β-榄香烯对肝癌细胞SK-hep-1的迁移和侵袭力的影响

目的:观察β-榄香烯对肝癌SK-hep-1细胞的侵袭、转移等生物学行为的影响,探讨其对MMP2基因的调节.方法:将SK-hep-1细胞分为3组:control组、β-榄香烯(80μg/ml)组、TGF-β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)(10μg/ml)组,RT-PCR检测各组细胞的MMP2(matrix metalloproteinase-2,MMP2)mRNA表达;通过划痕试验及transwell细胞侵袭试验进一步对β-榄香烯作用的肝癌细胞迁移和侵袭能力进行分析.结果:β-榄香烯作用肝癌细胞中MMP2mRNA表达低于control组和TGF-β1组(P<0.05).β-榄香烯组穿膜细胞数(50±10)少于control组(150±16)及TGF-β1组(300±13),(P<0.05).β-榄香烯组细胞的迁移数(92±8)明显低于control组(180±14)及TGF-β组(300±20),差异具有统计学意义(P<0.05).结论:β-榄香烯能下调肝癌细胞SK-hep-1的MMP2mRNA表达,降低肝癌细胞的侵袭、迁移能力.     

β-榄香烯对肝癌细胞SK—hep-1的迁移和侵袭力的影响

目的：观察β-榄香烯对肝癌SK—hep-1细胞的侵袭、转移等生物学行为的影响,探讨其对MMP2基因的调节。方法：将SK—hep-1细胞分为3组：control组、β-榄香烯（80μg／m1）组、TGF-β1（transforming growth factorβ1,TGF—β1）（10μg／m1）组,RT—PCR检测各组细胞的MMP2（matrix metalloproteinase-2,MMP2）mRNA表达;通过划痕试验及transwell细胞侵袭试验进一步对β-榄香烯作用的肝癌细胞迁移和侵袭能力进行分析。结果：β-榄香烯作用肝癌细胞中MMP2mRNA表达低于control组和TGF—β1组（P〈0．05）。β-榄香烯组穿膜细胞数（50±10）少于control组（150±16）及TGF—β1组（300±13）,（P〈0．05）。β-榄香烯组细胞的迁移数（92±8）明显低于control组（180±14）及TGF—β组（300±20）,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：β-榄香烯能下调肝癌细胞SK—hep-1的MMP2mRNA表达,降低肝癌细胞的侵袭、迁移能力。     

β-榄香烯对人乳头状甲状腺癌细胞生物学行为的影响及其作用机制

目的:研究β-榄香烯对人乳头状甲状腺癌（PTC）的治疗作用并探讨其作用机制。方法:选择人PTC中TPC-1、K1细胞系为研究对象,以不同浓度β-榄香烯分别作用于两个细胞系。采用CCK-8比色法分析细胞增殖情况;流式细胞仪检测对细胞凋亡和周期的影响;Transwell小室法观察细胞侵袭性的变化。结果:经β-榄香烯处理后,TPC-1和K1细胞增殖被抑制,且呈时间-浓度依赖性。当β-榄香烯浓度分别为40、60 μg/ml时,TPC-1细胞凋亡比例升高,且差异有统计学意义（P<0.05）;当β-榄香烯浓度分别为20、40 μg/ml时,K1细胞凋亡比例升高,且差异有统计学意义（P<0.05）。当β-榄香烯浓度为60 μg/ml时,TPC-1细胞在G1期所占比例显著增高（P<0.05）;当β-榄香烯浓度为10、20和40 μg/ml时K1细胞在G2/M期所占比例显著增高（P<0.05）。经β-榄香烯处理后,TPC-1、K1细胞穿过基质胶的细胞数均明显减少（P<0.05）。结论:β-榄香烯对PTC有抗肿瘤作用,有潜力成为治疗PTC的一种化疗药物。     

