血浆lncRNA DLEU2在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

Ⅲ目的:通过检测甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)患者血浆DLEU2的水平,分析其与临床病理参数的关系,并探讨影响PTC及其淋巴结转移和临床分期的危险因素。方法:生物信息分析DLEU2在PTC组织和正常人群的水平。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测22对PTC组织和癌旁组织以及89例PTC(PTC组)和36例正常人(对照组)血浆DLEU2的水平,分析89例PTC患者DLEU2与临床病理参数的关系。受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析DLEU2对PTC的诊断效能;二元Logistic回归分析影响PTC及其淋巴结转移和临床分期的因素。结果:生信结果显示512例PTC组织DLEU2表达量高于59例正常组织(P<0.001),ROC曲线下面积(area under the curve, AUC)为0.824,95%CI 0.755～0.893;22对PTC和癌旁组织qRT-PCR验证显示,PTC组织DLEU2的...     

非小细胞肺癌患者肿瘤组织PA28γ、miR-7-5p的表达水平及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中蛋白酶体激活因子PA28γ及微小RNA-7-5p(miR-7-5p)表达水平与术后生存的相关性。方法 回顾性分析2018年3月—2020年5月间接受手术治疗的82例NSCLC患者临床资料,使用免疫组化法和qPCR法测定其癌组织及癌旁组织标本中PA28γ、miR-7-5p表达情况并分析其与NSCLC患者病理特征的关系。术后随访14～42个月,观察患者生存情况,绘制ROC曲线分析癌组织中PA28γ、miR-7-5p表达对NSCLC患者预后的预测效果。结果 免疫组化法检测NSCLC组织中PA28γ表达水平显著高于癌旁组织,qPCR法测定miR-7-5p相对表达量明显低于癌旁组织(P<0.05);NSCLC癌组织中PA28γ表达与miR-7-5p呈负相关性(r=-0.557,P<0.001);PA28γ表达与肿瘤分化程度、TNM分期、浸润深度及远处转移相关(P<0.05);miR-7-5p表达与肿瘤病理类型、分化程度、TNM分期、浸润深度及远处转移相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示PA28γ表达预测生存率的AUC为0...     

触珠蛋白HP在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究触珠蛋白HP在肾透明细胞癌中的表达及临床意义,为肾透明细胞癌的医治提供新的生物治疗靶点和理论依据。方法:从美国癌症基因组图谱(TCGA)中下载肾透明细胞癌的相关基因数据,进行筛选后获得目的基因HP。利用免疫组化研究该基因在肾透明细胞癌组织及癌旁组织中的差异化表达,以及与临床数据的相关性,随后利用R软件对TCGA数据库中的病例样本进一步分析予以验证,并分析HP与临床预后的关系。结果:TCGA数据库中总共得到611个样本(其中癌旁组织样本72个,癌组织样本539个),挑选后得到1 925个差异基因。筛选后选择HP为目标基因,免疫组化表明HP在肾透明细胞癌组织中阳性率（66.0%）高于癌旁组织（36.0%）(P=0.005),并且该基因的表达与WHO/ISUP核分级差异有统计学意义（P<0.05）,与性别、年龄及T分期差异无统计学意义（P> 0.05）。对TCGA数据库样本分析发现HP的表达水平与T分期、N分期、性别及TNM分期的差异有统计学意义（P<0.05）,而与年龄、M分期的差异无统计学意义（P> 0.05）,并且HP高表达组的预后较低表达组更差。结论...     

