黄芪总苷通过PAR2信号通路减轻糖尿病大鼠肝纤维化的机制研究

目的 探讨黄芪总苷在蛋白酶激活受体2(PAR2)信号通路的作用下缓解糖尿病大鼠肝纤维化的作用机制.方法 采取随机数字表法分组,将100只大鼠平均分为5组,各20只,分别为空白对照组、模型组、黄芪总苷低、中、高剂量组.除空白对照组,其他各组均采用一次性腹腔注射构建糖尿病大鼠模型.空白对照组和模型组大鼠给予0.5 mg/k...     

荔枝核总黄酮通过JAK2/STAT3信号通路抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨荔枝核总黄酮(TFL)通过酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的作用机制。方法 将30只大鼠近照随机数字表法分为空白对照组、模型组、TFL组,各10只。除空白对照组外,其余各组大鼠采用DMN腹腔注射4周建立大鼠肝纤维化模型。造模后,TFL组给予TFL灌胃,空白对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,6周后处死大鼠。检测大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及肝组织羟脯氨酸(HYP)水平。取固定部位肝组织进行病理组织学检查,并采用Western blot检测JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原-Ⅰ(Collagen-Ⅰ)蛋白表达情况。结果 与模型组比较,TFL组大鼠DMN诱导的肝损伤病理表现改善,血清AST、ALT及肝组织HYP水平降低(P<0.05)。Western blot检测结果显示,TFL组α-SMA、Collagen-Ⅰ、p-JAK2、JAK2、p-STAT3、...     

IL-8和IL-10的表达在大鼠肝纤维化机制中的作用

目的探讨白细胞介素8(IL-8)和白细胞介素10(IL-10)在大鼠肝损伤和肝纤维化机制中的作用。方法以四氯化碳(CC l4)诱导大鼠形成肝纤维化模型,以秋水仙碱治疗以延缓肝纤维化进程,采用酶联免疫吸附双抗夹心法(EL ISA)检测IL-8、IL-10水平,同时检测肝功能,并对肝组织进行病理检查。结果IL-8水平在对照组、秋水仙碱组、肝纤模型组的表达分别为:51.25±10.61 ng/L,86.56±23.82 ng/L,167.76±34.52 ng/L,肝纤模型组显著高于对照组和秋水仙碱组(P<0.01);IL-10水平在三组的表达分别为:46.32±9.23 ng/L,38.41±11.53 ng/L,32.28±7.65 ng/L,肝纤模型组显著低于对照组和秋水仙碱组(P<0.01)。结论IL-8可能参与肝纤维化过程,其表达随着肝纤维化的严重程度加重而增加;IL-10有拮抗肝纤维化作用,随着纤维化和肝功能损伤的加重而显著降低。     

慢性乙型肝炎患者血清IL-13与肝纤维化的关系

IL-13是近年发现的一种细胞因子，主要由活化的Th2细胞产生。有资料表明，IL-13是Th2细胞因子家族中调控纤维化的主要成员，但它与慢性乙型肝炎（CHB）患者肝纤维化的关系国内鲜有报道，我们对CHB患者血清IL13的水平和肝纤维化指标透明质酸（HA）的相关性作了初步观察，以探讨IL-13在CHB肝纤维化过程中的作用，报告如下。     

人毛囊干细胞wnt10b信号通路激活作用研究

目的 通过病毒转染方式激活Wnt10b信号通路,调节毛囊干细胞的增殖分化过程,构建分化程度可控的毛囊干细胞种子细胞系.方法 本研究从人毛囊隆突部位中提取分离出多系毛囊干细胞.通过系统性的体外激活人毛囊干细胞中wnt10b信号通路,分析wnt信号通路对毛囊干细胞增殖和分化的影响.结果 本研究通过显微解剖结合消化法,实现了...     

