蜂胶水提液影响血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖的作用

目的：观察蜂胶水提液对血管紧张素Ⅱ诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖作用的影响。方法：实验于2005-03／2006-04在泰山医学院基础医学研究所完成。组织块法培养人脐动脉平滑肌细胞。取3～5代细胞进行实验。将培养的人脐动脉平滑肌细胞随机分为4组：①对照组：不加任何药物。②模型组：加入100nmol／L的血管紧张素Ⅱ。③蜂胶组：分别加入50mg／L、100mg／L、200mg,／L的蜂胶水提液预处理2h后，再加入终浓度为100nmol／L的血管紧张素Ⅱ。④氯沙坦组：加入1．5μmol／L的氯沙坦预处理2h后，再加入终浓度为100nmol／L的血管紧张素Ⅱ。同步化后，按分组分别加入处理药物孵育24h，倒置显微镜下动态观察细胞形态学的变化，同时计数细胞存活率，并用血细胞计数板计数各组细胞。采用流式细胞仪检测细胞周期，并分析细胞不同周期所占比例。采用免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原。计算增殖细胞核抗原阳性细胞百分率。增殖细胞核抗原阳性细胞百分率（％）=增殖细胞核抗原阳性细胞总数／血管平滑肌细胞总数&;#215;100％。结果：①相差倒置显微镜下观察各组细胞加药前后形态学无明显变化，细胞存活率均达95．0％以上。②模型组细胞计数高于对照组和氯沙坦组（P〈0．01），100mg／L和200mg／L蜂胶组低于模型组（P〈0．01）；50mg／L和100mg／L蜂胶组高于氯沙坦组（P〈0．01），200mg／L蜂胶组与氯沙坦组差异无显著性（P〉0．05）。③模型组G0／G1期细胞百分比低于对照组、氯沙坦组（P〈0．01）；100mg／L和200mg／L蜂胶组高于模型组（P〈0.01）150mg／L蜂胶组低于氯沙坦组（P〈0.05），100mg／L、200mg／L蜂胶组与氯沙坦组差异显著性（P〉0．05）。④模型组增殖细胞核抗原阳性率高于对照组、氯沙坦组（P〈0．01）；100mg／L和200mg／L蜂胶组低于模型组（P〈0．01），蜂胶各浓度组与氯沙坦组间差异无显著性意义。结论：血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞的增殖，氯沙坦能阻滞该作用；一定浓度的蜂胶水提液可抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞的增殖，其机制可能与限制细胞由G1期向S期转变及增殖细胞核抗原的表达有关。     

尿多酸肽联合亚砷酸对K562细胞凋亡及细胞增殖的影响

【目的】观察尿多酸肽（cDA-2）、亚砷酸、CDA_2与亚砷酸联合体外诱导慢性髓细胞白血病细胞（K562）株凋亡、抑制增殖的作用;探讨CDA-2与亚砷酸联合对诱导K562细胞凋亡及抑制增殖的协同作用。【方法】不同浓度的CDA-2、亚砷酸及二者联合处理K562细胞株,通过MTT比色法检测K562细胞细胞生长率,计算IC50值;应用倒置相差显微镜、A0荧光染色观察细胞凋亡及形态学变化;应用流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】①MTT结果显示,在一定的范围内,K562细胞的生长率存在剂量及时间依赖性降低,CDA-2作用K562细胞24h、48h、72h的IC50值分别为75mg／L、59mg／L和37mg／L,亚砷酸作用K562细胞24h、48h、72h的IC50值分别为11．55μmol／L、6．14gmol／L及5．18μmol／L;②荧光染色结果显示,与未加药的对照组相比,二者单药均可促进细胞凋亡,二者联合后凋亡作用更加显著;③流式细胞术显示,cDA-262．5mg／L处理K562细胞24h早期凋亡细胞为（1．77±0．49）％,亚砷酸4umol／L处理K562细胞24h早期凋亡细胞为（1．33±0．58）％,而相同浓度的二者联合用药作用于K562细胞24h早期凋亡细胞为（11．03±0．7）％（P〈0．05）,按照预计效应公式得出,两药联合存在协同作用,且协同作用于24h,两药最低浓度联合时已开始,随着两药浓度的增加,协同作用逐渐增大。【结论】CDA-2、亚砷酸单药及二者联合均可抑制K562细胞株增殖并促进凋亡,二者具有协同作用。     

