RT-PCR检测RORγt和FoxP3 mRNA表达,ELISA检测血清IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-23、转化生长因子-β(TGF-β)、干扰素-γ(IFN-γ)和C反应蛋白(CRP)水平,分析Th17/Treg比值变化及其临床意义. 结果 创伤组Th17比例与对照组差异无统计学意义,Th 17/Treg比值较对照组稍低(P＜0.05);而脓毒症组外周血Th17比例和Th17/Treg比值显著高于创伤组和对照组(P＜0.01).脓毒症组血清TGF-β、IL-6及IL-23含量均明显高于对照组(P＜0.01);脓毒症组与创伤组比较血清TGF-β含量差异无统计学意义,而血清IL-6、IL-23含量明显高于创伤组(P＜0.01);脓毒症组血清IL-17含量明显高于创伤组和对照组(P＜0.01).脓毒症组RORγt mRNA水平表达高于创伤组和对照组(P＜0.01). 结论 Th17/Treg失衡与创伤脓毒症的发生密切相关.     

转录因子ROR γt对妊娠期哮喘模型小鼠Th17/Treg平衡的调节作用

目的观察妊娠期哮喘模型小鼠Th17细胞相关细胞因子和维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)的表达变化,探讨地塞米松(DXM)对小鼠气道炎症和Th17细胞分泌功能的影响。方法 30只雌性BALB/c小鼠随机分为健康妊娠(HP)组、妊娠期哮喘(AP)组和地塞米松(DXM)组,每组10只。AP组和DXM组于实验当天(0d)和7、14d时分别给予OVA/Al(OH)3混悬液腹腔注射致敏,HP组仅给予单纯等量生理盐水(NS)。3组小鼠合笼交配至妊娠成功。于21d起,连续7d对AP组和DXM组给予50g/L OVA雾化激发(1次/d,40min/次);DXM组于雾化吸入OVA前30min给予1mg/kgDXM腹腔注射;HP组仅给予单纯等量NS进行雾化激发。各组小鼠于末次激发24h后进行气道反应性检测,结果以相应浓度乙酰胆碱(Mch)激发下增强的呼吸间歇(Penh)值与基线值的百分比[Penh值(%)]来表示;分析支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及分类计数;取肺组织行病理学观察;采用流式细胞仪检测外周血Th17和Treg细胞的比例并计算Th17/Treg比值;ELISA法测定外周血IL-17、IL-23、IFN-γ和RORγt含量,RT-PCR法检测前述因子在肺组织中的表达,Western blotting检测肺组织中RORγt的表达。结果雌性BALB/c小鼠以OVA致敏后气道反应性增加,BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞(Eos)、淋巴细胞(Lym)和中性粒细胞(Neu)比例增加,肺组织病理学改变符合哮喘的特征。外周血标本中,AP组Th17细胞显著升高,Treg细胞显著降低(P<0.05),Th17/Treg比值上升。DXM组Th17和Treg细胞变化趋势与AP组相同,Th17/Treg比值高于HP组,但低于AP组(P<0.05)。分别在肺组织和外周血标本中检测蛋白和mRNA表达水平,结果显示,AP组IL-17、IL-23及RORγt含量均高于HP组及DXM组(P<0.05),IFN-γ含量低于HP组及DXM组(P<0.05)。AP组肺组织RORγt蛋白的表达(61.27%±3.11%)明显高于DXM组(37.51%±1.93%,P<0.01)和HP组(22.39%±0.86%,P<0.01),后两者比较差异亦有统计学意义(P<0.01)。相关分析表明,AP组肺组织RORγt蛋白表达量与Eos、Lym和Neu细胞绝对值呈显著正相关(r=0.879、0.759、0.802,P<0.01),与外周血IL-17含量、肺组织IL-17mRNA表达水平亦呈正相关(r=0.696、0.863,P<0.01)。结论 Th17细胞分泌功能及RORγt表达上调参与了妊娠期哮喘的发生发展。DXM干预在改善哮喘症状的同时可降低RORγt表达,使Th17分化和增殖功能受抑。     