黄芪总皂苷改善血管性痴呆大鼠的认知功能

目的：研究黄芪总皂苷（AST）对血管性痴呆（VD）大鼠的认知功能及细胞凋亡、氧化应激的影响。方法：选取40只健康雄性SPF级SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组和AST组,每组10只。模型组、阳性对照组和AST组均采用双侧颈总动脉结扎术（BCCAO）建立VD大鼠模型,阳性对照组每天灌胃甲磺酸二氢麦角碱缓释胶囊混悬液,AST组每天给予AST溶液,假手术组和模型组分别给予等体积的生理盐水,共给药7 d。采用Morris水迷宫实验测试各组大鼠的认知功能;试剂盒检测大鼠海马组织中多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、乙酰胆碱酯酶（AchE）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）的含量;Western blotting检测B-细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和活化型半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白的表达。结果：Morris水迷宫实验显示,自第2天开始,阳性对照组和AST组大鼠逃逸潜伏期时间短于模型组（P<0.05）,阳性对照组和AST组大鼠在目标象限的停留时间长于模型组（P<...     

利用SELDI技术检测大鼠肝纤维化组织的实验研究

目的初步建立表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF/MS)技术检测大鼠肝纤维化组织样本的方法。方法采用SELDI技术及弱阳离子交换表面蛋白芯片(CM10)对组织样本进行分析,从组织样本制备、组织裂解液选择、上样浓度控制、重复性验证等方面进行实验条件的优化,并对大鼠肝纤维化组和对照组肝组织各4例进行差异蛋白分析。结果液氮研磨法结合含两性电解液和蛋白酶抑制剂的裂解液处理样本,以及组织蛋白样本浓度为5μg/μl时,芯片检测得到的蛋白峰强度和蛋白数量最优;对两组样本重复检测3次,蛋白丰度的平均变异系数(CV值)分别为0.105和0.155;两组样本共检测到292个蛋白峰,其中差异表达蛋白54个,在肝纤维化组中表达上调16个,表达下调38个。结论初步建立了SELDI技术检测组织样本的方法,并初步筛选出大鼠肝纤维化差异表达蛋白。     

黄芪总皂苷对心室重构大鼠血流动力学及抗氧化作用的影响

目的观察黄芪总皂苷（AST）对心室重构大鼠血流动力学及抗氧化作用的影响。方法通过结扎大鼠左冠状动脉前降支4周建立实验性心室重构模型。将Wistar大鼠随机分成空白对照组、模型对照组、AST组和阳性对照组。AST组和阳性对照组分别灌胃给予AST100mg／kg和卡托普利100mg／kg,空白对照组及模型对照组灌胃给予等体积0．5％羧甲基纤维素钠溶液,每日1次,连续4周。4周后测定各组大鼠血流动力学;测量各组大鼠体重,左心室绝对重量,计算左心室相对重量;测定各组大鼠体内血清丙二醛（MDA）含量,血清超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性;测定各组大鼠心肌胶原含量及Ⅰ／Ⅲ胶原比例。结果AST能明显降低心室重构大鼠左心室舒张末压（LVEDP）,升高平均动脉压（MAP）和左心室内压最大上升和下降速率（±dp／dtmax）;减轻心室重构大鼠左心室绝对重量及相对重量;降低心室重构大鼠心肌间质胶原含量和Ⅰ型胶原／Ⅲ型胶原比例;降低心室重构大鼠血清MDA的含量,提高SOD和GSH—Px活性。结论AST对大鼠实验性心室重构具有保护作用,机制可能与其抑制心肌间质纤维化及增强机体抗氧化能力有关。     

黄芪总皂苷对大鼠缺血心肌血管内皮生长因子蛋白表达的影响

目的探讨黄芪总皂苷对急性心肌梗死（ AMI）大鼠缺血心肌组织血管内皮生长因子（ VEGF）蛋白表达水平的影响。方法雄性Wistar大鼠24只,建立AMI模型,术后24 h存活大鼠随机分为药物组（n＝8）、对照组（n＝8）,另设假手术组（n＝8）。药物组给予黄芪总皂苷水溶液2．5 mg/（kg· d）腹腔注射,对照组及假手术组给予等体积生理盐水,4周处死大鼠。心肌组织取材,Ⅷ因子染色计数微血管数（ MVC）及微血管密度（ MVD）,免疫组化法观察缺血心肌VEGF蛋白表达水平。结果药物组及对照组大鼠缺血心肌MVC、MVD均高于假手术组,且药物组MVC、MVD高于对照组（P＜0．05）;药物组及对照组大鼠缺血心肌VEGF蛋白表达均高于假手术组（P＜0．01）,且药物组高于对照组（P＜0．01）。结论黄芪总皂苷促进大鼠缺血心肌血管新生,同时可上调缺血心肌组织VEGF蛋白表达水平。     