β-榄香烯对肾细胞癌的抗肿瘤作用及机制研究

目的:探讨β-榄香烯对肾细胞癌786-0细胞的抗肿瘤作用及机制.方法:浓度为50,100,150,200和250 μg/ml β-榄香烯作用于肾癌786-0细胞24、48和72h,MTT法检测细胞活力.50,150μg/ml β-榄香烯作用于786-0细胞24h,流式细胞术碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡和周期分布,免疫印迹法检测PARP裂解和凋亡相关蛋白的表达.结果:β-榄香烯对肾癌786-0细胞的抑制作用随着浓度和时间的增加而增强.流式细胞术结果提示β-榄香烯可诱导细胞凋亡,而对细胞周期分布无明显影响.β-榄香烯可裂解PARP,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2和Survivin的表达.结论:β-榄香烯可能通过诱导细胞凋亡发挥对肾癌786-0细胞的抗肿瘤作用.     

β-榄香烯对肾细胞癌的抗肿瘤作用及机制研究

目的：探讨β-榄香烯对肾细胞癌786-0细胞的抗肿瘤作用及机制。方法：浓度为50,100,150,200和250μg/mlβ-榄香烯作用于肾癌786-0细胞24、48和72h,MTT法检测细胞活力。50,150μg/mlβ-榄香烯作用于786-0细胞24h,流式细胞术碘化丙啶（PI）染色检测细胞凋亡和周期分布,免疫印迹法检测PARP裂解和凋亡相关蛋白的表达。结果：β-榄香烯对肾癌786-0细胞的抑制作用随着浓度和时间的增加而增强。流式细胞术结果提示β-榄香烯可诱导细胞凋亡,而对细胞周期分布无明显影响。β-榄香烯可裂解PARP,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2和Survivin的表达。结论：β-榄香烯可能通过诱导细胞凋亡发挥对肾癌786-0细胞的抗肿瘤作用。     

β-榄香烯对2-乙酰氨基芴诱发实验性鼠肝癌的影响

目的：研究β－榄香烯对2－乙酰氨基芴(2－AAF）诱发实验性鼠肝癌的干预效应,并探讨其对c－myc、c－erbB－2和血管内皮生长因子(VEGF）等蛋白表达的影响。方法：以2－AAF喂饲SD大鼠,制备肝癌模型,予以不同剂量榄香烯乳腹腔内注射,观察肿瘤生成状况,并测定c－myc、c－erbB－2和VEGF蛋白的表达。结果：小剂量榄香烯乳(5mg／kg）干预组发生肝癌结节数较其他组少;c－myc、c－erbB－2和VEGF在正常对照组均为阴性,而增生结节或癌结节均为阳性,其表达水平与榄香烯乳用量无关。结论：小剂量β－榄香烯对2－AAF诱发的实验性鼠肝癌有一定阻抑作用,但不是通过调控c－myc、 c－erbB－2和VEGF等基因蛋白实现的。     

β-榄香烯对胃癌细胞Akt通路活化和凋亡相关蛋白表达的影响

目的：旨在探讨β-榄香烯对人胃癌BGC823细胞Akt通路的活化和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和PARP表达的影响。方法：实验分为对照组和β-榄香烯处理组,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）试验法检测β-榄香烯对人胃癌BGC823细胞的药物敏感性,采用Western blot检测蛋白表达,应用SPSS（13.0软件包）进行统计学分析。结果：β-榄香烯处理胃癌BGC823细胞24h的IC50为46.56μg/ml,选用50μg/ml和200μg/ml的β-榄香烯处理24h,BGC823细胞凋亡率分别为12.33%和42.59%,与对照组相比有统计学差异（P〈0.05）。与对照组相比,β-榄香烯处理组Bcl-2与Bax的比值显著下调、伴有PARP裂解。进一步检测发现β-榄香烯处理组明显下调了Akt的磷酸化水平,从而有效抑制Akt信号转导通路。结论：β-榄香烯可以通过抑制Akt信号通路的活化、下调Bcl-2与Bax的比值和诱导PARP裂解,进而抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

