胎鼠肠管上皮细胞增殖分化与间质血管形成的关系

目的：探讨胎鼠肠管上皮细胞增殖分化与间质血管形成的关系，方法：通过免疫组织化学及电子计算机形态学分析方法，对血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）和Ⅳ型胶原在胚胎期１３－１８ｄ之胎鼠肠管的表达进行研究。结果：（１）在Ｅ１３－１５时，胎鼠肠管上皮增殖旺盛，此后维持在２０％左右；（２）间质血管一直占机体体积的２０％左右，比较恒定；（３）ＶＥＧＦ呈波峰工表达，先在间充质吭表达而后则有上皮表达高峰；（４）Ｅ１５－１     

TGF_β·VEGF及PCNA在胚胎肠管的表达及其生物学意义

目的：探讨各种细胞因子在肠管发生及实质细胞分化中的调控机理。方法：通过免疫组织化学及组织形态学分析方法，对转化生长因子（ＴＧＦβ），血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在胚胎期１３～１８ｄ之胎鼠肠管的表达进行研究。结果：①在胎鼠肠管ＴＧＦβ、ＶＥＧＦ、ＰＣＮＡ均有表达；②ＴＧＦβ在Ｅ１３时，在上皮及间充质呈高表达；③ＰＣＮＡＥ１８时，在上皮呈高表达；④ＶＥＧＦ先在间充质中高表达而后则有上皮表达高峰。结论：ＴＧＦβ对实质细胞增殖，具有抑制及促进分化作用。ＶＥＧＦ在促血管生成作用的同时，亦可促进实质细胞的分化     

TrkA在胚胎期Wistar大鼠端脑内的表达

目的：探讨TrkA受体在胚胎不同时期Wistar大鼠端脑内的表达情况。方法：成年Wista大鼠合笼饲养，查到阴栓或阴道涂片查到精子为E0天，分别在E13、E15、E17、E19和E21天利用常规形态学手段免疫组织化学方法观察胚胎期Wistar大鼠不同脑区TrkA表达情况。结果： E13天胎脑组织内未检测到TrkA阳性表达，E15天TrkA表达阳性率在胚胎期大鼠端脑皮质内呈上升趋势，E17天达次高峰，E19开始下降，出生前E21天再次达表达高峰。胎鼠纹状体、海马的发育较晚，E17天开始发育，TrkA在其内的表达与皮质内相似。结论：TrkA在胎鼠端脑的表达始于E15天，且自E15～E21表达量呈持续增加趋势，符合胚胎诱导过程。     

TGFβ·VEGF及PCNA在胚胎肠管的表达及其生物学意义

目的：探讨各种细胞因子在肠管发生及实质细胞分化中的调控机理。方法：通过免疫组织化学及组织形态学分析方法，对转化生长因子，血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在胚胎期１３￣１８ｄ之胎鼠肠管的表达进行研究。     

小鼠胚胎胃发育中细胞凋亡及凋亡相关蛋白的表达

目的：观察小鼠胚胎胃发育过程中上皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、P53的表达.方法：E11d～E15d胎鼠连续切片,体视学法测量胃上皮凋亡小体密度（DAB）;免疫组化SABC法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、P53的表达.结果：①胃DAB峰值为E14d～E15d.②Bcl-2表达峰值为E11～13d;Bax表达峰值在E14d,P53表达峰值在E11～13d.结论：Bel-2可能具有抑制胃上皮细胞凋亡的作用;Bax可能具有促进细胞凋亡的作用;P53可能与胃上皮细胞凋亡调控的关系不密切.     

地塞米松对体外培养视网膜色素上皮细胞生长及表达VEGF的影响

目的：观察不同浓度地塞米松对体外正常和缺氧培养的人视网膜色素上皮细胞（hRPE）生长及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：体外正常（氧浓度95％）和缺氧（氧浓度2％-5％）下培养视网膜色素上皮细胞，分别加入不同浓度地塞米松，用四唑溴盐（MTT）和RT-PCR的方法，分别检测药物对细胞生长的影响和细胞VEGF的表达。结果：同一药物浓度下，缺氧刺激后，细胞较正常培养细胞呈现增殖状态，VEGF表达增强；1-200μg／ml药物浓度可刺激细胞增殖，VEGF表达增强；200～400μg／ml药物浓度逐渐出现细胞增殖率下降，VEGF表达降低趋势。各组与对照组相比差异性显著（P〈0.05）。结论：对于体外正常培养或缺氧培养视网膜色素上皮细胞，地塞米松在低浓度可刺激细胞生长，高浓度可抑制细胞生长，这一过程可能与VEGF的表达有关。     

