膀胱癌患者血清miR-21、miR-119a表达量与肿瘤恶性增殖及侵袭的相关性分析

目的 探讨血清miR-21和miR-119a是否可以预测膀胱肿瘤并分析其与肿瘤恶性增殖及侵袭的关系。方法 膀胱癌患者及健康体检者各48例,分为膀胱癌组和正常对照组。荧光定量PCR法检测血清和组织中miR-21和miR-119a的表达水平。蛋白质印迹法检测PTEN,PI3K,AKT,CyclinD1,TGF-β,β-Catenin,N-cadherin和E-cadherin的表达。流式细胞术检测细胞凋亡率和周期分布。Perason相关分析血清miR-21和miR-119a表达与侵袭性基因的相关性。结果 与正常对照组比较,膀胱癌组血清miR-21和miR-119a相对表达量均升高（均P<0.05）;血清miR-21和miR-119a对膀胱癌的分型具有良好的鉴别能力,其AUC分别为0.995和0.996。与癌旁正常组织比较,膀胱癌组织miR-21和miR-119a相对表达量均升高（均P<0.05）,PTEN和E-cadheri相对表达量降低（均P<0.05）,PI3K、AKT、CyclinD1、TGF-β、β-catenin和N-cadherin相对表达量均升高（均P<0.05）。与膀胱癌正常组织比较,膀胱癌组织凋亡率较低,膀胱癌组织G1期的比例低于膀胱癌正常组织,S、G2期的比例则高于膀胱癌正常组织（均P<0.05）;Pearson相关分析显示,血清miR-21和miR-119a表达水平与PI3K、AKT、CyclinD1、TGF-β、β-catenin及N-cadherin表达呈正相关（均P<0.05）,与PTEN和E-cadherin表达呈负相关（均P<0.05）。结论 血清中miR-21和miR-119a的表达水平对膀胱癌的预测具有较高的价值,膀胱癌患者血清和癌组织中miR-21、miR-119a表达水平均升高,且血清miR-21、miR-119a与增殖和侵袭相关基因相关,提示血清miR-21、miR-119a可能是膀胱癌的潜在生物标志物。     

miR-34a在复发-缓解型多发性硬化患者血清中表达情况研究

目的检测复发-缓解型多发性硬化患者在急性复发期及缓解期外周血血清miR-34a的表达情况,探讨其作为新的血清标记物的可能性,以及其血清表达情况与疾病活动的关系。方法选取2014年1月至2015年12月在哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科就诊的复发-缓解型多发性硬化患者20例为观察组,患者均处于急性复发期且近期未接受任何治疗;患者均接受随访,在缓解期未用药物治疗(免疫调节药物等)。同时,选取年龄、性别与观察组相匹配的20例健康人作为健康组。分别采集两组患者外周静脉血,提取血清总RNA,并对miR-34a进行RT-qPCR检测验证,对观察组急性复发期和缓解期、健康组分别进行多种microRNA的相对定量分析。结果 RT-qPCR检测结果显示,观察组急性复发期与健康组比较,血清中miR-34a的含量明显降低,对照组平均表达量约为观察组急性复发期的1.91倍,差异有统计学意义(P<0.05);miR-34a在观察组缓解期的血清表达与健康组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-34a在复发-缓解型多发性硬化患者的急性复发期中表达降低,并可能具有作为复发-缓解型多发性硬化急性复发期诊断的血清生物标志物潜质。     

MiR-92a及其靶抑癌基因BCL11b在辐射诱导小鼠胸腺淋巴瘤中的作用

目的 采用电离辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤动物模型,检测抑癌基因BCL11b和miR-92a的表达变化,探讨miR-92a对BCL11b基因的调控作用.方法 BALB/c小鼠采用γ射线全身照射,单次照射剂量和剂量率分别为1.75 Gy和0.382 Gy/min,每周1次,连续照射4周,计算电离辐射诱导小鼠胸腺淋巴瘤发生率.采用实时定量PCR法检测miR-92a表达变化情况,Westernblot方法检测BCL11b蛋白表达变化情况;将miR-92a序列插入载体pcDNA-DEST-47中构建真核表达质粒;构建BCL11b基因3'UTR-荧光素酶报告质粒,与pcDNA-DEST-miR-92a质粒共转染至EL-4细胞,分析miR-92a对BCL11b表达的调控作用.结果 辐射诱导的BALB/c小鼠胸腺淋巴瘤的发生率为58.51％.胸腺淋巴瘤细胞中BCL11b表达下调,而miR-92a表达上调,两者之间存在显著的负相关(r=-0.827,P＜0.05).psiCHECK 2-BCL11b和pcDNA-DEST-miR-92a两种质粒共转染组的荧光素酶表达明显低于单独转染的空载体和靶基因BCL11b组(t=3.42,P＜0.05).结论 电离辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤中miR-92a与BCL11b表达的负相关,提示miR-92a可能参与了辐射诱发肿瘤中BCL11b蛋白表达的调控作用.     

