N-乙酰半胱氨酸对矽尘诱导肺泡巨噬细胞自噬影响

目的 探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383在染尘不同时间的自噬活动影响。方法 常规培养NR8383细胞,染尘3、6、12、20、24 h,并给予NAC,分别收集细胞上清液,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-βⅠ（TGF-βⅠ）表达水平,自噬水平检测采用蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光法。结果 体外巨噬细胞染尘模型最佳时间为20 h;NAC+矽尘组NR8383细胞TNF-α表达[（116.82±8.98）pg/mL]低于矽尘组[（1823.58±764.85）pg/mL]（P<0.05）;NAC+矽尘组NR8383细胞TGF-βⅠ表达[（8.27±3.62）pg/mL]与矽尘组[（14.28±5.71）pg/mL]比较差异无统计学意义（P>0.05）;NAC+矽尘组与矽尘组NR8383细胞LC3蛋白表达[分别为（3.52±0.57）、（3.84±0.53）pg/mL]高于对照组[（2.24±0.56）pg/mL];免疫荧光结果显示,矽尘组NR8383细胞在20 h荧光信号强于对照组;NAC+矽尘组NR8383细胞荧光强度与矽尘组无明显差异。结论 矽尘刺激使NR8383细胞自噬表达增强;NAC可降低细胞上清液中TNF-α分泌水平,NAC可能参与染尘肺泡巨噬细胞的炎症反应过程。     

线粒体分裂对甲苯二异氰酸酯诱导人支气管上皮细胞NLRP3炎性小体活化的影响

目的探讨线粒体过度分裂对甲苯二异氰酸酯(TDI)诱导人支气管上皮细胞(HBECs)NLRP3炎性小体激活的影响。方法(1)制备TDI-人血清白蛋白(HSA)偶联物,分别采用Gutmann法和BCA蛋白定量法测定偶联物中TDI和HSA的水平。(2)以不同浓度TDI-HSA(0.00、40.00、80.00和120.00 mg/L)处理HBECs 12 h,采用荧光探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测NLRP3炎性小体相关蛋白(ASC、NLRP3、Caspase-1)的表达水平以及线粒体分裂蛋白DRP1、融合相关蛋白MFN2和OPA1的表达水平。(3)采用线粒体分裂抑制剂Mdivi-1(10μmol/L)预处理HBECs 2 h后,再用TDI-HSA(120.00 mg/L)处理12 h,检测细胞中ROS及IL-18、IL-1β的水平,测定NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Caspase-1,线粒体分裂蛋白DRP1及融合相关蛋白MFN2、OPA1的表达水平。结果(1)合成的TDI-HSA偶联物中TDI和HSA质量浓度分别为22.80、2120.00μg/L,摩尔比为4.19。(2)与对照组相比,随着TDI-HSA染毒剂量的增加,HBECs细胞中ROS和IL-18、IL-1β水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,TDI-HSA 80.00、120.00 mg/L剂量染毒组NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Cleaved Caspase-1的表达水平增加(P<0.05);线粒体分裂蛋白DRP1表达水平增加,融合相关蛋白MFN2、OPA1表达降低(P<0.05)。(3)与TDI-HSA 120.00 mg/L染毒组相比,TDI-HSA+Mdivi-1组HBECs细胞中ROS和IL-18、IL-1β水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Cleaved Caspase-1的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);线粒体分裂蛋白DRP1表达明显降低,融合相关蛋白MFN2、OPA1表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TDI可以剂量依赖性方式促进HBECs线粒体过度分裂及融合抑制,促进NLRP3炎性小体活化。采用线粒体分裂抑制剂Mdivi-1处理HBECs后,可显著抑制NLRP3炎性小体的活化,表明TDI诱导的线粒体过度分裂是NLRP3炎性小体活化的重要原因。     