TGF-β及其信号通路在肝脏疾病中的研究进展

转化生长因子β(transforming growth factor-β, TGF-β)在机体正常发育和动态平衡中起重要作用。TGF-β反应性失调及其下游信号通路参与许多疾病的发生、发展。目前,TGF-β及其信号通路的研究已取得一定进展,但其在肝脏疾病中的具体作用机制尚未明确。本文对TGF-β及其信号通路在肝脏疾病中的研究进展进行综述,以期为肝脏疾病的进一步研究及治疗提供更多的理论依据。     

肝纤维化ADC值减低机制及与选取b值关系的实验研究

目的 探讨ADC值随肝纤维化程度增加而减低的机制及b值取值在肝纤维化诊断中的价值。 方法 建立不同时期的家兔肝纤维化模型30只,对其行DWI。对每只动物在第1次扫描后结扎肝脏左外叶动脉及门静脉肝左外叶支,再次行相同序列MR扫描。分别在肝左外叶和肝右前叶及结扎血管后的肝左外叶选取ROI,测量ADC值。MR检查后取家兔肝脏行病理检查,并按病理结果分期、分组。 结果 随肝纤维化分期进展, ADC值逐渐降低,肝左外叶血管结扎后测量ADC值明显降低,但并未随肝纤维化程度的加重而明显变化。随着b值增大,图像质量下降,且ADC值亦逐渐减低。b=300、500、700、1000 s/mm²时,S0期、S1期与S2期、S3期、S4期之间比较,ADC值差异有统计学意义(P<0.05)。b=300 s/mm²时,S2期与S3、S4期比较,ADC值差异有统计学意义(P<0.05)。b=500 s/mm²时,S2期与S4期比较,ADC值差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 不同程度肝纤维化导致ADC值减低的主要原因为肝内微循环障碍导致的血流灌注减少,较小b值对于判定肝纤维化严重程度更有价值。在有效范围内,b值越小,测量结果受血流灌注因素的影响越大,且判定肝纤维化程度越准确。     

慢性HBV感染不同临床类型患者IL-2、IL-10水平的变化及其意义

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染的不同临床类型患者白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化及其意义。方法采用ELISA法检测91例慢性HBV感染患者[慢性重型乙型肝炎(慢重肝组,SH)18例,乙型肝炎肝硬化(肝硬化组,LC)25例,慢性乙型肝炎(慢乙肝组,C     

LncRNA CASC7/miR-21/Wnt2b轴介导糖尿病肾病小鼠肾纤维化的机制研究

目的 探究miR-21靶向调控肾纤维化的发生发展机制,为临床糖尿病肾病（DN）的治疗提供新的思路。方法 24只C57BLKS/J-Leprdb/db小鼠随机分为实验1组、实验2组与对照组,每组8只。实验1组进行单侧肾切除术,术后2月,实验1组和实验2组小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立糖尿病肾病动物模型。HE染色法观察肾组织病理学改变,Masson染色法观察肾组织纤维化状况,qRT-PCR法检测各组肾组织中LncRNA CASC7、miR-21、Wnt2b、SMAD7表达水平,western blot法检测Wnt2b和SMAD7的蛋白表达水平,荧光素酶报告系统鉴定LncRNA CASC7和miR-21靶向关系。Pearson相关性分析肾组织中LncRNA CASC7和miR-21的表达水平与糖尿病肾病肾纤维化之间的关系。结果染色试验中观察到实验1组与实验2组小鼠肾小球肥大,系膜细胞及系膜基质增生,肾小管上皮细胞空泡变性。肾组织存在炎性细胞浸润、肾小管萎缩与间质纤维化。肾组织纤维化评分：实验1组（2.87±0.66）分>实验2组（2.17±0.62）分>对照组（0...     