胚胎大鼠脑内神经干细胞增殖和分化特性的初步探讨

目的 观察胎鼠发育过程中脑内神经干细胞增殖、迁移和分化特点。方法 在妊娠8～10d、12～13d和15～16d的孕鼠，分别于腹膜腔内注射BrdU，妊娠17d时取其胎鼠脑组织制备切片，免疫细胞化学方法观察BrdU标记的增殖细胞密度和分布；取E13d、E15d和E17d胎鼠皮质，分离获得神经细胞并制备成滴片，免疫细胞化学方法抗nestin和抗NeuN染色，观察不同胚期胎鼠皮质神经干细胞和神经元细胞比例。结果 E8～10d时BrdU标记的细胞主要分布于脑室周围和顶叶皮质；E12～13d时BrdU标记的细胞主要分布于脑室周围、基底节区和顶叶皮质；E15～16d时BrdU标记的细胞主要分布于丘脑和颞叶皮质。E13d、E15d和E17d胎鼠皮质nestin免疫反应阳性细胞比例随胚龄增加而逐渐减少（分别为66．4％、32．1％和3．4％），NeuN免疫反应阳性细胞比例逐渐增加（分别为17．2％、35．6％和92．3％）。结论 胎鼠发育过程中脑内神经干细胞增殖并按一定模式顺序迁移至各脑区，至出生前皮质神经细胞已基本分化成熟。     

血小板反应蛋白1及血管内皮生长因子在肾间质纤维化中的表达及意义

目的 探讨肾脏组织中血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,TSP-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肾间质纤维化发生、发展中的表达及意义.方法 选择不同类型肾脏疾病患者53例,按肾间质病理损伤程度对肾组织标本进行分组:正常对照组5例、轻度损伤组18例、中度损伤组19例、重度损伤组11例.用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统半定量检测肾间质的TSP-1、VEGF、CD34、TGF-β1、α-SMA和Ⅳ型胶原表达情况.结果 在正常对照组,TSP-1无阳性表达;TGF-β1在肾小管上皮细胞浆偶见表达;α-SMA仅在血管壁表达;肾间质Ⅳ型胶原在肾小管基底膜、动脉管壁呈线状表达.而VEGF在肾小管上皮细胞及足突细胞浆均可见表达,CD34在肾小管周围毛细血管内皮细胞表达.随着病变程度加重, TSP-1、TGF-β1、α-SMA和Ⅳ型胶原其表达量及面积显著增加(P＜0.01),与肾间质病理损害程度呈显著正相关(r=0.86,0.674,0.779,0.784).而VEGF及CD34表达量及面积则显著递减(P＜0.01),与肾间质病理损害程度呈显著负相关(r=-0.715,-0.672).结论 随着肾间质病理损伤程度加重,TSP-1在肾小管上皮细胞、肾间质区表达增强,与肾间质损害程度呈显著正相关;VEGF在肾小管上皮细胞、足细胞表达减弱,与肾间质损害程度呈显著负相关.提示TSP-1与VEGF对肾小管周围毛细血管作用失衡,使肾小管周围毛细胞血管减少,加重肾组织缺氧,导致慢性肾间质纤维化发生、发展.     

血管内皮生长因子在外周血内皮祖细胞体外三维血管新生中的作用

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)在三维血管新生中的作用.方法 取大鼠外周血,密度梯度离心法分离出内皮祖细胞,以VEGF为诱导因子,观察VEGF对大鼠外周血内皮祖细胞体外培养和扩增的影响,同时重点建立三维立体模型并分析VEGF在外周血内皮祖细胞体外三维血管新生中的作用.结果 VEGF实验组细胞在三维基质内向胶原基质内生长,24 h内即可出现向胶原内的出芽及浸润并逐渐形成分支样结构,对照组细胞生长慢、出芽慢,管状结构细小,向胶原内浸润的深度浅,网状结构稀疏、不完整.VEGF实验组与对照组新生血管数目比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 鼠尾胶原凝胶可以诱导内皮祖细胞表现出血管新生中的迁移、增殖、发芽等;VEGF能动员和诱导内皮祖细胞促进血管新生.     