BAI-1在肾细胞癌组织中的表达定位及与VEGF MCD P53蛋白相关性研究

  目的  探讨BAI-1在不同分期肾细胞癌中的表达差异以及BAI-1抑制肿瘤血管内皮增殖的机制。  方法  取人肾细胞癌标本133例, 正常肾组织标本133例(癌旁 > 4 cm处正常肾组织, 病理学检测证实)。正常肾脏标本为对照组, 肾细胞癌标本为研究组。采用免疫组织化学SP法分别检测BAI-1、VEGF、MVD、P53, 进行半定量统计学分析。取临床新鲜肾细胞癌组织标本27例, 癌旁4cm以外肾组织15例。应用Western blot方法分析BAI-1肾细胞癌组织及正常肾组织中的表达差异。  结果  免疫组化统计分析及western blot检测显示正常肾组织中BAI-1表达明显高于肾细胞癌组织, 并且与临床分期相关, T1~2局限期肾细胞癌中BAI-1表达远高于T3~4进展期肾细胞癌(P < 0.05)。同时BAI-1表达与VEGF具有相关性(r=0.586, P < 0.05), 与MVD具有相关性(r=0.577, P < 0.05), 与P53表达具有相关性(r=0.513, P < 0.001)。  结论  在肾细胞癌组织中BAI-1含量较正常肾组织明显降低且与肾细胞癌临床分期相关, BAI-1表达与VEGF、MVD负相关, 与P53正相关性。BAI-1可能参与了肿瘤微血管增殖的负调节, BAI-1的表达减少可能与P53的突变相关。      

MYBL1在肾透明细胞癌组织中表达及与其预后相关性分析

目的 探讨MYBL1在肾透明细胞癌中表达及与其预后的相关性。方法 通过TCGA数据库获取肾透明细胞癌患者临床资料，卡方检验分析MYBL1表达在肾透明细胞癌中相关因素，R软件分析MYBL1在肾透明细胞与癌旁组织表达差异；受试者工作曲线特征(ROC)分析MYBL1诊断肾透明细胞癌准确度。LimkedOmic数据库进行GO/KEEG分析；TIMER数据库评估肾透明细胞癌中MYBL1表达与免疫细胞浸润分析。结果 MYBL1表达与性别(P=0.008)、肿瘤分级(P=0.001)、T分期(P=0.02)、M分期(P=0.003)显著相关，与种族、年龄、N分期无显著相关。肾透明系细胞癌组织MYBL1表达水平明显高于癌旁组织，MYBL1低表达组总生存期及疾病无进展期均优于高表达组(P<0.01),ROC曲线结果显示：MYBL1具有较高的诊断准确性0.926,可信区间为(0.89～0.926);GO/KEE通路分析显示MYBL基因参与细胞器分裂、细胞核分裂、染色体分离以及ATP酶活性和偶联、微管运动等多种细胞周期活动。MYBL1表达与B细胞(cor=0.209)、CD4+T细胞(cor=0.17...     

透明细胞肾细胞癌外泌体miR-133a表达及临床意义

目的 探讨外泌体微小RNA(miR)-133a在透明细胞肾细胞癌(ccRCC)中的表达及临床意义。方法 收集2015年9月至2019年1月在我院行根治性肾切除术的293例ccRCC患者的血清样本，另外收集200例健康体检者的血清样本作为对照组。提取血清及组织外泌体总RNA,采用TaqMan低密度芯片(TLDA)鉴定差异表达的miRNA,并通过实时荧光定量PCR(qPCR)进行验证。随访患者的总生存期(OS)和无病生存期(DFS)。结果 与健康对照组血清和癌旁正常组织比较，TLDA筛选得到3个在ccRCC患者血清外泌体和肿瘤组织中差异表达的miRNAs(miR-133a、miR-210、miR-7-1)。qPCR证实外泌体miR-133a表达在ccRCC患者中显著下调(P<0.001)。ccRCC患者外泌体miR-133a表达与肿瘤组织表达呈正相关(r=0.467,P<0.001)。受试者工作特征(ROC)曲线证实血清外泌体miR-133a诊断ccRCC曲线下面积(AUC)为0.78(95%CI:0.747～0.729)。术前血清外泌体miR-133a表达与TNM分期、Fuh...     