不同剂型β-榄香烯类药物抗癌疗效及其机制的研究

目的观察不同剂型β-榄香烯类药物的抗癌疗效及其作用机制。方法本实验采用MTT方法、流式细胞术分析法,检测二者对人红白血病K562细胞生长抑制的影响。结果β-榄香烯乳剂和β-榄香烯吗素均能明显抑制K562细胞生长,其作用机制主要是诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期(G1期细胞升高,S期细胞下降)。结论β-榄香烯乳剂和β-榄香烯吗素抗癌疗效及其作用机制相似。     

β-榄香烯对人食管癌细胞 EC9706增殖、凋亡及 caspase-3的影响

目的：研究β-榄香烯对人食管癌细胞EC9706增殖、凋亡及caspase-3表达的影响。方法采用不同浓度的β-榄香烯（0、10、20、30、40、50μg／ml）处理细胞24 h,CCK-8测定细胞增殖活力。以50μg／mlβ-榄香烯处理细胞0、6、12、24 h,CCK-8测定细胞增殖活力。以不加β-榄香烯组作为对照组,选取50μg／mlβ-榄香烯处理细胞24 h,流式细胞术测定细胞凋亡率,分光光度法测定caspase-3活性。结果随着β-榄香烯浓度的增加,人食管癌细胞增殖活力逐渐下降,呈浓度依赖性（P＜0．05）。以50μg／mlβ-榄香烯处理细胞0、6、12、24 h,随着时间的增加,细胞增殖活力下降,呈现时间依赖性（P＜0．05）。相比对照组,50μg／ml β-榄香烯处理细胞24 h后细胞凋亡明显增加（P＜0．05）,caspase-3活性明显增加（P＜0．05）。结论β-榄香烯可抑制食管癌细胞增殖、诱导其凋亡,并且其诱导凋亡的作用机制可能与促进caspase-3活化有关。     

β-榄香烯乳对舌鳞癌细胞株Tca-8113体外放射增敏观察

目的 探讨β-榄香烯乳对体外舌鳞癌细胞株的放射增敏作用。方法 MTT比色法测定不同浓度β-榄香烯乳对细胞生长抑制率，MTT法初步判断β-榄香烯乳对舌鳞癌细胞的放射敏感性：结果 β-榄香烯乳对Tca-8113细胞株有明显的抑制作用，40μg/mL、60μg／mL、80μg／mL、120μg／mL β-榄香烯乳作用细胞24h后生长抑制率分别为11％、19％、32％、48％。在相同放射剂量作用下，无细胞毒浓度（40μg/mL）作用后的OD值显著低于对照组。结论 β-榄香烯乳对Tca-8113细胞有放射增敏作用。     

β-榄香烯抗肿瘤及逆转耐药机制的研究进展

β-榄香烯是国产抗癌药,主要通过直接杀伤肿瘤细胞、诱导细胞凋亡、诱导分化、细胞周期阻滞、抑制信号转导及抑制血管生长等方式参与抗肿瘤。近年有学者提出β-榄香烯可有效逆转化疗药物耐药,与放化疗联合增敏等功效,且因其广谱、安全、有效、价廉等突出优点而具有良好的应用前景。现就β-榄香烯抗肿瘤及逆转耐药机制的相关研究作一综述,为榄香烯更好地应用于临床提供理论基础。     

β—榄香烯对2—乙酰氨基芴诱发实验性鼠肝癌的影响

目的：研究β－榄香烯对2－乙酰氨基芴（2－AAF）诱发实验性鼠肝癌的干预效应,并探讨其对c-myc、c-erbB-2和血管内皮生长因子（VEGF）等蛋白表达的影响。方法：以2－AAF喂饲SD大鼠,制备肝癌模型,予以不同剂量榄香烯乳腹腔内注射,观察肿瘤生成状况,并制定c-myc、c-erbB-2和VEGF蛋白的表达。结果：小剂量榄香烯乳（5mg/kg）干预组发生肝癌结节数较其他组少;c-myc、c-erbB-2和VEGF在正常对照组均为阴性,而增生结节或癌结节均为阳性,其表达水平与榄香烯乳用量无关。结论：小剂量β－榄香烯对2－AAF诱发的实验性鼠肝癌有一定阻抑作用,但不是通过调控c-myc、c-erbB-2和VEGF等基因蛋白实现的。     