川芎嗪对血管平滑肌细胞增殖抑制作用的探讨

目的观察川芎嗪（TMP）对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的抑制作用，并探讨其作用机制。方法利用大鼠颈动脉血管内膜损伤可引起VSMC增殖、血管增厚为实验模型。行增殖细胞核抗原（PCNA）、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原组织化学检测，纤维母细胞生长因子（FGF）、血小板源生长因子（PDGF）、Bcl-2、Pax、C—myc原位杂交检测及TUNEL染色。结果内皮损伤后VSMC增殖，血管管腔面积减少；低剂量TMP治疗组有轻度抑制VSMC增殖的作用，使管腔面积有所增加；TMP高剂量抑制作用明显增强。高剂量TMP组和假手术组PCNA、Ⅳ胶原、PDGF的表达低于模型组；TMP低剂量组与模型组相比无显著差异。高、低剂量TMP组和假手术组的Ⅰ型胶原、FGF、Bcl-2、c—myc和TUNEL的表达低于模型组。高、低剂量TMP组和假手术组的Bax表达高于模型组。结论TMP能抑制平滑肌细胞Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、FGF、PDGF表达；影响Bcl-2、c—myc、Bax基因表达，促进血管平滑肌细胞凋亡；达到抑制平滑肌细胞增殖的作用。     

Regulation effect of vascular endothelial growth factor on vascularization and angiogenesis in developmental human fetal retinas

目的 :研究血管内皮生长因子 ( Vascular endothelial growth factor VEGF)对人胚胎视网膜血管发生的调节作用。方法 :收集 54例 9～ 4 0周龄胎儿眼球后壁标本 ,免疫组织化学染色 ,光镜观察。结果 :1VEGF在视网膜的表达呈波峰式分布 ,高峰在 9～ 13周及 2 6周左右。 2节细胞层的梭形细胞(血管内皮细胞前体细胞 )、血管内皮细胞呈增殖细胞核抗原 ( Proliferation cell nucelear antigen,PCNA)免疫反应阳性 ,水平波动 ,高峰在 9～ 13周及 2 1周前后 ,此期间梭形细胞不断增殖、分化形成内皮细胞索 ,经改建形成视网膜内层血管 ,2 6、34周起见内核层内、外缘血管内皮细胞呈 PCNA免疫反应阳性 ,并保持至足月。 3视网膜 VEGF表达量与梭形细胞、血管内皮细胞 PCNA表达量呈显著正相关( r=0 .736,P<0 .0 1)。结论 :VEGF对视网膜内层及外层血管发生均有促进作用     

Angiogenesis and developmental expression of vascular endothelial growth factor in rat lingual papillae

We used an embryological approach to investigate development and microvasculature of lingual papillae, and expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in the rat tongue. Temporal changes in the rat tongue at each developmental stage from embryonic day 13 (E13) to postnatal day 7 (P7) were observed by intravascular injection of India ink and immunohistochemistry using a VEGF antibody. At E13, the primordium of circumvallate papilla was observed among various lingual papillae. VEGF was widely expressed at E16 on the proliferated epithelium and the connective tissue core of circumvallate papilla. Invasion by capillary sprouts forming the lingual papillae was observed at E17. The primordium of fungiform papillae was observed at E14. VEGF was strongly expressed around the basal cells of proliferated epithelial tissues of fungiform papillae at E17. At E18, blind-ended capillary sprouts invaded into connective tissue cores from subepithelial sinusoidal capillaries by sprout angiogenesis. At P1, the invading capillary sprouts formed loops by vascular remodeling. The primordium of foliate papillae was observed at E16. VEGF was slightly expressed, but uniformly at E17 on the epithelium, muscle cells, and fibroblasts of foliate papillae. At E18, vascular density was increased by angiogenesis. The primordium of filiform papillae was observed at E17. It was the last to develop among the lingual papillae. VEGF was expressed in the cytoplasm of grown epithelial cells of filiform papillae at E19, and in blind-ended capillary sprouts formed by angiogenesis in the connective tissue cores at E20. The capillary sprouts formed loops by vascular remodeling at P1. Consequently, VEGF was expressed on the papillary epithelium and connective tissue cores of papillae during development of the papillary epithelium, and invasion by capillary sprouts into each papillae was observed thereafter. These results suggest a close relationship between expression of VEGF and angiogenesis of lingual papillae in the rat.     

