山楂中有机酸对过氧化氢诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨山楂中有机酸对H2O2损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用。方法:将正常培养的HUVECs细胞分为6组,即空白对照组、模型组、NAC阳性对照组及山楂有机酸6.25、25、100μg/m L组。用100μmol/L H2O2作用于HUVECs,2 h后采用MTT方法检测细胞增殖情况,试剂盒检测山楂有机酸对受损血管内皮细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响。对细胞进行HE染色,显微镜下观察细胞形态学的变化。结果:与模型组比较,山楂有机酸25、100μg/m L能显著减少H2O2所致的HUVECs细胞死亡;显著改善氧化损伤的HUVECs的形态变化;显著降低LDH漏出量和MDA含量;显著提高GSH-Px和SOD活性(P<0.05或P<0.01)。其作用呈浓度依赖性。结论:山楂有机酸对过氧化氢诱导HUVECs的损伤具有保护作用,其机制可能和有效改善细胞内抗氧化酶的活性,抑制氧化应激损伤有关。     

糖痹康对高糖损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:观察糖痹康大鼠含药血清对高糖造成人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用。方法:以CCK-8法观察不同浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞活力的影响;根据实验结果选择葡萄糖浓度为5.55mmol/L组为正常组,葡萄糖浓度为25mmol/L组做为模型组。然后制备正常组,弥可保组,糖痹康组的大鼠含药血清,将含药血清作用于高糖损伤的人脐静脉内皮细胞,分为正常组、高糖模型组、高糖弥可保组、高糖糖痹康低、中、高剂量组,并通过测定培养液中丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)含量与超氧化物歧化酶(SOD)活力,探讨糖痹康对血管内皮细胞损伤的保护作用。结果:与高糖模型组比较,糖痹康含药血清能减少细胞MDA、LDH释放量,提高SOD活力及NO含量。结论:糖痹康对高糖损伤的血管内皮细胞有一定的保护作用,间接的起到对周围神经的保护作用。     

红芪总黄酮对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用

目的研究红芪总黄酮对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导脐静脉内皮细胞损伤的保护作用.方法建立ox-LDL致脐静脉内皮细胞损伤模型,化学比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性.结果红芪总黄酮可显著降低ox-LDL损伤脐静脉内皮细胞的LDH释放,使细胞分泌的NO含量升高,提高细胞内SOD及NOS活性.结论红芪总黄酮对ox-LDL诱导脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高脐静脉内皮细胞的抗氧化能力有关.     

氧化型低密度脂蛋白对培养人脐静脉内皮细胞生长的影响

动脉粥样硬化形成是一个多因素多途径协同作用的过程,发病机制复杂。在各独立危险因素中脂代谢异常是首要因素,尤其是低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)是AS的一个主要危险因子。研究发现,低密度脂蛋白经氧化修饰后其致AS作用大为加强[1]。本实验参考低温超速离心法提取LDL[2],用Cu2+氧化法制备ox-LDL,并以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为对象,观察ox-LDL对培养的HUVECs生长的影响,旨在为临床研究AS的发生、发展机制提供实验依据。     

菟丝子总黄酮对过氧化氢损伤的血管内皮细胞的保护作用

目的:探讨菟丝子总黄酮对H202损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:于37℃、5％ CO2、95％空气饱和湿度的培养箱内体外培养内皮细胞,将细胞分为4组,即正常对照组:加入DMEM培养液(pH 7.2 ～7.4)、菟丝子对照组(菟丝子0.5mg·L-1)、模型组(过氧化氢终浓度为200 mmol·L-)、菟丝子+过氧化氢组(菟丝子0.5mg· L-1,过氧化氢200 mmol·L-),研究菟丝子总黄酮对受损血管内皮细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)释放情况、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及对细胞形态学的影响.结果:菟丝子总黄酮(0.5 mg·L-1)能明显减轻H2O2对HUVECs所致的氧化损伤,可明显改善氧化损伤的HUVECs形态学变化,H2O2模型组(200 mmol·L-)与空白组比较,LDH释放和MDA含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05),SOD释放水平和GSH-Px活力显著下降(P＜0.01),菟丝子(0.5mg·L-1)+ H2O2(200 mmol·L-1)组与H2O2模型组(200 mmol·L-1)比较,LDH释放和MDA含量显著下降(P＜0.01,P＜0.05),SOD释放水平和GSH-Px活力显著升高(P＜0.01).结论:菟丝子总黄酮对H202诱导的HUVECs的损伤具有保护作用.     

