钙周期素结合蛋白(CacyBP)在创伤性脑损伤中的意义和机制

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)为神经外科严重疾患,其死亡率、致残率居各类创伤之首[1,2]。TBI后神经细胞受损、缺失或死亡,造成神经功能严重受损从而导致偏瘫、失语、学习记忆障碍,或者昏迷,甚至死亡。随着全球交通、建筑和工矿等企业的高速发展,其发病率呈逐年上升趋势,危害严重,已经成为严重的社会问题。对TBI的细胞生物学机理,缺乏突破性认识,一直是困扰TBI临床诊治的瓶     

神经干细胞移植在创伤性脑损伤再生与修复中的作用和影响因素

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是一种十分常见的神经外科疾病,世界卫生组织研究表明,到2020年创伤性脑损伤将成为死亡和致残的主要疾病[1,2].每年大约有1 000万人遭受创伤性脑损伤,其中主要集中在15～ 24岁的年轻人和75岁以上的老年人.TBI后神经细胞受损、缺失或死亡,常使神经功能严重受损而导致偏瘫、失语、智力障碍或昏迷,甚至死亡.创伤性脑损伤预后较差与损伤后神经功能的缺失相关,神经功能的缺失与中枢神经系统(central nervous system,CNS)难以再生与修复有关.CNS已被证实并非不可再生,体外实验中枢神经可以再生,体内神经细胞的轴突不能再生的原因可能为环境因素和抑制因素的限制所致.因此影响神经组织再生和修复的因素,是当下研究的焦点[3-9].     

神经干细胞修复脊髓损伤

背景：神经生物学和干细胞技术的发展．使通过细胞移植增加脊髓神经数量、减少胶质瘢痕和空洞的形成成为可能。 目的：复习相关文献,就神经干细胞的鉴定及特性、神经干细胞修复脊髓损伤的可能机制、临床前研究及临床应用方面进行综述。 方法：以 “neural stem cells,transplant,spinal cord injury”为英文检索词,以“神经干细胞,移植,脊髓损伤” 为中文检索词,由第一作者检索1997/2010 PubMed数据库及万方数据库有关神经干细胞鉴定、特性、神经干细胞修复脊髓损伤的可能机制、临床前研究及临床应用方面等方面的文章。排除发表时间较早、重复及类似研究,对29篇符合标准的文献进行归纳总结。 结果与结论：神经干细胞有产生神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞,并替代受损的神经细胞功能等。文章从神经干细胞的鉴定及特性,神经干细胞修复脊髓损伤的可能机制,神经干细胞治疗脊髓损伤的实验研究及临床应用等方面进行了讨论。关于干细胞来源的神经元或胶质细胞移植后的长期生存及表型稳定性,以及逃脱分化及选择性程序的很少部分胚胎干细胞,可能会自在移植后的移植位点扩增并形成肿瘤等问题有待进一步解决。     

帕金森病的细胞治疗

帕金森病（PD）是一种中脑黑质多巴胺能神经元进行性退化导致黑质-纹状体通路受损的中枢神经系统退行性疾病。目前主要治疗方式是多巴胺能药物和深部脑刺激（DBS）,但这两种治疗方案只能暂时缓解症状并不能完全根治且有不良反应。干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,干细胞移植能够修复受损的组织,为PD的治疗带来了曙光。本文介绍了细胞移植治疗帕金森病的研究进展。     

加强对创伤性脑损伤后神经再生与修复机理的研究

<正>生物体自身组织对于各种病理状态具有先天潜能完成一定程度的再生与重建,创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后,脑组织在实现这一修复的过程中,存在有利和有害两方面因素。TBI预后恶劣,与中枢神经系统损伤后再生与修复困难有关[1~3]。迄今,神经创伤领域无论是基础还是临床,对这一问题的热衷研究贯穿始终,但结果仍存分歧,观点莫衷一是。TBI的有效救治处于瓶颈,措施尚缺突破。对TBI后神经再生与修复的最新研究成果,涉及以下一些方面。一、神经干细胞在TBI再生与修复中起重要作用神经干细胞(neural stem cells,NSCs)具有分化     