N-乙酰半胱氨酸对镉致人胚肾细胞凋亡拮抗作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)对氯化镉所致人胚肾(human embryonic kidney,HEK)细胞凋亡的拮抗作用。方法应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测不同CdCl₂浓度(0,10,20,40,80μmol/L)处理以及不同浓度NAC(1,2,4,8 mmol/L)和镉联合作用对HEK细胞相对存活率和凋亡率的影响。结果单纯染镉时,与对照组(0μmol/L)比较,20,40,80μmol/L CdCl₂3组HEK细胞相对存活率明显降低(P<0.01),HEK细胞凋亡率明显升高(P<0.01);NAC与镉联合作用时,与40μmol/L CdCl₂比较,40μmol/L CdCl₂+4,8 mmol/L NAC2组HEK细胞相对存活率明显提高,40μmol/L CdCl₂+2,4,8 mmol/L NAC3组HEK细胞凋亡率明显降低。结论一定浓度氯化镉可引起HEK细胞凋亡增加,NAC可以拮氯化镉引起的细胞凋亡。     

N-乙酰半胱氨酸对乌拉坦诱发小鼠骨髓细胞SCE的影响

ＤｅＦｌｏｒａ等［１］和刘淑英等［２］均证实Ｎ乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）具有抗诱变性,ＤｅＦｌｏｒａ等［３］和Ｋａｄａ等［４］报道了ＮＡＣ对诱变剂导致的ＤＮＡ损伤的修复作用。我们以Ｌ半胱氨酸为参比,观察了ＮＡＣ对乌拉坦诱发的小鼠骨髓细胞姐妹染色单体交换率（ＳＣＥ）的影响。一、材料与方法１．材料：乌拉坦（日本关东化学株式会社产品）、ＮＡＣ（镇江化学工业研究所生产）、Ｌ半胱氨酸（中国军事医学科学院东方材料厂生产）、５ＢＵＤＲ（Ｓｉｇｍａ公司生产）。实验动物为健康昆明种小白鼠２４只,雌雄各半,６周…     

N-乙酰半胱氨酸对氟诱导睾丸支持细胞内质网应激的作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸对氟化钠(NaF)介导睾丸支持细胞内质网应激的抑制作用。方法将原代培养大鼠睾丸支持细胞进行分组:0μg/ml NaF(对照组)、6μg/ml NaF组、12μg/ml NaF组、24μg/ml NaF组、N-乙酰半胱氨酸(2 mmol/L NAC)组、6μg/ml NaF+2 mmol/L NAC组、12μg/ml NaF+2 mmol/L NAC组和24μg/ml NaF+2 mmol/L NAC组,各组以相应药物孵育24 h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞生长活性;荧光探针法分析各组细胞内活性氧(ROS)水平;免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激相关蛋白GRP78、PERK和CHOP的表达。结果 2 mmol/L NAC有效提高了细胞存活率(P0.01);NAC明显抑制了NaF介导的细胞内ROS水平的升高,与NaF组相比,各NAC组的ROS水平均显著降低(P0.01);NaF诱导内质网应激相关蛋白GRP78、PERK和CHOP表达明显上调,经2mmol/L NAC处理后,其有效拮抗了GRP78、PERK和CHOP蛋白表达的上调(P0.01)。结论 ROS激活了内质网应激相关信号通路,而NAC通过减少ROS的产生,拮抗了NaF介导的睾丸支持细胞内质网应激。     

N-乙酰半胱氨酸雾化吸入辅助抗生素治疗支气管肺炎患儿的疗效

目的探讨N-乙酰半胱氨酸雾化吸入辅助抗生素治疗支气管肺炎患儿的疗效。方法选取2018年7月至2019年6月福建医科大学附属泉州第一医院收治的104例支气管肺炎患儿作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组和试验组,每组52例。对照组采用抗生素治疗,试验组采用N-乙酰半胱氨酸雾化吸入辅以抗生素治疗,比较两组的免疫因子水平、临床症状消失时间及临床疗效。结果治疗后,试验组IgA、IgG、IgM水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组临床总有效率高于对照组,临床症状消失时间短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论对支气管肺炎患儿实施N-乙酰半胱氨酸雾化吸入辅助抗生素治疗的效果理想,可有效缓解临床症状,并提高免疫功能。     

