Study on Synthesis, Characterization and Anti-tumor Activity of Quercetin-3-sulphate Sodium

目的:研究槲皮素-3-硫酸酯钠的合成、表征及抗肿瘤活性,并对槲皮素和槲皮素-3-硫酸酯钠的溶解度及其抗肿瘤作用进行对照比较.方法:以芦丁为原料,合成出槲皮素-3-硫酸酯钠,通过元素分析、红外光谱、紫外光谱及核磁共振等,确定其组成结构以及测定其溶解度.同时采用噻唑蓝(MTT)比色法测定槲皮素及磺化产物对HepG2肝癌细胞株的抗肿瘤活性.结果:槲皮素-3-硫酸酯钠在水中溶解度(15℃)是3.391 mg/mL,比槲皮素增大42.6倍.由于水溶性的增强,槲皮素-3-硫酸酯钠高浓度下对HepG2细胞抑制率显著高于槲皮索.结论:槲皮素-3-硫酸酯钠的水溶性提高,抗肿瘤作用明显.     

槲皮素-3-硫酸酯钠的合成、表征及抗肿瘤活性研究

目的:研究槲皮素-3-硫酸酯钠的合成、表征及抗肿瘤活性,并对槲皮素和槲皮素-3-硫酸酯钠的溶解度及其抗肿瘤作用进行对照比较。方法:以芦丁为原料,合成出槲皮素-3-硫酸酯钠,通过元素分析、红外光谱、紫外光谱及核磁共振等,确定其组成结构以及测定其溶解度。同时采用噻唑蓝(MTT)比色法测定槲皮素及磺化产物对HepG2肝癌细胞株的抗肿瘤活性。结果:槲皮素-3-硫酸酯钠在水中溶解度(15℃)是3.391 mg/mL,比槲皮素增大42.6倍。由于水溶性的增强,槲皮素-3-硫酸酯钠高浓度下对HepG2细胞抑制率显著高于槲皮素。结论:槲皮素-3-硫酸酯钠的水溶性提高,抗肿瘤作用明显。     

黑根霉胞外多糖硫酸酯的制备及其抗肿瘤活性

目的分析EPS硫酸酯化修饰中配料比对硫酸基取代度的影响及其硫酸酯化修饰对EPS抗肿瘤活性的影响。方法采用 氯磺酸-吡啶法修饰EPS,氯化钡-明胶浊度法测定硫酸基取代度,分析酯化剂配料比对硫酸基取代度的影响;红外光谱分析硫酸 基团是否与EPS结合形成硫酸酯;CCK-8法检测EPS硫酸酯（SEPS）抑制人结肠癌HCT 116增殖活性;Annexin V-FITC/PI双染 法检测SEPS 诱导HCT 116 细胞凋亡活性。结果酯化剂和EPS 配料比1∶1 和2∶1 条件下产物硫酸基取代度分别为0.98% （SEPS-1）和1.18%（SEPS-2）,增加酯化剂配料比可以提高产物取代度（P<0.05）。红外光谱分析发现1249 cm-1附近出现-OSO3 - 的S=O 伸缩振动吸收峰,表明硫酸基团与EPS 结合形成硫酸酯。CCK-8 实验表明,在0.02~0.10 mg/L 各浓度梯度范围内, SEPS-1对HCT 116细胞增殖的抑制率明显高于EPS（P<0.05）;在0.04、0.06、0.10 mg/mL浓度梯度水平时,SEPS-2活性高于EPS （P<0.05）;在0.04~0.08 mg/L 各浓度梯度水平,SEPS-1 活性高于SEPS-2（P<0.05）。流式细胞术检测结果显示SEPS-1 诱导 HCT 116细胞凋亡活性较EPS明显增强,随着SEPS-1浓度的增加,发生早期凋亡的细胞与坏死细胞相应增加,并呈现剂量依赖 性,0.06、0.08、0.10 mg/mL处理组细胞早期凋亡率分别为6.38%、11.8%与12.5%,晚期凋亡和坏死细胞率分别为5.26%、8.04%、 6.80%。结论黑根霉EPS硫酸酯化修饰中,酯化剂配料比对产物取代度有直接影响,增加酯化剂配料比可以提高产物取代度。 黑根霉EPS硫酸酯化修饰可以提高其抗肿瘤活性,但取代度高低与活性高低没有直接关系。     