六味地黄汤含药血清对H_2O_2致HUVECs损伤的保护作用

目的:研究六味地黄汤含药血清对过氧化氢(H2O2)损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的保护作用,并阐明其可能的机制。方法:六味地黄汤药物煎剂浓缩为生药2g/ml,以人临床用量×动物等效剂量比值×血清稀释度为参考浓度给家兔灌胃(35g/kg),每天2次,连续3天,正常对照组给予等量生理盐水。于末次给药后1 h(灌药前禁食不禁水12 h)颈动脉取血,分离血清。本实验采用400μmol/L H2O2复制HUVECs损伤模型,六味地黄汤含药血清分为3个剂量干预组(体积分数为5%、10%、20%),MTT法测定细胞活力,电子显微镜观察细胞内超微结构的改变,PI单染法流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化,激光共聚焦检测细胞内钙离子荧光强度的改变。结果:体积分数5%、10%、20%六味地黄汤含药血清均能促进H2O2损伤的血管内皮细胞增殖;电镜和流式细胞仪检测结果均显示体积分数为5%、10%、20%的六味地黄汤含药血清可减少血管内皮细胞凋亡;激光共聚焦结果提示六味地黄汤抑制H2O2所致的血管内皮细胞凋亡可能是通过降低细胞内钙离子浓度实现的。结论 :六味地黄汤含药血清可以抑制H2O2诱导的细胞凋亡,这种保护作用是通过改变细胞内钙离子浓度实现的。     

野蔷薇根总黄酮含药血清对ox-LDL诱导HUVEC损伤的保护作用研究

研究野蔷薇根总黄酮(total flavonoids from Rosa multiflora,TF-RM)对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞株(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC...     

补肾益气方对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:探讨补肾益气方防治动脉粥样硬化(AS)的部分机理.方法:采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)致血管内皮损伤为AS细胞病理模型,采用MTT法、3H-Tdr掺入法观察细胞增殖能力与生命活力,通过胞内丙二醛(MDA)含量及细胞培养液乳脱氢酶(LDH)活力的测定,分析比较细胞的受损程度.结果:ox-LDL损伤的血管内皮细胞内MDA含量明显增多,细胞培养液内LDH活力增强,细胞增殖能力及生命活力下降,DNA合成减慢,补肾益气方对此均有明显的改善作用.结论:抗氧化损伤、保护血管内皮细胞是补肾益气方防治AS的部分机理.     

三棱含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用研究

目的 研究三棱含药血清对脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）损伤的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组和三棱组,制备空白血清及含药血清。建立LPS诱导的HUVEC损伤模型,设置对照组、模型组、5%空白血清组和三棱含药血清（1%、3%、5%）组,采用MTT法检测三棱含药血清对细胞活力的影响;采用荧光显微镜分析各组细胞线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）和活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;采用ELISA法检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Caspase-1)活性和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-17、组织因子...     

补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤后的影响及可能的机制.方法:将经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞分为5组:补气化痰方药物血清低、中、高剂量组,模型组和正常对照组.用MTT法观察补气化痰方药物血清对经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞抑制作用的保护;采用west-ernblot检测法测定细胞VEGF蛋白水平探讨其可能的机制.结果:补气化痰方药物血清能减少经氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤生长的抑制,并通过上调VEGF蛋白途径达到抑制氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤.结论:补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用,其可能的机制是上调VEGF蛋白表达实现.     