急性胰腺炎患者外周血中Th17和Treg细胞及其细胞因子水平变化

目的：研究急性胰腺炎患者外周血中辅助性T细胞(Th17细胞)与调节性T细胞（regulatory cells,Treg细胞）及其细胞因子的水平变化。方法选取2014年8月—2015年8月来我院接受治疗的急性胰腺炎患者92例,其中轻度急性胰腺炎（mild acute pancreatitis,MAP）患者39例作为MAP组,中度急性胰腺炎（moderately severe acute pancreatitis,MSAP）患者29例作为MSAP组,重度急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）患者24例作为SAP组,并以25名健康体检者作为对照组。采用流式细胞术分别检测4组外周血中Th17和Treg细胞比例,采用实时荧光定量PCR分析外周血白细胞中白介素17（IL-17）、白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）、转化生长因子-β（TGF-β）等因子mRNA水平,采用ELISA法检测血清中细胞因子IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β等因子蛋白质水平。结果与对照组比较,MAP、MSAP和SAP组外周血Treg细胞比例、Treg/Th17比值明显下降,而Th17细胞比例明显升高（P＜0.05）。与对照组比较,MAP、MSAP和SAP组患者外周血细胞和血清中IL-10和TGF-β mRNA和蛋白质水平显著下降（P＜0.05),而IL-17和IL-6 mRNA和蛋白质水平显著升高（P＜0.05）。结论急性胰腺炎患者外周血Treg细胞和Th17细胞比例以及相关细胞因子表达水平失衡,对进一步探讨急性胰腺炎发病机制具有重要意义。     

太极拳运动对中老年女性Th1/Th2平衡影响的机制研究

目的:从细胞因子角度在基因表达水平上探讨太极拳运动前后调节性T细胞(regulatoryT cells,Treg)对辅助性T细胞(helper T cell,Th)亚群Th1/Th2平衡的影响。方法:将自愿参加本实验的34名中老年女性随机分为太极拳组和对照组。太极拳组参加为期32周、每周3次、每次1小时的24式和42式太极拳锻炼;对照组不锻炼,保持原有生活状态。实验前后采集受试者外周血,使用流式细胞术检测Treg细胞数量;使用Real-time PCR定量分析Th1型淋巴细胞相关细胞因子干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)和Th2型淋巴细胞相关细胞因子白介素-4(Interleukin-4,IL-4)、Treg相关细胞因子白介素-10(Interleukin-10,IL-10)和转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)以及细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4)mRNA表达。结果:实验后,太极拳组IFN-γ、TGF-β、CTLA-4和IL-10 mRNA表达量较实验前显著上升(P<0.01),IFN-γ与IL-4 mRNA表达量比值显著上升(P<0.05),Treg细胞占CD4+T细胞比例显著上升(P<0.01)。实验后,对照组除TGF-βmRNA表达下降(P<0.05)外,其他指标变化均无统计学意义。结论:太极拳运动影响外周血Treg细胞数量及相关细胞因子mRNA表达,提高中老年女性Th1/Th2型细胞因子mRNA表达量比值,在基因表达水平上改善老年女性Th1/Th2失衡。     

高强度间歇训练对武警战士T淋巴细胞稳态的影响

 目的 探讨高强度间歇训练(high-intensity interval training,HIIT)对武警战士T淋巴细胞稳态(Th1/Th2和TH17/Treg)的影响。方法 选取23名武警男性战士分别进行急性(1次)和短期(4周、3次/周)HIIT,于1次HIIT运动前、运动后即刻、运动后60 min及4周HIIT前后取静脉血利用流式细胞术测定细胞因子IFN-γ(Th1亚群)、IL-4(Th2亚群)、IL-17A(Th17亚群)、TGF-β(Treg亚群),以及Treg细胞活化标志物CD39、LAP和GARP相对表达量(用阳性细胞率表示)。结果 1次HIIT后即刻,Th1细胞IFN-γ表达上调(P<0.05),60 min后,Treg细胞GARP、LAP和CD39表达量升高(P<0.05),IFN-γ恢复(P>0.05);IL-4在各时间点均无显著性变化(P>0.05)。4周HIIT后,Treg细胞LAP表达下调(P<0.05)。未检测到IL-17A和TGF-β表达量。结论 1次急性HIIT暂时性破坏Th1/Th2稳态并使Th1/Th2平衡向Th1漂移,运动后恢复期具有免疫抑制作用的Treg细胞被动员,其作用可能参与T细胞稳态的调节与重建。短期(4周)HIIT诱导Treg细胞免疫抑制能力减弱,但T细胞稳态平衡无显著性改变。     

