高浓度游离脂肪酸对大鼠胰岛细胞凋亡的影响

目的 探讨高浓度游离脂肪酸(FFA)对体外胰岛细胞凋亡的影响及其机制.方法 将分离的SD大鼠胰岛按体外培养的条件分为低糖对照组(5.60 mmol/L)、FFA1组(0.25 mmol/L)、FFA2组(0.50 mmol/L)培养48 h后,用低糖(5.60 mmol/L)孵育1 h,收集孵育液用放射免疫法检测胰岛素分泌水平;应用TUNEL法检测各组培养后细胞凋亡百分率;应用免疫组织化学检测培养后caspase-3的表达.结果 ①经FFA培养后的大鼠胰岛胰岛素分泌量降低:FFA 1组、FFA 2组与对照组比较明显减少(P<0.01),并且随FFA浓度的升高胰岛素分泌量减少更明显(p<0.01).②经高浓度FFA培养后大鼠胰岛细胞凋亡增多,胰岛细胞内caspase-3的表达增 多:FFA 1组、2组与对照组比较均明显增多(P<0.01),FFA 1组与FFA 2组组间比较亦差异有显著性(P<0.01).结论 FFA可以减少大鼠胰岛细胞分泌胰岛素,导致胰岛细胞凋亡增多.     

瘦素对体外培养大鼠胰岛细胞的分泌功能的影响

目的:探讨瘦素对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响。方法:250-350 g的SD大鼠,分离并纯化其胰岛细胞。将胰岛细胞放于营养液中在培养箱中培养2 h,然后换营养液再培养1 h。以10个胰岛为一个单位,放于一个培养孔中。将22个培养孔分成实验组和对照组,实验组中加入11种不同浓度(4-24 mmol/L)的葡萄糖溶液、瘦素(10 mmol/L),对照组中加入11种不同浓度     

供体凋亡细胞输注对大鼠胰岛移植物功能的影响

目的 研究供体凋亡细胞预输注对大鼠胰岛移植后胰岛移植物功能的影响.方法 应用STZ制备SD大鼠糖尿病模型,以直线加速器照射诱导供体Wistar大鼠脾细胞凋亡.经阴茎背静脉输注供体凋亡脾细胞,7d后于糖尿病SD大鼠双侧肾包囊进行同种异体胰岛移植,通过测定血糖变化、血清胰岛素水平以及胰岛移植物存活时间来观察胰岛移植物的功能状态.结果 预输注供体凋亡脾细胞能显著延长同种异体胰岛移植物存活时间(中位生存时间达31 d),并较长时间地维持受体鼠血清胰岛素处于较高水平.结论供体凋亡细胞预输注能够显著延长同种异体胰岛移植物的存活时间,能够较长时间维持胰岛移植物的正常功能状态.     

白细胞介素—1对大鼠离体胰岛B细胞分泌功能的影响

目的：观察白细胞介素－1（IL-1）对大鼠胰岛B细胞分泌功能的影响并探讨其机制。方法：采用胰岛细胞培养的方法，观察IL－1对胰岛素分泌和MTT还原的影响；通过分子杂交检测c-fos mRNA并分析蛋白质合成的变化。结果：IL－1作用后胰岛素分泌和MTT还原量明显减少，且有时间依赖性；IL－1诱导c-fos mRNA，从而使细胞蛋白质表达发生变化。结论：IL－1可能通过改变胰岛细胞内基因表达，抑制细胞代谢，从而使胰岛素分泌减少。     

内毒素对大鼠胰岛细胞凋亡及其意义的研究

目的：探讨内毒素对大鼠胰岛细胞凋亡作用的意义。方法：采用单细胞凝胶电泳和DNA凝胶电泳技术,分析外源NO供体（硝普钠）和LPS对离体胰岛细胞的凋亡及胰岛素合成与分泌的影响。结果：体外试验显示,外源NO明显引起胰岛细胞DNA断裂,出现慧星尾和凋亡梯状带,并呈剂量依赖关系,高浓度NO（60mmol/L,SNP)可引起胰岛细胞DNA随机降解,外源NO强裂抑制葡萄糖刺激β－细胞的胰岛素合成与分泌,LPS离体条件下,对胰岛细胞凋亡作用不明显。结论：LIPS通过整体作用诱导炎症细胞和胰岛细胞iNOS表达,产生NO介导胰岛细胞凋亡,从而抑制胰岛素合成与分泌。     