miR-302a在胃癌中表达及其对胃癌细胞凋亡与细胞周期影响

目的研究微小RNA-302a(miRNA-302a)在胃癌标本中的表达水平与临床病理特征的关系,以及其对胃癌细胞的凋亡和细胞周期调控作用,以探讨将miR-302a用于胃癌生物靶向治疗的可能性。方法采用实时PCR(RT-PCR)方法检测胃癌组织和正常胃黏膜组织中miR-302a的相对表达水平,并分析其与对应患者的临床病理资料的相关性。同时,采用RTPCR方法检测miR-302a在胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803和BGC-823及正常胃黏膜细胞GES-1中的表达情况;选取miR-302a表达水平最低者为癌细胞,并转染过表达miR-302a的真核重组质粒p CDNA3.1-miR-302a;转染后,采用流式细胞仪Annexin V/PI双染法和PI单染法检测miR-302a对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果胃癌组织中miR-302a的相对表达水平显著低于癌旁正常胃癌黏膜组织(P<0.05),且其表达与临床分期、病理分级和转移均有密切关系(P<0.05)。同时,在胃癌细胞SGC-7901、MGC-803和BGC-823中miR-302a的相对表达水平显著低于正常细胞GES-1中的表达(P<0.05),且在BGC-823中表达水平最低。p CDNA3.1-miR-302a质粒转染组与空白组和p CDNA3.1质粒转染组比较,miR-302a质粒转染后48 h后细胞凋亡水平显著升高,且G2/M期细胞数显著增高(P<0.05)。结论在胃癌组织和细胞中miR-302a均呈现低水平表达,当miR-302a过表达后,能显著增高胃癌细胞的凋亡水平并使细胞出现G2/M期阻滞,可能成为胃癌治疗的新靶点。     

miR-181a在转染乙型肝炎病毒基因组的HepG2.2.15细胞中的表达研究

目的鉴定分析microRNA（miRNA）miR-181a在转染了乙型肝炎病毒（HBV）基因组的HepG2.2.15细胞中的表达情况,探讨miR-181a在与HBV相关的肝脏疾病中的作用。方法以本课题组基因芯片结果为基础,设计并合成miR-181a探针,采用Northernblotting检测miR-181a在HepG2.2.15和HepG2细胞（对照组）中的表达水平,应用生物信息学方法结合mRNA表达谱芯片结果预测miR-181a的靶基因,选取靶基因HLA-A2,应用流式细胞仪分析HLA-A2分子在上述2种细胞中的表达。结果Northernblotting结果显示,与对照组相比,miR-181a在HepG2.2.15细胞中的表达量显著增高;miR-181a可能的靶基因包括C8A、IDH1和HLA-A等,miR-181a可能通过其种子序列与其靶基因HLA-A的3′-UTR区部分互补结合来调节HLA-A的表达;流式分析也显示HLA-A2分子在HepG2.2.15细胞中的表达量（43.9%）显著低于HepG2细胞（96.6%）。结论miR-181a在HBV转染的HepG2.2.15细胞中高表达,并可能下调靶基因HLA-A的表达,推测这可能是HBV感染后病毒逃避免疫反应、持续复制的机制之一。     

miR-181a在转染乙型肝炎病毒基因组的nepG2.2.15细胞中的表达研究

目的 鉴定分析microRNA(miRNA)miR-181a在转染了乙型肝炎病毒(HBV)基因组的HepG2.2.15细胞中的表达情况,探讨miR-181a在与HBV相关的肝脏疾病中的作用.方法 以本课题组基因芯片结果为基础,设计并合成miR-181a探针,采用Northern blotting检测miR-181a在HepG2.2.15和HepG2细胞(对照组)中的表达水平,应用生物信息学方法结合mRNA表达谱芯片结果预测miR-181a的靶基因,选取靶基因HLA-A2,应用流式细胞仪分析HLA-A2分子在上述2种细胞中的表达.结果 Northernblotting结果显示,与对照组相比,miR-181a在HepG2.2.15细胞中的表达量显著增高;miR-181a可能的靶基因包括C8A、IDH1和HLA-A等,miR-181a可能通过其种子序列与其靶基因HLA-A的3'-UTR区部分互补结合来调节HLA-A的表达;流式分析也显示HLA-A2分子在HepG2.2.15细胞中的表达量(43.9%)显著低于HepG2细胞(96.6%).结论 miR-181a在HBV转染的HepG2.2.15细胞中高表达,并可能下调靶基因HLA-A的表达,推测这可能是HBV感染后病毒逃避免疫反应、持续复制的机制之一.     