三白益肾方加减辅助治疗脾肾亏虚型慢性肾炎的效果及对24 h尿总蛋白定量、Th17/Treg细胞的影响

目的 分析三白益肾方加减辅助治疗脾肾亏虚型慢性肾炎的效果及对24 h尿总蛋白定量、Th17/Treg细胞的影响。方法 选取2020年1月—2022年1月收治的100例脾肾亏虚型慢性肾炎为研究对象,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组50例。对照组采取厄贝沙坦片治疗,观察组采取三白益肾方加减辅助厄贝沙坦片治疗,连续治疗2个月。比较2组中医疗效及安全性,同时比较2组治疗前后中医证候积分、24 h尿总蛋白定量、肾功能指标[尿微量白蛋白/肌酐比值(ACR)、血尿素(BUN)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(CysC)]、Th17/Treg细胞及其细胞因子[白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、转化生长因子-β1(TGF-β1)]。结果 治疗2个月后,观察组治疗总有效率90.00%(45/50)明显高于对照组72.00%(36/50)(P<0.05)。治疗1、2个月后,观察组中医证候积分、24 h尿总蛋白定量、BUN、Scr、ACR、CysC、Th17/Treg细胞及血清IL-17、IL-23水平均低于对照组,血清TGF-β1、IL...     

新型辅助性T细胞亚群Th9与相关疾病的研究进展

一直以来,人们普遍认为CD4+T辅助细胞(Th)受到外来抗原刺激可分化为具有不同表型、细胞因子分泌特征及功能的T细胞亚群Th1、Th2、Th17及调节性T细胞(Treg).然而,近年来随着研究的深入,一群与上述已知的T细胞亚群不同的CD4+ Th细胞被发现,这群T细胞的分化过程需要白细胞介素4(IL-4)及转化生长因子β(TGF-β)的协同刺激,并且主要分泌IL-9和IL-10,因此被命名为Th9.越来越多的证据表明,Th9与多种疾病密切相关.本文就近年来Th9的发现、诱导及培养特性,以及在移植免疫等相关疾病中的作用做一综述.     

白血病与骨髓增生异常综合征患者Th17、白细胞介素21及白细胞介素1β水平变化研究

目的 探讨急性髓系白血病(AML)与骨髓增生异常综合征(MDS)患者Th17、白细胞介素21(IL-21)及白细胞介素1β(IL-1β)水平的变化。方法 将自2016年1月至2020年12月河北医科大学第一医院收治的20例AML患者纳入AML组,30例MDS患者纳入MDS组。将MDS组中难治性贫血原始细胞增多(MDS-RAEB)患者纳入MDS-RAEB亚组(n=15),难治性贫血(MDS-RA)患者纳入MDS-RA亚组(n=15)。另选取同期于我院体检的20例健康者纳入对照组。比较各组研究对象外周血及骨髓单个核细胞Treg细胞、Th17细胞比例。采用Pearson相关性分析对AML、MDS患者Th17细胞与Treg细胞的相关性进行分析。观察各组研究对象外周血白细胞介素17(IL-17)、IL-21、IL-1β、转化生长因子β(TGF-β)水平差异。结果 与对照组比较,AML组和MDS组外周血及骨髓单个核细胞Treg细胞、Th17细胞比例明显升高,且MDS组高于AML组,差异有统计学意义(P<0.05)。MDS-RA亚组外周血及骨髓单个核细胞Treg细胞、Th17细胞比例高于MDS...     