甘精胰岛素对游离脂肪酸诱导的RIN-m细胞凋亡的影响

[目的]研究甘精胰岛素(insulin glargine)对游离脂肪酸诱导的β细胞凋亡是否具有保护作用.[方法]不同浓度的甘精胰岛素、普通人胰岛素以及IGF-1与0.3 mmol/L棕榈酸分别加入RIN-m细胞培养液中,24h后,采用Hoechst33342染色、流式细胞仪以及ELISA方法检测RIN-m细胞的凋亡.[结果]0.3 mmol/L棕榈酸诱导RIN-m细胞凋亡率达42.10%±4.24%,同时加入甘精胰岛素或者普通胰岛素(均为100 nmol/L)的凋亡率分别为32.00%±3.08%和35.97%±3.14%,甘精胰岛素对凋亡的抑制作用明显强于普通胰岛素,并呈剂量依赖性.[结论]甘精胰岛素对游离脂肪酸诱导的β细胞凋亡具有呈剂量依赖性的保护作用.     

高浓度游离脂肪酸对胰岛β细胞凋亡的影响及其机制的研究进展

高浓度游离脂肪酸可导致胰岛岱细胞凋亡,与2型糖尿病发生发展密切相关。其机制可能与胰岛素受体底物、代谢中关键酶、氧化应激、内质网应激、Bcl-2家族、神经酰胺途径、Caspase家族、12-脂氧合酶、蛋白激酶B、G蛋白偶联受体等有关。研究游离脂肪酸对胰岛β细胞凋亡的影响有重要的临床意义。     

肾上腺髓质素对自发性高血压大鼠胰岛分泌功能影响的体外实验

目的　探讨肾上腺髓质素 (AM)对自发性高血压大鼠 (SHR)和 Wistar- Kyoto(WKY)鼠胰岛分泌功能的影响。方法　分别在含 2 .8mm ol/ L 及 11.1mm ol/ L 葡萄糖的 RPMI16 4 0培养基中加不同浓度 AM(0、10 - 8、10 - 7和 10 - 6 m ol/ L )培养 SHR和 WKY大鼠胰岛 ,用放射免疫分析 (RIA )法测定两次培养液的胰岛素及胰升糖素含量。结果　加入不同浓度 AM培养 WKY鼠胰岛 2 4 h后 ,培养液中胰岛素含量呈剂量依赖性降低 ;高浓度 AM(10 - 6 mol/ L )使 SHR和胰岛培养液中胰岛素含量明显降低 (P<0 .0 5 )。SHR、WKY鼠的各组培养液中胰升糖素含量无明显差异 ,SHR与 WKY鼠相比亦无差异。结论　 AM对 WKY鼠的胰岛β细胞的分泌功能具有剂量依赖性抑制作用 ,高浓度 AM对 SHR胰岛β细胞的分泌功能具有抑制作用。 AM对胰岛α细胞分泌功能无影响     

牛磺酸对细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡的影响

目的：观察牛磺酸对白细胞介素－1β（IL-β）、肿瘤坏死因子（TNF）和γ－干扰素（IFN－γ）诱导的胰岛细胞凋亡的影响。方法：应用体外单层培养的Wistar大鼠胰岛细胞,分别检测IL－1β、TNF和IFN－以及牛磺酸对胰岛细胞凋亡细胞百分率,培养液中NO含量及NOS活性以及DNA片段的影响。结果：IL－1β、TNF和IFN－γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率及DNA片段明显增加,同时NO含量和NOS活性亦明显升高（P＜0．01）;牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用（P＜0．01）,且有剂量依赖性。结论：NO可能是介导上述细胞因子引起胰岛细胞凋亡的重要途径之一。牛磺酸能够改善细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡,其机制可能与抑制NOS活性从而减少NO的生成有关。     