miR-34a调控高糖环境中HK-2细胞增殖作用的初步研究

目的探讨miR-34a对高糖环境中HK-2细胞增殖作用的影响。方法以miR-34a模拟物和miR-34a抑制剂分别转染HK-2细胞,定量PCR检测miR-34a的表达变化,MTT检测细胞增殖活性;Western印迹检测周期相关蛋白CyclinD1和CyclinE的表达变化。生物信息学分析miR-34a的靶基因,对其中的增殖相关转录因子E2F3进行双荧光素酶验证。结果 miR-34a模拟物组miR-34a表达显著上调（P〈0.05）,miR-34a抑制剂组miR-34a显著下调（P〈0.05）。与对照组相比,miR-34a模拟物显著抑制高糖环境中HK-2细胞的增殖作用（P〈0.05）,CyclinD1和CyclinE表达下调（P〈0.05）,miR-34a抑制剂组显著上调高糖环境中HK-2细胞的增殖作用,CyclinD1和CyclinE表达上调（P〈0.05）。TargetScan在线分析软件显示,增殖相关转录因子E2F3可能是miR-34a潜在的靶基因,双荧光素酶分析结果显示E2F3是miR-34a的直接靶基因。结论 miR-34a可以调控高糖环境中HK-2的细胞增殖,其机制可能是通过直接抑制E2F3基因的表达而实现。     

miR-33 a调控ABCA1表达介导棕榈酸诱导肝细胞脂质代谢损伤研究

目的探讨miR-33a及其下游靶基因ABCA1在肝细胞脂质代谢中的作用。方法刺激棕榈酸(PA)制备肝细胞脂质损伤的细胞学模型。应用油红染色检测细胞内脂质堆积情况。采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法检测miR-33a、ABCA1等表达。结果 PA刺激显著增加肝细胞中脂质成分堆积,同时miR-33a表达增加,而ABCA1表达减少。干预miR-33a表达可以介导PA诱导的脂质损伤,同时调控ABCA1表达。抑制或者增加ABCA1表达可以调控PA诱导的肝细胞代谢损伤。结论 MiR-33a与ABCA1介导PA诱导肝细胞脂质代谢损伤。     

miR-34a调控高糖环境中HK-2细胞增殖作用的初步研究

目的探讨miR-34a对高糖环境中HK-2细胞增殖作用的影响。方法以miR-34a模拟物和miR-34a抑制剂分别转染HK-2细胞,定量PCR检测miR-34a的表达变化,MTT检测细胞增殖活性;Western印迹检测周期相关蛋白CyclinD1和CyclinE的表达变化。生物信息学分析miR-34a的靶基因,对其中的增殖相关转录因子E2F3进行双荧光素酶验证。结果 miR-34a模拟物组miR-34a表达显著上调(P<0.05),miR-34a抑制剂组miR-34a显著下调(P<0.05)。与对照组相比,miR-34a模拟物显著抑制高糖环境中HK-2细胞的增殖作用(P<0.05),CyclinD1和CyclinE表达下调(P<0.05),miR-34a抑制剂组显著上调高糖环境中HK-2细胞的增殖作用,CyclinD1和CyclinE表达上调(P<0.05)。TargetScan在线分析软件显示,增殖相关转录因子E2F3可能是miR-34a潜在的靶基因,双荧光素酶分析结果显示E2F3是miR-34a的直接靶基因。结论 miR-34a可以调控高糖环境中HK-2的细胞增殖,其机制可能是通过直接抑制E2F3基因的表达而实现。     

miR-34a调控HEK293细胞自噬作用的初步研究

目的探讨miR-34a对HEK293细胞自噬作用的影响。方法采用miR-34a模拟物(模拟物组)和miR-34a抑制剂(抑制剂组)分别转染HEK293细胞,并设空白对照(对照组)。采用定量PCR检测miR-34a、p53基因表达的变化,Western blotting检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ及p53表达的变化,并采用生物信息学方法分析miR-34a对自噬相关基因(Atg6/beclin1、sestrin2、FoxO3等)的可能作用。结果定量PCR结果显示,模拟物组miR-34a表达显著上调(P<0.05),抑制剂组miR-34a表达显著下调(P<0.05)。与对照组相比,miR-34a模拟物可显著抑制HEK293细胞LC3Ⅱ蛋白的表达(P<0.05),而miR-34a抑制剂则显著上调HEK293细胞LC3Ⅱ蛋白的表达(P<0.05)。定量PCR和Western blotting结果显示,各组p53mRNA及蛋白表达无统计学差异。生物信息学分析显示,Atg6/beclin1、sestrin2、FoxO3等自噬相关基因是miR-34a潜在的靶基因。结论miR-34a能抑制HEK293的自噬作用,可能是通过直接抑制...     