活性氧在荆花牡荆素诱导人肺癌A549细胞凋亡中的作用

目的 探讨紫花牡荆素(CAS)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及其机制.方法 体外培养A549细胞.MTT法测定CAS对A549细胞增殖的抑制;Annexin V/PI双染色分析细胞凋亡率;H2DCFH-DA探针流式细胞术分析活性氧(ROS)生成.结果 CAS能抑制人肺癌A549细胞增殖,呈浓度依赖性.Annexin V/PI法检测结果显示10 μmol/L的CAS作用A549细胞12 h、24 h、48 h后,其凋亡率分别为22.39%、38.66%、64.82%.H2DCFH-DA探针流式细胞术分析表明,完全培养基组、溶媒(0.1% DMSO)组对A459细胞作用0 h;CAS(10 μmol/L)对A549细胞作用3 h、6 h、12 h;N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,10 mmol/L)+CAS(10 μmol/L)组对A549细胞作用6 h的ROS生成水平分别为8.47、15.26、66.2、74.1、82.2、67.3,随着CAS作用时间延长,细胞内ROS水平增加.NAC对细胞凋亡有抑制作用.结论 CAS可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与提高细胞内ROS产生增加有关.     

不同浓度游离脂肪酸对HA-VSMC增殖活性的影响

目的 探讨不同浓度的游离脂肪酸(FFA)对人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)增殖活性的影响。方法 体外培养HA-VSMC,采用不同浓度的FFA(25、50、100、200、300、400、500、600μmol/L)处理HA-VSMC 24、48 h,同时以未经处理的HA-VSMC作为对照组;通过倒置显微镜观察细胞形态学变化,用MTT法和EdU荧光染色法两种方法检测FFA对HA-VSMC存活率和增殖活性的影响。结果 100、200和400μmol/L组较对照组HA-VSMC存活率和增殖活性均明显增强;500、600μmol/L组较对照组HA-VSMC存活率和增殖活性均明显减低;各实验组中400μmol/L组HA-VSMC存活率和增殖活性最强。结论 低浓度的FFA(≤400μmol/L)能诱导HA-VSMC增殖,且有时间和剂量依赖性。     

原钙黏附蛋白7在脂多糖诱导的肾小管上皮细胞焦亡中的作用

目的 探讨原钙黏附蛋白7（PCDH7）是否参与脂多糖（LPS）刺激引起的肾小管上皮细胞（HK-2）焦亡过程。方法 构建LPS刺激HK-2损伤模型,使用RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测细胞中PCDH7、NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）、caspase-1、和IL-1β蛋白的表达变化。MTT法测定细胞活力,TUNEL法确定细胞焦亡率,ELISA法检测细胞分泌TNF-α、IL-6水平,全自动生化分析仪检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）含量。结果 与Control组比较,LPS组细胞生存率下降,细胞凋亡率升高,炎症因子TNF-α和IL-6水平升高,细胞损伤指标LDH含量明显升高,PCDH7的蛋白和mRNA表达明显下调,细胞焦亡指标NLRP3、caspase-1、IL-1β蛋白和mRNA表达明显上调（P均< 0.05）。结论 LPS通过下调PCDH7的表达,促进肾小管上皮细胞发生明显细胞焦亡损伤。     