复元愈肝胶囊抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的：探讨复元愈肝胶囊抗肝纤维化的作用机制。方法：70只Wistar大鼠被随机分为正常对照组（A组,10只）、模型组（B组,12只）、秋水仙碱组（C组,12只）和复元愈肝胶囊大、中、小剂量组（D、E、F组,各12只）。除A组外,余各组均采用CCl4、高脂、高胆固醇、低蛋白等复合因素制备大鼠肝纤维化模型。同时A组和B组每日给予2 ml生理盐水;C组给予秋水仙碱0.1 mg/kg;D、E、F组分别给予复元愈肝胶囊9、4.5和2.25g/kg。于第6周末心脏取血测定血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LM）、型前胶原（PC）及肝组织羟脯氨酸（HYP）含量,并观察肝组织病理改变,以判定胶原纤维增生程度。结果：B组血清HA、LM、PC及肝组织HYP含量均显著高于其他各组（P均〈0.01）。与C组比较,D组血清HA、LM和PC均显著降低（P〈0.05和P〈0.01）,且显著低于F组（P〈0.05和P〈0.01）,而D、E、F组血清PC均显著低于C组,但3组间差异无显著性（P均〉0.05）。肝组织病理观察,C、D、E和F组均可以改善肝脏病理、抑制肝纤维化形成。结论：复元愈肝胶囊具有确切的抗肝纤维化作用,且以大剂量组为优。     

肝纤维化时基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子的表达

目的：了解基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子（TIMP-2）在不同病因致有肝纤维化病理阶段中的变化。分析MMP-2/TIMP-2与肝病理损害的关系。方法：用免疫组织化学（LsAB法）,在正常肝组织,慢活肝伴早期肝纤维化,肝癌伴早期肝纤维化、胆汁性肝硬化、坏死后性肝硬化病例中MMP-2及TIMP-2的联合检测,行半定量研究。结果：正常肝组织MMP-2/TIMP-2的比值高于病肝组;早期肝纤维化组MMP-2/TIMP-2比值高于肝硬化组;早期肝纤维化组组间,肝硬化组组间MMP-2/TIMP-2比值无显著差异。结论：早期肝纤维化MMP-2表达相对增高,对肝纤维化的始动和进展起重要作用。肝硬化时TIMP-2表达明显增高,抑制MMP-2,细胞外基质（ECM）降解障碍而大量沉积,加重肝病理损害。     

不同无创肝纤维化评分指标评估2型糖尿病伴非酒精性脂肪肝病患者肝纤维化的比较

目的:比较不同无创肝纤维化评分指标对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)伴非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者肝纤维化的评价作用。方法:将996例明确诊断为T2DM、同时经超声诊断为NAFLD的患者(男性578例,女性418例)纳入分析,采集患者的空腹静脉血,测定血常规及肝脏相关酶。计算天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)/丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)比值、FIB-4指数、BARD评分、AST/血小板比值指数(APRI)及NAFLD纤维化评分(NAFLD fibrosis score,NFS)。以NFS作为评价肝纤维化的标准,采用相关性分析比较其余指标与NFS的相关性,进一步采用Bland-Altman方法评价这些指标的一致性。结果:T2DM伴NAFLD的男性和女性患者中,AST/ALT比值、FIB-4指数、BARD评分及APRI均与NFS呈线性正相关,其中FIB-4指数与NFS的相关性最强(r=0.619,P0.01)。Bland-Altman分析结果表明,AST/ALT比值及FIB-4指数与NFS一致性良好,以FIB-4指数最佳。结论:AST/ALT比值及FIB-4指数可以用来评价T2DM伴NAFLD患者是否存在肝纤维化。     