ERK信号传导通路在β-榄香烯诱导肾癌细胞凋亡中作用的研究

目的:探讨ERK信号传导通路在β-榄香烯诱导肾癌细胞凋亡中的作用.方法:以人肾透明细胞癌786-0细胞为研究对象,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞活力;流式细胞术碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡;蛋白印迹法检测细胞内磷酸化ERK及总ERK的表达水平.为研究ERK通路活性对β-榄香烯抗肿瘤作用的影响,将实验分为空白对照组,β-榄香烯单药组( 160μg/mL)、ERK抑制剂组(PD98059,20μmol/L)和联合用药组(PD98059+β-榄香烯).结果:40、80、160及320 μg/mL的β-榄香烯作用于786-0细胞24 h,细胞生存率逐渐下降,分别为(83.20±4.63)％、(74.29±3.50)％、(49.75±3.08)％和(16.99±4.73)％,相邻浓度间P均＜0.05.随着浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加.进一步研究发现,β-榄香烯可明显抑制细胞内磷酸化ERK的水平.同β-榄香烯单药组相比,联合用药组的细胞活力明显降低,差异有统计学意义[(52.73±6.36)％vs (39.24±3.24)％],P＜0.05.结论:β-榄香烯可能通过抑制ERK通路活性发挥对肾癌细胞的抗肿瘤作用.     

β-榄香烯联合紫杉醇诱导胃癌细胞凋亡的体外研究

目的:观察联合β-榄香烯和紫杉醇对诱导胃癌细胞凋亡以及对凋亡相关蛋白表达的影响。方法:β-榄香烯和紫杉醇单独及联合作用于胃癌SGC7901细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印记检测凋亡相关蛋白的表达。结果:单药β-榄香烯作用SGC7901细胞24、48和72小时的IC50值分别为(52.56±6.26)、(28.69±2.36)和(13.33±0.64)μg/ml。单药紫杉醇作用24、48和72小时的IC50值为(7.23±1.98)、(1.72±0.76)和(0.22±0.19)μg/ml。选用低浓度药物(10μg/ml的β-榄香烯和2μg/ml的紫杉醇)联合处理SGC7901细胞24小时,与相应浓度β-榄香烯、紫杉醇单药组相比,两药联合组对SGC7901的增殖抑制率显著增强(P<0.05),细胞凋亡率显著提高。进一步研究发现β-榄香烯和紫杉醇联合后,诱导了PARP裂解以及显著下调了Bcl-2与Bax的比值。结论:β-榄香烯和紫杉醇联合用药后,可能通过下调Bcl-2与Bax的比值诱导PARP裂解,进而抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

β-榄香烯乳联合肝动脉化疗栓塞治疗中晚期肝癌21例

[目的]评价β-榄香烯乳联合肝动脉化疗栓塞（TACE）治疗中晚期肝癌的疗效。[方法]入组42例中晚期肝癌患者随机分为联合组（n=21）和对照组（n=21）。对照组仅行TACE治疗,联合组行肝动脉灌注β-榄香烯乳联合TACE治疗。比较两组疗效、生存情况。[结果]联合组有效率明显优于对照组（57.1%vs 28.6%,P=0.032）。对照组和联合组中位无进展生存期（PFS）分别为131d和183d（P=0.011）,中位生存时间（MST）分别为230d和253d（P=0.096）。两组均未出现严重的不良反应,联合组腹痛较对照组轻（P=0.039）。[结论]β-榄香烯乳联合TACE治疗中晚期肝癌可提高疗效,且不良反应可耐受。     