黄芩苷对耐阿霉素白血病细胞株HL-60／ADR增殖、凋亡的影响

本研究探讨中药黄芩苷对耐阿霉素人髓系白血病细胞株HL-60／ADR增殖、凋亡的影响。应用MTT法绘制细胞生长曲线,观察黄芩苷对HL-60／ADR细胞增殖的影响;应用Annexin V FITC／PI双染流式细胞术、DNA片段化、TdT酶介导的原位缺口末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡;RT—PCR检测黄芩苷作用不同时段后c-myc、bcl-2等凋亡相关基因mRNA的表达水平;Western blot法检测凋亡及信号通路相关蛋白C—MYC、BCL-2、pro—caspase-3、PARP、BAD等的表达变化。结果表明,黄芩苷能明显抑制HL-60／ADR细胞增殖所测得的细胞倍增时间为48小时,半数抑制率为28μmol;Annexin V FITC／PI法检测到早期凋亡细胞、DNA片段化,TUNEL法检测到晚期凋亡细胞,细胞凋亡率呈浓度依赖性（20、40、80μmol／L）。黄芩苷作用HL-60／ADR细胞不同时段（12、24、48小时）后C-myc、bcl-2基因mRNA的表达,并随着作用时间的延长而逐渐减弱,C—MYC、BCL-2、procaspase-3、PARP（116kD）蛋白的表达逐渐下降,PARP（85kD）及BAD蛋白表达逐渐增强,呈时间依赖性。结论：黄芩苷能有效抑制HL-60／ADR细胞增殖,诱导其凋亡,上述凋亡相关基因及信号通路相关蛋白可能参与了黄芩苷抑制HL-60／ADR细胞增殖和诱导凋亡的过程：     

大蒜素对人乳腺癌细胞株的抑制作用

目的探讨大蒜素对人乳腺癌细胞株（MDA-MB-231）的抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定不同浓度（5、10、20、40、80mg／L）大蒜素对增殖MDA-MB-231的抑制率。通过药物半数抑制浓度（IC50）计算软件计算IC50。相差倒置显微镜下观察细胞形态的改变情况。结果10、20、40mg／L组大蒜素对MDA-MB-231的增殖有明显抑制作用（P〈O．01）。24、48、72hIC50值分别为16．50、8．28、7．82mg／L。相差倒置显微镜下观察可见MDA-MB-231细胞分裂相减少，部分细胞漂浮，残存细胞形态不规则，状态差，反光差，出现细胞碎片。16．50、8．28、7．82mg／L的大蒜素作用24、48、72h后，琼脂糖凝胶电泳可见DNA凋亡梯形条带。结论大蒜素可使MDA-MB-231的增殖受到抑制，促进肿瘤细胞凋亡，具有抗肿瘤作用。     

黄芩苷诱导T细胞淋巴瘤凋亡的初步研究

目的:探讨黄芩苷对T细胞淋巴瘤细胞的诱导调亡作用及其机制。方法:采用黄芩苷处理白血病细胞株Jurkat,3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法测定细胞生长抑制率,细胞甩片瑞氏染色法观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶caspase-3、caspase-8、caspase-9及AKT/ERK-MYC信号通路的表达,并用Calcusyn软件分析其与阿霉素、环磷酰胺联合使用的药效。结果:黄芩苷作用于Jurkat细胞48 h后的半数抑制浓度(IC50)为(24.32±1.01)μg/mL,且其生长抑制作用呈药物浓度-时间依赖性。黄芩苷组细胞呈现细胞凋亡的形态学改变,流式细胞术检测凋亡细胞百分比亦明显高于对照组,且呈药物浓度依赖性,而这种作用可被pan-caspase抑制剂ZVAD-FMK逆转。黄芩苷作用于Jurkat细胞48 h后,活化剪切型caspase-3、caspase-8、caspase-9表达均上调,AKT/ERK-MYC通路被抑制。此外,黄芩苷与阿霉素联合使用具有显著的协同效应。结论:黄芩苷可有效抑制T细胞淋巴瘤细胞增殖,诱导内源性和外源性凋亡,抑制AKT/ERK-MYC信号通路,并与阿霉素有显著的协同效应,具有良好的临床应用前景。     