厄贝沙坦对2型糖尿病SD大鼠胰岛结构和功能的影响

目的：观察厄贝沙坦干预对2型糖尿病（T2DM）大鼠胰岛结构和功能的影响,以探讨其保护胰岛结构和功能的可能机制.方法：40只SD大鼠随机分为4组,每组10只,即A组（普通饲料组）,B组（高糖高脂饲料组）,C组（T2DM对照组）、D组（厄贝沙坦干预组）.观察厄贝沙坦干预对T2DM大鼠血糖、胰岛素等胰岛结构和功能的影响.结果：D组与C组比较,空腹血糖下降25.08％,稳态模型评价胰岛素抵抗指数下降30.87％,ISI提高了11.93％,明显改善糖耐量.D组与C组大鼠比较,胰岛内β细胞相对量增加67.35％,胰岛β细胞内胰岛素水平增加43.86％,胰岛β细胞胰岛素mRNA表达水平增高9.79％.结论：厄贝沙坦干预可降低T2DM大鼠空腹血糖、HOMA-IR,提高ISI,改善胰岛结构和功能.     

心肌缺血－再灌注后血液中脂肪酸和乳酸浓度改变的实验研究

以家兔复制心肌缺血—再灌注模型，测得心肌缺血３０分钟与再灌注３０分钟时，血液中游离脂肪酸和乳酸的浓度明显高于心肌正常供氧时。（Ｐ＜０．０１），且乳酸的浓度在心肌再灌注后明显高于心肌缺血时（Ｐ＜０．０１）。游离脂肪酸和乳酸浓度的升高均与再灌注性心律失常的发生率无关     

GADA和ICA联合检测对成人隐匿性自身免疫性糖尿病早期诊断及预测胰岛功能的意义

①目的　探讨早期诊断成人迟发型自身免疫性糖尿病 (LADA)的临床标准 ,及 1型糖尿病相关抗体与胰岛功能之间的关系。②方法　检测 10 6例初诊的 2型糖尿病病人的谷氨酸脱羧酶抗体 (GADA)和胰岛细胞抗体(ICA) ,比较发病年龄、体质量指数 (BMI)和典型症状与抗体阳性的关系 ,并进行为期 1.5年的随访 ,比较基础和随访结束时C 肽水平的变化。③结果　抗体阴性组 84例 (79.2 % ) ,抗体阳性组 2 2例 (2 0 .8% ) ,GADA+ 组 17例 (16 .0 % ) ,ICA+ 组 19例 (17.9% ) ,仅 1种抗体阳性组 15例 (14 .2 % ) ,双阳性组 7例 (6 .6 % )。抗体阳性组与抗体阴性组之间的C 肽水平无明显差异 ,在随访 1.5年后 ,抗体阳性组餐后 2hC 肽水平明显高于抗体阴性组 (t=9.84 1,P <0 .0 1)。④结论　发病年龄、BMI和多尿、多饮等症状并不能预测是否有抗体阳性 ,出现抗体阳性的 2型糖尿病病人的胰岛功能将迅速恶化     

STUDIES OF EFFECTS OF PORTASYSTEMIC SHUNT ON THE FUNCTION OF HEPATIC AND PANCREATIC ISLET CELLS

The present study was aimed at dynamic observation of the ef fects of end to side portacaval shunt (PCS) and end to side mesocaval shunt (MCS) in dogs on the functions of the liver and pancreatic islet cells. According to correlation between the changes of plasma insulin level in the portal vein and hepatic flow and liver morphology after PCS and MCS, we conclude that the depletion of hepatic flow is the major factor in the deterioration of liver functions. The levels of insulin and glucagon in both the peripheral vein and the portal vein were decreased after PCS and MCS. There was also depletion of pancreatic islet A and B cells and vacuolar degeneration of the pancreas. These changes were more signifcant in PCS than in MCS, suggesting that portasystemic shunt, especially total portasystemie shunt, might damage pancreatic endocrine functions.     