N-乙酰半胱氨酸在有或无caspase抑制条件下对Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞凋亡的拮抗作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)在有或无caspase抑制条件下,对Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞线粒体依赖性凋亡的拮抗作用。方法将L-02肝细胞随机分成对照组、Cr(Ⅵ)处理组、Z-VAD-fmk预处理组[Z-VAD-fmk预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)]、NAC预处理组[NAC预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)]、联合预处理组[Z-VAD-fmk和NAC分别预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)],Cr(Ⅵ)终浓度为20μmol/L,处理6h。流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光分光光度法检测线粒体膜电位(△ψm)和通透性转运孔(PTP)的改变,单细胞凝胶电泳法观察细胞凋亡形态及细胞DNA损伤情况。结果终浓度20μmol/L的Cr(Ⅵ),处理6h,可诱导细胞凋亡,在有或无caspase抑制条件下,NAC均明显减轻了Cr(Ⅵ)引起的肝细胞线粒体膜电位下降及PTP孔开放(P<0.05),使细胞DNA损伤程度减轻(P<0.05),从而对细胞凋亡有明显拮抗作用(P<0.05),但与非caspase抑制条件下相比,caspase抑制条件下NAC的保护效果有明显降低(P<0.05)。结论在有或无caspase抑制条件下,NAC对Cr(Ⅵ)诱导的L-02肝细胞凋亡具有重要拮抗作用,caspase在该凋亡过程中不起决定性作用。     

N-乙酰半胱氨酸对AECOPD细菌感染患者肺功能及血清炎性因子水平的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)细菌感染患者肺功能及血清炎性因子水平的影响。方法选取2017年2月至2019年4月我院收治的AECOPD细菌感染患者80例,随机分为对照组和实验组各40例。对照组给予常规治疗,实验组在对照组基础上采用N-乙酰半胱氨酸治疗。对比两组的肺功能及血清炎性因子水平。结果治疗后,实验组的FEV1%、FEV1/FVC水平均高于对照组,TNF-α、hs-CRP、IL-8水平均低于对照组(P均<0.05)。结论N-乙酰半胱氨酸可提升AECOPD细菌感染患者的肺功能,降低血清炎性因子水平。     

N-乙酰半胱氨酸与盐酸氨溴索治疗小儿支气管肺炎的疗效对比及其对免疫功能和临床症状的影响

目的对比N-乙酰半胱氨酸与盐酸氨溴索治疗小儿支气管肺炎的疗效及其对免疫功能和临床症状的影响。方法选取2015年1月-2016年1月在该院治疗的支气管肺炎患儿120例,按照用药方法随机分为对照组和试验组,各60例。对照组患儿采用盐酸氨溴索雾化吸入治疗,试验组患儿采用N-乙酰半胱氨酸雾化吸入治疗。结果治疗后,两组患儿的免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)及补体C3(C3)均显著升高(P0.05),且试验组患儿IgA和IgG明显高于对照组(P0.05)。试验组发热、咳嗽咯痰、肺部湿啰音等临床症状消失时间明显低于对照组(P0.05)。试验组总有效率(95.0%)明显高于对照组(81.7%)(P0.05)。结论采用N-乙酰半胱氨酸雾化吸入治疗支气管肺炎患儿能有效改善患儿的临床症状和免疫功能,疗效确切。     

大剂量N-乙酰半胱氨酸对染尘大鼠模型的抗氧化作用

目的观察大剂量N-乙酰半胱氨酸(NAC)在矽肺形成过程中的抗氧化作用。方法 选取Wistar健康大鼠96只,随机分为模型组、预防治疗组、对照组3组,每组32只。模型组和预防治疗组均以气管滴注二氧化硅混悬液建立染尘大鼠模型,预防治疗组以大剂量N-乙酰半胱氨酸灌胃进行干预治疗,对照组给予等量的生理盐水。分别在染尘后的第3、7、14、28天分批处死大鼠取材。切取肺组织样本作病理切片,分别行苏木精-伊红(HE)染色,Masson染色,观察肺组织病理变化,并对病理切片(14d、28d)肺纤维化进行半定量评分。测定肺组织匀浆羟脯氨酸(Hyp)含量(样本碱水解法)和微量丙二醛(MDA)的含量(TBA法)。结果与模型组比较,大剂量NAC预防治疗组病理显示肺泡炎症和纤维化程度减轻,肺纤维化得分明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组丙二醛的含量各时间点与对照组相比,均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),高峰位于第7天,预防治疗组丙二醛的含量均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。肺匀浆羟脯氨酸的含量比较,模型组在第7天明显升高,高峰位于第28天,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),预防治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 早期应用大剂量NAC可增强肺组织的抗氧化作用,减轻二氧化硅对大鼠肺组织的损伤,部分抑制肺间质纤维化。     