神经干细胞移植联用神经节苷脂对脑损伤大鼠神经学功能恢复的影响*

背景：研究表明, 神经节苷脂(GM1)通过激活神经营养因子,抑制毒性产物对神经元的损害,并且能够减少兴奋性氨基酸所引起的神经细胞的死亡起到促进神经细胞修复的作用。 目的：神经干细胞移植同时应用GM1,观察两者对脑损伤大鼠恢复的影响。 方法：取健康Wistar大鼠制成重型液压颅脑损伤模型,随机分成3组：损伤组(培养液移植组),神经干细胞移植组,神经干细胞+GM1组。脑损伤后4 d用RT-PCR、Western Blot检测脑组织中AQP4基因表达和蛋白合成的变化,并于脑损伤后24 h,3 d及伤后1,2,3,4 周行动物神经学缺损评分,在脑损伤后21~28 d进行Morris水迷宫试验。4周后处死大鼠行免疫组化、苏木精-伊红染色组织学观察。 结果及结论：脑损伤后4 d脑损伤周围组织AQP4及其mRNA的表达损伤组高于神经干细胞移植组,神经干细胞移植组高于神经干细胞+ GM1组(P < 0.05);移植后1,2,3,4 周,大鼠神经学缺损评分及水迷宫测试结果显示,神经干细胞移植可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经功能,联合应用GM1有协同效果。移植4周后苏木精-伊红染色神经干细胞+ GM1组出现典型的神经细胞样形态学改变且软化灶消失。免疫组化染色结果显示大鼠损伤灶脑组织中的BrdU阳性细胞数神经干细胞+GM1组高于NSCs移植组和损伤组。提示神经干细胞移植可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经学功能,联合应用GM1有协同效果。     

神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病的研究进展

神经干细胞(neuralstemsells,NSCs)具有多向分化潜能和自我更新能力及低免疫源性,从人和动物的胚胎和成体神经组织均可获得神经干细胞,体外培养或定向诱导分化后可做为移植治疗神经系统疾病的理想细胞来源。通过各种手段使内源性神经干细胞与移植的神经干细胞分化为适当的神经细胞来重建受损的神经结构,从而促进丧失的神经功能恢复。神经干细胞向病变部位的趋向迁徙性使其成为理想的药物与基因载体用于治疗恶性肿瘤和一些遗传性疾病。神经干细胞移植治疗神经系统疾病具有广阔的应用前景。     

诱导型神经干细胞移植抑制颅脑创伤后补体活化的影响

目的研究诱导型神经干细胞（iNSCs）移植对颅脑创伤（TBI）后补体活化的影响。 方法采用自由落体脑打击装置制备雄性成年C57BL/6小鼠TBI模型，将30只神经功能缺损评分（NSS）为4~8分的小鼠纳入TBI组，按照随机数字表法选取10只用于制备TBI小鼠血清和热灭活TBI小鼠血清，余下20只按照按照随机数字表法分为：iNSCs移植组（10只）和磷酸缓冲盐溶液（PBS）处理组（10只）。同时设置假手术（sham）组（10只）。于TBI后12 h，分别将含5×10⁶个iNSCs单细胞悬液或等体积PBS经尾静脉注射到TBI小鼠体内，于移植后7 d处死动物，取脑组织行双重免疫荧光染色，观察iNSCs移植对TBI小鼠脑内C3d和NeuN抗体双阳性、C5b-9和NeuN抗体双阳性、C3d和Map2抗体双阳性以及C5b-9和Map2抗体双阳性的神经细胞的影响。于TBI后12 h，制备TBI小鼠血清和热灭活TBI小鼠血清，分别处理iNSCs后用流式细胞仪检测iNSCs表达补体调节分子Crry、Cd46、Cd59a和Cd55水平。 结果双重免疫荧光染色示：相比sham组，TBI小鼠脑组织中明显可见C3d和C5b-9沉积于NeuN和Map2抗体阳性的神经细胞；相比PBS处理组，iNSCs移植组TBI小鼠脑内C3d和NeuN抗体双阳性、C5b-9和NeuN抗体双阳性、C3d和Map2抗体双阳性以及C5b-9和Map2抗体双阳性的神经细胞数量均明显下降，2组差异具有统计学意义（P<0.05）。流式细胞仪检测示：相比热灭活TBI小鼠血清组，TBI小鼠血清组中iNSCs补体调节分子Crry表达水平明显上调，差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论经静脉移植iNSCs可抑制TBI后补体活化，减轻神经损伤。     