长链非编码RNA RAD51-AS1通过ERK信号通路对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响

目的 探讨RAD51反义RNA 1(RAD51-AS1)通过抑制细胞外信号调节激酶(ERK)信号调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的潜在机制。方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测55对乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织以及乳腺癌细胞(BT549、MCF7、SK-BR-3、BT474、MDA-MB-231)和正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)中RAD51-AS1的表达情况。培养MDA-MB-231细胞并分为NC组(转染pcDNA3.1)、RAD51-AS1组(转染pcDNA3.1-RAD51-AS1以过表达RAD51-AS1)和RAD51-AS1+ERK激动剂组(同时转染pcDNA3.1-RAD51-AS1和ERK激动剂以过表达RAD51-AS1并激活ERK信号)。通过CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别评估细胞的增殖、迁移和侵袭能力。利用qPCR和Western blot检测细胞中ERK、p-ERK和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达情况。结果 乳腺癌组织的RAD51-AS1表达量低于癌旁组织(0.419±0.039 vs. 1.000±0.063,P<...     

AGAP2-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨AGAP2反义RNA1(AGAP2-AS1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法回顾性分析95例NSCLC患者临床资料,收集患者NSCLC组织及癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR法测定NSCLC组织及癌旁正常组织中的AGAP2-AS1表达水平,并进行比较。分析AGAP2-AS1表达与NSCLC患者临床病理特征关系,分析AGAP2-AS1表达水平与NSCLC患者预后的关系。结果 NSCLC组织中AGAP2-AS1表达水平高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤直径≥3 cm、TNM分期Ⅲ期+Ⅳ期、分化程度低分化、淋巴结转移患者的AGAP2-AS1表达水平高于肿瘤直径<3 cm、Ⅰ期+Ⅱ期、中分化+高分化、无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄及性别患者的AGAP2-AS1表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。随访2年,95例患者死亡40例,生存55例;死亡组患者的AGAP2-AS1表达水平高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NSCLC组织中AGAP2-AS1呈高表...     

肺腺癌组织中lncRNA CADM1-AS1表达及其临床意义

目的 探讨长链非编码lncRNA CADM1-AS1在肺腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法 收集于本院行手术切除的72例肺腺癌组织及对应癌旁组织，采用实时定量PCR（qPCR）法检测以上组织标本中的CADM1-AS1水平，分析CADM1-AS1水平与临床病理参数（性别、年龄、肿瘤大小、分化类型、临床分期、T分期、吸烟史和淋巴结转移）的关系，同时根据远期生存资料比较不同CADM1-AS1表达水平的中位总生存期（OS）。进一步采用qPCR法检测常见非小细胞肺癌株A549、SPC-A、NCI-H1650和NCI-H1299中的CADM1-AS1水平。采用受试者工作特征曲线（ROC）评价组织CADM1-AS1水平在肺腺癌早期诊断中的效能。结果 肺腺癌组织中的CADM1-AS1水平低于癌旁组织，且与正常支气管上皮细胞株16HBE相比，非小细胞肺癌株的CADM1-AS1均为低表达，差异有统计学意义（P均＜0.05），且按照由高至低依次为NCI-H1299＞SPC-A＞NCI-H1650＞A549；CADM1-AS1表达与肺腺癌的TNM分期、分化类型、肿瘤大小、T分期及淋巴结转移有关，其中TNM Ⅱ、Ⅲ期、低未分化、肿瘤最大径＞3 cm、T分期T3、T4期及有淋巴结转移组织的CADM1-AS1水平均低于对应项（P均＜0.05）；CADM1-AS1高水平者的中位OS为32.5个月，高于低水平者的16.0个月，差异有统计学意义（P均＜0.05）。组织CADM1-AS1水平在肺腺癌早期诊断中的价值较好，其曲线下面积为0.874，灵敏度和特异度分别为87.8％和85.2％。结论 CADM1-AS1 在肺腺癌组织及非小细胞肺癌细胞株中低表达，且与TNM分期、分化类型等临床病理参数及预后有关，可能在肺腺癌的发生发展中有一定作用，同时对于肺腺癌的早期诊断有较好价值。     