甲苯二异氰酸酯致中国仓鼠肺细胞DNA交联作用

目的 研究甲苯二异氰酸酯(TDI)诱导中国仓鼠肺细胞(CHL)DNA的交联作用,探讨TDI的遗传毒性。方法 在培养的CHL细胞中分别加入浓度为0.64,1.28,2.56μmol/mL的TDI进行染毒,用荧光分光光度法检测细胞内的DNA-DNA交联水平,用氯化钾-十二烷基硫酸钠(KCl-SDS)沉淀法检测细胞内的DNA-蛋白质交联水平。结果 低浓度的TDI不能致DNA-DNA交联(DDC)和DNA-蛋白质交联(DPC)(P>0.05);随着染毒浓度的增加,其DDC率和DPC率也随之升高,高剂量组的DDC为54.97%(P<0.01),DPC为29.06%(P<0.0)。结论 一定剂量的TDI能诱导细胞内DNA交联作用。     

人单核细胞对煤焦沥青烟提取物诱导BEAS-2B细胞TRAF2 mRNA表达的影响

目的探讨人单核细胞(THP-1)对煤焦沥青烟提取物(CTPE)诱导BEAS-2B细胞肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)mRNA表达的影响。方法构建THP-1细胞和BEAS-2B细胞的共培养模型,用终浓度3μg/m L的CTPE处理共培养模型,细胞培养至第9代时加入肿瘤坏死因子-α(TNF-α)中和抗体和C-Jun氨基端激酶(JNK)抑制剂SP600125,继续培养至第15代(CC15),设立共培养模型CC15组、TNF-α中和抗体组、JNK激酶抑制剂SP600125组,同代培养的BEAS-2B细胞为对照组,用Real-time PCR方法检测各组细胞中TRAF2 mRNA的相对表达水平。结果与CC10组相比,TNF-α中和抗体对共培养细胞作用不同时间时TRAF2 mRNA的相对表达量均降低(P0.001),作用48 h时TRAF2 mRNA相对表达水平达到最低(0.19±0.02)。SP600125抑制剂作用共培养细胞不同时间时c-Jun mRNA的相对表达水平与CC10组相比差异均有统计学意义(P0.001),36 h组表达水平最低(0.03±0.02)。TNF-α中和抗体组和SP600125抑制剂组TRAF2 mRNA相对表达水平(分别为1.73±0.04和1.88±0.05)均高于对照组(1.07±0.06),低于CC15组(2.23±0.09),差异有统计学意义(P0.05)。结论 THP-1可通过TNF-α上调了CTPE诱导的BEAS-2B细胞中TRAF2 mRNA的表达水平,TRAF2和AP-1之间可能存在负反馈作用。     

Immunological determinants in a murine model of toluene diisocyanate-induced asthma

Objectives

Diisocyanates (DIC) are highly reactive, low-molecular-weight chemicals which are the leading cause of occupational asthma (OA). The aim of the study was to analyze certain aspects of the pathogenesis of allergic inflammation in the airways induced by toluene diisocyanate (TDI) in an experimental model in mice.

Materials and Methods

The experiment was carried out on 50 female BALB/cJ/Han/IMP mice, which were exposed by inhalation (intranasal and in the inhalation chamber) to toluene diisocyanate (2,4-TDI). After the experiment, the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was collected from the animals, and the composition of the induced inflammatory cells, and the concentrations of certain cytokines (IL-4, IL-5, TNF-α) were evaluated.