黄芩苷对氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞凋亡的防护作用

目的：研究黄芩苷抑制氧化低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的血管内皮细胞凋亡及其介导机制。方法：应用大鼠模型,以低密度脂蛋白（LDL）体内诱导血管内皮细胞凋亡,并以黄芩苷进行干预,观察其对LDL诱导血管内皮细胞凋亡的影响。原位末端标记技术（TUNEL）法检测凋亡细胞,比色法测半胱天冬蛋白酶3（Caspase-3）的活性。结果：LDL组与氯化钠对照组比较,血管内皮细胞凋亡数显著增加,caspase-3酶活性显著增高,黄芩苷干预组与LDL组比较,凋亡细胞数显著减少,caspase-3酶活性下降。结论：LDL可能通过激活caspase-3使大鼠血管内皮细胞凋亡;黄芩苷可通过抑制caspase-3酶活性抑制LDL诱导的细胞凋亡。     

加味补阳还五汤对氧化型低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:观察加味补阳还五汤(BHT)含药血清和含药血浆对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤血管内皮细胞(VEC)的保护作用及机制,同时比较加味BHT含药血清和含药血浆对VEC生成影响的差异。方法:制备加味BHT含药血清和含药血浆,体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),采用ox-LDL造模,通过噻唑蓝(MTT)法观察细胞活力和Hoechst33258染色法、流式细胞术观察细胞凋亡率,并通过测定一氧化氮(NO),丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力,探讨加味BHT含药血清和含药血浆对ox-LDL损伤VEC的保护作用及含药血清和含药血浆之间的差异。结果:与空白组比较,模型组细胞死亡和凋亡率明显升高(P0.05),和模型组比较,加味BHT含药血清组和含药血浆组能显著降低ox-LDL造成的HUVECs的凋亡和死亡率(P0.05),细胞活性显著增强(P0.05),NO含量,SOD和GPx活力显著提高,MDA含量均显著下降(P0.05)。此外,含药血清组与含药血浆组比较细胞凋亡和死亡率更低(P0.05),含药血浆组与含药血清组比较产生NO含量明显增加(P0.05)。结论:加味BHT含药血清和含药血浆对于oxLDL损伤的VEC具有一定保护作用,其机制可能与改善内皮细胞功能、抗氧化损伤、抑制细胞凋亡有关。在一定条件下对于加味BHT含药血浆保护VEC的作用强于含药血清。     

黑果枸杞花色苷对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

 目的 探讨黑果枸杞花色苷对体外氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用。方法 利用体外培养人脐静脉血管内皮细胞,建立了氧化低密度脂蛋白氧化损伤模型。将细胞分为6组：正常组、氧化低密度脂蛋白组、辛伐他汀组、花色苷低剂量+氧化低密度脂蛋白组,花色苷中剂量+氧化低密度脂蛋白组和花色苷高剂量+氧化低密度脂蛋白组。各剂量组经实验处理后进行细胞计数及形态观察,利用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖能力,运用流式细胞术（FCM）检测内皮细胞增殖周期及凋亡率,并对细胞代谢中的超氧化物歧化酶(SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px)、丙二醛（MDA）、过氧化物酶（POD）的活性进行检测。结果 中高浓度的花色苷可以有效的抑制氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤,减缓被损伤细胞的G₀/G₁比率及凋亡率,增高S期细胞比率、G₂/M 比率;同时提高细胞代谢中超氧化物歧化酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化酶的活性,降低丙二醛的含量。结论 黑果枸杞花色苷对氧化低密度脂蛋白所损伤的人脐静脉内皮细胞具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

小檗碱对氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨小檗碱是否具有保护内皮细胞的作用。方法用不同浓度的小檗碱预处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs),再用400mg/L的氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导HUVECs损伤,通过评价细胞增殖、上清液中一氧化氮(NO)及内皮素(ET-1)含量来评价小檗碱对内皮细胞的保护作用。结果 400mg/LOX-LDL能明显抑制HUVECs增殖,下调细胞分泌NO含量,上调ET-1含量;而与模型组相比,小檗碱预处理组细胞增殖活性明显增加,NO含量增加,ET-1含量降低,但随着小檗碱浓度的增加,这种保护作用逐渐减弱。结论小檗碱能够减轻OX-LDL对HUVECs的损伤,对HUVECS具有一定的保护作用。     

原儿茶醛对ox-LDL损伤的血管内皮细胞保护作用

目的:观察原儿茶醛对ox-LDL诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(CRL-1730)损伤的保护作用。方法:ox-LDL诱导人血管内皮细胞损伤,并以不同剂量的原儿茶醛干预24 h,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量,比色法测定细胞培养液中NO含量和NOS活性,流式细胞术测定细胞内CD40蛋白表达。结果:原儿茶醛对ox-LDL引起的CRL-1730损伤血管内皮细胞数量的减少和培养液中NO、NOS的降低有明显的抑制作用;ox-LDL可引起细胞内CD40蛋白表达增加,原儿茶醛可以抑制此作用。结论:原儿茶醛对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用,其机制可能与CD40/CD40L抗炎途径有关。     