β-榄香烯对MCF-7／ADM细胞株中乳腺癌干细胞作用的初步研究

目的探讨乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7／ADM与阿霉素敏感细胞株MCF-7／S中乳腺癌干细胞（BCSCs）含量及乳腺癌耐药蛋白（BCRP）和P-糖蛋白（P-gp）表达的差异,观察中药β-榄香烯（β-ELE）对BCSCs及BCRP和P-gp表达的影响。方法 应用无血清细胞培养法培养MCF-7／ADM和MCF-7／S细胞株,形态学观察不同细胞株无血清细胞球培养的成球率,RT PCR检测两种细胞株中BCRP和P-gp的mRNA水平,流式细胞仪检测BCRP和P-gp的阳性表达率及CD44+CD24^-／low细胞比例。应用15μg/ml β-ELE作用MCF-7/ADM细胞株48h后,检测细胞成球率及BCRP、P-gp基因与蛋白表达的变化。结果 与MCF-7／S细胞比较,MCF-7／ADM细胞的成球率及BCRP、P-gp mRNA水平较高。MCF-7／ADM细胞中BCRP和P-gp蛋白的阳性表达率分别为（77.78±9.55）％和（32.33±5.12）％,CD44+CD24-／low细胞比例为（64.79±11.78）％,均高于MCF-7／S细胞的（3.97±1.51）％、（14.26±2.51）％和（18.79±3.28）％,差异均有统计学意义（P＜0.01）。β-ELE能明显抑制MCF-7／ADM细胞的成球率及BCRP、P-gp基因与蛋白的表达（P＜0.01）。结论 MCF-7／ADM是BCSCs相对富集的一种耐药细胞株且高表达BCRP和P gp,β-ELE能够抑制MCF-7／ADM细胞中BCSCs比例及其成球率,并降低耐药蛋白的表达。     

β-榄香烯逆转K562/ADM细胞MDR机制的探讨

目的:探讨β-榄香烯(β-elemene)对多药耐药细胞株K562/ADM的耐药逆转及作用机制。方法:MTT法检测抗药性逆转,免疫组化检测Bcl-2及P-gp蛋白的表达,流式细胞术对凋亡百分率及Bcl-2、P-gp蛋白的表达进行定量检测。结果:非细胞毒性浓度的β-elemene(4.0μg/ml)可显著降低ADM对K562/ADM细胞的IC50(P<0.01),逆转倍数为2.18倍;明显增强ADM对K562/ADM细胞的凋亡诱导作用,凋亡率由(1.88±0.11)%上升至(3.93±0.06)%(P<0.01);降低耐药细胞Bcl-2及P-gp的表达,Bcl-2的表达率由(94.8±1.9)%降至(66.7±0.9)%,P-gp的表达率由(98.7±2.1)%降至(76.8±1.4)%。结论:β-榄香烯可部分逆转K562/ADM细胞的耐药性,其逆转机制具有异质性,主要以抑制Bcl-2的表达从而诱导细胞凋亡来逆转MDR,同时兼具降低P-gp表达的作用。     