Results

The total number of cells in BALF of the examined group of mice was significantly higher compared to the control mice. There was also a significant increase in neutrophils and eosinophils in the study group compared to the controls. The number of lymphocytes and macrophages did not differ significantly between the two groups. A statistically significant increase in the level of TNF-α was shown to occur in the group exposed to toluene diisocyanate in comparison to the control group. The concentration of IL-4 increased in the study group, compared to the control one, but the differences did not reach the level of significance, p > 0.05. Such difference was not observed for IL-5.

Conclusions

We developed a murine model of TDI-induced asthma which caused the influx of inflammatory cells like eosinophils and neutrophils in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) in the TDI-treated mice. The increase of the concentration of some proinflammatory cytokines (TNF-α, IL-4) in BALF from the exposed mice was also observed.     

人支气管上皮细胞5-脂氧合酶表达与联苯胺的活化及细胞毒性的研究

目的 研究人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对联苯胺(BZD)的氧化代谢,为LOX作为细胞色素P450氧化代谢外源化合物的替代途径提供进一步的依据.方法 体外酶系统实验:BZD在含有大豆脂氧合酶(SLO)的酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物.细胞实验:HBE细胞染毒24h(BZO剂量分别为100、200、500μmol/L,AA861剂量分别为0.3、3.0、30.0 μmol/L),用Western-blot检测5-LOX蛋白表达;用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤.同时,检测特异性5-LOX抑制剂(AA861)对5-LOX蛋白表达和对DNA损伤的影响.结果 在过氧化氢参与下,SLO可以介导BZD氧化生成二亚胺联苯胺.最大反应速度(Vmax)值为1.42 nmol/(min·nmol)SLO,BZD的米氏常数(Km)值为1.48 mmol/L.LOX抑制剂上甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用.BZD可以使HBE细胞5-LOX蛋白表达增加,AA861对5-LOX蛋白表达无影响;BZO可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤,AA861可以明显抑制BZD所致的DNA损伤,且有剂量-效应关系.结论 5-LOX在HBE细胞内的蛋白表达可以受BZD的影响.HBE细胞的5-LOX可能通过介导BZD协同氧化,产生亲电子白南基,而与DNA结合,使HBE细胞产生DNA损伤,这可能是BZD致癌的机制之一;AA861可以明显抑制这种作用.     

Smoker extracellular vesicles influence status of human bronchial epithelial cells

Cigarette smoking is a habit that has spread all over the world and is a significant risk factor for many diseases including cardiovascular disease, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), asthma and lung cancer. Evaluation and understanding of tobacco health effects are of major interest worldwide and answer to important societal concerns. Identification of new biomarkers of exposure to tobacco smoke potentially implicated in COPD or lung carcinogenesis would allow a better observation of tobacco exposed population, thanks to screening establishment at reversible stages of pathological processes. In this study, we questioned whether cigarette smoking alters miRNA profiles of Extracellular Vesicles (EVs) present in human Broncho Alveolar Lavages (BALs), which could affect surrounding normal bronchial epithelial cells status. To this aim, BALs were carried out on 10 Smokers and 10 Non-Smokers, and EVs were isolated from the supernatants and characterized. We then compared the amount of 10 microRNAs (miRNAs) present in Smokers versus Non-Smokers BAL EVs and performed statistical analysis to discuss the biological significance by the smoking status and to evaluate BAL EV miRNAs as potential biomarkers of tobacco exposure. Finally, we tested the effects of smokers versus non-smokers EVs on human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) to compare their influence on the cells status. Our study shows for the first time in human samples that smoking can alter lung EV profile that can influence surrounding bronchial epithelial cells.     