神经营养因子3基因修饰神经干细胞移植脊髓损伤的相关蛋白表达☆

背景：研究表明神经干细胞和神经营养因子3基因修饰的神经细胞联合移植能够在移植后存活并有效促进脊髓横断后脊髓的功能恢复,但神经营养因子3基因修饰的神经干细胞能否在脊髓受损部位发挥功能并促进脊髓损伤大鼠的功能恢复? 目的：观察神经营养因子3基因修饰胚胎脊髓神经干细胞移植后脊髓损伤大鼠的功能恢复情况及损伤局部的基因表达。 方法：将30只SD大鼠在T9水平进行脊髓半切后,随机分为3组,分别在受损脊髓内植入细胞培养液、神经干细胞及神经营养因子3基因修饰神经干细胞。另取10只仅行椎板切除设置为空白对照。移植后通过行为学测试评价脊髓功能的恢复,RT-PCR和Western blot检测脊髓损伤部位神经营养因子3和髓鞘碱性蛋白的表达。 结果与结论：移植神经营养因子3基因修饰神经干细胞组行为学测试结果最好,移植细胞培养液组行为学测试最差。与移植细胞培养液组相比,移植神经干细胞及神经营养因子3基因修饰神经干细胞组大鼠脊髓组织中神经营养因子3基因和髓鞘碱性蛋白基因的mRNA水平明显上调,在蛋白水平也有类似的结果,且神经营养因子3基因修饰神经干细胞组效果更明显。提示移植神经营养因子3基因修饰神经干细胞能促进脊髓受损部位出现更多向少突胶质细胞分化的细胞,并能更强的表达神经营养因子3。     

应用细胞移植方法治疗脑出血存在的问题与策略

干细胞移植可以替代部分受损的神经细胞并分泌神经营养因子，因而可用于恢复脑出血后受损的神经功能。但中枢神经系统存在抑制再生的因子，脑出血局部缺乏再生必需的支持系统和细胞信号等。解决这些困难的策略包括选择合适的种子细胞．促进移植细胞轴突的生长和髓鞘化，以及应用合适的动物模型验证治疗效果等。本文就应用细胞移植方法治疗脑出血的有关问题与策略进行综述。     

中枢神经系统损伤后神经再生的策略

中枢神经系统（central nervous system，CNS）损伤后神经细胞受损、缺失或死亡，常使神经功能严重受损而导致偏瘫、失语、智力障碍或昏迷，甚至死亡。传统的药物治疗及功能性电刺激虽然显示了一定的效果，但是要修复受损的神经环路，重建神经功能，至关重要的是解决神经再生这一难题。由于CNS损伤后复杂的病理生理变化，单一的治疗措施难以获得良好的再生效果，因此，促进CNS损伤后的神经再生需要“多管齐下”。目前，我们认为促进神经再生的策略主要有下述几个方面。[第一段]     

体外转染绿色荧光蛋白基因的肌源性干细胞移植修复大鼠脊髓损伤

背景：肌源性干细胞易于提取、分离及扩增,在特定条件下可分化为骨、软骨、肌肉等中胚层组织细胞,还可以跨胚层分化为神经细胞等,是组织工程临床用于脊髓损伤修复的理想种子细胞。 目的：观察肌源性干细胞移植对脊髓半切损伤大鼠运动功能的修复作用。 方法：40只成年SD大鼠随机数字表法分为移植组和对照组,每组20只。均进行脊髓半切损伤,伤后9 d,移植组于伤处移植体外转染绿色荧光蛋白基因的大鼠肌源性干细胞,而对照组仅注射等量PBS,于移植后1,2,3,4周用斜板实验和BBB评分测大鼠的运动功能,同时进行损伤脊髓取材、快速冰冻切片进行荧光显微镜观察。 结果与结论：所有大鼠脊髓半切损伤手术均成功,术后无动物死亡。肌源性干细胞移植后1周,移植组与对照组均有所恢复,斜板实验和BBB评分差异无显著性意义(P > 0.05);2~4周移植组恢复明显较好,斜板实验和BBB评分显著高于对照组(P < 0.05),移植组后肢活动与前后肢活动的协调性明显优于对照组。荧光显微镜观察经诱导分化和基因标记的肌源性干细胞在损伤脊髓组织局部生长良好,并且有沿着脊髓神经束向头尾两侧迁移的趋势。提示脊髓半切损伤大鼠经肌源性干细胞移植后能在损伤脊髓组织局部长期存活并明显改善其运动功能,肌源性干细胞移植对脊髓半切损伤大鼠有修复作用。 关键词：肌源性干细胞;移植;脊髓损伤;绿色荧光蛋白;大鼠     