IGF-Ⅰ及IGF-ⅠR在肾细胞癌中的表达和临床意义

目的探讨胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)及其受体(IGF-ⅠR)在肾细胞癌中表达的意义。方法应用免疫组化法检测40例肾细胞癌、25例癌旁组织及10例正常肾组织中IGF-Ⅰ及IGF-ⅠR的表达,并对两者与组织学分级、淋巴转移和临床分期等临床资料的关系进行分析。结果 IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR在肾细胞癌标本中阳性率明显高于癌旁及正常组织(均P<0.01),但与肾细胞癌的分级、分期及淋巴结转移情况无相关性(均P>0.05)。结论 IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR在肾细胞癌的发生发展中起重要的作用,两者对肾细胞癌的早期诊断、免疫治疗或基因治疗具有一定的临床价值。     

PTEN和Livin在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨PTEN及Livin在肾透明细胞癌中表达的意义及两者的相互关系。方法应用免疫组化SP法检测50例肾透明细胞癌、25例癌旁组织(距肿瘤边缘>1cm)及10例正常肾组织中PTEN及Livin的表达。并对两者与组织学分级、淋巴结转移和临床分期等生物学行为间的关系进行分析。结果 PTEN在肾透明细胞癌中的阳性表达率明显低于癌旁及正常肾组织,差异有统计学意义(P<0.01);Livin在正常肾组织及癌旁组织中无表达,而在肾透明细胞癌中高表达,差异有统计学意义(P<0.01)。在不同临床分期的肾透明细胞癌组织中PTEN和Livin的表达有显著差异性(P<0.01);并且两个因子的表达呈显著负相关(rS=-0.395,P<0.01)。结论 PTEN,Livin在肾透明细胞癌的发生发展中起重要的作用,两个因子联合检测可为肾透明细胞癌的预后评估提供重要依据。     

lncRNA NUP50-AS1 在食管鳞癌组织中的表达及其对Eca109 细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）NUP50-AS1 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancer, ESCC）组织及细胞株中的表达及其对人食管癌Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：选取自2015 年1 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库的49 例ESCC手术患者的癌组织和相应癌旁组织,qRT-PCR检测ESCC癌组织、癌旁组织及5 种食管癌细胞株（TE1、TE13、Eca109、Kyse150 和Kyse170）中NUP50-AS1 表达水平。shRNA 转染NUP50-AS1 后,选用sh2 -NUP50-AS1 进行后续功能实验。采用MTS法、克隆形成实验检测敲减NUP50-AS1 表达对Eca109 细胞增殖的影响,划痕实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞迁移的影响,Transwell 小室实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞侵袭的影响。结果：NUP50-AS1 在ESCC组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(2.003±0.870 vs 1.000±0.000,P<0.05）;NUP50-AS1 在ESCC组织中的表达水平与淋巴结转移及TNM分期相关（均P<0.01）,NUP50-AS1 在5 株食管癌细胞系中相对表达量均明显上调（P<0.05）,其中Eca109 细胞的NUP50-AS1 表达水平最高。转染后,sh2-NUP50-AS1 转染组干扰效率最高,敲低NUP50-AS1 可明显抑制Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论：ESCC组织中lncRNA NUP50-AS1 表达明显高于癌旁组织,且与癌症分期和淋巴结转移有关,敲减其表达明显抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,NUP50-AS1 的高表达可能与ESCC的发生发展密切相关。     