煤焦沥青烟提取物诱导人支气管上皮细胞发生炎性凋亡的研究

目的 探讨煤焦沥青烟提取物(coal tar pitch smoke extract,CTP)刺激人支气管上皮细胞(BEAS-2B)是否发生炎性凋亡(pyroptosis).方法 用l、3μg/ml的CTP分别染毒BEAS-2B细胞8、24 h,以二甲基亚砜(DMSO)为对照,用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活力测定试剂盒和白细胞介素-1β(Interleukin-1 beta,IL-1β) ELISA试剂盒分别检测细胞培养上清中的LDH活力和IL-1β含量,用半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(caspase-1)活力测定试剂盒检测细胞caspase-1活力.结果 染毒8h,1、3 μg/ml CTP染毒组细胞中caspase-1的活力分别为(9.29±0.30) μmol/ml和(8.67±0.59) μmol/ml,均明显高于DMSO对照组[(7.42±0.59) μmol/ml],差异有统计学意义(P＜0.05);1、3μg/mlCTP染毒组LDH活力和IL-1β含量与DMSO对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).染毒24 h时,1、3μg/ml染毒组与DMSO对照组细胞中caspase-1活力差异无统计学意义(P＞0.05);1、3μg/ml染毒组培养液上清中LDH活力[(1323.03±28.53)、(1148.45±16.42) U/dl]和IL-1β含量[(125.37±25.00)、(92.04±19.09) pg/m]均高于对照组[LDH:(1091.93±26.64) U/dl,IL-1β:(46.20±14.43) pg/ml],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 煤焦沥青烟提取物刺激BEAS-2B细胞早期caspase-1活力升高,继之LDH酶活力及IL-1β含量均增高,可能发生pyroptosis.     

JWA对N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍诱导人支气管上皮细胞恶性转化的影响

目的 探讨JWA对烷化剂N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导人支气管上皮细胞(HBE)恶性转化的影响及可能机制.方法 建立JWA高表达HBE细胞株,用MNNG诱导HBE细胞恶性转化,用噻唑蓝(MTT)法检测MNNG诱导后细胞生长状况,用软琼脂集落试验检测细胞非锚着依赖生长能力,用Western blot法检测P53蛋白的表达变化规律.结果 经MNNG处理的正常HBE细胞恶性转化后生长速度明显快于高表达JWA的HBE细胞和未经MNNG处理的HBE细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).经MNNG处理的JWA高表达的HBE细胞和未用MNNG处理的HBE细胞的克隆形成率(8.06%和10.14%)明显低于MNNG处理的恶性转化的HBE细胞(26.80%),差异有统计学意义(P＜0.01).MNNG诱导正常的HBE细胞恶性转化过程中,P53蛋白逐渐增加;而在JWA高表达HBE细胞,经MNNG处理后,P53蛋白早期(第1～2代)有一过性的表达增高,此后,随着传代数增加,P53表达则逐渐下降,细胞最终未显示恶性转化表型特征.结论 JWA可能通过P53蛋白表达调节MNNG诱导HBE细胞的恶性转化.     

PM2.5对BEAS-2B细胞脂质过氧化损伤作用

目的 用大气细颗粒物(PM_2.5)刺激人支气管上皮细胞(BEAS-2B细胞),探讨其脂质过氧化作用。方法 PM_2.5采自河南省郑州市;实验细胞为人支气管上皮细胞。用0、12.5、25 μg/mL的PM_2.5刺激BEAS-2B细胞4 h后,使用流式细胞仪检测其活性氧(ROS)水平;刺激BEAS-2B细胞8 h,用丙二醛试剂盒和超氧化物歧化酶活性测定试剂盒分别检测细胞裂解液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 PM_2.5作用于BEAS-2B细胞4 h,12.5、25 μg/mL染毒组ROS水平分别为(6 074.69±41.65)、(7 338.58±168.34),均明显高于对照组的(5 816.66±114.69)(P<0.01);刺激BEAS-2B细胞8 h,12.5、25 μg/mL染毒组MDA含量分别为(195.44±35.58)、(334.11±26.75) μmol/mg,均明显高于对照组的(71.14±4.21) μmol/mg(P<0.01),同时染毒组SOD活力分别为(100.08±7.54)、(80.03±7.61) U/mg,均低于对照组的(159.91±10.59) U/mg(P<0.01)。结论 PM_2.5可以引起BEAS-2B细胞脂质过氧化损伤。