白术挥发油化学成分及抗肿瘤实验研究

目的 研究白术挥发油的化学成分及对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用.方法 采用水蒸气蒸馏法提取得到白术挥发油,常规硅胶柱层析将白术挥发油按极性分成极性大的部分(zbo-2)和极性小的部分(zbo-1),并分离纯化白术挥发油的化学成分,用核磁共振和X-射线衍射法鉴定其结构.并以肿瘤生长抑制率为指标观察白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、zbo-2、zbo-1对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用.结果 共从白术挥发油中分离得到3个化合物,分别为白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ.白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、zbo-2、zbo-1小剂量和zbo-1大剂量对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用均较弱,其中zbo-1大剂量(200 mg/kg)抗肿瘤作用最强,抑瘤率为24.74%.结论 白术内酯Ⅱ为第1次从白术挥发油中分离得到;白术挥发油的抗肿瘤有效成分可能存在于白术挥发油中极性小的部位.     

中越猕猴桃地上部分抗肿瘤作用的实验研究

目的　了解中越猕猴桃地上部分的抗肿瘤作用。方法　用 MTT法及动物移植性肿瘤实验方法研究其抑制肿瘤作用。结果　中越猕猴桃茎、叶、果多种提取物稀释 10 0倍对肝癌细胞仍有明显抑制作用 ,抑制率 31.3%～ 5 4 .5 %。体内抑瘤试验表明 ,茎乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物对小鼠肝癌 H2 2 的抑制率分别为 30 .3%、33.1%、34.5 % ;叶乙醇提取物对 S1 80 抑制率为31.7% ;茎乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物对 S1 80 的抑制率分别为 35 .9%、34.8%、32 .2 %。结论　中越猕猴桃果、叶及茎的多种提取物具有抗肿瘤作用。     

桑黄等四种抗癌药物抗癌活性比较

目的:研究比较桑黄、灵芝、阿加里斯茸、PL-2.PL-5(MeSima)的抗癌活性.方法:以小鼠移植性胃癌和S180肿瘤模型观察桑黄、灵芝、阿加里斯茸、PL-2.PL-5的抗肿瘤作用.结果:桑黄、灵芝、阿加里斯茸、PL-2.PL-5对小鼠胃癌的抑制率分别为43.09%、38.99%、31.01%和35.70%;对S180肉瘤的抑制率分别为46.07%、37.22%、27.99%和10.43%.结论:桑黄在4种药物中有较好的抑瘤作用.     

柚皮素衍生物的合成及抗肿瘤活性

目的:合成甲基化柚皮素和乙酰化柚皮素,并测定其抗肿瘤活性。方法:以柚皮素为原料,碘甲烷为甲基化试剂,乙酸酐为酰化试剂,制备目标物;IR、ESI-MS1、H-NMR确证目标物结构;噻唑蓝(MTT)法测定抗肿瘤活性。结果:目标物确证为7,4′-二甲基柚皮素和5,7,4′-三乙酰柚皮素,其对人源肝肿瘤细胞SMMC-CTT 21的抑制率分别为7.60%和4.10%。结论:7,4′-二甲基柚皮素和5,7,4′-三乙酰柚皮素无抑制肿瘤细胞生长的作用。     

北五味子茎藤的抗肝癌细胞活性成分

[目的]分离纯化北五味子茎藤中具有抗肝癌细胞活性的化学成分.[方法]反复采用硅胶柱色谱及重结晶等方法分离化合物.根据理化性质和波谱学分析,鉴定化学结构.并采用MTT法分析化合物的体外抗肝癌细胞作用.[结果]分离得到7个化合物,分别鉴定为五味子丙素(Ⅰ)、十九醇(Ⅱ)、三十五醇(Ⅲ)、二十四醇(Ⅳ)、五味子乙素(Ⅴ)、β-谷甾醇(Ⅵ)及五味子醇乙(Ⅶ).活性检测结果见,化合物Ⅰ,Ⅴ,Ⅵ有较强的体外抗肝癌细胞活性,质量浓度均为50mg/L时的抑制率分别为96.27%,97.11%,93.99%;化合物Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅶ的质量浓度均为50mg/L时抑制率分别为86.81%,82.33%,77.62%,86.25%.[结论]从北五味子茎藤中分离得到的7个化合物均具有体外抗肝癌细胞活性.     