miR-101基因簇与食管癌发病风险的病例对照研究

目的：探讨miR-101基因簇与食管癌发病风险的关系。方法：收集3例食管癌进展期患者的新鲜组织标本进行组织芯片高通量microRNA检测,采用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库食管癌RNA测序数据验证的方式对miR-101基因簇表达水平进行分析;另收集33例食管癌患者癌组织和癌旁组织标本,分别提取样本总RNA,采用实时荧光定量PCR法(qPCR)检测miR-101基因簇相关基因的表达,logistic回归分析miRNA异常表达对食管癌发病风险的影响,受试者特征曲线(ROC)评价miR-101基因簇对食管癌的诊断效力,Fisher检验分析基因簇各miRNA的表达和食管癌患者临床病理指标之间的相关性。结果：miRNA芯片高通量检测及TCGA数据库生物信息学分析结果显示,与食管正常组织相比,miR-101-3p、miR-125a-5p和miR-145-5p在食管癌组织中表达下调(P<0.05)。qPCR结果显示miR-101基因簇在33例食管癌组织中均呈低表达,多因素logistic回归分析显示,miR-101基因簇miR-101-3p、miR-127-5p与miR-145-5p表达水平与食管癌的发病风险呈负相关[OR (95% CI)值分别为：0.717(0.563,0.912)、0.717(0.534,0.962)和0.597(0.426,0.838),均为P<0.05];ROC分析显示miR-101基因簇曲线下面积(AUC)分别为0.753、0.792、0.763和0.800(P<0.05)。此外,miR-101-3p、miR-145-5p的表达水平与食管癌患者肿瘤大小相关(P<0.05),miR-125a-5p的表达水平与患者淋巴结转移相关(P<0.05)。结论：miR-101基因簇在食管癌患者癌组织中呈低表达,可作为食管癌诊断的潜在生物标志物,其在食管癌进程中的功能和调控机制有待进一步研究。     

LncRNA NR2F1-AS1在结肠癌组织中的表达及其与预后的相关性

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)核受体亚家族2F组成员1-反义RNA 1(NR2F1-AS1)在结肠癌患者中的表达水平及其与预后的相关性。方法:选取本院2015年07月至2017年02月诊治的93例结肠癌患者的癌组织及对应癌旁正常组织进行研究。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测结肠癌组织及对应癌旁正常组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平;分析癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者临床病理特征的相关性;采用Kaplan-Meier曲线法分析结肠癌患者癌组织中LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者预后的相关性;采用COX回归分析结肠癌预后的影响因素。结果:结肠癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平明显低于癌旁正常组织（P＜0.05）;结肠癌患者癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者TNM分期、淋巴结转移、浸润深度、分化程度相关（P＜0.05）,而与结肠癌患者性别、年龄、肿瘤大小、位置无关（P＞0.05）;结肠癌患者LncRNA NR2F1-AS1低表达组术后36个月总生存率(OS)、无病生存率(DFS)明显低于LncRNA NR2F1-AS1高表达组OS、DFS（P＜0.05）;COX回归分析显示,TNM分期、淋巴结转移是影响结肠癌患者预后的独立危险因素（P＜0.05）,LncRNA NR2F1-AS1是影响结肠癌患者预后的独立保护因素（P＜0.05）。结论:LncRNA NR2F1-AS1在结肠癌患者癌组织中表达水平明显降低,且低水平LncRNA NR2F1-AS1与结肠癌患者不良预后密切相关,有利于判定结肠癌患者预后情况。     

lncRNA TOB1-AS1在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨 ERBB2.1 转导蛋白反义 RNA1（transducer of ERBB2.1 antisense RNA 1,TOB1-AS1）在上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer,EOC）组织中的表达情况及其临床意义,初步探讨TOB1-AS1对EOC细胞体外增殖、迁移和侵袭的影响。方法：使用TCGA数据库对EOC组织中TOB1-AS1表达情况进行分析;收集2017年7月至2018年1月在河北医科大学第四医院妇科行肿瘤切除并经病理检查证实为EOC的67例患者的肿瘤组织,收集同期因其他妇科疾病接受手术的30例患者的非肿瘤卵巢组织作为对照。采用qPCR法检测EOC组织和非肿瘤卵巢组织中TOB1-AS1的表达水平,χ2检验分析TOB1-AS1的表达与不同临床病理特征之间的相关性,Kaplan-Meier和Cox比例风险回归模型分析患者生存及预后的潜在影响因素。CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验分别检测敲低TOB1-AS1表达对EOC细胞SKOV3和A2780增殖、迁移和侵袭的影响。结果：TCGA数据库中资料和qPCR检测结果均显示,在EOC组织中TOB1-AS1的表达水平显著高于非肿瘤卵巢组织（均P<0. 01）。TOB1-AS1的高表达与EOC患者较晚的FIGO分期、较差的组织分级、淋巴结转移及腹膜转移有关（均P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析结果显示,TOB1-AS1 高表达组患者术后 DFS 和 OS 均短于 TOB1-AS1 低表达组（均 P<0.05）。Cox 比例风险回归模型分析结果显示,FIGO分期、淋巴结转移、腹膜转移及TOB1-AS1表达是EOC患者预后的独立影响因素（均P<0.05）。TOB1-AS1在EOC细胞系SKOV3、A2780中的表达水平也显著高于正常卵巢上皮细胞系IOSE80（均P<0.01）。细胞功能实验结果显示,敲低TOB1-AS1可抑制SKOV3和A2780细胞的增殖、迁移和侵袭（均P<0.05）。结论：TOB1-AS1在EOC组织中高表达,与患者的不良预后显著相关。TOB1-AS1可能通过促进EOC细胞SKOV3、A2780的增殖、迁移和侵袭来影响EOC的恶性进展。     