神经干细胞治疗脑缺血性疾病

神经干细胞具有低免疫源性、自我更新及多潜能分化等特性,它既能参加与神经功能的修复,又是基因治疗的理想载体,因而可望用于脑缺血性疾病的治疗。目前神经干细胞治疗脑缺血性疾病的途径有:１、激活自身神经干细胞,并诱导其向缺血区迁徙分化;２、异体神经干细胞脑内移植。而较为可行的策略是将转染神经营养因子的神经干细胞移植于缺血边缘区,早期利用其分化的基因产物。阻止宿主神经细胞的坏死和凋亡;晚期,利用其迁徙、分化特性来达到结构和功能修复的目的。     

骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经元的研究进展

骨髓间充质干细胞除了分化为间质细胞谱系外, 还具有向非间质细胞谱系,如神经细胞分化的多向分化潜能, 可充当多种器官改建或损伤后修复反应的细胞源。骨髓间充质干细胞的多向分化潜能和超强的自我更新能力,在细胞和基因治疗中可能更具有优越性。值得注意的是,无论是自体移植还是异体移植,局部移植还是全身注入,均未引起宿主体内的免疫反应,提示骨髓间充质干细胞可在基因治疗中作为理想的基因转移载体。尽管骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的研究已获得了一些令人鼓舞的结果,并且自体骨髓间充质干细胞用于个体化治疗已经取得了较满意的动物试验和初步临床试验结果, 但仍存在许多尚待解决的问题。     

人骨髓间充质干细胞移植老年性痴呆大鼠认知能力和海马超微结构的变化

背景：因发病机制不明,目前尚无治愈老年性痴呆的有效方法。现临床上主要是采用药物治疗,而骨髓间充质干细胞的替代治疗尚处于基础研究阶段,其海马移植后对老年性痴呆认知能力的影响未见报道。 目的：探讨人骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠认知能力和海马超微结构的影响。 方法：老年雄性Wistar大鼠30只,制备自然衰老痴呆模型,造模后随机分为3组,选取双侧海马为移植区,分化细胞移植组注射定向神经细胞诱导分化的人骨髓间充质干细胞悬液4 μL(2×105个细胞),干细胞移植组注射等量常规培养的人骨髓间充质干细胞,模型组注射等量生理盐水。通过Y迷宫试验测定大鼠的学习、记忆能力,透射电镜观察海马区超微结构。 结果与结论：与移植前大鼠学习、记忆分数比较,移植后12周模型组均显著下降(P < 0.01),干细胞移植组均有所提高(P > 0.05),分化细胞移植组均显著提高(P < 0.01)。移植后12周与模型组比较,干细胞移植组、分化细胞移植组大鼠学习、记忆分数均显著提高(P < 0.01)。电镜观察模型组大鼠海马区神经细胞可见明显损伤,干细胞移植组损伤减轻,分化细胞移植组多数神经细胞结构正常。证实骨髓间充质干细胞移植可以提高老年性痴呆大鼠的认知能力,且定向神经诱导分化的骨髓间充质干细胞移植治疗效果优于未分化的骨髓间充质干细胞,提示骨髓间充质干细胞减少海马组织神经细胞变性坏死可能是其改善老年性痴呆大鼠认知功能障碍的作用机制之一。     

干细胞移植治疗脑缺血性疾病所致神经功能障碍的研究进展

脑缺血所致的神经功能障碍临床常见,难以修复。神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植被认为是目前治 疗缺血性脑疾病所致的神经功能障碍最有前景的方法。但是脑缺血发生后,缺血中心区和半暗带区大量的炎性和 凋亡因子及兴奋性氨基酸的产生,导致了大量的移植干细胞和神经营养因子凋亡,影响了移植干细胞的存活,难以 发挥其功效。认识和解决干细胞移植中的问题对神经干细胞移植技术早期应用于临床具有重要意义。     

血管新生与干细胞移植脑梗死

干细胞移植是脑缺血治疗研究的热点之一,它可改善脑梗死的神经功能.近来发现干细胞还能增强血管新生(angiogenesis)或分化为血管,促进新生神经细胞的存活,有助于干细胞移植脑缺血获得理想的治疗效果.本文介绍了干细胞移植后促进血管形成、改善脑梗死的治疗方面的进展.     