姜黄素对人口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb增殖的抑制及诱导凋亡作用。方法分别应用6．25、12．50、25．00、50．00μmol／L的姜黄素作用Tca8113及Tb细胞24h,采用MTT法检测姜黄素对口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb增殖的抑制作用,形态学观察及流式细胞仪测定细胞凋亡。结果6．25～50．00μmol／L姜黄素能显著抑制口腔鳞癌细胞Tca8113和Tb细胞的增殖（F＝793．94、391．08,q＝6．00～62．68,P〈0．05）。流式细胞仪检测显示口腔鳞癌细胞凋亡率随姜黄素浓度升高而增加。倒置显微镜下可观察到部分凋亡细胞出现染色质凝集、核固缩、核碎裂等形态学改变。结论姜黄素对人口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb的增殖具有显著的抑制作用,并可诱导细胞凋亡。     

不同磁感强度磁场对人脑微血管内皮细胞生物学效应的影响

目的 观察不同磁感强度磁场对人脑微血管内皮细胞（HBMEC）生物学效应的影响。 方法 提取传代后处于对数生长期的HBMEC并将其分为对照组、不同强度（其极面中心磁感强度分别为26mT、62.5mT、110.7mT、215.6mT)磁场组。经体外培养72h后,分别采用乳酸脱氢酶（LDH）法检测各组细胞细胞膜改变,采用超氧化物歧化酶（SOD）法、丙二醛（MDA）法检测磁场对细胞氧化损伤的影响;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;采用流式细胞仪观察细胞凋亡情况。 结果 与对照组比较,磁感强度为215.6mT的磁场组细胞LDH值明显升高,组间差异具有统计学意义（P<0.05）,其细胞氧化损伤、凋亡情况与对照组间差异无统计学意义（P>0.05）,细胞形态也无明显改变;与对照组比较,磁感强度26mT、62.5mT、110.7mT的磁场组细胞LDH值、细胞氧化损伤及凋亡均无明显差异（P>0.05）,细胞形态无明显改变。 结论 不同磁感强度磁场对HBMEC生物学效应的影响不同,其中磁感强度215.6mT的磁场对HBMEC细胞膜具有一定影响作用,但对细胞氧化损伤、凋亡及形态尚无明显影响,其作用效果及相关机制还有待进一步探讨。     

吴茱萸碱诱导不同起源的白血病细胞凋亡的研究

目的:探讨吴茱萸碱对白血病细胞株K562、Raji、Jurkat的作用.方法:采用CCK8试剂盒检测药物对细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、死亡率及胞内ROS水平.结果:昊茱萸碱对K562、Raji、Jurkat细胞均有抑制作用,并呈时效量效关系.作用48 h的IC50值分别为K562细胞17.84μmol/L,Raji细胞27.49μmol/L,Jurkat细胞18.89μmol/L.吴茱萸碱作用后三种细胞阻滞在G2/M期,凋亡率、死亡率及胞内ROS水平随着药物浓度增加而增加.结论:吴茱萸碱对不同起源的白血病细胞均有抑制增殖的作用.     

汉黄芩素对肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移及侵袭的影响

目的探讨汉黄芩素对肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法肝癌细胞SMMC-7721分为5μmol/L汉黄芩素组、10μmol/L汉黄芩素组、20μmol/L汉黄芩素组和空白对照组。5、10、20μmol/L汉黄芩素组分别加入5、10、20μmol/L汉黄芩素进行处理,空白对照组不进行任何处理。处理48h后,采用MTT法检测各组细胞增殖率,采用TUNEL法检测各组细胞凋亡率,采用划痕试验检测各组细胞划痕愈合率,采用Transwell侵袭试验检测各组侵袭细胞数,并进行比较。结果处理48h后,20μmol/L汉黄芩素组细胞增殖率[(46.8±4.5)%]、划痕愈合率[(38.3±2.1)%]和侵袭细胞数[(16±7)个]明显低于5μmol/L汉黄芩素组[(93.5±2.3)%、(73.3±4.6)%、(24±2)个]、10μmol/L汉黄芩素组[(58.3±6.2)%、(47.8±3.6)%、(19±5)个]和空白对照组[100.0%、100.0%、(29±8)个],10μmol/L汉黄芩素组低于5μmol/L汉黄芩素组和空白对照组,5μmol/L汉黄芩素组低于空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05);20μmol/L汉黄芩素组细胞凋亡率[(27.3±3.6)%]明显高于5μmol/L汉黄芩素组[(8.8±5.3)%]、10μmol/L汉黄芩素组[(16.1±3.7)%]和空白对照组[(4.6±2.1)%],10μmol/L汉黄芩素组高于5μmol/L汉黄芩素组和空白对照组,5μmol/L汉黄芩素组高于空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论汉黄芩素可抑制肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,诱导其凋亡。     