γ射线对小鼠造血功能及T细胞亚群功能的影响

目的 观察γ射线对小鼠造血功能及外周血T细胞相关细胞因子和脾脏T细胞转录因子的影响,探讨射线引起的造血功能损伤与免疫异常的相关性。方法 将50只BALB/c小鼠用随机数字表法分为两组：照射组（40只）和空白对照组（10只）,照射组小鼠予⁶⁰Co γ射线（1.0 Gy/min,5.5 min）照射,空白对照组予假照射,照射组于照射后4、8、12及20 d,空白对照组于20 d,计数小鼠外周血白细胞和血小板;骨髓病理切片观察骨髓造血组织增生情况;流式细胞微球芯片捕获技术（CBA）检测外周血中Th1/Th2/Th17细胞因子含量变化;Western blot法检测脾脏Th1/Th2、Th17/Treg细胞分化特异性转录因子T-bet/GATA-3、RORγt/Foxp3蛋白表达水平。结果 照射组小鼠外周血白细胞和血小板计数较空白对照组显著降低（t_白细胞=18.48、15.72、9.79、3.30,t_血小板=22.52、19.74、11.78、4.70,P<0.05）。照射组骨髓病理切片与空白对照组相比,骨髓增生显著低下,造血组织面积减少,被脂肪组织大量替代,巨核细胞少见,照射后8 d较20 d骨髓抑制更明显。照后8和12 d,照射组小鼠外周血Th1类细胞因子IFN-γ、TNF-α及Th2类细胞因子IL-4、IL-6含量较空白对照组明显升高,IL-17A含量照射组较空白对照组亦明显升高（t_IFN-γ=2.93、3.36,t_TNF-α=6.09、8.11、6.43、4.49,t_IL-4=4.49、3.18,t _IL-6 =5.11、8.67、6.67、8.55,P<0.05）。与空白对照组比较,照射组脾脏RORγt蛋白在照射后4、8和12 d及GATA-3、Foxp3蛋白在各时间点表达水平均降低（t_RORγt=6.79、4.31、4.47,t_GATA-3=3.88、8.06、2.84,3.23,t_Foxp3=10.00、8.06、2.89、5.93,P<0.05）。而照射组T-bet蛋白表达较空白对照组升高（t=5.64、2.75、3.56、4.65,P<0.05）。结论 5.5 Gy γ射线照射后引起小鼠骨髓造血抑制,同时导致Th1/Th2、Th17/Treg细胞亚群功能失衡,提示由射线引起的免疫异常可能参与骨髓造血功能的损伤。     

浆细胞性乳腺炎患者外周血Th17细胞的变化

目的观察浆细胞性乳腺炎(PCM)患者外周血Th17细胞数量的变化。方法采用流式细胞术检测慢性期PCM(CPCM)患者、亚急性期PCM(SPCM)患者、急性期PCM(APCM)患者和健康对照者(HC)的外周血中Th17细胞百分率;采用ELISA检测上述四组受检者的血浆IL-17和IL-23水平。结果 CPCM、SPCM和APCM三组患者的外周血Th17细胞数量、IL-17和IL-23水平依次增高,且均高于HC组,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PCM患者的外周血Th17细胞数量有所增多且功能增强。     

细胞因子对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响

目的 研究外源性肿瘤坏死因子β(TGF-13)、白细胞介素(IL)-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响,并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制.方法 用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)刺激小鼠脾单个核细胞4h,将细胞因子与脾单个核细胞共培养72h,根据加入细胞因子的不同,将培养细胞分...     

产后甲状腺炎妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平分析

目的分析产后甲状腺炎(PPT)妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平。方法连续选择2011年1月—2012年12月在我院门诊新确诊的PPT妇女(PPT组)31例,另有29例同期分娩未发生PPT的妇女为对照组。入选对象同期接受外周血调节性T细胞(CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测。结果 PPT妇女外周血CD8+表达水平明显低于对照组(P<0.01),而CD+4/CD+8比值明显高于对照组(P<0.05)。PPT妇女外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg均明显低于对照组(P均<0.05~0.01)。结论PPT妇女存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