VP16对S-180和S-180-R细胞凋亡的作用

①目的探讨ＶＰ１６对细胞凋亡的作用。②方法用两种剂量（３．１２，６．２５μｍｏｌ）的ＶＰ１６处理腹腔接种Ｓ－１８０瘤细胞和抗阿霉素瘤细胞（Ｓ－１８０－Ｒ）的ＢＡＢＬ／Ｃ鼠。０，６，９ｈ分别取腹水，用流式细胞仪测定细胞相对ＤＮＡ含量。③结果ＶＰ１６在３．１２，６．２５μｍｏｌ剂量时，均可诱导Ｓ－１８０细胞凋亡，而剂量效应并不明显。在６．２５μｍｏｌ时，也可诱导Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡，且ＶＰ１６诱导Ｓ－１８０和Ｓ－１８０－Ｒ两种细胞凋亡差别不明显。④结论ＶＰ１６是Ｓ－１８０和Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡的诱导剂。ＶＰ１６诱导的凋亡与其抗药表型关系不大，但与免疫机制似乎有一定的关系。     

丙戊酸钠抑制NB4细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)对NB4细胞的作用.方法:台盼蓝细胞计数检测不同浓度VPA对NB4细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术检测VPA作用后NB4细胞CD11b的表达,用DNA梯形片段电泳分析细胞凋亡.结果:VPA能显著抑制NB4细胞的增殖(P＜0.01),VPA处理NB4细胞72h时的半数抑制浓度(IC50)为1.17mmol/L;VPA组NB4细胞髓系分化抗原CD11b表达水平明显高于对照组(P＜0.05);NB4细胞经不同浓度VPA处理48h后,出现典型的凋亡细胞所具有的梯形DNA条带.结论:VPA能抑制NB4细胞增殖,诱导细胞分化和凋亡.     

UVB对HaCaT细胞凋亡的影响

①目的　探讨紫外线B(UVB)对HaCaT细胞凋亡的影响及其作用机制。②方法　取培养的HaCaT细胞 ,用 30mJ/cm2 的UVB照射后继续培养 18h ,以流式细胞术检测细胞的凋亡率、线粒体膜电位和细胞内游离Ca2 +水平 ,用透射电镜观察细胞的超微结构。③结果　UVB照射增加了HaCaT细胞的凋亡率 (t =5 .2 36 ,P <0 .0 1) ,降低了线粒体膜电位 (t=6 .897,P <0 .0 1) ,升高了细胞内游离Ca2 + 水平 (t =6 .0 4 6 ,P <0 .0 1)。细胞的超微结构因UVB照射而遭到严重破坏 ,胞浆内的细胞器大量减少 ,线粒体严重空泡化 ,髓样小体形成 ,核内染色质成块并边聚。④结论　线粒体膜电位的下降和胞内游离Ca2 + 的升高可能参与了UVB诱发HaCaT细胞凋亡的过程     

大鼠胰岛分离与纯化的实验研究

本实验经胰管注射胶原酶、胰腺静止消化方法。分离成年Wistar大鼠胰岛,葡聚糖密度梯度离心纯化。大鼠胰腺消化后,胰岛收获量为710～1015个/胰腺,纯化后胰岛收获量为610—820个/胰腺,纯度达92%。纯化胰岛形态结构完整,内分泌细胞超微结构保持良好;对葡萄糖刺激反应,胰岛素释放量是基础分泌水平的8倍;异体移植可逆转实验性糖尿病小鼠的高血糖达一周。     

ω-3多不饱和脂肪酸对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响

目的 利用人胃癌BGC-823细胞体外培养实验,观察不同含量ω-3多不饱和脂肪酸合成的二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoc acid,DHA）对肿瘤细胞凋亡的影响。方法采用MTT法、凋亡形态学检查和流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况。结果 30和45mg／L的EPA或DHA可显著降低肿瘤细胞存活率（P＜0.01）。透射电镜可见细胞凋亡现象,流式细胞检测bcl-2和Ga基因蛋白表达明显下降（P＜0.05,P＜0.01）。结论ω-3多不饱和脂肪酸可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡,细胞增殖受到抑制。