洛莫司汀热敏脂质体的制备及体外抗肿瘤活性研究

目的 制备洛莫司汀热敏脂质体并考察其体外抗肿瘤活性.方法 以二棕榈酰-D,L-α磷脂酰胆碱(DPPC)和胆固醇为载体,采用薄膜分散法制备洛莫司汀热敏脂质体,以甘露醇为赋形剂将其制成冻干脂质体;透射电镜观察冻干前后脂质体的形态,激光散射法测定脂质体的粒径分布及Zeta电位;Sephadex G-50柱分离脂质体与未包封药物,HPLC测定脂质体包封率;并考察脂质体的体外释药特性和体外抗肿瘤活性.结果 脂质体为多层圆形或椭圆型小囊,无粘连,大小均匀,冷冻干燥前后平均粒径分别为189.8和274.9 nm;ζ电位分别为-19.13和-0.83 mV,包封率分别为68.28%和60.32%(n=3).在pH 7.4 PBS介质、相变温度42 ℃时30 min累积释药88.64%.相同剂量洛莫司汀溶液与洛莫司汀热敏脂质体比较,37 ℃时肿瘤抑制率分别为33.04%和35.35%,两者无明显差异(P＞0.05);加热到42 ℃时肿瘤抑制率明显增加,加热10 min肿瘤抑制率分别为36.75%和58.87%;加热30 min肿瘤抑制率分别为50.52%和71.69%.结论 洛莫司汀热敏脂质体在相变温度时,体外释药明显增加,体外抑瘤效果明显提高.     

AMH-T体外抗肿瘤作用的研究

目的探讨功效部位AMH-T对人Hela、Hep G2和U251体外抗肿瘤作用,了解其剂量-反应和时间-效应关系,发现对AMH-T敏感的肿瘤细胞株.方法采用体外抗肿瘤实验进行体外抗癌活性检测.实验设阴性对照组(DMSO)、阳性对照组(DDP,3μM)、AMH-T的5个剂量组(2、4、8、16和32μg/m L).采用MTT法检测药物处理24 h、48 h和72 h后的OD值,计算各组的增殖抑制率.结果 AMH-T作用72 h后,在AMH-T为8μg/m L时,显微镜下观察Hela细胞几乎死亡.AMH-T在剂量为2、4、8、16和32μg/m L时,对人宫颈癌细胞株Hela的抑制率分别为-5.54%、2.93%、72.14%、74.41%和73.86%,其IC50为11.66μg;对人肝癌细胞株Hep G2的抑制率分别为3.87%、12.50%、54.07%、55.27%和51.86%,其IC50为22.90μg;对人神经胶质瘤细胞株U251的抑制率分别为-5.47%、1.08%、54.83%、57.75%和71.78%,其IC50为16.85μg.结论 AMH-T对Hela、Hep G2和U251均具有显著性的体外抗肿瘤作用,存在明显的剂量-反应和时间-效应关系;Hela细胞株对AMH-T最为敏感.     

一氧化氮供体型抗高血压药物的研究Ⅰ.C-3位具有硝酸酯和呋咱氮氧化物取代结构的苯骈吡喃类化合物的合成及其降压活性

目的:研究C-3位一氧化氮(NO)供体取代的苯骈吡喃类化合物的合成及其降压活性,寻找活性强、不良反应小的新型抗高血压药.方法:以3,4位反式苯骈吡喃为基本骨架,在C-3位通过丁二酸连接硝酸酯和呋咱氮氧化物,合成了一系列衍生物;测定目标物对KCl引起的大鼠胸主动脉条收缩的抑制作用,选择活性化合物Ⅱ1测定其经口给药对自发性高血压大鼠(SHR)尾动脉收缩压(SAP)和舒张压(DAP)的影响;采用Griess法测定目标物体外NO释放量.结果与结论:合成了16个新化合物(Ⅰ1-6;Ⅱ1-10),结构经波谱确证.大部分目标物对大鼠胸主动脉条收缩具有不同程度的抑制作用,其中Ⅱ1的抑制率与阳性药吡那地尔(PIN)相当,对SHR尾动脉SAP和DAP的抑制幅度分别为15.2%和12.5%,降压持续时间长于PIN.Ⅱ1的NO释放量为0.9μg/mL,NO释放量与目标物降压活性的关系尚待进一步研究.     