基于生物信息学数据分析ATM在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）感染对胃癌细胞共济失调毛细血管扩张突变（ataxia-telangiectasia mutated,ATM）基因表达的影响及其临床意义。方法：从TCGA数据库中获取胃癌相关RNAseq数据,比较ATM基因的表达差 异,分析ATM表达与患者临床病理参数的相关性及预后价值,用Kaplan-Meier法进行生存分析,LinkedOmics数据库分析ATM相 关基因,用R语言进行GO、KEGG富集分析。选用2019年3月至2019年12月贵州医科大学附属医院12例手术切除的胃癌及癌 旁组织标本,以及胃癌细胞系AGS和BGC823,用感染复数40∶1的Hp GZ7菌感染细胞,用免疫组织化学染色法检测胃癌组织中 ATM蛋白的表达,qPCR法检测胃癌组织和细胞中ATM mRNA的表达。结果：TCGA数据显示胃癌和Hp感染胃癌组织中ATM miRNA表达水平均显著高于癌旁组织（均P<0.01);胃癌组织中ATM miRNA表达与患者的T分期、AJCC分期等病理参数呈正相 关（均P<0.05),ATM 高表达时生存率显著降低(P<0.05)。实验检测显示,胃癌组织标本中ATM蛋白的表达水平明显高于癌旁 组织(P<0.01);Hp感染胃癌细胞中ATM miRNA 表达水平显著高于未感染胃癌细胞(P<0.01)。胃癌中ATM基因与NPAT等 12 461个基因呈正相关(P<0.05),与MIF等7 764个基因呈负相关(P<0.05)。GO、KEGG富集分析显示,ATM富集到DNA修复复 合体、癌症中的转录失调等信号通路。结论：ATM基因在胃癌组织中高表达,患者生存率随表达水平的增高而降低,其与患者的 T分期、AJCC分期等病理参数相关,且Hp感染引起ATM表达水平升高可能是Hp引起胃癌的原因之一。     

长链非编码RNA ARHGAP5-AS1抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的：检测长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）ARHGAP5-AS1在乳腺癌组织及细胞中的表达,分析其表达与患者临床病理参数及预后的相关性,并初步探讨其对乳腺癌细胞体外增殖、迁移和侵袭的影响。方法：通过对TCGA数据库中乳腺癌相关数据集的生物信息学分析,筛选出在乳腺癌中低表达且与患者不良预后相关的lncRNA ARHGAP5-AS1,采用qPCR 方法在江南大学附属医院肿瘤科从 2010 年 4 月至 2016 年 10 月收集的乳腺癌组织中验证其表达。采用 χ2检验分析ARHGAP5-AS1表达与乳腺癌患者临床病理参数之间的关系,Kaplan-Meier生存分析构建生存曲线,比较高、低表达组的总生存期和无复发生存期。CCK-8 实验、划痕实验和 Transwell 实验分别检测 ARHGAP5-AS1 敲低对乳腺癌细胞MDA-MB-231和BT-549的增殖、迁移和侵袭的影响。结果：TCGA 数据库分析结果显示,ARHGAP5-AS1 在乳腺癌组织中的表达水平显著低于正常乳腺组织（P<0.01）,其低表达与较大肿瘤直径（T3）、远处转移（M1）、ER 和 PR 阴性以及较短的总生存期显著相关（均P<0.05）。乳腺癌组织中ARHGAP5-AS1表达水平显著低于癌旁组织（P<0.05）,其低表达与较大的肿瘤直径和淋巴结转移相关（均 P<0.05）。同样,ARHGAP5-AS1 在 6 株人乳腺癌细胞系（MDA-MB-231、BT-549、MDA-MB-468、MCF-7、HCC1937、Hs578T）中的表达水平也显著低于正常乳腺上皮细胞系（MCF-10A）（均P<0.05）。细胞功能实验显示,ARHGAP5-AS1敲低促进MDA-MB-231和BT-549细胞的增殖、迁移和侵袭（均P<0.05）。结论：ARHGAP5-AS1异常低表达可能通过促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭影响乳腺癌的发生发展。     