神经干细胞在胚胎脑皮质发育过程中的变化

目的 比较3个不同胚胎时期神经干细胞的增生、分化和凋亡等生物学性状,了解胚胎脑皮质发育过程.方法E14、 E18和E20胎鼠前脑脑皮质来源的神经干细胞在原代培养后,用BrdU细胞增生检测试剂盒检测增生能力;诱导分化7天后,对细胞分别进行MAP2和GFAP免疫荧光标记和Hoechst 33342核染色,计算MAP2 细胞和GFAP 细胞占Hoechst 细胞的各自比例;用Annexin V-FITC凋亡试剂盒检测早期凋亡率.结果 3组神经干细胞的OD值分别是:E14为1.1771±0.0422(n=22),E18为0.4127±0.0328(n=23),E20为0.2117±0.0456(n=16)(均为P<0.001);E14神经元细胞比例和星形胶质细胞比例分别为:81.96%±4.91%(n=10)和16.63%±4.05%(n=10),E18为27.56%±3.54%(n=10)和58.98%±5.91%(n=10),E20为4.75%±2.39%(n=10)和89.43%±3.40%(n=10)(均为P<0.001);早期凋亡率分别为:E14为41.12%±9.75%(n=8),E18为56.30%±9.35%(n=19),E20为5.74%±3.31%(n=9)(均为P<0.01).结论神经干细胞的增生能力随着胚胎发育变得越来越弱,而凋亡比例先小后大,最后逐渐变小.神经干细胞分化为神经元细胞的比例随着胚胎发育过程会越来越小,而星形胶质细胞的比例会越来越大.     

激素对鼻息肉组织肿瘤坏死因子α、血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF)α、血管内皮生长因子(VEGF)在鼻息肉组织中的表达,以及全身应用糖皮质激素对两种细胞因子表达水平的影响。方法:采用免疫组化SP法,检测鼻息肉组织在糖皮质激素治疗前和治疗后TNF α、VEGF的表达,运用HPIAS 1000高分辨率彩色图像分析系统分别对治疗前、后鼻息肉组织的粘膜上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞、粘膜下浸润炎性细胞、细胞间基质进行光密度测定分析。结果: ① TNF α在鼻息肉粘膜上皮细胞、血管内皮细胞、腺上皮细胞、粘膜下浸润炎性细胞均有阳性表达;VEGF在粘膜上皮细胞、血管内皮细胞、腺上皮细胞、粘膜下浸润细胞、基质有阳性表达;②激素治疗后 TNF α、VEGF表达下降,其中 TNF α在血管内皮细胞表达下降,治疗前后有显著性差异。VEGF表达在治疗前、后无明显差异。结论:全身应用激素可能通过以下机制起到治疗鼻息肉的作用:①降低鼻息肉组织中 TNF α、VEGF的含量,影响鼻息肉形成的微环境,改变其它细胞因子的表达从而调节上皮细胞的增生、血管的生成及通透性;②降低TNF α在鼻息肉血管内皮细胞的表达,减弱粘附分子、吸附分子的作用从而减轻嗜酸性粒细胞在鼻息肉组织的浸润。     

血管内皮生长因子促血管形成作用及其调控

血管内皮生长因子是一种具有促血管生成活性的功能性蛋白,它通过与特异性受体的结合,发挥生理功能:(1)促血管内皮细胞分裂从而促进新生血管形成;(2)增强血管通透性的功能.其活性的发挥受到多因素、多水平的调节,如:缺氧、癌基因、细胞因子、细胞间质成分等.本文从血管内皮生长因子的促血管形成机制及其调控因素等方面对其生物学行为和特性作一综述.     