喜树碱20-O-β-胺基丙酸酯类衍生物的合成及抗肿瘤活性

目的:研究Topo Ⅰ抑制剂喜树碱β-胺基酸酯类衍生物的合成、抗肿瘤活性和血液稳定性,寻找高效低毒的肿瘤治疗药物.方法:通过喜树碱、9-硝基喜树碱和7-乙基喜树碱的20位羟基与丙烯酰氯反应得化合物1a～3a,然后与仲胺进行Michael加成,产物与盐酸成盐分别制得目标化合物1b～1e,2b～2e,3b～3e.采用MTT法对上述化合物进行4个瘤株KB,HT-29,HCT-8,Bel 7402的抗肿瘤活性测定.以化合物1b和1e为代表检测了目标化合物在人血液中的稳定性.结果:合成了12个新的化合物,其结构经IR、1H NMR、MS等确证.所有目标化合物都有较好的抗肿瘤活性,其中7个化合物1b,3b,1c,3c,3d,2e和3e的抗肿瘤活性强于羟基喜树碱,化合物1c,3b和3d的抗肿瘤活性与喜树碱相当.与喜树碱相比,化合物1b和1e的血液稳定性从5.2%增加到66.6%和55.1%.结论:Topo Ⅰ抑制剂喜树碱β-氨基酸酯类衍生物有较好的抗肿瘤活性,20位成酯增加在血液中的稳定性,且有利于降低毒性.化合物1c,3b和3d的活性较强,值得进一步研究.     

银耳多糖铁(Ⅲ)配合物的合成及其理化性质的研究

用从银耳中提取的多糖和 FeCl_3为主要原料合成一种新的补铁剂——银耳多糖铁(Ⅲ)配合物(ITC),并测定了其理化性质。实验证明:在 ITC 水溶液中,不存在游离 Fe~(3+),表明铁(Ⅲ)与银耳多糖形成了稳定的配合物.经红外光谱、超速离心及电镜观测可知:银耳多糖铁(Ⅲ)配合物是以β-(FeOOH)。为微核,银耳多糖在其核表面络合而形成的表面配合物,其粒子直径约为30～80 nm,属于高分子化合物。ITC 在生理 pH 下不沉淀、不水解,可望有较好的生物利用度.     

1-［二-(4-氟苯)甲基］-4-取代哌嗪类化合物的合成及抗肿瘤活性

目的:寻找活性强、毒性低的新抗肿瘤化合物。方法:以哌嗪为起始原料,通过与［二-(4-氟苯)］甲基氯反应得到 1-［二-(4-氟苯)甲基］哌嗪Ⅰ,Ⅰ分别通过烷基化、烷基二硫代甲酰化、酰基化和Mannich反应在哌嗪的4-位引入具有抗肿瘤活性的基团,得到 9 个未见文献报道的 1-［二-(4-氟苯)甲基］-4-取代哌嗪衍生物Ⅱa-i。通过SRB法和MTT法测试了它们对 8 种瘤株生长的抑制率。结果:改进了关键中间体Ⅰ的制备方法,使收率由文献的54%提高到74%。初步生物活性实验结果表明, 该类化合物对瘤株 Skov3（人体卵巢癌）较对其它瘤株有较强的抑制率;比较化合物Ⅱc和Ⅱg的结构和活性,可以发现二硫代酯基的存在与否对不同瘤株生长的抑制率有明显影响;4-位引入苄基可使活性有所提高。结论：1-［二-(4-氟苯)甲基］-4-取代苄基哌嗪类化合物值得进一步深入研究。     

依曲替酸衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

目的 合成依曲替酸酯及酰胺衍生物,以寻找新的具有抗肿瘤活性的药物.方法 以依曲替酸和三氟甲苯衍生物为原料,合成一系列依曲替酸酯及酰胺衍生物.在体外通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验法检测其对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4生长抑制的作用;利用流式细胞术检测细胞周期的变化情况.结果 制备出依曲替酸酯及酰胺衍生物并通过1H-NMR、13C-NMR和HR-MS确认结构.MTT结果显示部分化合物对NB4细胞增殖的抑制作用较为明显;细胞周期分析显示G0/G1期细胞增加,而S期减少.结论 初步的药理实验结果显示将依曲替酸通过酯键和酰胺键与三氟甲苯衍生物连接起来能增强其对NB4细胞的诱导分化作用.     

小叶锦鸡儿对小鼠S_(180)肉瘤的抑制作用

[目的 ]探讨小叶锦鸡儿的抗肿瘤作用 .[方法 ]按标准方法给小鼠接种S180 肉瘤细胞 ,随机分组后 ,分别腹腔注射不同剂量的小叶锦鸡儿乙醇提取物和乙酸乙酯萃取物 ,10d后观察瘤重及体重变化 .[结果 ]不同剂量小叶锦鸡儿乙酸乙酯萃取物对雌性小鼠S180 肉瘤的抑制率分别为 2 8% ,33% ,5 2 % ,对雄性小鼠S180 肉瘤的抑制率小于 30 % ;不同剂量乙醇提取物对S180 肉瘤的抑制率均小于 30 % .[结论 ]小叶锦鸡儿乙酸乙酯萃取物对雌性小鼠S180 肉瘤有抑制作用 .     