树突细胞联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌治疗的实验研究

背景与目的：树突细胞（Dendritic cells，DC）是目前发现的功能最强大的肿瘤抗原专职免疫递呈细胞，DC疫苗是目前最具临床应用潜能的治疗性疫苗。肿瘤细胞凋亡小体被DC的MHC—1分子提呈并诱导的特异性CTL免疫反应抗癌作用显著。本研究探讨了DC负载凋亡癌细胞抗原后诱导的免疫应答联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌治疗作用。方法：制备C57BL／6小鼠骨髓源性DC并鉴定，负载肿瘤抗原后制备成疫苗。分别观察DC诱导的CTL和β-榄香烯对胰腺癌细胞的杀伤作用。体内观察DC疫苗联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌的抑制作用。结果1经电镜及流式细胞鉴定可获得典型的具有抗原加工及递呈作用的DC，利用TNF-α可使成熟的树突状细胞比例增加，MHC-Ⅱ、CD83、CD86等表面分子的表达较单纯DC组显著增强。负载凋亡抗原后DC诱导的特异性CTL体外对胰腺癌细胞有显著杀伤作用，效靶比30：1时，诱导的CTL对胰腺癌细胞抑制率达93％。β-榄香烯对癌细胞增殖抑制明显，DC疫苗与β-榄香烯联合治疗可明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长，使其生存期延长，联合治疗组生存期为49．4天，与单纯β-榄香烯组（24．8天）、DC疫苗（38．5天）、DC组（20．7天）及对照组（17．5天）相比有显著差异（P〈0．05）。结论：经凋亡肿瘤细胞致敏的DC回输荷瘤小鼠可激发宿主针对特异肿瘤的Th1及CTL免疫应答，以DC、介导的免疫反应联合中药的治疗方法可成为抗肿瘤的崭新且有效手段。     

β-榄香烯乳联合照射对肺腺癌A549 细胞凋亡及KU70基因表达的影响*

目的:检测β- 榄香烯乳对肺腺癌A549 细胞株放射增敏作用,探讨β- 榄香烯乳影响细胞凋亡及KU70基因mRNA 表达的放射增敏机制。方法:四氮唑蓝比色分析法（MTT 法）检测β- 榄香烯乳对A549 细胞的半数抑制浓度（IC 50）;将细胞分为对照组（C）、照射组（IR）、β- 榄香烯乳组（0.1 ×IC50、0.2 ×IC50）及β- 榄香烯乳联合照射组（0.1 ×IC50+IR、0.2 ×IC50+IR）,不同浓度的β- 榄香烯乳处理细胞24h 后照射,通过克隆形成实验计算细胞存活率;流式细胞仪检测细胞周期与凋亡率;逆转录PCR 技术（RT-PCR）检测细胞KU70基因mRNA 表达量。结果:MTT 法测得β-榄香烯乳对A549 细胞的IC 50值为120 μ g/mL;克隆形成实验证明β-榄香烯乳对A549 细胞有放射增敏作用;β- 榄香烯乳联合照射组细胞G2/M期比率及凋亡率明显高于单纯照射组及β- 榄香烯乳组（P<0.05）;β- 榄香烯乳联合照射组细胞KU70基因mRNA 表达量较照射组明显下降（P<0.05）。 结论:β- 榄香烯乳可促进A549 细胞凋亡和抑制KU70基因mRNA 表达,诱导凋亡同时抑制KU70参与的双链损伤修复途径可能是其放射增敏的机制。      

β-榄香烯联合照射对肺腺癌A549细胞凋亡及Livin基因表达的影响

目的:检测β-榄香烯乳对肺腺癌A549细胞株放射增敏作用并初步探讨其作用机制。方法:四氮唑蓝比色分析法(MTT法)检测β-榄香烯乳对A549细胞增殖的半数抑制浓度(IC50);将细胞分为对照组(C)、照射组(R)、β-榄香烯乳组(0.1×IC50、0.2×IC50)及β-榄香烯乳联合照射组(0.1×IC50+R、0.2×IC50+R),用不同浓度的β-榄香烯乳处理细胞24h后照射,流式细胞仪检测细胞凋亡率。实时定量PCR技术(real-time PCR)检测细胞Livin基因mRNA表达量。结果:MTT法测得β-榄香烯乳对A549细胞增殖的IC50值为115μg/ml;流式细胞仪检测β-榄香烯乳联合照射组细胞凋亡率明显高于单纯照射组及β-榄香烯乳组(P<0.05);β-榄香烯乳联合照射组细胞Livin基因mRNA表达量较照射组明显下降(P<0.01)。结论:β-榄香烯乳可抑制A549细胞增殖,促进A549细胞凋亡和抑制Livin基因mRNA表达,其放射增敏机制可能与这些作用有关。