Treg分化对放射性肺损伤的影响

目的 探讨调节性T细胞（Treg）的分化对放射性肺损伤的影响及其作用机制。 方法 建立Treg抑制小鼠模型,按随机数字表法将C57BL/6小鼠分成4组：空白对照组、单纯照射组、照射+免疫球蛋白G（IgG）组和照射+CD25组,每组12只,除空白对照组外其余3组小鼠给予单次20 Gy X射线全胸照射,照射+IgG组和照射+CD25组小鼠每周腹腔注射IgG抗体和CD25抗体。分别于照射后第4周和第8周各处死小鼠6只,采用流式细胞术检测小鼠肺组织内CD25+Foxp3+Treg（Foxp3：叉头样转录因子3）的百分比以鉴定模型是否建立成功;采用Western blot法检测单纯照射组小鼠肺组织内神经纤毛蛋白1（NRP1）的表达;采用免疫荧光法检测每组小鼠肺组织内CD25+NRP1+Treg的百分比;拍照并观察每组小鼠皮肤的损伤情况,采用苏木精-伊红染色法检测小鼠肺组织的病理学改变;采用酶联免疫吸附测定法检测每组小鼠肺组织内转化生长因子β1（TGF-β1）、白细胞介素（IL）-17A、干扰素γ（IFN-γ）、IL-2和IL-4的水平变化。两组间比较采用独立样本t检验。 结果 流式细胞术检测结果显示,照射后第4周和第8周,单纯照射组小鼠肺组织内CD25+Foxp3+Treg百分比[（1.73±0.04）%、（2.13±0.15）%]均较空白对照组[（1.14±0.02）%、（1.70±0.06）%] 明显升高,差异均有统计学意义（t=−26.680、−4.545,P=0.000、0.010）,抑制Treg后,第4周和第8周时照射+CD25组小鼠肺组织内CD25+Foxp3+Treg百分比[（0.72±0.14）%、（0.27±0.02）%]均较单纯照射组明显降低,差异均有统计学意义（t=5.296、37.538,均P=0.000）。Western blot结果显示,照射后第4周和第8周,单纯照射组小鼠肺组织内NRP1蛋白表达水平均较空白对照组升高,差异均有统计学意义（t=−7.341、−9.127,均P=0.000）。免疫荧光法检测结果显示,照射后第4周和第8周,单纯照射组小鼠肺组织内CD25+NRP1+Treg的百分比均较空白对照组升高,而照射+CD25组CD25+NRP1+Treg百分比均较单纯照射组降低,且差异均有统计学意义（t=8.926、14.457,P=0.001、0.000）。观察小鼠皮肤损伤程度后发现,照射后第4周和第8周,单纯照射组小鼠皮肤损伤严重,而照射+CD25组小鼠照射后第4周时皮肤基本完好,第8周时出现脱毛脱皮。病理学结果显示,照射后第4周和第8周,与空白对照组相比,单纯照射组小鼠的肺组织结构破坏,肺泡壁增厚,细胞外基质增多,而照射+CD25组小鼠的肺组织结构完整,肺泡壁纤细。酶联免疫吸附测定结果显示,与空白对照组相比,照射后第4周,单纯照射组小鼠肺组织内IL-17A和IL-4的水平均升高,差异均有统计学意义（t=−8.492、−15.796,P=0.001、0.000）,照射后第8周,TGF-β1和IL-17A水平升高,差异均有统计学意义（t=−11.072、−7.167,P=0.000、0.002）,IL-2水平在第4周和第8周时均降低,IFN-γ水平在第4周时升高,差异有统计学意义（t=−27.393,P=0.000）,第8周时下降;与单纯照射组相比,照射+CD25组小鼠TGF-β1和IL-17A水平在第4周和第8周时均降低（t=6.037、4.524、5.496、4.772,均P=0.000）,IFN-γ水平升高（t=−7.006、−12.565,P=0.002、0.000）,差异均有统计学意义,而IL-2和IL-4水平在第4周时均降低,第8周时均明显升高,差异均有统计学意义（t=2.866、−9.090、8.833、−7.191,均P=0.000）。 结论 放射性肺损伤小鼠的肺组织中出现Treg分化,并增强分泌TGF-β1促炎因子,同时干扰辅助T细胞（Th1、Th2型）细胞因子的平衡来促进放射性肺损伤的发生。     

肝移植急性排异患者外周血Th17及调节性T细胞的特征及意义

目的 探讨肝移植术后急性排异患者外周血中Th17细胞、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的变化特征及临床意义.方法 2011年1-9月解放军302医院肝移植研究中心收治的肝移植术后患者25例,根据移植组织穿刺活检病理结果分为急性排异组(排异组,12例)和非排斥稳定组(稳定组,13例),另选取13名健康体检者作为对照.采用流式细胞分析法检测外周血中Th17、Treg细胞占CD4+T细胞的比例,观察Th17/Treg比值变化及其与肝脏损伤的关系.结果移植术后排异组外周血中Th17占CD4+T细胞的比例(3.50％±0.86％)明显高于稳定组(2.10％±0.52％)和对照组(1.79％±0.42％,P＜0.01),稳定组和对照组比较无统计学差异(P＞0.05).排异组和稳定组患者外周血中Treg占CD4+T细胞的比例(分别为0.90％±0.25％、1.51％±0.23％)明显低于对照组(2.57％±0.79％,P＜0.01),且排异组明显低于稳定组(P＜0.05).排异组Th17/Treg比值(4.20±1.69)明显高于稳定组(1.43±0.47)及对照组(0.75±0.28,P＜0.01),且稳定组明显高于对照组(P＜0.01).Th17/Treg比值与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酸转氨酶(GGT)水平呈正相关(分别为r=0.5023,P=0.0105; r=0.4561,P=0.0219;r=0.4393,P=0.0280; r=0.5516,P=0.0043).结论 肝移植术后急性排异反应患者外周血中存在Th17/Treg失衡,且与肝脏损伤有一定关系.Th17/Treg失衡可能参与了肝移植术后急性排异反应的发生发展过程.     