神经干细胞移植修复鼠脊髓损伤的实验研究

目的 :观察神经干细胞移植治疗对鼠脊髓损伤后神经结构修复和功能恢复的作用并探讨其作用机制。方法 :制备鼠T10 脊髓损伤模型 ,体外培养、诱导鼠神经干细胞 ,定量评价神经干细胞移植对脊髓损伤后神经结构修复和功能恢复的影响。结果 :与对照组相比 ,神经干细胞移植组明显的增强了GAP 43mRNA的表达 ,促进了脊髓ChAT阳性的运动神经元的再生、结构的修复和下肢运动功能的恢复。结论 :神经干细胞移植促进了脊髓损伤后神经结构的修复和功能的恢复 ,是急性脊髓损伤一种有效的治疗方案     

骨髓基质多能成体祖细胞在帕金森病大鼠体内移植与多巴胺能神经元分化的研究

目的探讨骨髓基质分离的多能成体祖细胞(MAPCs)通过系统移植(即尾静脉注射)方式进入大鼠脑组织内并修复受损的神经功能。方法制作实验性帕金森病大鼠模型,将在体外纯化、增殖和已用5-溴-2脱氧尿苷(BrdUrd)处理过的MAPCs通过尾静脉注入帕金森病大鼠体内。3个月后,对移植大鼠采用免疫组化技术、RT-PCR、免疫电镜、行为学评定等方法鉴定移行入大鼠脑组织内的MAPCs、其分化的神经元样细胞以及神经功能的修复。结果MAPCs能移行入大鼠脑组织内并在中脑黑质和纹状体区分化为神经元样细胞;6-羟多巴诱导的大鼠行为损伤有明显恢复;多巴胺-β-羟化酶、神经生长因子和多巴胺转运体mRNA的表达水平明显升高;电镜下观察到MAPCs所分化的神经细胞与其它神经细胞形成突触联系;这些资料表明MAPCs能在大鼠脑组织内分化为多巴胺能神经细胞并发挥相应的神经功能。结论骨髓基质分离的MAPCs能通过系统移植方式进入大鼠脑组织内,在中脑微环境中可自主分化为多巴胺能神经细胞并有效地修复6-羟多巴诱导的神经功能缺损。因此,MAPCs有望成为中枢神经系统疾病自体移植治疗的最佳候选干细胞之一。     

干细胞在视神经保护及损伤修复中的研究进展

背景：视神经作为特殊分化的中枢神经,损伤后视网膜神经细胞修复和再生困难,最终导致不可逆性视功能丧失,目前临床尚缺乏行之有效的治疗措施。由于干细胞的多向分化潜,其在视神经保护及损伤修复中的作用日渐成为研究热点。 目的：对视神经保护研究的干细胞种类、干细胞移植方式、干细移植在视神经保护及损伤修复中作用进行综述。 方法：应用计算机检索ISI Web of Knowledge平台数据库(1994-02/ 2009-04),以“stem cells,optic nerve”为检索词;应用计算机检索中国知网全文数据库(1994-02/2009-04),以“干细胞、视神经”为检索词。 结果与结论：共收集98篇有关干细胞与视神经保护及损伤修复的文献,中文23篇,英文75篇。排除发表时间较早、重复及类似研究,纳入38篇符合标准的文献。干细胞既具有生理性的自我更新能力,又具有对损伤组织的修复能力。目前大部分有关干细胞与视神经保护和损伤修复的研究都只表现在形态结构方面,如何使干细胞安全有效地植入体内及稳定视功能重现仍需努力。取材较方便的皮肤干细胞、外周血干细胞、脂肪干细胞等都是很好的实验材料,应深入研究使其得到更好的利用。