羟基喜树碱诱导膀胱癌T24细胞凋亡的研究

目的探讨羟基喜树碱（HCPT）诱导膀胱癌T24细胞凋亡与氧化应激的关系。方法体外培养人膀胱癌T24细胞,以0.10～100.00 mg/L的羟基喜树碱处理6～48 h后,MTT法测定细胞抑制率,得出HCPT的IC50和最佳作用时间,DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测细胞凋亡情况。HCPT 10.00 mg/L作用细胞24 h后,采用生物化学方法检测SOD、MDA、LDH、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、活性氧以及谷胱甘肽（glutathione,GSH）与谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase,GR）的水平并与正常值对照,分析HCPT对T24细胞氧化与抗氧化系统的影响。结果0.10～100.00 mg/L的HCPT均能抑制T24细胞增殖并诱导调亡,其作用具有时间及浓度依赖性。细胞生化指标分析HCPT明显提高了培养上清液LDH的活力,降低了细胞内LDH的活力;细胞内SOD、T-AOC、GSH及GR的水平明显减少（P〈0.05）,MDA、活性氧的水平显著升高（P〈0.05）。结论通过诱导激活氧化应激致使凋亡抑制细胞增殖可能是HCPT抗肿瘤作用机制之一。     

原代骨髓基质细胞共培养对K562细胞伊马替尼敏感性及细胞周期的影响

背景：与骨髓基质细胞黏附可介导白血病细胞耐药,而对于黏附功能缺陷的慢性髓细胞白血病而言,骨髓基质细胞在伊马替尼耐药形成中的作用及其机制尚不清楚。目的：构建慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞-K562细胞共培养模型,探讨慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞共培养对K562细胞伊马替尼敏感性及细胞周期的影响。方法：自慢性髓细胞白血病患者骨髓分离、培养骨髓基质细胞,与K562细胞共培养构建骨髓基质细胞-K562细胞共培养模型。MTT法检测伊马替尼IC50,Annexin V-FITC/PI标记暴露于0.5μmol/L伊马替尼72 h的K562细胞,流式细胞仪检测K562细胞凋亡率。收集与骨髓基质细胞共培养72 h的K562细胞,流式细胞仪检测细胞周期及细胞周期蛋白（Cyclin A、Cyclin D1及cyclin E）的表达。结果与结论：基质细胞共培养组及悬浮培养组 K562细胞伊马替尼 IC50分别为（0.52±0.02）μmol/L 和（1.27±0.05）μmol/L,两者比较差异有显著性意义（P＜0.01）。0.5μmol/L伊马替尼处理72 h,共培养组及悬浮培养组凋亡率分别为（15.48±4.17）%和（32.01±6.83）%,两者比较差异有显著性意义（P＜0.01）。与骨髓基质细胞共培养72 h的K562细胞G0-G1期细胞的比例为（48.81±8.27）%,明显高于悬浮培养组（25.78±3.26）%（P＜0.01）。慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞共培养能介导 K562细胞对伊马替尼耐药,其机制可能与基质细胞共培养使K562细胞发生G0/G1细胞周期阻滞有关。     