妊娠期肝内胆汁淤积症产妇外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达分析

目的：分析妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）产妇外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平。方法：连续选择近期入院分娩的23例ICP产妇,入选对象均接受了外周血调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg和CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg）和辅助性T细胞（CD＋3、CD＋4、CD＋8、CD＋4/CD＋8）检测,并与同期住院正常怀孕产妇（对照组,20例）相同测试结果比较。结果：调节性T细胞检测数据比较中,ICP组血清CD4＋CD25＋Treg和CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg水平明显低于对照组（P均〈0.05～0.01）。辅助性T细胞检测数据比较中,ICP组血清CD＋4/CD＋8表达水平明显高于对照组,而CD＋8表达水平则显著低于后者（P均〈0.05～0.01）。结论：ICP产妇存在着外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

Th17细胞在乙肝肝硬化患者中的免疫致病机制研究

目的 探讨IL-17+CD4+T细胞(Th17细胞)在乙肝肝硬化患者中的免疫致病机制.方法 选择2008年7月一2011年12月收治的乙肝肝硬化患者60例及健康对照30名,采用流式细胞仪检测外周血Th17细胞频率及IL-17受体表达情况,ELISA法检测外周血血浆中IL-17水平,并检测IL-17刺激后人肝星状细胞LX-2中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及细胞因子IL-6、IL-8和IL-23p19的表达情况.结果 与健康对照相比,乙肝肝硬化患者外周血Th17细胞频率和血浆IL-17浓度均显著升高(P＜0.01),Th17细胞频率随肝功能损害程度的加重而增高,Child分级C级患者体内Th17频率最高,与A级患者相比差异有统计学意义(P＜0.05).LX-2细胞在IL-17刺激后IL-17受体表达上调,同时α-SMA表达也明显上调(P＜0.05),并产生了炎症相关细胞因子IL-6、IL-8和IL-23p19.结论 Th17细胞的增加不但与乙肝肝硬化患者肝功能损害程度密切相关,而且通过分泌IL-17促进了肝星状细胞的活化,加快了肝硬化的疾病进程.     