肾癌组织血小板源性生长因子受体表达定量研究

目的:探讨血小板源性生长因子受体(PDGFR)的表达与肾细胞癌之间的关系。方法:应用免疫组化SP法检测12例正常肾、14癌旁组织、46例肾细胞癌组织中PDGFR的表达,并结合肾癌的分级、分期和随访结果进行研究。结果:PDGFR表达于细胞膜、细胞浆和核膜;肾癌组织表达阳性率为73.91%,明显高于正常组织及癌旁组织,统计学有显著性差异(P<0.05);PDGFR的表达在肾癌的分级中有显著性差异(P<0.05),而在分期中无显著性差异(P>0.05),与肾癌5年生存率无相关关系(P>0.05)。结论:PDGFR的过度表达与肾癌的发生密切相关;PDGFR的表达未能作为肾癌生物学行为指标。     

miR-204启动子甲基化作为结直肠癌表观遗传生物标志物的临床研究

目的 探讨miR-204启动子甲基化在结直肠癌(CRC)中的临床意义。方法 收集2018年1月至2020年3月于我院就诊的69例CRC患者血浆样本、肿瘤组织标本和癌旁正常结肠黏膜组织标本；另外招募68例健康志愿者作为正常对照组，采集血浆样本。使用肿瘤基因图谱计划(TCGA)数据库与基因芯片数据(Methyl450K)分析肿瘤和正常组织中识别的CpG位点的甲基化水平。采用定量甲基化特异性PCR法(qMSP)和实时荧光定量PCR法(qPCR)检测样本中miR-204启动子区甲基化状态和基因表达量。结果 TCGA数据表明miR-204表达与宿主基因TRPM3的表达协调下调，并确定了miR-204启动子周围的两个CpG岛。与癌旁组织比较，CRC组织中miR-204启动子甲基化参考百分比(PMR)升高[1.78(0.35,16.61)vs. 1.51(0.45,2.98),P<0.001],且与miR-204表达量呈负相关(r=-0.324,P=0.007),与DNA甲基转移酶1 mRNA呈正相关(r=0.502,P<0.001)。此外，与正常对照组比较，CRC患者血浆cfDNA中m...     

HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达情况

目的 探讨HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达情况.方法 选取行手术切除的经病理学检查确诊的肾细胞癌患者的肾细胞癌组织标本61例,同时选取对应的癌旁正常肾组织标本61例为对照;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肾细胞癌组织和癌旁正常肾组织中HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA的表达水平.结果 肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA的相对表达量均明显高于癌旁正常肾组织(P﹤0.01);不同临床分期、淋巴结转移情况肾细胞癌患者的肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01);肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA的相对表达量为(0.76±0.20),EZH2 mRNA的相对表达量为(2.04±0.51),两者呈正相关(r=0.683,P﹤0.01).结论 HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常肾组织,检测肾细胞癌患者的HOTAIR、EZH2水平对其肿瘤的恶性程度判断具有一定参考价值.