热损伤对人皮肤成纤维细胞氧化应激的影响

目的探讨体外培养人皮肤成纤维细胞热损伤后氧化应激及前列腺素E2（PGE2）分泌的变化及其可能的机制。方法体外培养人皮肤成纤维细胞,制作热损伤模型后分为损伤组、DPI预处理组、NAC预处理组三组,以未受热损伤细胞作为对照组。CCK8比色法检测细胞增殖。荧光探针法及化学发光法观察细胞内活性氧（ROS）含量和NADPH氧化酶（Nox）活性变化,EIA检测上清液中PGE2的变化。半定量RT—PCR法检测人皮肤成纤维细胞表达的Nox亚型的mRNA水平。Westernblot法检测热损伤后Noxl蛋白水平的变化。结果热损伤明显抑制人皮肤成纤维细胞的增殖;热损伤后即刻细胞内ROS含量和Nox活性明显升高,在4h后二者均抵达峰值,而DPI预处理组ROS含量和Nox酶活性明显低于损伤组（P〈0．叭或P〈0．05）;热损伤后细胞分泌PGE2明显增高（P〈0．01）,而DPI预处理组和NAC预处理组均显著低于损伤组（P〈0．01）。RT—PCR结果提示正常人皮肤成纤维细胞表达Noxl、Nox3和Nox4三种亚型,三者表达量无明显差异（P〉0．05）。Westernblot结果显示热损伤后不同时间点Noxl的蛋白表达量逐渐升高。结论热损伤可明显抑制人皮肤成纤维细胞增殖并诱导Nox活性升高和Noxl蛋白表达增高,从而使细胞内ROS量升高,进一步引起PGE2分泌增多。     

黄芩苷抑制低氧性肺动脉平滑肌细胞增殖的机制

目的:研究黄芩苷对低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的影响及其作用机制.方法:体外培养大鼠PASMCs,免疫组化方法鉴定;CCK-8染色法检测常氧、低氧及黄芩苷不同浓度(5、10、20、40μmol/L)对PASMCs增殖的影响;离体细胞分为正常组、低氧组、低氧+黄芩苷组、低氧+腺苷A2A受体(A2A adenosine receptor,A2AAR)特异性激动剂(CGS21680,1μmol/L)组、低氧+ A2AAR特异性拮抗剂(SCH58261,100 nmol/L)组,RT-PCR和Western-Blot检测A2AAR的表达变化.结果:低氧使CCK-8吸光度(absorbance,A)值升高(P＜0.01),黄芩苷干预使A值下降,当浓度为40μmol/L时,A值接近正常组;RT-PCR和Western-Blot显示黄芩苷组A2AAR表达量显著增加(P＜0.01).结论:黄芩苷能抑制低氧PASMCs增殖,可能与上调A2AAR的表达有关.     

黄芩苷诱导HL-60细胞凋亡的分子机制研究

本研究旨在探讨黄芩苷对急性髓系白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。CCK-8法检测黄芩苷对HL-60细胞增殖抑制情况;普通光学显微镜和Hoechst 33342染色后荧光显微镜下观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR方法检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax mRNA表达;Westernblot检测Bcl-2、Bax、caspase-8及caspase-3剪切片段的蛋白表达。结果表明,黄芩苷对HL-60细胞具有明显的增殖抑制作用,呈浓度和时间依赖性;在光学显微镜和荧光显微镜下细胞均呈凋亡的形态学改变;AnnexinⅤ/PI法检测到细胞早期凋亡;caspase-3、caspase-9、Bax基因mRNA表达水平呈上升趋势,Bcl-2 mRNA表达水平呈下降趋势,Bax、caspase-8及capsase-3剪切片段蛋白表达上调,同时Bcl-2蛋白表达下调,Bcl-2/Bax比值降低。结论:黄芩苷显著抑制HL-60细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与降低Bcl-2/Bax比值,激活线粒体凋亡途径及死亡受体途径有关。     