2 Gy γ射线照射对小鼠调节性T细胞和Th17细胞及其免疫平衡的影响

目的 观察2 Gy γ射线照射对小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响。方法 50只C57BL/6雄性小鼠随机数字表法分为对照组和照射组,照射组小鼠接受2 Gy γ射线一次性全身照射(剂量率为164.94 Gy/min),对照组行假照射。于照射后1、3、7、14和28 d检测外周血象的变化;流式细胞仪分析外周血、胸腺及脾脏调节性T细胞(Treg细胞)和脾脏Th17细胞数量的改变。结果 受照后小鼠外周血白细胞总数和淋巴细胞数降低(t=8.89～33.54, P<0.05)。小鼠外周血Treg略有升高;胸腺Treg在照后1、3 d显著高于对照组(t=-6.45和-10.59, P<0.05),至28 d明显低于对照组(t=5.34, P<0.05);脾脏Treg在照后1～14 d显著高于对照组(t=-6.82～-3.89, P<0.05)。脾脏Th17细胞于照后1 d出现显著增高,3 d达到最大值(t=-2.42, P<0.05),较脾脏内Treg增长更为明显。Treg/Th17比值在照后1～14 d降低,差异有统计学意义(t=4.02～8.04, P<0.05),导致Treg/Th17平衡模式向Th17方向明显偏移。结论 Treg/Th17免疫平衡失调在辐射所致免疫功能损伤中可能扮演重要角色。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血辅助性T细胞-17/调节性T细胞表达及意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病患者外周血辅助性T细胞-17/调节性T细胞表达及意义。方法选取2018年1—9月遵义医学院附属医院收治的120例慢性阻塞性肺疾病患者为研究对象。根据病情严重程度,将患者分入慢性阻塞性肺疾病稳定期组(SCOPD组,n=52)和慢性阻塞性肺疾病急性加重期组(AECOPD组,n=68);另将同期于我院体检中心接受体检的50例健康者纳入健康组。比较3组研究对象的第1秒用力呼出量/用力肺活量、第1秒用力呼出量/预计值、辅助性T细胞-17/调节性T细胞,以及辅助性T细胞-17、调节性T细胞、白细胞介素-6、白细胞介素-10、白细胞介素-1β水平。结果健康组、SCOPD组、AECOPD组的第1秒用力呼出量/用力肺活量分别为(85.10%±5.09%)、(57.44%±7.23%)、(48.31%±5.35%),第1秒用力呼出量/预计值分别为(99.15%±7.12%)、(66.10%±9.41%)、(56.37%±5.59%),均呈下降趋势,两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。健康组、SCOPD组、AECOPD组的辅助性T细胞-17分别为(2.45±0.66)×10~9个/L、(5.23±1.30)×10~9个/L、(6.48±0.82)×10~9个/L,呈上升趋势;调节性T细胞分别为(5.87±0.42)×10~9个/L、(4.12±0.31)×10~9个/L、(2.41±1.02)×10~9个/L,呈下降趋势;辅助性T细胞-17/调节性T细胞分别为(0.50±0.16)、(1.44±1.02)、(2.78±0.81),呈上升趋势。3组的辅助性T细胞-17、调节性T细胞、辅助性T细胞-17/调节性T细胞两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。健康组、SCOPD组、AECOPD组的白细胞介素-6分别为(10.58±5.11)pg/ml、(31.05±10.22)pg/ml、(70.33±14.75)pg/ml,呈上升趋势;白细胞介素-10分别为(8.15±1.12)pg/ml、(4.39±2.51)pg/ml、(3.61±0.64)pg/ml,呈下降趋势;白细胞介素-1β分别为(1.24±0.52)pg/ml、(5.56±0.41)pg/ml、(10.44±0.59)pg/ml,呈上升趋势。3组的白细胞介素-6、白细胞介素-10、白细胞介素-1β两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论外周血辅助性T细胞-17/调节性T细胞动态平衡被打破可能在慢性阻塞性肺疾病的发生和进展过程中起着至关重要的作用。在临床工作中,可将外周血辅助性T细胞-17/调节性T细胞作为慢性阻塞性肺疾病的监测指标,为慢性阻塞性肺疾病的早期诊断和防治提供指导。     

多发性硬化患者外周血调节性T细胞功能受损

目的:探讨多发性硬化患者外周血调节性T细胞(Treg)的变化及其转录因子Foxp3的表达。方法:收集58例多发性硬化(MS)患者及24例正常人外周血,通过流式细胞术检测CD4+CD25+T细胞,RT-PCR检测Foxp3的表达。结果:MS患者外周血中Treg细胞数量较正常人无差异(P>0.05),而Foxp3表达明显减低(P<0.05)。结论:MS患者外周血中Treg细胞数量较正常人无明显变化,但其功能明显受损,是导致自身免疫性疾病发生的原因之一。     

X射线照射对小鼠辅助性T细胞相关细胞因子的影响

目的 观察不同剂量X射线照射对小鼠辅助性T细胞相关细胞因子的影响。方法 100只BALB/c小鼠用随机数字表法分为4组,包括健康对照组和X射线照射组(分别予2、4和6 Gy 照射),每组25只。于照射前、照射后7、14、21和28 d,对小鼠一般情况进行观察,对外周血进行白细胞计数,用蛋白芯片检测血清中辅助性T细胞相关细胞因子含量,并用ELISA确证细胞因子的浓度变化。结果 照射后,小鼠外周血白细胞14 d降至最低, 同一时间点的下降程度随照射剂量增加而增加 (F=86.267,P<0.05)。芯片法初筛提示,细胞因子IFN-γ、TGF-β、IL-6、IL-17上调,IL-5、IL-23、TNF-α下调。ELISA检测可见,IL-17浓度随辐射剂量增高而明显增高,6 Gy组在7、14和21 d均明显高于对照(t=23.743、21.759和17.662,P<0.05);IFN-γ/IL-4浓度在2和4 Gy照射后无明显变化,6 Gy照射后在7、14、21和28 d均比健康对照组明显增高(t=8.335、9.982、6.990和3.074,P<0.05),呈先升高后降低的变化趋势,14 d达高峰。结论 低于致死剂量的X射线照射可使小鼠血清IFN-γ、TGF-β、IL-6、IL-17细胞因子浓度升高,呈Th1细胞偏移。