人参总皂苷诱导红系血细胞增殖的信号转号

背景：研究证实多数造血生长因子通过JAKs-SWATs途径转导信号，调节血细胞的增殖与分化。人参总皂苷能够促进早期的造血干，祖细胞向红系细胞分化，具有类似造血生长因子的功效，在红系血细胞发生中造血细胞膜表面红细胞生成素受体起着关键性的作用。 目的：通过红细胞生成素及其受体介导的JAK2／STAT5信号转导途径，分析人参总皂苷定向诱导红系血细胞发生的分子机制。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2006—05，2008—10在在重庆医科大学基础医学研究所、组织胚胎学教研室完成。材料：脐血细胞来源于正常足月妊娠产妇分娩脐带血，由重庆医科大学第一附属医院提供。人参总皂苷由重庆中药研究所惠赠，纯度95％以上，添加MI-1640培养液配成1g/L的工作液。 方法：①集落形成实验：取5&;#215;10^6L^-1脐血单个核细胞，添加含马血清的RPMI-1640培养液，10，25，50，75，100mg／L人参总皂苷组分别加入对应终浓度的人参总皂苷，并设立空白对照组。在96孔板上培养，0．2mL/孔，14d计数早期红系祖细胞，6d计数晚期红系祖细胞。②取脐血单个核细胞悬液100uL（5&;#215;10^8L^-1），进行MTT检测。（3）分别将0，25，50，100mg／L人参总皂苷与脐血造血细胞1&;#215;10^9L^-1共培养24h，进行Westemblot检测。④取脐血造血细胞1&;#215;10^9L^-1，对照组加入含体积分数为10％马血清的RPMI-1640培养液，人参总皂苷组在常规培养体系中加入终浓度25mg／L人参总皂营。分别用5U／mL红细胞生成素诱导0，2，5，30min后终止反应，进行免疫沉淀检测。 主要观察指标：人参总皂苷刺激红系造血祖细胞增殖的能力，红细胞生成素对脐血细胞增殖的影响，人参总皂苷对造血细胞红细胞生成素受体表达的影响，JAK2、STAT5蛋白酪氨酸磷酸化情况。结果：10～75mg/L人参总皂营均能提高脐血细胞形成早期红系祖细胞、晚期红系祖细胞的集落产率，以25mg/L提高幅度最为明显。2—50U/mL红细胞生成素均能促进脐血细胞的增殖，以5U/mL促进增殖效果最为明显。0—100mg/L人参总皂苷作用脐血细胞24h后，红细胞生成素受体的表达无明显变化。人参总皂苷作用造血细胞24h后，加入红细胞生成素继续刺激0～30min．JAK2和SWAT5的酪氨酸磷酸化程度均明硅增强。 结论：人参总皂苷在促进造血细胞增殖的过程中，尽管对造血细胞红细胞生成素受体的表达无明显影响，但可能通过在红细胞生成素受体介导的信号转导过程中增强JAK2和SWAT5的酪氨酸磷酸化程度发挥作用。     

抗病毒治疗对Ⅰb型慢性丙肝患者PBMC IL-10、IL-12水平变化影响的研究

目的研究派罗欣联合利巴韦林抗病毒治疗对Ⅰb型慢性丙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10、IL-12水平的影响,分析IL-10、IL-12水平变化与病毒学应答结果之间的相关程度,探讨IL-10、IL-12作为抗病毒疗效评价指标的可能性。方法选取血清HCV-RNA阳性的Ib型慢性丙肝患者60例,依据病毒载量将其分为3组,低病毒载量组(1.0×103IU/ml     

辛伐他汀抑制大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化的实验研究

目的在大鼠结扎前降支致心肌梗死的模型上观察辛伐他汀抑制心肌纤维化的作用,探讨辛伐他汀改善心室重塑和心功能的机制。方法结扎大鼠冠状动脉前降支造成心肌梗死模型,给予辛伐他汀干预。8周后,测定心脏重量指数、心肌梗死区与非梗死区心肌羟脯氨酸含量和胶原含量、IL-6表达量,并与假手术组比较。结果心肌梗死组（M组）大鼠右室重量指数（RVWI）、左室重量指数（LVWI）升高（P〈0．01）。心肌中羟脯氨酸、胶原含量、IL-6表达升高（P〈0．01）。辛伐他汀干预组较M组辛RVWI、LVWI下降（P〈0．01）,心肌中羟脯氨酸、胶原含量及IL-6表达下降（P〈0．01）。结论辛伐他汀减少急性心肌梗死后IL-6表达,抑制胶原形成及纤维化,可能是改善心室重塑和心功能的机制之一。