依达拉奉在星形胶质细胞持续缺糖缺氧损伤中的作用

【目的】研究自由基清除剂依达拉奉对持续缺糖缺氧诱导的星形胶质细胞（AS）损伤的影响。【方法】用缺糖缺氧4h处理大鼠原代AS星形胶质细胞作为As持续缺血的体外模型,实验分为4组：①空白对照组,②依达拉奉对照组（300uM）,③缺糖缺氧组,④依达拉奉（300uM）＋缺糖缺氧组。测定各组细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放量,观察并测定细胞内活性氧簇（ROS）含量、线粒体膜电位（MMP）水平。【结果】AS经持续缺糖缺氧损伤后,与空白对照组相比,细胞LHD释放量及ROS含量显著增加（P〈0．05）,MMP显著下降（P〈0．05）;依达拉奉＋缺糖缺氧组与缺糖缺氧组相比,细胞LDH释放量及R0s含量显著下降（P〈0．05）,MMP显著升高（P〈0．05）;依迭拉奉对照组与空白对照组相比3项指标无显著差异（P〉0．05）。【结论】依达拉奉通过减轻氧化应激、保护线粒体功能,减轻持续缺糖缺氧诱导的As。     

应用细胞培养技术观察黄芩苷对损伤子宫内膜细胞凋亡的影响

背景:研究表明脂多糖对子宫内膜细胞具有损伤作用.目的:通过噻唑蓝和流式细胞术观察黄芩昔对脂多糖诱导的子宫内膜细胞活性、周期和凋亡率的影响.设计、时间及地点:以细胞为对象的分组对比观察实验,于2005-11/2007-03在湖南中医药大学完成.材料:子宫内膜组织标本3例,来自中南大学湘雅医学院第三附属医院和湖南省妇幼保健医院因不孕症行诊断性刮宫术,或子宫肌瘤行子宫全切除的患者;黄芩提取物由长沙艾菌生物科技开发有限公司提供.黄芩苷含量≥90%,由湖南中医药大学药学院药物制剂室制备黄芩苷药物,原液浓度为80 g/L.方法:体外培养人子宫内膜细胞.将细胞随机分为空白组、黄芩苷组(8,0.8,0.08,0.008 p/L).根据细胞活性最好的黄芩苷浓度以下实验将细胞随机分为空白组、脂多糖组、脂多糖 黄芩苷组(0.08 g/L).主要观察指标:①采用噻唑蓝法检测黄芩苷对子宫内膜细胞活性的影响.②采用流式细胞术检测黄芩苷对脂多糖诱导子宫内膜细胞凋亡率及周期的影响.结果:①噻唑蓝法检测显示黄芩苷组除0.008g/L外,其余各浓度对子宫内膜细胞活性均有抑制作用,选择0.08g/L进行后续实验.②流式细胞术检测显示黄芩苷干预后G0/G1和G2/M期细胞百分比较脂多糖组明显降低,S期明显增高,细胞凋亡率明显降低.结论:黄芩苷可以使G0/G,期细胞被诱导进入S期,从而促进细胞的增殖,降低了脂多糖诱导的细胞凋亡.     

龙胆苦苷对人结肠癌HCT116细胞增殖、凋亡的影响

目的 研究龙胆苦苷对人结肠癌细胞HCT116增殖、凋亡的影响,并初步探讨其可能作用机制。方法体外培养人结肠癌HCT116细胞,采用不同浓度的龙胆苦苷（0、12.5、25、50 mg/L）作用于细胞,并同时应用5-氟尿嘧啶作用于相同的细胞,对比不同处理方法对细胞生长的抑制及对细胞形态及凋亡的影响,并检测不同浓度龙胆苦苷对细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bax、Bcl-2表达水平的影响。结果 与阴性对照组相比,5-氟尿嘧啶组和龙胆苦苷组均显著能够抑制HCT116细胞增殖,且龙胆苦苷组对HCT116细胞的抑制增殖作用呈剂量和时间依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）。5-FU组凋亡细胞百分率最高,其次是龙胆苦苷50、25、12.5 mg/L组,与阴性对照组比较,龙胆苦苷组（50、25、12.5 mg/L）细胞凋亡率显著提高,差异有统计学意义（P<0.05）。与阴性对照组比较,龙胆苦苷（12.5、25、50 mg/L）组Bax、Caspase-3 mRNA表达水平显著升高,而Bcl-2 mRNA表达在25、50 mg/L龙胆苦苷处理后明显降低,差异均有统计学意义（P<0...