氧化型低密度脂蛋白对内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对内皮细胞损伤的可能机制.方法 用不同质量浓度的ox-LDL处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24h,观察HUVECs的形态学变化,评价细胞增殖,观察PI染色后细胞核的形态改变.使用流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 与对照组相比,100mg/L ox-LDL能够促进细胞增殖,200mg/L ox-LDL对细胞增殖无影响,400mg/L ox-LDL明显抑制细胞增殖并可明显引起细胞凋亡,与空白对照组比较差异有统计学意义.结论 ox-LDL能抑制内皮细胞增殖并引起细胞凋亡,这可能与其致动脉粥样硬化(AS)作用机制有关,可用ox-LDL刺激体外培养的内皮细胞进行AS研究.     

绞股蓝总苷对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用研究

目的:探讨绞股蓝总苷对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用的研究。方法:采用ox-LDL对血管内皮细胞造成损伤模型,并将HUVEC分为空白对照组、模型组、绞股蓝高、中、低剂量组,空白对照组给予常规DMEM液+5%血清,模型组除与空白对照组相同常规DMEM液+5%血清外,予加入100mg/L ox-LDL干预,绞股蓝低、中、高剂量组在分别给予10、50、100 mg/L绞股蓝提取物24 h后,加入100mg/L ox-LDL。观察各组细胞生存活性、线粒体膜电位、iNOS、MMP-9、NF-κB p65、NO、SOD水平等指标变化,其结果应用统计学软件SPSS 19.0进行数据分析。结果:与空白对照组相比,模型组细胞生存活性、线粒体膜电位、NO、SOD等指标水平明显低于空白对照组,iNOS、MMP-9、NF-κB p65等指标水平明显高于空白对照组;对模型组相比,绞股蓝低、中、高剂量组细胞生存活性、线粒体膜电位、NO、SOD等指标水平明显高于模型组,iNOS、MMP-9、NF-κB p65等明显低于模型组。以上结果差异均有统计学意义(P0.05)。结论:绞股蓝总苷具有保护血管内皮细胞活性,维持线粒体膜电位水平,提高血管内皮细胞抗氧化活性等药理作用,并通过以上作用机制起到对氧化低密度脂蛋白损伤的血管内皮细胞的保护作用。     

毛葡萄叶水提物对大鼠脑缺血再灌注的保护作用

目的探讨毛葡萄叶水提物对SD大鼠脑栓塞后缺血再灌注的脑保护作用及其可能作用机制。方法连续灌胃给药8d后建立SD大鼠脑栓塞模型,作TTC脑染色,观察脑梗死面积;HE染色观察脑梗死区的形态学变化;用免疫细胞化学检测脑组织相关凋亡基因bcl-2及caspase-3的表达变化;并检测大鼠血浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及乳酸脱氢酶(LDH)水平变化。结果毛葡萄叶水提物能明显减小大鼠脑栓塞模型的梗死面积,明显提高bcl-2的表达和下调caspase-3的表达,并有降低血浆MDA水平和升高LDH、NO水平的作用,且毛葡萄叶水提物组的效果优于阳性药物对照组。结论毛葡萄叶水提物有明显抗脑梗死形成作用,其机制可能与抑制细胞凋亡和抗氧化作用有关。     

芎冰微乳抗脑缺血再灌注损伤保护作用研究

目的探讨芎冰微乳对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型及小鼠双侧颈总动脉夹闭的脑缺血再灌注模型。观察芎冰微乳对脑组织含水量、大鼠脑梗死面积、脑组织中超氧化物歧化酶(MDA)、脂质过氧化物丙二醛(SOD)、一氧化氮(NO)含量变化的影响。结果与模型组相比,芎冰微乳组脑组织含水量、梗死面积显著减小,脑组织中MDA、NO的含量显著降低,SOD的活性显著提高,上述作用与尼莫地平对照组相似。结论芎冰微乳对大鼠、小鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与抑制NO合成,提高SOD的活性,减少脂质过氧化作用有关。