高血压对男性冠心病患者血脂和载脂蛋白的影响

 目的观察高血压对男性冠心病患者血脂和载脂蛋白的影响.方法将276例患者分为高血压病组(EH,83例)、冠心病组(CHD,85例)、高血压合并冠心病组(EH+CHD,108例).选择健康体检者106例作为对照组.比较三组患者的血脂和载脂蛋白的变化情况,并做分层分析.结果(1)三组患者的总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(Apo B)水平均明显高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A-I(Apo AI)和Apo AI/B的水平明显降低(P＜0.05).(2)未按年龄分组时,各项血脂水平在三组患者中差异无统计学意义.(3)按年龄分层后,≤55岁组中EH+CHD组TC、甘油三酯(TG)和LDL-C的水平最高.结论高血压患者存在血脂代谢紊乱,在合并冠心病时高血压对血脂具有叠加作用,应加强中青年男性高血压患者的调脂治疗.     

超声评价冠心病患者血管内皮依赖性舒张功能

目的：探讨肱动脉内皮依赖性舒张功能（EDD）对冠心病（CAD）的诊断价值。方法：对189例连续冠脉造影（CAG）受检者术前利用高频超声进行肱动脉EDD检查，并与CAG结果进行相关性研究。结果：CAD单支病变组、多支病变组肱动脉EDD明显低于对照组（P〈0．01）；多支病变组EDD显著低于单支病变组（P〈0．01）。结论：CAD患者及具有其危险因素人群中，进行EDD检查，可间接反映冠状动脉情况，不仅为早期发现、预防和治疗CAD患者提供依据，还可作为监测和评估病情变化的指标。     

高龄冠心病患者外周动脉硬化与冠状动脉硬化的研究

 目的 观察高龄冠心病患者颈动脉、股动脉、股浅动脉、腘动脉的内-中膜厚度(IMT)与冠状动脉硬化的相关性.方法 选经冠状动脉造影确诊为冠心病的高龄患者86例,选冠状动脉造影证实无冠状动脉狭窄的患者20例为对照组,采用二维超声检测颈、股、股浅、胭动脉的IMT.动脉粥样硬化斑块积分采用Sutton 法,并与冠状动脉病变程度进行对比分析.结果 高龄老年冠心病患者外周动脉的IMT,斑块积分显著高于对照组(P＜0.001).斑块指数与冠状动脉病变程度呈正相关.结论 颈、股、股浅、腘动脉粥样硬化与冠状动脉粥样硬化的病变相平行.     

Cardiac nuclear medicine in monitoring patients with coronary heart disease

Patient monitoring is a major indication for cardiac nuclear medicine procedures. Stress myocardial perfusion scintigraphy was initially used for diagnosis, but monitoring patients with coronary artery disease has become more common. Stress myocardial perfusion scintigraphy has been shown to provide a considerable amount of incremental prognostic information, which may be useful in selecting patients for therapy. In patients being considered for revascularization, fluorodeoxyglucose can be used to identify regions of dysfunctional but viable myocardium, even within regions that show fixed defects on stress perfusion imaging. It can be used to select a group of patients who will improve function with revascularization and who may have an improved outcome. Thus, cardiac nuclear medicine plays a pivotal role in monitoring patients with coronary artery disease.     