表皮生长因子在小鼠耳蜗发育中的表达

运用免疫组织化学技术（LSAB法），对表皮生长因子（EGF）在昆明种小白鼠内耳发育中的表达进行研究。结果显示：EGF在小鼠胚胎第13d和14d的耳蜗上应及螺旋神经节的神经细胞中有阳性表达，但在前庭感觉器官的上皮中表达很弱。EGF在内耳间充质及内耳软骨包囊中无表达。结果表明：EGF在小鼠耳蜗上皮发育中的表达呈现明显的阶段性及组织特异性分布的特点，说明EGF参与小鼠耳蜗上皮的发育过程，其在小鼠耳蜗上皮发育的增殖期有阳性表达。     

鼠尾胶原三维诱导E14小鼠胚胎干细胞分化为甲状腺类似细胞的初步研究

目的 在体外贴壁诱导E14小鼠胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的基础上,不改变诱导因子,探索鼠尾胶原三维结构体外诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的可行性。方法 E14小鼠胚胎干细胞半固体培养基悬浮培养6d生成拟胚体,随后在鼠尾胶原三维结构中继续诱导分化11d,全程添加诱导因子促甲状腺素及胰岛素,第14天时开始添加碘化钾。结果 拟胚体在鼠尾胶原上生长状态良好,分化细胞贴壁后逐渐陷入鼠尾胶原;电镜下诱导细胞高尔基体、内质网丰富,部分诱导细胞胞质内见不典型分泌颗粒,与人成体甲状腺细胞超微结构类似。结论 胚胎干细胞在鼠尾胶原三维结构中可以分化为甲状腺类似细胞,并具备合成、分泌的功能;三维结构为体外诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞提供了新的方法。 [关键词] 胶原; 胚胎; 干细胞 ;细胞分化; 甲状腺     

缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在慢性滑膜炎中表达及其与毛细血管密度之间的关系

[摘要] 目的 检测滑膜HIF-1α、VEGF、CD34表达水平,观察慢性滑膜炎滑膜组织的组织病理学形态改变,了解HIF-1a、VEGF与毛细血管密度（MVD）及组织学分级之间的关系。方法 应用免疫组织化学技术对获得的45例滑膜组织进行HIF-1α、VEGF、CD34染色,HE染色观察慢性滑膜炎滑膜组织病理学形态并进行病理评分及分级,分析相关关系。结果 HIF-1α、VEGF在慢性滑膜炎患者滑膜组织中高表达,表达率分别为68.9%、80%,明显高于正常对照组10%、20%（P<0.05）,MVD在慢性滑膜炎组织中较正常对照组明显增高, HIF-1α与VEGF相关（r=0.525,P<0.01）,HIF-1α与MVD相关（r=0.867 p<0.01）;光镜下可见病变滑膜细胞明显增殖,并伴有大量增生血管,血管周围可见多量淋巴细胞、浆细胞浸润, HIF-1α与滑膜炎的病理学分级正相关（r=0.526,p<0.01）。结论 慢性滑膜炎滑膜中HIF-1α、VEGF与MVD具有相关性,滑膜的增生及滑膜炎的持续可能与HIF-1α引起的血管增生有关,滑膜形态学观察有助于滑膜炎的分级及监测。     

皮肤血管瘤的组织学分型和鉴定

目的 :探讨皮肤血管瘤的组织学分型标准。方法 :采用组织学常规切片技术和HE染色法对临床皮肤血管瘤标本进行病理复检 ,用免疫组织化学方法检测复检后各期血管瘤和血管畸形中血管内皮生长因子 (vascularen dothelialgrowthfactor,VEGF)的表达 ,结合图像分析技术对组织学分型后的标本进行分析鉴定。结果 :将 35例标本分为血管瘤 2 0例 ,其中增生期 8例 ,退化期 12例 ;血管畸形 15例。增生期血管瘤表现出明显的血管内皮细胞增殖、血管生成 ,VEGF表达强阳性 ;退化期血管瘤血管管腔扩张、退化 ,管壁细胞数减少 ,VEGF表达极弱 ;血管畸形中血管极度扩张 ,VEGF表达极弱。结论 :血管瘤和血管畸形组织形态学上的变化反映了各自的功能活动状态