不同硫取代度昆布多糖硫酸酯的合成及理化性质初步研究

目的:对昆布多糖进行不同硫取代度的硫酸酯化修饰,并对其产物的硫酸基含量、糖含量与分子量进行检测,为研究不同硫取代度昆布多糖硫酸酯的生物活性奠定物质基础。方法:采用氯磺酸-吡啶法对昆布多糖进行硫酸化修饰,通过改变硫酸化修饰条件,来制取不同硫酸基取代度的昆布多糖硫酸酯;利用盐酸水解-硫酸钡比浊法测定昆布多糖硫酸酯的硫酸基含量,并通过公式求得其硫取代度;用苯酚-硫酸法测定昆布多糖硫酸酯的多糖含量,并使用HPGPC法测定其分子量。结果:两种不同硫取代度昆布多糖硫酸酯的硫酸基含量分别为37.8%、45.92%,取代度分别为1.07、1.51,糖含量分别为44.52%、37.19%,分子量分别为13000、16000。结论:利用氯磺酸-吡啶法对昆布多糖进行硫酸酯化修饰,该方法可以获取不同取代度产物,酯化率高。     

王浆酸锗对U14瘤的抑制作用

目的 观察王浆酸锗体内外对小鼠U14瘤的抑制作用。方法 MTT法评价王浆酸锗体外抑制U14瘤的活性;建立小鼠U14瘤模型,以王浆酸锗高、中、低剂量连续给药10d,分离瘤体,计算肿瘤抑制率,评价其体内抗肿瘤活性。结果 MTT法显示王浆酸锗(1 mg/L, 10 mg/L and 100 mg/L)体外对U14瘤的抑制率分别为18.43%, 33.12% 和 55.20%,IC50为43.60 mg/L;体内活性实验表明王浆酸锗高、中剂量组和低剂量组的抑制率分别为70.0%, 51.8% 和 42.4%。结论 王浆酸锗对小鼠U14瘤有较强的抑制作用。     

肌醇硫酸酯铝对胃溃疡大鼠黏膜保护作用的研究

目的：研究肌醇硫酸酯铝对大鼠胃黏膜损伤的保护作用。方法：采用幽门结扎急性胃溃疡、乙酸烧灼慢性胃溃疡模型观察肌醇硫酸酯铝对胃溃疡大鼠黏膜的保护作用,测定胃溃疡指数和溃疡抑制百分率。同时幽门结扎形成急性胃溃疡后测定胃液量、胃蛋白酶活性、pH值、游离盐酸和总酸度。结果：在急性胃溃疡模型中,与空白组相比,肌醇硫酸酯铝可降低胃溃疡指数,提高溃疡抑制率（P〈0.05）,奥美拉唑及多司马酯组亦有同样作用;但在抗乙酸诱发的慢性溃疡实验中,肌醇硫酸酯铝可有效抑制胃溃疡的生成,降低胃溃疡指数,提高溃疡抑制率（P〈0.05）;而多司马酯组及奥美拉唑组无显著影响。与空白组相比,肌醇硫酸酯铝中、低剂量及多司马酯组对pH值和总酸度影响不明显;而肌醇硫酸酯铝高剂量组可以有效抑制胃酸产生,抑制胃蛋白酶活性（P〈0.05）。结论：肌醇硫酸酯铝可抑制溃疡的发生,降低胃溃疡指数,并具有剂量依赖性。     

苯并吡喃酯类化合物的合成及其生物活性

为寻找活性更高、降压作用更理想的钾通道开放剂 ,合成了 10个苯并吡喃酯类衍生物及 3个中间体 ,并对它们进行了体外低钾诱导的血管收缩抑制试验。结果表明 :化合物浓度为 1× 10 -4 ｍｏｌ/Ｌ时对低钾 (2 0ｍｍｏｌ/Ｌ)引起的血管收缩有不同程度的抑制作用 ,化合物 (Ⅰ )和 (Ⅱａ)的活性较好 ,抑制率分别为 86 .4%和 79.3 %。苯并吡喃酯类化合物的合成及其生物活性@张惠斌 @爱起利 @黄文龙