冠心病患者胰岛素抵抗指数与冠脉病变的相关性研究

冠心病是冠状动脉粥样硬化引起的心脏病,为多因素疾病,其主要危险因素包括高龄、高脂血症、高血压、吸烟和糖尿病。糖尿病是一种全身代谢性疾病,其血管病变是引发其他复杂病变的基础,其中大血管病变常引起冠心病、脑血管病和周围血管病。糖尿病大血管病变的主要危险因素除了高血压、高血脂和高血糖外,还包括高胰岛素血症和(或)胰岛素抵抗(IR)、血小板凝集及黏附功能异常,因而动脉粥样硬化进展更快,冠心病的发生率和病死率急剧增加,在临床工作中引起了人们的极大关注。而目前有关糖尿病并发冠心病(CHD)患者IR及其与冠脉病变关系的报道不多…     

25例冠状动脉硬化性心脏病的外科治疗

目的：回顾性研究2000－05－2001－07我院25例行冠脉旁路移植手术病人的治疗效果。结果：术后22例患者心绞痛症状完全消失，1例冠状动脉弥漫性病变的患者仅偶尔需服用小剂量硝酸甘油制剂，症状即可明显改善，1例术后3例死于严重的感染，1例术中死于严重的鱼精蛋白过敏。结论：药物及介入治疗无效的冠心病病人采用冠状动脉旁路移植术是有效的方法。     

冠状动脉粥样硬化性心脏病血管造影分析

目的 :探讨冠心病患者的冠状动脉病变特点及其危险因素。方法 :根据冠状动脉造影结果将 164例分为硬化组 12 2例和非硬化组 42例 ,分析冠状动脉病变特点、心电图特点及其危险因素。结果 :冠状动脉病变者 12 2例 ,累积病变血管 2 45支 ,其中左前降支 98支 (40 % )、右冠状动脉 72支 (2 9.4% )、左回旋支 60支 (2 4.5% )、左主干 15支 (6.1% ) ;单支50例 (41% )、双支和三支各 3 6例 (2 9.5% ) ;狭窄程度以 75%～ 94%占大多数 10 4支 (42 .4% )、95%～ 10 0 %占次位 75支(3 0 .6% )。ECG对冠心病诊断存在假阳性 (9.5%～ 3 0 .9% )。硬化组的年龄、吸烟、合并高血压、糖尿病、合并TC、TG、LDL C异常及GLU、TC、LDL C、SBP、DBP值与非硬化组之间均有显著差异 (P <0 .0 5)。 2组间的饮酒 ,HDL C、APOA和APOB值之间无显著性差异 (P >0 .0 5)。但 2组的TG水平均高于异常临床界值 ,TG >1.7mmol/L。结论 :冠心病的危险因素从高到低的顺序为年龄、高血压、糖尿病、高TC、TG和LDL C水平、吸烟     

冠心病患者检测hs—CRP的临床价值

目的探讨冠心病患者检测超敏C反应蛋白（hs—CRP）的临床意义。方法选择54例稳定型心绞痛患者（SAP）、71例不稳定型心绞痛患者（UAP）、43例急性心肌梗死患者（AMI）与这43例处于恢复期的急性心肌梗死患者．检测其血清hs—CRP水平,与65例健康者对照比较。结果SAP、UAP、AMI三组患者血清hs—CRP水平依次逐渐升高。AMI恢复期患者血清hs—CRP水平同AMI组比较显著降低（P〈0．01）。4组患者hs—CRP水平同健康对照组比较均显著性升高（P〈0．01）。结论冠心病患者血清hs—CRP水平升高与其病情严重程度呈正相关,提示hs—CRP不仅是冠心病的一种危险因子．而且与冠心病预后密切相关。     

拟诊冠心病患者心电图与冠状动脉造影结果分析

 目的通过对178例拟诊冠心病患者的静息心电图(ECG)与冠状动脉造影结果进行回顾性分析,评价静息心电图(ECG)对冠心病诊断和预后的价值.方法选择有冠心病典型症状及危险因素的患者,男109例、女69例,年龄62.5(61.5±11.1)岁.其中,99例患者ECG有心肌缺血表现(ECG阳性组),79例无心肌缺血表现(ECG阴性组).对所有拟诊患者进行冠状动脉造影(CAG)检查.结果静息ECG阳性与阴性组患者,CAG阳性率无显著性差异(54.5%vs 59.5%,P＞0.05);静息ECG对冠心病诊断的敏感性为56.4%,特异性为36.8%;静息ECG阳性组多支病变率明显高于ECG阴性组(66.7%vs 44.7%,P=0.029);静息ECG阴性组单支病变率明显高于ECG阳性组(55.3%vs 33.3%,P=0.026).静息ECG阳性组高血压患病率明显高于ECG阴性组(P=0.042).结论静息ECG阳性对诊断冠心病的特异性和敏感性低,对多支、多危险因素的高危冠心病患者具有一定的提示意义.     

老年冠心病人的PTCA介入治疗

1 资料与方法 本组53例60岁以上冠心病患者,男45例,女8例,年龄60～79岁,平均68岁,90%以上病人有劳累性心绞痛发作病史,近期表现急性心绞痛47便,表现急性心肌梗死53例.